USO CORRECTO DE LAS PIPETAS GRADUADAS
La pipeta es un material de laboratorio que se utiliza para transferir líquido de un recipiente a otro
de forma muy precisa, además de medir alícuotas de líquido con mucha precisión.
Características y formas
• Se trata de un tubo transparente terminado en forma cónica.
• Suele estar hecho de vidrio o de plástico.
• Tiene marcas de graduación.
• Suelen permitir un volumen de hasta 20 ml.
• Se suele utilizar junto con una propipeta, un instrumento de laboratorio que se utiliza para
traspasar líquidos de un recipiente a otro.
Usos
La pipeta de laboratorio se usa para medir la alícuota de un líquido con mucha precisión, es decir, la
parte que se toma de un volumen de líquido inicial. Se utiliza normalmente para la transferencia de
un volumen de líquido de un recipiente a otro con suma exactitud.
Pipeta graduada o pipeta de simple aforo: La pipeta se enrasa una vez en los 0 ml y luego se deja
vaciar hasta el volumen que se desee. Se pueden medir distintos volúmenes de líquido.
Metodología de uso de la pipeta
• Comprobar que no hay espuma ni burbujas en el líquido de la pipeta.
• Limpiar la punta inferior de la pipeta.
• Aspirar el líquido utilizando un bulbo de succión o una propipeta en la punta libre.
• Trasladar la pipeta al nuevo recipiente.
• Dejar que el contenido caiga por completo, sin forzar la caída de las últimas gotas.
Tipos de pipeteo
1- Profundidad de inmersión errónea de la punta: La correcta profundidad de inmersión de la
punta puede mejorar la exactitud en hasta un 5 %. La punta debería estar sumergida 3 o 6 mm en
las pipetas de gran volumen, en función del tamaño de la punta. Si la punta se sumerge demasiado,
el volumen de gas de la punta se comprime y provoca que se aspire demasiado líquido.
2- Ángulo de pipeteo incorrecto: El ángulo de inmersión de la punta de la pipeta en la muestra
debería ser lo más vertical posible y no debería desviarse más de 20 grados del ángulo vertical. Un
ángulo más horizontal provoca que se introduzca demasiado líquido en la punta, lo que conlleva
aspiraciones inexactas
3- Ritmo irregular en el pipeteo: Use un ritmo constante en el pipeteo entre muestras. Evite ir
deprisa o realizar operaciones rápidas, y mantenga el ritmo para cada paso del ciclo de pipeteo
Pipeta graduada o pipeta de simple aforo: Antes de comenzar a utilizarla asegurarse de limpiar la
punta de la pipeta antes de trasladar líquido y de que no haya burbujas ni espuma en el líquido. Para
su correcta utilización, la pipeta debe ser tomada por la parte superior, entre el dedo pulgar y el del
medio, para aplicar el dedo índice en el extremo superior. Luego se introduce el extremo inferior de
la pipeta en el líquido, se quita el dedo índice del otro extremo y se deja que el líquido ascienda por
el interior de la pipeta. Una vez que se alcanzó el volumen deseado se tapa con el índice el extremo
superior para evitar que siga subiendo y también que se derrame. En ese momento se retira la pipeta
con su contenido (siempre manteniendo el extremo tapado). Para volcar el contenido en otro
recipiente, se separa levemente el dedo índice, y el líquido sale nuevamente. El movimiento del dedo
índice, tapando o destapando, permite controlar el caudal a voluntad.
Otra forma de cargar el líquido en la pipeta es mediante un ligero vacío usando bulbo de succión o
propipeta. Se procede a llenar la pipeta sobre la marca de graduación y trasladar el volumen
deseado. El borde del menisco debe quedar sobre la marca de graduación. Manejo de la pera de
seguridad Es una propipeta (o prepipeta) de goma con válvulas. También se llama pera japonesa o
de tres vías Su correcto manejo requiere llevar a cabo los siguientes pasos:
1) Presionar el botón superior (A) y la pera a la vez con el fin de hacer un vacío retirando el aire del
interior de la pera.
2) Poner la boquilla de la pipeta dentro del extremo interior de la pera de seguridad.
3) Introducir la punta de la pipeta en el líquido que se va a succionar.
4) Presionar el botón intermedio (S). Al ser justamente el sitio por donde se ha conectado la pipeta,
se produce un efecto de succión y el líquido asciende por la misma.
5) Llegar hasta el menisco (curvatura de la superficie del líquido) de tal modo que la base de éste
coincida con la graduación correspondiente y se encuentre tangente a la graduación deseada para
realizar la medición exacta del volumen solicitado.
6) Para evitar el error de pipeteo y realizar una lectura correcta, se debe colocar la pipeta a la altura
de nuestros ojos, de tal modo que nuestra vista quede perpendicular a la graduación deseada.
7) Presionar el botón lateral (E) de la pera de seguridad para hacer que el líquido contenido en la
pipeta salga.
Manejo del aspirador de cremallera
Hay que acoplar la pipeta en la parte inferior del aspirador y, al girar la rueda, sube la cremallera y
sube el líquido. Para vaciarla lentamente, se debe girar la rueda despacio en sentido contrario a
cuando ascendía el líquido. Para vaciarla con rapidez, presionar el botón lateral
Procedimiento
1. Primeramente, observamos la simbología de la pipeta para informarnos de su correcto uso.
2. Llenamos una probeta (solución amarilla) y un vaso de precipitado (solución azul) con el líquido
que queremos medir.
3. Sujetar la pipeta por la parte superior, entre el dedo pulgar y el del medio, para aplicar el dedo
índice en el extremo superior. Luego se introduce el extremo inferior de la pipeta en el líquido, se
quita el dedo índice del otro extremo y se deja que el líquido ascienda por el interior de la pipeta.
