AMILASA LÍQUIDA

MÉTODO IFCC
Para la determinación “in vitro” de la α-amilasa
PRINCIPIO
El sustrato, un oligosacárido de maltosa, está unido por uno de sus extremos al grupo cromógeno, mientras que por el otro está bloqueado por un grupo etilideno. La degradación del sustrato se inicia
al adicionar la α-amilasa de la muestra y los oligosacáridos de cadena más corta producidos interaccionan con el enzima α-glucosidasa con lo que se libera el grupo p-nitrofenol.
El aumento de Abs a 405 nm es proporcional a la actividad α-amilasa de la muestra.
α-amilasa
5 etilideno-G PNP* + 5 H O → etilideno-G + G PNP + 2 etilideno-G + 2 G PNP + 2 etilideno-G + 2 G PNP
7 2 3 4 4 3 5 2
α-glucosidasa
2 G PNP + 2 G PNP + G PNP + 14 H O → 5 PNP + 14 glucosa
2 3 4 2
* 4,6-etilideno(G7)-p-nitrofenil(G1)-α,D maltoheptaósido.
* PNP = p-nitrofenol

UTILIDAD DIAGNÓSTICA PROCEDIMIENTO

La determinación de la actividad amilásica en suero u orina se utiliza para recabar datos para Llevar el reactivo de trabajo y el instrumento a 37ºC. Pipetear en la cubeta de reacción.
el diagnóstico de pancreatitis crónica o aguda. El 80% de pacientes con pancreatitis crónica
presenta valores elevados de amilasa durante las primeras 24 horas. Monorreactivo Birreactivo
También se encuentran valores elevados de amilasa en casos de parotiditis, infarto intestinal, mL mL
alteraciones del tracto biliar, cetoacidosis diabética o peritonitis. Reactivo de trabajo 3,0 ---
Algunos tumores de pulmón y ovario, pueden dar lugar, asimismo, a elevación del nivel de amilasa. (5A + 1 B)
Se detectan valores elevados en enfermos alcohólicos crónicos.
Reactivo A --- 2,5
Una única prueba de laboratorio no permite establecer un diagnóstico. Los resultados se han de Muestra 0,10 0,10
evaluar en el contexto de todos los datos clínicos y de laboratorio obtenidos. Reactivo B --- 0,50

Mezclar e incubar durante 3 min.

