UNIVERSIDAD NACIONAL INTERCUTURAL DE LA AMAZONIA

FACULTAD DE INGENIERIA Y CIENCIAS AMBIENTALES

CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

PRACTICA 2

PRODUCCION DE BIOMASA

ASIGNATURA: BIOTECNOLOGIA AGROINDUSTRIAL

DOCENTE: ING. MANUEL RICARDO GUERRERO OCHOA

ESTUDIANTE: EDSON PANDAL ASENJO

YARINACOCHA-PUCALLPA

2025
 I. INTRODUCCIÓN
Durante la respiración celular las complejas sustancias orgánicas que existen se
escinden a compuestos simples liberando energía química esencial para el
crecimiento celular y otras actividades. Debido a que todas las células vivas
necesitan energía éste es un proceso universal. En las investigaciones que
evalúan el crecimiento microbiano es esencial relacionar la formación de biomasa
o de producto con el consumo de sustrato. Si se mide el consumo de un sustrato
en una fermentación y se registra el incSremento en la biomasa entonces se
puede calcular el coeficiente de rendimiento para el proceso de fermentación.

Industrialmente los microorganismos son usados en la obtención de enzimas,

vitaminas, colorantes, biomasa (para uso industrial y como fuente proteica),
productos alimenticios, entre otros. Actualmente, uno de los principales objetivos
de la biotecnología es mejorar los procesos de fermentación, disminuyendo los
costos de producción y aumentando la productividad y rendimiento de estos, por
este motivo se han estudiado desechos orgánicos procedentes de la
agroindustria, que no sólo resultan ser muy económicos, sino a su vez actúan
como excelentes fuentes nutricionales.

La producción de biomasa es un proceso que puede verse afectado por

condiciones ambientales (pH, temperatura, aireación, humedad) o también por
factores metabólicos y fisiológicos propios de los microorganismos, cuando
carecen de alguna fuente nutricional o por el contrario presentan exceso de
alguna de estas. En el presente laboratorio se realizará la reproducción celular
para la obtención de biomasa con fines industriales, utilizando un medio de cultivo
específico y un desecho de la agroindustria

II. OBJETIVOS

2.1. Objetivo general

Produccion de biomasa

2.2. Objetivos específicos

 Reconocer los materiales y equipos involucrados, y su ensamblaje en un
sistema fermentativo.
 Determinar el coeficiente de rendimiento de biomasa por sustrato
consumido.
 Determinar los parámetros cinéticos para producción de biomasa y
consumo de sustrato.
 III. MARCO TEORICO

3.1. Definición de biomasa

La Unión Europea indica que la “Biomasa es la fracción biodegradable de
productos, deshechos y re¬siduos de la agricultura (incluyendo sustancias
vegetales y animales), silvicultura e industrias relacio¬nadas, así como la
fracción biodegradable de los residuos municipales e industriales” (Cerdá, 2012).

3.2. Tipos de biomasa

De acuerdo con Cerdá (2012) la biomasa puede clasificarse en cuatro tipos así:

 Biomasa solida
Tiene un aprovechamiento térmico y eléctrico de materia orgánica de
origen animal y vegetal, como los cultivos energéticos -aquellos en los
que las especies cultivadas tienen como uso específico la producción de
energía-, residuos generados en labores de poda de viñedos y frutales
generalmente, y residuos de cultivos en invierno.

 Biogás
Obtenido mediante un proceso de fermentación anaeróbica de la materia
orgánica producida por bacterias en ambientes faltos de oxígeno. Dicha
desgasificación de los residuos puede ser de manera natural en
vertederos o inducida en biodigestores. A nivel mundial los líderes en la
producción de biogás son Alemania y Reino Unido, teniendo el 61,2% y
16,2%, respectivamente, de la producción de la UE, la cual es de 10,9
Mteq (Millones de toneladas equivalentes de petróleo) en 2010.

 Fracción Orgánica de los Residuos Sólidos Urbanos (FORSU).

Para este tipo de residuos se hace énfasis en la gestión en el proceso de
producción de energía que se da en cuatro etapas: 1. Prevención o
reducción de producción de residuos; 2. Recuperación de residuos por
medio del reciclaje, la reutilización y la recolección o cualquier otro
proceso que permita extraer materias primas secundarias; 3. Uso de
residuos como fuente de energía; 4. Vertido de residuos. La utilización de
residuos sólidos en la producción de energía evita la generación de
 gases de efecto invernadero mediante la sustitución de combustibles
fósiles y obviando gran parte de emisiones de metano en vertederos.

 Biocarburantes
Combustibles líquidos cuyas propiedades les permiten sustituir la
gasolina en su totalidad o por lo menos en un porcentaje considerable.
En la Figura 1 se presenta una síntesis de los diferentes tipos de biomasa
y su modo de producción.

