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26 - Act - Colab - 2

El documento aborda la importancia de la ingeniería genética en el uso de ácidos nucleicos, destacando su aplicación en la producción de insulina a partir de bacterias. Se analiza la estructura y función de los ácidos nucleicos en bacterias y eucariotas, así como la relevancia de la inhibición enzimática en el metabolismo celular. Además, se discuten conceptos clave como la cinética enzimática y la constante de Michaelis (Km) en relación con la afinidad de las enzimas por sus sustratos.

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El documento aborda la importancia de la ingeniería genética en el uso de ácidos nucleicos, destacando su aplicación en la producción de insulina a partir de bacterias. Se analiza la estructura y función de los ácidos nucleicos en bacterias y eucariotas, así como la relevancia de la inhibición enzimática en el metabolismo celular. Además, se discuten conceptos clave como la cinética enzimática y la constante de Michaelis (Km) en relación con la afinidad de las enzimas por sus sustratos.

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1

Bioquímica

Ácidos Nucleicos Flujo de Información Genética

Leidy Liliana Mendoza


Luz Esmeralda Sánchez
Melba Lucero Gómez
Luis Felipe Salamanca

Código:
151030_26

Docente
Wilma Esther Fuentes Jiménez

Universidad Nacional Abierta y a Distancia Unad


Escuela Ciencias de la Salud
Administración en Salud
Bioquímica

Bogotá
2017
2

OBJETIVOS

Objetivo general:

Reconocer la importancia que tiene la Ingeniería genética en el uso de los ácidos


Nucleicos, así como la necesidad de introducir genes en bacterias para poder ayudar en
el manejo de patologías que afectan a la humanidad.

Objetivos específicos:

 Comprender que La composición y estructura de los ácidos nucleicos bacterianos,


es la misma que para cualquier célula.
 Analizar la acción enzimática en los procesos metabólicos
 Identificar que la concentración de sustrato es a que determina la actividad enzimática
medida como la velocidad de catálisis enzimática
3

Introducción

Las bacterias son microorganismos con una capacidad extraordinaria de adaptación a


diferentes condiciones ambientales. Para comprender la esencia de esta capacidad es
importante conocer sus bases genéticas, es decir cómo está organizada la información
genética, como realizan y regulan su expresión y que mecanismos de variación génica poseen.
Por otro lado, el conocimiento del funcionamiento genético de las bacterias, sumado al hecho
de que son de fácil manejo en el laboratorio y que tienen crecimiento rápido, ha permitido
usarlas para sintetizar productos útiles a la medicina, tanto para el diagnóstico como para la
prevención y tratamiento de algunas enfermedades.
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a). Situación problema

Muchas bacterias poseen además ADN extra cromosómico, también circular y cerrado,
denominado ADN plasmídico por estar contenido en los plásmidos. Éstos, portan información génica
para muchas funciones que no son esenciales para la célula en condiciones normales de crecimiento.
Este plásmido ha sido aprovechado para realizar la inserción de un gen de interés y en 1978, se logró
cultivar bacterias [Link] (Escherichia coli), la cual contenía un gen humano para producir insulina en
gran cantidades y a bajo costo. Aunque esta alternativa fue contundente dio paso a nuevas aplicaciones
biotécnicas, mejorando la calidad de vida de las personas diabéticas que no pueden Producir secreción de
insulina por las células β del páncreas en respuesta al aumento de los niveles de glucosa.

Para dar respuesta. 1. Analice En términos bioquímicos la composición y estructura de los


ácidos nucleicos bacterianos e identifique si hay diferencia estructurales con el de otra célula
(p.e eucariotas).

La composición y estructura de los ácidos nucleicos bacterianos, es la misma que para


cualquier célula. Igual son macromoléculas que se componen de nucleótidos formados y
unidos de forma covalente, la estructura forma un esqueleto de azucares y fosfatos constantes
en toda la macromolécula.

La información que se encuentra dentro de la genética esencial de la vida de la bacteria, se


ubica dentro del ADN con doble cadena y circular, a esto se le llama cromosoma bacteriano.

Las diferencia entre las bacterias y la eucariota, se encuentra en que las bacterias no poseen
histonas asociadas a su genoma y en consecuencia no tiene la posibilidad de compactar su
ADN en estructuras tipo nucleosomas.

Los ARNm eucariotas son monogénicos y requieren de modificaciones postranscripcionales


antes de atravesar la membrana nuclear y llegar al citoplasma donde son traducidos.