REACTIVOS
A los 3 minutos poner el cronómetro en marcha y anotar la absorbancia.
Kit 1 x 60 mL. (Ref. 99 60 66). Contiene:
Repetir las lecturas exactamente después de 1, 2 y 3 minutos.
A. 1 x 50 mL Tampón / Enzimas Ref. 99 60 88
Determinar la ΔAbs/minuto promedio de las tres lecturas.
B. 1 x 10 mL Tampón / Substrato Ref. 99 60 90
Lectura
Kit 1 x 120 mL. (Ref. 99 26 40). Contiene:
Longitud de onda: 405 nm (400 – 420)
A. 1 x 100 mL Tampón / Enzimas Ref. 99 26 45
Blanco: medida frente a aire
B. 1 x 20 mL Tampón / Substrato Ref. 99 26 50
Cubeta termostatizada, 1 cm de paso de luz.
PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO
Técnica semimicro
Los reactivos A y B, están listos para su uso. En caso de que se quiera trabajar como
Puede llevarse a cabo con la mitad de los volúmenes indicados anteriormente.
Monorreactivo: mezclar las cantidades deseadas, pero manteniendo la proporción 5 partes
de A (Tampón / Enzimas) + 1 parte de B (Tampón / Sustrato).
CÁLCULOS
Se utiliza la fórmula indicada para obtener el factor para calcular las U/L:
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO
Las concentraciones en la disolución reactiva son: Vt x 106
Tampón Hepes pH 7,1 65 mM ΔAbs/min x = U/L
Є x l x Vs
NaCl 95 mM
Donde:
MgCl2 15 mM
Vt: Volumen total de la mezcla de reacción
Etilideno-G7PNP 17 mM
Vs: Volumen de muestra
α-glucosidasa ≥ 4500 U/L
l: Paso de luz de la cubeta
Estabilizantes y conservantes
Є: Coeficiente de extinción molar de p-nitrofenol, 10.600
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Determinar la ΔAbs/min promedio y multiplicar por el factor:
Los componentes del kit almacenados en refrigerador a 2-8ºC, son estables hasta la fecha de
caducidad indicada en la etiqueta. Una vez mezclados los componentes A y B dicha disolución
U/L (37ºC) = 2930 x ΔAbs 405 nm /min
monorreactiva es estable 1 semana a 2-8º C y 3 días a temperatura ambiente (≤25ºC). Proteger
µkal/L (37ºC) = 48.8 x ΔAbs 405 nm /min
de la luz.
Indicaciones de alteración de los reactivos:
Presencia de partículas o turbidez. Blanco del reactivo de trabajo > 0,300. VALORES DE REFERENCIA
Un ligero color amarillento de la disolución reactiva no influye en la determinación. Suero / Plasma: 28 – 100 U/L (0,47 – 1,67 µktal/L)
Orina: ≤ 460 U/L (≤ 7,67 µktal/L)
MATERIAL NECESARIO NO SUMISTRADO Los valores indicados son a título orientativo. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus
Material común de laboratorio. propios valores de referencia.
Espectrofotómetro, analizador automático o fotómetro termostatizado a 37ºC. Cubeta de 1cm de
paso de luz. PRESTACIONES. CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO
Las características de funcionamiento de un producto dependen tanto del reactivo como del
PRECAUCIONES sistema de lectura empleado. Los resultados siguientes se han obtenido de forma manual.
Los reactivos contienen azida sódica al 0,09%, manipular con precaución.
Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos. Se aconseja Sensibilidad, como límite de detección: 12 U/L
consultar la ficha de datos de seguridad antes de la manipulación del reactivo. La eliminación de Linealidad: Hasta 1500 U/L. Con actividades superiores se aconseja diluir la muestra 1/10 con
residuos debe hacerse según la normativa local vigente. salina (NaCl 0,9%) y repetir el ensayo. Multiplicar el resultado por 10
Exactitud, como % de recuperación: 98,8%
Precisión en la serie, como CV%: 1,56%
MUESTRA Precisión entre series, como CV%: 1,98%
Suero, plasma heparinizado u orina. Utilizar muestras exentas de hemólisis. Veracidad. Los resultados obtenidos con el reactivo no presentan diferencias significativas al
En ausencia de contaminación bacteriana, la actividad α-amilásica en suero o plasma se mantiene compararlo con el reactivo considerado de referencia
en refrigerador a 2-8ºC, durante 6 días. En orina dicha actividad se mantiene 10 días a 2-8ºC y 2 Los datos detallados del estudio de las prestaciones del reactivo están disponibles bajo demanda.
días a temp. ambiente (≤ 25ºC).
INTERFERENCIAS
CONTROL DE CALIDAD No hay interferencia por la bilirrubina hasta 15 mg/dL ni por la hemoglobina hasta 450 mg/dL.
Es recomendable la inclusión de sueros control, Seriscann Normal (Ref. 994148/996571) y
Seriscann Anormal (Ref. 994685/999329) en cada proceso de medida para verificar los resultados. NOTAS
Se recomienda calibrar con el Calibrador para Autoanalizadores (Ref. 996280) siempre que se Debe evitarse la contaminación por saliva o sudor del material o de las muestras usadas, pues al
cambie el lote de reactivo y/o calibrador y/o los sueros control no entren dentro de los márgenes. contener α-amilasa falsearían los resultados.
Se aconseja que cada laboratorio establezca su propio programa de control de calidad y los
procedimientos de corrección de las desviaciones detectadas. BIBLIOGRAFÍA
Junge, W., Troge, B., Klein, G., Poppe, W., Gerber, H. (1989). Clin. Biochem. 22, 109 – 114.
AUTOANALIZADORES Lorentz, K., (2000). [Link]., 46, 644-649.
Adaptaciones a distintos analizadores automáticos están disponibles bajo demanda.