3.3. Fundamentos fisiológicos de la producción de biomasa

La producción de biomasa vegetal está directamente ligada a la fotosíntesis, el
proceso mediante el cual las plantas convierten la energía solar en energía
química. Este proceso depende de múltiples factores:

 Radiación fotosintéticamente activa (PAR): Cuanta más luz intercepta una

planta, más biomasa puede producir (Monteith, 1977).
 Disponibilidad de agua y nutrientes: Son esenciales para la síntesis de
compuestos orgánicos y el crecimiento celular (Hsiao, 1973; Sinclair &
Muchow, 1999).
 Genética y tipo de metabolismo fotosintético: Las especies con metabolismo
C4 (como el maíz o sorgo) tienen una eficiencia fotosintética superior en
climas cálidos y secos, lo que se traduce en mayor producción de biomasa
(Taiz & Zeiger, 2010).

3.4. Factores que afectan la producción de biomasa

a. Factores bióticos:
o Genotipo de la planta
o Estado fenológico
o Interacción con microorganismos beneficiosos (e.g., micorrizas)

b. Factores abióticos:
o Clima (temperatura, precipitación, radiación solar)
o Suelo (textura, fertilidad, contenido de materia orgánica)
o Manejo agronómico (densidad de siembra, fertilización, riego)
3.5. Biomasa como indicador ecológico y productivo
La biomasa es un indicador clave de:

 Productividad primaria neta (PPN): Es la biomasa producida después de

descontar la respiración celular. Refleja la eficiencia del ecosistema (Chapin
et al., 2002).
 Salud del cultivo: Biomasa vigorosa indica buenas condiciones de manejo y
desarrollo.
 Captura de carbono: La acumulación de biomasa vegetal contribuye al
secuestro de CO₂, siendo un mecanismo importante en estrategias de
mitigación del cambio climático (Lal, 2004).

IV. MATERIALES Y METODOS

4.1. Materiales

▪ Baso precipitado
▪ Mesa aluminio
▪ Placas petris
▪ Jeringas
▪ Tapón
▪ Cubitos
▪ Matraz
▪ Guantes
▪ Mascarillas
▪ Cubre bocas
▪ Cofias
▪ Levadura
▪ Peptona
▪ Glucosa
▪ Biorector
▪ Agar
▪ Tapas
▪ Bomba de tubería
▪ Agitador magnético
4.2. Metodología
• Levadura de panadería fresca y seca, Saccharomyces cerevisiae.
• 500 mL de caldo GYEP.
o (10% glucosa, 1% extracto de levadura, 1% peptona)
• Bioreactor.
• 3 x Botellas universales.
• 10 mL agua estéril en una botella universal.
• 2 x agar malta o glucose nutrient agar plate.
• Antiespumante de silicona estéril.
• Asa de inoculación.
• 3 x jeringas estériles de 1 mL.
• Tapas de 3 vías estéril.
• Bomba y tubería de acuario.
• Agitador magnético y pastillas.
• Contenedor y jeringas de mL estériles para muestreo.

Procedimiento

Día 1

1. Preparar y autoclavar un bioreactor con 450 mL de caldo GYER y dos botellas

universales con 10 mL de caldo.

N.B. La exposición prolongada a altas temperaturas puede caramelizar el medio

rico en azucares; por lo tanto debe tener cuidado en el autoclavado, es decir, use
15 minutos a 103 kPa (121°C). Después del autoclavado el bioreactor debe ser
almacenado a 4°C hasta su uso. (Si el bioreactor es agitado magnéticamente
entonces los magnetos también deben ser autoclavados).

2. Pesar asépticamente 1 g de levadura seca en una botella Universal. Adicionar

asépticamente 10 mL de agua estéril a la levadura. Mezclar vigorosamente para
resuspender la levadura.
3. Tomar un inóculo con el asa de siembra llena y sembrar por estrías en dos placas
de agar malta. Dejar crecer por una noche a 25°C.

Día 2 o 3

1. Seleccionar la placa con el mejor crecimiento de levadura. Usando un asa de

siembra metálica inocular ambos caldos en las botellas universales con uno o dos
 colonias de la placa de agar. Incubar a 25°C por 24 horas. Incubar en un agitador
si es posible, si no, cuidadosamente agitar manualmente las botellas provocando
remolinos cada dos horas para ayudar al crecimiento de la levadura.