2. Analice La importancia de ingeniería genética en una técnica que consiste en la


introducción de genes en el genoma de un individuo que carece de ellos, esto se realiza a
través de las enzimas de restricción que son capaces de "cortar" el ADN en puntos concretos;
denominándose ADN recombinante, el que se ha formado cuando se intercala un segmento
de ADN extraño en un ADN receptor
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La ingeniería genética es una rama de la ciencia que define un conjunto de técnicas,


procedimientos, metodologías en la manipulación y transferencia de genes de un organismo a
otro con el objetivo de suplir una deficiencia o mejorar su expresión genética, confiándoles
una nueva característica. Por tanto su importancia radica en la creación y desarrollo de
vacunas, fármacos, enzimas, proteínas o demás tecnologías con el fin de corregir y prevenir
algún defecto o deficiencia en la genética tanto en el seres vivos como en las plantas y así
poder evitar el contagio de enfermedades, también con el propósito de fortalecer tanto el
genotipo como el fenotipo para el mejoramiento de la especie, haciéndola menos vulnerable.

Estas técnicas se emplean normalmente para la producción de proteínas en gran escala, ya que
podemos hacer que una bacteria produzca una proteína humana y lograr una superproducción,
como en el caso de la insulina humana, que actualmente es producida por bacterias en grandes
recipientes de cultivo, denominados bioreactores. Como las bacterias se multiplican muy
rápidamente y pueden expresar grandes cantidades de proteínas, es posible lograr una
sobreproducción de la proteína deseada. A esto justamente se dedica la biotecnología, es decir
a la utilización de organismos vivos o de sus productos con fines prácticos.

3. Analice La insulina es como una llave que abre la cerradura de las puertas de las células del
cuerpo para que la glucosa (azúcar en la sangre) pueda entrar y sea utilizada como energía. La
glucosa no puede entrar en las células, se acumula en la sangre.
El control y la regulación de la glucosa en el organismo dependen de la interacción entre las
hormonas pancreáticas glucagón e insulina secretadas por las células β, respectivamente; sus
acciones son opuestas a nivel del metabolismo energético y son claves para mantener un
equilibrio de oferta y demanda, en especial de la glucosa. El glucagón aumenta sus niveles
sanguíneos y la insulina los disminuye al ayudar a ingresarlo al interior de las células. El
hígado musculo estriado y el tejido graso, ejercen acciones anabolizantes de almacenamiento
de glucosa en forma de glucógeno o su utilización en la fosforilación oxidativa. El glucagón,
por el contrario, actúa activando principalmente la glucogenólisis y la gluconeogénesis en
asocio con el cortisol, una alteración en la producción de estas dos hormonas (exceso de
glucagón y déficit de insulina) puede generar diabetes mellitus.

B) Situación problema.

Paso 1 La inhibición enzimática

La inhibición enzimáticos son moléculas que se unen a las enzimas para disminuir su
actividad provocando la muerte de un organismo patógeno o corregir un desequilibrio del
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metabolismo. Todas las funciones de la célula requieren de las enzimas para que ocurran a
una velocidad adecuada todas las reacciones químicas responsable de las funciones. La
actividad de las enzimas no es siempre biológicamente útil, una actividad incontrolada por
ejemplo de las proteasas de la coagulación tendrían fatales consecuencias, por eso la
naturaleza ha desarrollado inhibidores enzimáticos que frenan su actividad o la anulan por
completo. Los inhibidores están directamente implicados en la regulación del metabolismo de
la célula, estos inhibidores detienen la ruta bioquímica cuando los productos comienzan a
acumularse y así mantener la homeostasis de una célula. Los denominados inhibidores
incluyen fármacos, antibióticos, conservadores alimentarios y venenosos

Tipos de inhibidores

. Inhibición reversible: Se caracteriza por el equilibrio entre la enzima y al inhibidor. .


. Inhibición irreversible: Se une covalentemente a la enzima y la inactiva de manera
irreversible. Casi todos los inhibidores irreversibles son sustancias toxicas naturales o
sintéticas.

2. Clases de Inhibidores reversibles

Se combinan transitoriamente con el enzima, de manera parecida a como lo hacen los mismos
sustratos. Algunos inhibidores reversibles no se combinan con el enzima libre sino con el
complejo enzima- sustrato. Se subdividen en:

. Inhibidor competitivo: Sustancia similar es estructura al sustrato con quien compite por
el sitio enzima provocando una inhibición total, este proceso es reversible si se aporta exceso
de sustrato que desplazaría al inhibidor.