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A 7 Km 1081 – P.O. Box 20 - E43870 AMPOSTA / SPAIN [Link]
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Revisión: 09.2024 PRO4-9_AMIL_9
AMYLASE LIQUID
IFCC METHOD
For “in vitro” determination of α-amylase
PRINCIPLE
The p-NP group is bonded to a maltose oligosaccharide with a blocked end by ethylidene. α-amylase reacts with the substrate producing lower chain oligosaccharides that, after the action of
α-glucosidase, liberate the p-NP coloured group.
The Abs at 405 nm is directly related to α-amylase activity of the sample.
α-amilase
5 ethylidene-G PNP* + 5 H O → ethylidene-G + G PNP + 2 ethylidene-G + 2 G PNP + 2 ethylidene-G + 2 G PNP
7 2 3 4 4 3 5 2
α-glucosidase
2 G PNP + 2 G PNP + G PNP + 14 H O → 5 PNP + 14 glucose
2 3 4 2

* 4,6-ethylidene(G7)-p-nitrophenyl(G1)-α,D maltoheptaoside;
* PNP = p-Nitrophenol

DIAGNOSTIC USE PROCEDURE

Determination of amylase activity, in sera or urines, is used for assessing the possibility of chronic Bring the working reagent and the analyzer to 37ºC.
or acute pancreatitis.
An 80% of patients suffering from acute pancreatitis have elevated values during the first 24 hours.
Serum amylase values may be elevated in patients with parotitis, intestinal obstruction, Monoreagent Bireagent
Technique
cholecystitis, diabetic ketoacidosis or peritonitis and in chronic alcoholics. Some lung or ovarian mL mL
tumours can give elevated values of amylase. Monoreagent (A+B) 3.00 ---

Single test result can not be used to make a clinical diagnosis. It should integrate clinical and Reagent A --- 2.50
laboratory data. Sample 0.10 0.10
Reagent B --- 0.50
REAGENTS
Kit 1 x 60 mL. (Ref. 99 60 66). Contents: Mix well and incubate for 3 min.
A. 1 x 50 mL Buffer / Enzyme Ref. 99 60 88 Read the absorbance and start the stopwatch at the same time.
B. 1 x 10 mL Buffer / Substrate Ref. 99 60 90 Read the absorbance again, after exactly 1, 2 and 3 min.
Determine the average ΔAbs/min of the three readings.
Kit 1 x 120 mL. (Ref. 99 26 40). Contents:
A. 1 x 100 mL Buffer / Enzyme Ref. 99 26 45 Reading
B. 1 x 20 mL Buffer / Substrate Ref. 99 26 50 Wavelength: 405 nm (405 – 420 nm)
Blank: against air
WORKING REAGENT PREPARATION Cuvette: Thermostated 1 cm light-path.
Reagents A and B are ready-to-use. If a Monoreagent procedure is preferred, then the reagents
must be mixed in the ratio: 5 parts of A (Buffer/Enzyme) + 1 part of B (Buffer / Substrate). Semimicromethod
It can be carried out with half of the volumes as those in the macro method.
WORKING REAGENT CONCENTRATIONS
The concentrations in the reagent solution are: CALCULATIONS
Hepes buffer pH 7.1 65 mM Use the stated formula for factor calculation:
NaCl 95 mM
MgCl2 15 mM Vt x 106
ΔAbs/ min x = U/L
Ethylidene-G7PNP 17 mM Є x l x Vs
α-glucosidase ≥ 4500 U/L
Stabilizers and preservatives Vt: Reaction total volume
Vs: Sample volume
STORAGE AND STABILITY l: Cuvette light path
When stored at 2-8ºC the components of the kit will remain stable until the expiration date stated Є: Extinction Coefficient of p-nitrophenol, 10.600
on the label. The Monoreagent is stable for 1 week at 2-8ºC and for 3 days at room temperature (≤
25ºC), when protected from the sunlight. Determine the mean ΔAbs/min value and multiply by the factor:
Signs of reagent deterioration:
Reagent turbid or with visible particles. Reagent blank: > 0.300. A slight yellowing of the reagent U/L (37ºC) = 2930 x ΔAbs 405 nm./min
solution does not affect the determination. µkal/L (37ºC) = 48.8 x ΔAbs 405 nm/min