Día 3 o 4

1. Permitir al bioreactor llegar a la temperatura ambiente y adicionar 1 mL del

antiespumante estéril.
2. Seleccionar el cultivo Saccaromyces cerevisiae con el mejor crecimiento. Inocular
el bioreactor con 1 mL del caldo de cultivo y encender el agitador y el aireador para
mezclar el inóculo de levadura en el caldo. Apagar el agitador y el aireador
después de 10 minutos. Usando la unidad de muestreo y una jeringa estéril
remover 1.5 mL de caldo de modo que la población inicial de levadura y el
contenido inicial de glucosa puedan ser estimados. Es importante que las
mediciones se hagan sin retraso para brindar valores iniciales confiables. Si esto
no es posible entonces coloque la muestra en una refrigeradora y evalúe después.
3. El bioreactor debe ser incubado a 25°C. Las muestras iniciales deben ser tomadas
cada 6 horas si es posible sino al menos cada 12 horas. Se tomarán muestras más
frecuentes una vez que un cambio se ha notado, p.e. cada hora. El bioreactor debe
ser monitoreado por cerca de 24-48 horas. La población de células de levadura y
glucosa deben medirse para cada muestra.

Una manera fácil de evaluar el contenido de glucosa del caldo es usar un test de tiras
de glucosas semicuantitativo para diabéticos p.e. Roche Diabur-Test® 5000. Si la
solución es muy concentrada, o se necesitan resultados más precisos, entonces
pueden hacerse diluciones y calcular los porcentajes. Las mediciones más confiables
son las que se realizan utilizando la determinación de azúcares reductores.

Cálculos

Cálculo del coeficiente de rendimiento

Se puede calcular un coeficiente de rendimiento de la pérdida de glucosa del caldo y el

incremento de biomasa de la levadura. La pérdida de glucosa puede medirse
fácilmente mediante el uso de tiras de test de glucosa. Hay varios métodos para medir
la biomasa. Considere todos ellos y use el más apropiado para medir su incremento.
Matemáticamente el coeficiente de rendimiento (Y x/s) para producción de biomasa
puede expresarse como:
Donde ds es el decremento en la concentración de sustrato correspondiente a un
pequeño incremento en la biomasa microbiana, dx. El signo negativo indica que x y s
varían en sentido opuesto. Si se proporcionan las condiciones de crecimiento el
coeficiente de rendimiento permanecerá constante. En la siguiente expresión x 0 y s0
representan las concentraciones de biomasa y sustrato iniciales respectivamente y x y
s los valores en el tiempo t durante el crecimiento microbiano.

(x - xo) = Yx/s (so - s)

N.B. El coeficiente de rendimiento varía con las condiciones de crecimiento.

Plantee las ecuaciones de modelamiento (realizada en clase) y calcule los

parámetros cinéticos de producción de biomasa y consumo de sustrato.

V. RESULTADOS Y DISCUSIONES
▪ Resultados obtenidos se muestra en las tablas por cada día y hora
- Día 1
Durante el primer día en la práctica, se comenzó con la revisión del sistema
de cultivo empleado y los métodos utilizados para estimar la producción de
biomasa.

Fecha: 07/05/25
Muestra Hora Brix Promedio
M0 10:10 5.6 - 5.4 - 5.5 5,5
M1 11:10 5.6 - 5.5 - 5.2 5,43
M2 12:10 5.4 - 5.5 - 5.5 5,46
M3 1:10 5.3. - 5.2 - 5 5,16
M4 2:10 5.1 - 4.8 - 5.1 5
M5 3:10 4.8 - 4.7 - 4.7 4,76
 En cuadro observamos los datos obtenidos durante el primer dia en la
práctica. Según Monteith (1977), la producción de biomasa está directamente
relacionada con la eficiencia en el uso de la radiación fotosintéticamente
activa. Esta relación es útil para entender la productividad del sistema
observado.

Promedio
5.6

5.4

5.2

4.8

4.6

4.4

4.2
M0 M1 M2 M3 M4 M5

En la gráfica observamos datos obtenidos de promedio. La biomasa se

define como la cantidad total de materia orgánica producida por organismos
vivos en un área específica y en un tiempo determinado (Odum, 2006). Esta
definición es clave para contextualizar las mediciones iniciales en campo.

- Día 2
Durante la segunda jornada de práctica, se realizaron mediciones
preliminares de biomasa aérea de cultivo. Se utilizó un muestreo para
obtener una muestra fresco, y posteriormente se llevó para determinar su
grado brix. Se comenzó a notar por cada hora.

Fecha: 07/05/25
Muestra Hora Brix Promedio
M6 7:10 2.7 - 2.7 - 2.7 2,7
M7 8:10 2.6 - 2.6 - 2.7 2,63
M8 9:10 2.8 - 2.7 - 2.6 2,7
M9 10:10 2.2 - 2.4 - 2.3 2,3
M10 11:10 2.2 - 2.4 - 2.6 2,4
M11 12:10 2.5 - 2.5 - 2.5 2,5
M12 1:10 2.5 - 2.7 - 2.7 2,63
M13 2:10 2.5 - 2.6 - 2.6 2,56
 M14 3:10 2.4 - 2.4 - 22 2,33
Según Taiz & Zeiger (2010), el crecimiento vegetal y la acumulación de
biomasa están estrechamente ligados a las fases fenológicas. Durante las
etapas de elongación y floración, la tasa de acumulación de biomasa suele
alcanzar su pico. Esto se reflejó en campo, donde las plantas en floración
mostraban mayor volumen de biomasa aérea.