. Inhibidor no competitivo: Puede combinarse con la enzima libre, igual que con el
complejo enzima-sustrato sin afectar el sitio activo de la enzima.

. Inhibidor Acompetitivo: Reacciona con la enzima en un punto distinto al centro activo


pero solo cuando este unida al complejo ES (enzima-sustrato)
7
8

X Y
[S] (mM) Vo (mM/min) 1/[S] 1/Vo
50 10 0,02 0,1 m b
100 19 0,01 0,05263158 4,69230648 0,00499707
160 29 0,00625 0,03448276
190 34 0,00526316 0,02941176 V/max= 200,117404 la Vmax es igual a1/b
210 44 0,0047619 0,02272727 Km= 939,012191 KM es igual a m/b
240 49 0,00416667 0,02040816
290 46 0,00344828 0,02173913 Título del gráfico
300 51 0,00333333 0,01960784 0,12
400 58 0,0025 0,01724138
0,1 y = 4,6923x + 0,005
500 63 0,002 0,01587302 R² = 0,9922
720 73 0,00138889 0,01369863
0,08
800 81 0,00125 0,01234568
1000 87 0,001 0,01149425 0,06

0,04

0,02

0
0 0,005 0,01 0,015 0,02 0,025
9

1. Analice las principales características estructurales de las enzimas, sitio activo, la


formación de complejos y la cinética enzimática Modelo de Michaelis y Menten
(Dependencia de la concentración de sustrato).

Las reacciones químicas sencillas se describen en términos de constantes de velocidad,


Michaelis y Menten, describe las reacciones catalizadas por enzima en términos de Km y
Vmax, la enzima se une a su sustrato antes de convertirlo en producto, por lo cual la reacción
global consiste en definir procesos de primer y segundo orden, cada una con una constante de
velocidad característica.

Las ecuaciones de Michaelis y Menten, se emplean para deducir Vmax y Km, a partir de las
mediciones de la velocidad de reacción a diferentes concentraciones de sustratos.

Dentro de las características estructurales se encuentra que son simples y conjugadas, se unen
al sustrato por interacciones no covalentes y actúan en situaciones específicas, en el sitio
activo existen reacciones químicas intracelulares que se pueden presentar en condiciones
desfavorables, pero dentro de la zona enzimática se une al sustrato para ser catalizado.

2. Analice Significado biológico de Km. En términos prácticos la Km, como una medida de la
afinidad de la enzima por su sustrato, más pequeño es su valor mayor es la afinidad de la
enzima por el sustrato.

Km es la concentración del sustrato a la cual la velocidad es la mitad del valor máximo,


dentro de la constante de Michaelis (Km) es una combinación de tres constantes de velocidad,
pero también puede determinarse con facilidad a partir de datos experimentales, estas
mediciones cinéticas suelen hacerse en un intervalo de concentraciones de sustrato. (Pratt, C.
W., & Cornely, K. 2012).

3. Analice Las enzimas con una Km muy baja (10-6-10-8M) son importantes en el
metabolismo

Una Km pequeño o bajo, refleja una alta afinidad de la enzima por el sustrato, porque se
requiere una baja concentración de sustrato para saturar la enzima a la mitad, esto es para que
alcance la velocidad ½ Vmax
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Referencias Bibliográficas

Escalona, M. I. (2009). Bioquímica. Córdoba, AR: El Cid Editor | apuntes. Recuperado de


[Link]
quimica
Betancor, L., Gadea, M., & Flores, K. (2008). Genética bacteriana. Recuperado de:
[Link]
Insulina. (2012). Biología y salud mental. [Link]
participaci%C3%B3n-pl%C3%A1stica-y-funcional/[Link].
[Link]. (Junio, 2002). Regulación y Control Metabólico. Recuperado de:
[Link]
Moratalla, N., & Santiago, E. (2002). Deontología Biológica. Capítulo XIXb.:
[Link]
Pratt, C. W., & Cornely, K. (2012). Bioquímica. México, D.F., MX: Editorial El Manual
Moderno. Recuperado de: [Link]
Raisman J., & Gonzalez A.M. (2013). Hipertextos del Área de la Biología. Procariotas y
Eucariotas. Recuperado de: [Link]
Roca, P., Oliver, J., & Rodríguez, A. M. (2004). Bioquímica: técnicas y métodos. Madrid, ES:
Editorial Hélice. Recuperado de
[Link]
quimica
Universidad Pública de Navarra, (2004- 2005). Microbiología Clínica. Recuperado de:
[Link]

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