ADDITIONAL EQUIPMENT REFERENCE VALUES

General laboratory equipment. Serum / plasma: 28 - 100 U/L (0,47- 1.67 µkal/L)
Spectrophotometer or photometer thermostatable at 37ºC. Cuvette: 1 cm light-path. Urine: ≤ 460 U/L (≤ 7.67 µkal/L)
Each particular laboratory should establish its own normal range, obtained from samples of a
SAMPLE representative population, using its own instrumentation, blood collection methods and assaying
Serum or plasma with heparin or urine. Samples free from hemolysis should be used. procedures.
In absence of bacterial contamination the α-amylase activity in serum or plasma will remain stable
for 6 days when stored at 2-8ºC. α-amylase activity in urine will remain stable for 10 days at PERFORMANCE CHARACTERISTICS
2-8ºC, and for 2 days at room temperature (< 25ºC). The performance characteristics depend on the method used. It is recommended to calculate these
data for each particular test protocol. These results have been obtained using a manual method.
CAUTION
The reagents contain sodium azide at 0.09%. Handle with care. Sensitivity, as detection limit: 12U/L
The safety statements are on the label. It is advisable to look at the SDS before using the reagent. Linearity: Up to 1500 U/L For higher values, it is recommended to dilute the sample 1/10 in saline
The disposal of the residues has to be made according to local regulations. (NaCl 0.9%) and assay once again
Accuracy: 98.8 %
Repetitivity, as Coefficient of Variation: 1.56%
QUALITY CONTROL Reproducibility, as Coefficient of Variation: 1.98%
Control serum, Seriscann Normal (Ref. 994148/996571) and Seriscann Anormal (Ref. Trueness: Results obtained with this reagent did not show systematic differences when compared
994685/999329) should be included in each test series. It is recommended to calibrate with reference reagent
with the Calibrator for Autoanalyzers (Ref. 99 62 80) whenever the batch of reagent and/or Details of the performance studies are available on request
calibrator is changed and/or the control sera do not fall within the margins.
Each particular laboratory should establish its own control program. INTERFERENCES
Bilirubin concentrations higher than 15 mg/dL, and haemoglobin higher than 450 mg/dL will
interfere with the reaction.
AUTOANALYZERS
Adaptations to different autoanalyzers are available on request.
NOTES
Sweat and saliva contamination in the glassware will alter the final results

REFERENCES
Junge, W., Troge, B., Klein, G., Poppe, W., Gerber, H. (1989). Clin. Biochem. 22, 109 – 114.
Lorentz, K., (2000). [Link]., 46, 644-649.

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Revision: 09.2024 PRO4-9_AMIL_9
AMYLASE LIQUIDE
MÉTHODE IFCC
Pour la détermination “in vitro” de l’ α-amylase

PRINCIPE
Le substrat, un oligosaccharide de maltose, est relié par une extrémité au groupe chromogène, tandis que l’autre est bloquée par un groupe. La dégradation du substrat démarre à l’ajout de l’α-amylase
de l’échantillon et les oligosaccharides à chaîne plus courte produits interagissent avec l’enzyme α-glucosidase, ce qui libère le groupe p-nitrophénol.
L’augmentation de Abs à 405 nm est directement liée à l’activité α-amylase de l’échantillon.

α-amilase
5 éthylidène-G PNP* + 5 H O → éthylidène-G + G PNP + 2 éthylidène-G + 2 G PNP + 2 éthylidène-G + 2 G PNP
7 2 3 4 4 3 5 2
α-glucosidase
2 G PNP + 2 G PNP + G PNP + 14 H O → 5 PNP + 14 glucose
2 3 4 2
* 4,6-éthylidène(G7)-p-nitrophényl(G1)-α,D maltoheptaoside.
* PNP = p-nitrophénol