Promedio
2.8

2.7

2.6

2.5

2.4

2.3

2.2

2.1

2
M6 M7 M8 M9 M10 M11 M12 M13 M14

Harper (1977) establece que la densidad de siembra afecta directamente la

competencia interespecífica por luz, agua y nutrientes. En las parcelas
observadas, se evidenció que zonas con alta densidad mostraban menor
desarrollo individual, pero mayor biomasa por unidad de superficie, un efecto
también reportado por Weiner et al. (2001).

- Día 3
Durante esta jornada, se dio continuidad al monitoreo procesamiento de
muestras para determinar el contenido de biomasa total por metro cuadrado.
Se empezaron a observar diferencias claras entre las zonas manejadas.

Fecha: 07/05/25
Muestra Hora Brix Promedio
M15 7:10 2.3 - 2.2 - 2.2 2,23
M16 8:10 2.2 - 2.2 - 2.1 2,16
M17 9:10 2.2 - 2.0 - 2.1 2,1
M18 10:10 2.3 - 2.1 - 2.2 2,2

Según Hsiao (1973), el agua es un factor determinante en la expansión

celular y la turgencia, procesos esenciales para el crecimiento y la
acumulación de biomasa. Las plantas con riego suplementario mostraron
 mayor desarrollo foliar, lo cual coincide con lo reportado por Passioura
(2006), quien subraya que la eficiencia en el uso del agua (WUE) es clave
para maximizar la biomasa en condiciones agrícolas.

Promedio
2.25

2.2

2.15

2.1

2.05

2
M15 M16 M17 M18

Sinclair & Muchow (1999) explican que la eficiencia en el uso de recursos

como la luz, el agua y los nutrientes está directamente relacionada con la
biomasa producida por planta o por área. En campo, se observó que parcelas
con buena fertilización nitrogenada tenían un crecimiento más robusto, lo cual
respalda esta relación.

VI. CONCLUSIONES

Lo que pudimos concluir de este trabajo es que la Biomasa será una importante
fuente de energía para el próximo siglo. Sin embargo, esta presenta tanto
ventajas como desventajas para nuestro medio ambiente, siendo primordial que
el uso de este tipo de energía sea utilizado con conciencia para evitar posibles
daños a nuestro medio ambiente.

Así como también es una energía estable que será una realidad en nuestro país,
como lo es en otras partes del mundo, esta presenta variadas ventajas entre las
cuales cabe destacar que es una energía natural donde su contaminación es
mucho más reducida que la de los combustibles fósiles siendo una gran opción
de energía a usarse en un futuro próximo.
 VII. RECOMENDACIONES

- Implementar sistemas de producción integrada que combinen la producción

de alimentos, energía y otros productos de valor añadido.
- Utilizar la biomasa para producir calor y electricidad de manera simultánea,
aumentando la eficiencia global del sistema.
- Implementar prácticas agrícolas de conservación, como la labranza mínima y
la rotación de cultivos.
- Fomentar la diversidad de cultivos para reducir el riesgo de plagas y
enfermedades.
- Establecer sistemas de monitoreo y evaluación para medir el impacto de la
producción de biomasa en el medio ambiente, la economía y la sociedad.
- Adaptar las estrategias y políticas en función de los resultados del monitoreo
y la evaluación.

VIII. BIBLIOGRAFIAS

Ratledge, C., & Kristiansen, B. (Eds.). (2009). Biotecnología Básica. Zaragoza:

Editorial Acribia.
Scholar, J., & Benedikte, W. (1999). Practical fermentation: a guide for schools
and colleges.
The society for general microbiology.
Cerdá, E. (2012). Energía obtenida a partir de biomasa. Cuadernos económicos
de ICE. Núm. 83, 2012, ISSN 0210-2633, pp. 117-140, 24 p. Madrid, España.
Cerdá, E. (2012). Energía obtenida a partir de biomasa. Cuadernos económicos
de ICE. Núm. 83, 2012, ISSN 0210-2633, pp. 117-140, 24 p. Madrid, España.
Berndes, G., Hoogwijk, M. & Van Den Broek, R. (2003). The contribution of
biomass in the future global energy supply: a review of 17 studies. Biomass and
Bioenergy, International Journal, No. 25, pp. 1-28, 28 p.
IX. ANEXOS