UTILITÉ DE DIAGNOSTIC TECHNIQUE

La détermination de l’activité amylasique, dans le sérum ou les urines, est utilisée pour évaluer un Incuber le réactif de travail et l’analyseur pendant 10 minutes à 37ºC.
diagnostic de pancréatite chronique ou aiguë. 80% des patients souffrant de pancréatite chronique
présentent des valeurs élevées d’amylase au cours des premières 24 heures.
Des valeurs élevées d’amylase peuvent être retrouvées chez les patients atteints de parotidite, Monoréactif Biréactif
Technique
d’infarctus intestinal, de troubles du tractus biliaire, d’acidocétose diabétique ou d’une péritonite. mL mL
Certaines tumeurs du poumon ou des ovaires peuvent également entraîner des valeurs élevées Monoréactif (A+B) 3,00 ---
du niveau d’amylase.
Des valeurs élevées sont détectées chez les alcooliques chroniques. Réactif A --- 2,50
Échantillon 0,10 0,10
Un test de laboratoire unique ne peut pas établir un diagnostic. Les résultats doivent être évalués
dans le contexte de toutes les données cliniques et de laboratoire obtenus. Réactif B --- 0,50

RÉACTIFS Mélanger et incuber pendant trois minutes puis mettre en marche le chronomètre. Lire l’absorption.
Kit 1 x 60 mL. (Réf. 99 60 66). Contenu: Répéter les lectures exactement toutes les minutes pendant 3 minutes.
A. 1 x 50 mL Tampon/enzymes Réf. 99 60 88 Détermine ΔAbs/min moyenne des trois lectures.
B. 1 x 10 mL Tampon/substrat Réf. 99 60 90
Lecture
Kit 1 x 120 mL. (Réf. 99 26 40). Contenu: Longueur d’onde: 405 nm (400 à 420 nm)
A. 1 x 100 mL Tampon/enzymes Réf. 99 26 45 Blanc: lecture contre l’air
B. 1 x 20 mL Tampon/substrat Réf. 99 26 50 Cuvette: thermostatée de 1 cm de trajet optique.

PRÉPARATION DU RÉACTIF DE TRAVAIL Technique semi-micro

Les réactifs A et B sont prêts à l’emploi. En cas d’utilisation de la technique Monoréactif: mélanger Elle peut être effectuée avec la moitié des volumes indiqués précédemment.
les quantités souhaitées, mais en maintenant la proportion 5 volumes de A (Tampon/Enzymes) +
1 volume de B (Tampon/Substrat). CALCULS
En utilisant la formule indiquée pour obtenir le facteur de calcul des U/L :
COMPOSITION DU RÉACTIF DE TRAVAIL
Les concentrations dans la solution réactive sont les suivantes: Vt x 106
Tampon Hepes pH 7,1 65 mM ΔAbs/ min x = U/L
NaCl 95 mM Є x l x Vs
MgCl2 15 mM Où:
Éthylidène-G7PNP 17 mM l: trajet optique
α-glucosidase ≥ 4500 U/l Vt : Volume total du mélange de réaction
Stabilisants et conservateurs Vs : Volume de l’échantillon
Є : Coefficient d’extinction molaire de p-nitrophénol, 10.600
CONSERVATION ET STABILITÉ
Conservés entre 2-8ºC, les composants du kit sont stables jusqu’à la date de péremption indiquée Calculer la valeur ΔABs/min obtenue à chaque lecture ainsi que la valeur moyenne. Les U/L
sur l’étiquette. Une fois les composants A et B mélangés, cette solution monoréactive est stable sont calculées à partir de:
pendant 1 semaine entre 2-8ºC et 3 jours à température ambiante (≤ 25ºC). À conserver à l’abri
de la lumière. U/L (37ºC) = 2.930 x ΔAbs 405 nm/min
µkat/L (37ºC) = 48,8 x ΔAbs 405 nm/min
Les réactifs seront altéré si:
Il existe une présence de particules ou de turbidité. Blanc Réactif de travail > 0,300.
VALEURS DE RÉFÉRENCE
Une légère coloration jaunâtre de la solution réactive n’a aucune influence sur la détermination.
Sérum/plasma: 28 à 100 U/L (0,47 à 1,67 µkat/L)
Urine: ≤ 460 U/L (≤ 7,67 µkat/L)
MATÉRIEL NÉCESSAIRE MAIS NON FOURNI Il est recommandé que chaque laboratoire établisse ses propres valeurs de référence.
Matériel courant de laboratoire.
Spectrophotomètre, analyseur automatique ou photomètre thermostaté à 37 ºC. Récipient de 1 cm
de trajet optique. PERFORMANCE. CARACTÉRISTIQUES DE FONCTIONNEMENT
Le fonctionnement du produit dépend tant du réactif que du système de lecture manuel ou
ÉCHANTILLON automatique utilisé. Les résultats suivants ont été obtenues avec une methode manuelle:
Sérum ou plasma héparinisé ou urine. Utiliser des échantillons exempts d’hémolyse.
En l’absence de contamination bactérienne, l’activité de l’α-amylase dans le sérum ou le plasma Sensibilité comme limite de détection: 12 U/L
est stable au réfrigérateur entre 2-8ºC pendant six jours. Dans l’urine, cette activité est stable Linéarité: L’essai est linéaire jusqu’à 1500 U/L. Pour des concentrations plus élevées, diluer
pendant dix jours entre 2-8ºC et deux jours à température ambiante (≤ 25 ºC). l’échantillon 1/10 avec une solution saline (NaCl 0,9%). Multipliez le résultat par 10.
Exactitude: le pourcentage de récupération est de 98,8 %.
Coefficient de variation dans la série: 1,56 %
PRÉCAUTIONS Coefficient de variation entre les séries: 1,98 %
Les réactifs contiennent de l’azide de sodium à 0,09 %. Manipuler avec précaution. Justesse. Les résultats obtenus avec le réactif ne sont pas significativement différents par rapport
Les indications de sécurité figurent sur l’étiquette des produits. Il est conseillé de consulter la fiche au réactif de référence considéré.
de données de sécurité avant de manipuler le réactif. L’élimination des déchets doit être réalisée L’étude détaillée de la performance du réactif sont disponibles sur demande.
conformément aux normes en vigueur.
INTERFÉRENCES
Aucune interférence n’a été observée avec la bilirubine jusqu’à 15 mg/dL ni avec l’hémoglobine
CONTRÔLE DE QUALITÉ
jusqu’à 450 mg/dL.
Nous recommandons l’inclusion de sérums de contrôle Seriscann normale (Réf.
994148/996571) et Seriscann anormale (Réf. 994685/999329) dans chaque processus de
NOTES
mesure pour vérifier les résultats. Il est recommandé de calibrer avec le Calibrateur pour
La contamination par la salive ou la sueur du matériel ou des échantillons utilisés doit être évitée,
Autoanalyseurs (Réf. 99 62 80) chaque fois que le lot de réactif et/ou de calibrateur est
car l’essai pourrait donner de faux résultats en raison de leur teneur en α-amylase.
changé et/ou que les sérums de contrôle ne rentrent pas dans les marges.
Nous suggérons que chaque laboratoire d’établir son propre programme et les procédures
de correction des écarts dans les mesures de contrôle qualité. BIBLIOGRAPHIE
Junge, W., Troge, B., Klein, G., Poppe, W., Gerber, H. (1989). Clin. Biochem. 22, 109 – 114.
Lorentz, K., (2000). [Link]., 46, 644-649.
AUTOANALYSEURS
Des adaptations aux différents analyseurs automatiques sont disponibles sur demande.

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AMİLAZ SIVI
IFCC YÖNTEMİ
α-amilazın “in vitro” belirlenmesi için
İLKEL
p-NP grubu, maltöz oligosakkaride, etiliden ile engellenmiş bir uç tarafına bağlanmıştır. α-amilaz, alt zincirli oligosakkaritler üreterek substratla reaksiyona girer ve α-glukozidazın etkisiyle p-NP renkli
grubunu serbest bırakır.
405 nm’deki Abs, örneğin α-amilaz aktivitesi ile doğrudan ilişkilidir.
α-amilaz
5 ethylidene-G PNP* + 5 H O → etiliden-G + G PNP + 2 etiliden-G + 2 G PNP + 2 etiliden-G + 2 G PNP
7 2 3 4 4 3 5 2
α-glukosidaz
2 G PNP + 2 G PNP + G PNP + 14 H O → 5 PNP + 14 glucose
2 3 4 2
* 4,6-etiliden(G7)-p-nitrofenil(G1)-α,D maltoheptaozid.
* PNP = p-nitrofenol

DİAGNOSTİK KULLANIM PROSEDÜR

Amilaz aktivitesinin belirlenmesi, serum veya idrar örneklerinde, kronik veya akut pankreatit Çalışma reaktifini ve analiz cihazını 37ºC’ye getirin.
olasılığının değerlendirilmesi için kullanılır.
Akut pankreatit hastalarının %80’inde ilk 24 saatte yüksek değerler gözlemlenmektedir. Teknik Tek bileşenli reaktif Bireaktif
Parotit, intestinal tıkanıklık, kolesistit, diyabetik ketoasidoz veya peritonit ve kronik alkoliklerde Tek bileşenli reaktif mL mL
serum amilaz değerleri yüksek olabilir. Bazı akciğer veya over tümörleri de amilaz değerlerinde (5A + 1 B) 3.0 ---
yükselmeye neden olabilir.
Reaktif A
Örnek --- 2.5
Tek bir test sonucu klinik teşhis için kullanılamaz. Klinik ve laboratuvar verileri bir araya getirilmelidir.
Reaktif B 0.10 0.10
--- 0.50
REAKTİFLER
Kit 1 x 60 mL. (Ref. 99 60 66). Içerik: İyi karıştırın ve 3 dakika inkübe edin.
A. 1 x 50 mL Tampon / Enzim Ref. 99 60 88 Aynı anda absorbansı okuyun ve kronometreyi başlatın.
B. 1 x 10 mL Tampon / Substrat Ref. 99 60 90 Tam olarak 1, 2 ve 3 dakika sonra tekrar absorbansı okuyun.
Üç okumanın ortalama ΔAbs/dak’ını belirleyin.
Kit 1 x 120 mL. (Ref. 99 26 40). Içerik:
A. 1 x 100 mL Tampon / Enzim Ref. 99 26 45 Okuma
B. 1 x 20 mL Tampon / Substrat Ref. 99 26 50 Dalga boyu: 405 nm (405 – 420 nm)
Boşluk: havaya karşı
Kuvvet: Termostatlı 1 cm ışık yolu.
ÇALIŞMA REAKTİFİNİN HAZIRLANMASI
Reagents A ve B kullanıma hazırdır. Eğer bir Monoreagent prosedürü tercih edilirse, o zaman Yarı mikro yöntem
reaktiflerin karışımı için şu oran kullanılmalıdır: 5 birim A (Tampon / Enzim) + 1 birim B (Tampon Makro yöntemdeki hacimlerin yarısıyla gerçekleştirilebilir.
/ Substrat).
HESAPLAMALAR
ÇALIŞMA REAKTİFİNİN BİLEŞİMİ Faktör hesaplaması için belirtilen formülü kullanın:
Reaktif çözeltisindeki konsantrasyonlar:
HEPES tamponu pH 7.1 65 mM Vt x 106
NaCl 95 mM ΔAbs/dk x = U/L
Є x l x Vs
MgCl2 15 mM Nerede:
Ethylidene-G7PNP 17 mM Vt: Reaksiyon toplam hacmi
α-glukozidaz 4500 U/L Vs: Örnek hacmi
Stabilizatörler ve koruyucular l: Kuvet ışık yolu
Є: p-nitrofenolün Ekstinksiyon Katsayısı, 10.600
DEPOLAMA VE STABİLİTE
2-8ºC’de saklandığında, kitin bileşenleri etikette belirtilen son kullanma tarihine kadar stabil Ortalama ΔAbs/dk değerini belirleyin ve faktörle çarpın:
kalacaktır. Monoreaktif, güneş ışığından korunduğunda 2-8ºC’de 1 hafta boyunca ve oda
sıcaklığında (≤ 25ºC) 3 gün boyunca stabildir. U/L (37ºC) = 2930 x ΔAbs 405 nm /dk
Reaktif bozulma belirtileri: µkal/L (37ºC) = 48.8 x ΔAbs 405 nm /dk
Reaktif bulanık veya görünür parçacıklarla. Reaktif boşluğu: > 0.300.
Biraz sararma, belirteç çözeltiyi etkilemez. REFERANS DEĞERLERİ
Serum / Plazma: 28 – 100 U/L (0.47 – 1.67 µktal/L)
EKİPMANLAR İdrar: ≤ 460 U/L (≤ 7.67 µktal/L)
Genel laboratuvar ekipmanı. Her laboratuvarın, kendi enstrümantasyonu, kan toplama yöntemleri ve analiz prosedürlerini
Spektrofotometre; termostatlı küvetli otomatik analizör veya fotometre, 1 cm ışık yolu. kullanarak, temsilci bir popülasyon örneğinden elde edilen kendi normal aralığını belirlemesi
gerekmektedir.

DİKKAT
Reaktifler %0.09 sodyum azid içerir, dikkatle kullanın. Güvenlik talimatları ürün etiketinde PERFORMANS KARAKTERİSTİKLERİ
bulunmaktadır. Reaktifi kullanmadan önce güvenlik bilgi formunu incelemeniz tavsiye edilir. Ürünün işleyişi, kullanılan reaktif ve manuel veya otomatik okuma sistemi kadar bağımlıdır.
Atıkların bertarafı, yürürlükteki yerel düzenlemelere göre yapılmalıdır. Aşağıdaki sonuçlar manuel bir yöntemle elde edilmiştir:

Duyarlılık olarak algılama limiti: 12 U/L

ÖRNEK Doğrusallık: Test 1500 U/L’ye kadar doğrusaldır. Daha yüksek konsantrasyonlar için örneği %0,9
Heparinli serum veya plazma veya idrar örneği. Hemolizden arınmış örnekler kullanılmalıdır. sodyum klorür (NaCl) solüsyonu ile 1/10 oranında sulandırın. Sonucu 10 ile çarpın.
Bakteriyel kontaminasyon olmadığında, serum veya plazmadaki α-amilaz aktivitesi 2-8ºC’de Doğruluk: Kurtarma yüzdesi %98,8’dir.
saklandığında 6 gün boyunca stabil kalacaktır. İdrardaki α-amilaz aktivitesi 2-8ºC’de 10 gün Seri içi varyasyon katsayısı: %1,56
boyunca ve oda sıcaklığında (< 25ºC) 2 gün boyunca stabil kalacaktır. Seri arası varyasyon katsayısı: %1,98
Doğruluk. Reaktif ile elde edilen sonuçlar, referans reaktife göre anlamlı şekilde farklı değildir.
KALİTE KONTROL
Ölçüm sonuçlarını doğrulamak için her ölçüm sürecine kontrol serumları, Seriscann Normal (Ref. Reaktifin performansının detaylı incelemesi talep üzerine mevcuttur.
994148/996571) ve Seriscann Anormal (Ref. 994685/999329) dahil edilmesi önerilir. Reaktif
ve/veya kalibratör partisi değiştirildiğinde ve/veya kontrol serumları sınırlar içinde olmadığında, MÜDAHALELER
Otomatik Analizörler için Kalibratör (Ref. 996280) ile kalibrasyon yapılması tavsiye edilir. Her 15 mg/dL’ye kadar bilirubin veya 450 mg/dL’ye kadar hemoglobin ile herhangi bir müdahale
laboratuvarın kendi kalite kontrol programını ve tespit edilen sapmaların düzeltilmesi prosedürlerini gözlemlenmemiştir.
oluşturması önerilir.
NOTLAR
Cam ekipmanlarındaki ter ve tükürük kontaminasyonu sonuçları değiştirecektir.
OTOANALİZÖRLER
Farklı otomatik analiz cihazlarına uyum sağlayan adaptasyonlar talep üzerine sağlanmaktadır.
REFERANSLAR
Junge, W., Troge, B., Klein, G., Poppe, W., Gerber, H. (1989). Clin. Biochem. 22, 109 – 114.
Lorentz, K., (2000). [Link]., 46, 644-649.

QUIMICA CLINICA APLICADA S.A.

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Redaksiyon: 09.2024 PRO4-9_AMIL_9