Tomar 10 ml de solución probeta (amarillo), una vez medidos, lo depositamos en un vaso de
precipitado.
4. Tomar 5 ml en la pipeta graduada de la solución del vaso de precipitado (azul), una vez medido, la
vaciamos en el vaso de precipitado.
5. Ajustar la propipeta (pera o cremallera) en la pipeta graduada y tomar 5,5 mL de la solución ya
preparada y depositar en un balón de fondo plano.
6. Ajustar la propipeta en la pipeta graduada y tomar 2 mL de la solución de la probeta (amarillo),
depositar en un tubo de ensayo y adicionar 1,5 mL de solución del Erlenmeyer (rojo)
8. Crea tu propia combinación de colores pipeteando los volúmenes deseados.
Ejercicios
A. Transferencias simples (volumen único)
1. Pipetear 5 mL de solución amarilla a un tubo limpio.
2. Pipetear 10 mL de solución azul a un vaso de precipitados.
3. Pipetear 20 mL de solución roja a un vaso grande.
4. Pipetear 5 mL de solución verde a un tubo pequeño.
5. Pipetear 10 mL de agua destilada a un tubo vacío.
6. Pipetear 15 mL de solución azul a un vaso mediano.
7. Pipetear 8 mL de solución roja a un tubo.
8. Pipetear 5 mL de solución verde a un nuevo tubo.
9. Pipetear 10 mL de solución amarilla a otro recipiente.
10. Pipetear 18 mL de agua destilada a un vaso de precipitados.
B. Mezclas de colores (en un solo recipiente)
11. Pipetear 5 mL de amarillo + 5 mL de azul → observar mezcla verde.
12. Pipetear 10 mL de rojo + 10 mL de amarillo → observar mezcla naranja.
13. Pipetear 5 mL de azul + 5 mL de rojo → observar mezcla púrpura.
14. Pipetear 10 mL de verde + 5 mL de amarillo → observar un verde más claro.
15. Pipetear 8 mL de azul + 12 mL de agua → azul diluido.
16. Pipetear 5 mL de rojo + 5 mL de verde → observar color resultante.
17. Pipetear 10 mL de amarillo + 10 mL de verde → verde-limón.
18. Pipetear 5 mL de azul + 5 mL de agua destilada → azul más claro.
19. Pipetear 10 mL de amarillo + 5 mL de agua destilada → amarillo pálido.
20. Pipetear 5 mL de rojo + 15 mL de agua destilada → rojo muy claro.
C. Diluciones (preparación de soluciones diluidas)
21. Pipetear 5 mL de rojo en 15 mL de agua → 1:4 dilución.
22. Pipetear 10 mL de verde en 10 mL de agua → 1:2 dilución.
23. Pipetear 2 mL de amarillo en 18 mL de agua → 1:10 dilución.
24. Pipetear 4 mL de azul en 16 mL de agua → 1:5 dilución.
25. Pipetear 5 mL de verde en 5 mL de agua → dilución 1:2.
26. Pipetear 10 mL de rojo en 20 mL de agua → dilución 1:3.
27. Pipetear 6 mL de amarillo en 14 mL de agua → dilución aproximada 1:3.
28. Pipetear 3 mL de azul en 17 mL de agua → dilución aproximada 1:6.
29. Pipetear 5 mL de verde en 15 mL de agua → dilución 1:4.
30. Pipetear 10 mL de mezcla de azul y rojo (púrpura) en 10 mL de agua → dilución 1:2.
Volumen Color(es) Resultado ¿Realizado?
Nº Actividad Observaciones
Transferido Involucrado(s) esperado (✓)
Transferir
1 solución 5 mL Amarillo -
amarilla
Transferir
2 10 mL Azul -
solución azul
Transferir
3 20 mL Rojo -
solución roja
Transferir
4 5 mL Verde -
solución verde
Transferir agua
5 10 mL Transparente -
destilada
Transferir
6 15 mL Azul -
solución azul
Transferir
7 8 mL Rojo -
solución roja
Volumen Color(es) Resultado ¿Realizado?
Nº Actividad Observaciones
Transferido Involucrado(s) esperado (✓)
Transferir
8 5 mL Verde -
solución verde
Transferir
9 solución 10 mL Amarillo -
amarilla
Transferir agua
10 18 mL Transparente -
destilada
Mezcla
11 5 + 5 mL Amarillo y Azul Verde
amarillo + azul
Mezcla rojo +
12 10 + 10 mL Rojo y Amarillo Naranja
amarillo
Mezcla azul +
13 5 + 5 mL Azul y Rojo Púrpura
rojo
Mezcla verde +
14 10 + 5 mL Verde y Amarillo Verde claro
amarillo
Mezcla azul +
15 8 + 12 mL Azul y Agua Azul diluido
agua
Mezcla rojo + Color
16 5 + 5 mL Rojo y Verde
verde intermedio
Mezcla
17 amarillo + 10 + 10 mL Amarillo y Verde Verde limón
verde
Mezcla azul +
18 5 + 5 mL Azul y Agua Azul claro
agua
Mezcla Amarillo
19 10 + 5 mL Amarillo y Agua
amarillo + agua pálido
Mezcla rojo +
20 5 + 15 mL Rojo y Agua Rojo claro
agua
Diluir rojo en Rojo muy
21 5 + 15 mL Rojo y Agua
agua claro
Volumen Color(es) Resultado ¿Realizado?
Nº Actividad Observaciones
Transferido Involucrado(s) esperado (✓)
Diluir verde en
22 10 + 10 mL Verde y Agua Verde diluido
agua
Diluir amarillo Amarillo muy
23 2 + 18 mL Amarillo y Agua
en agua pálido
Diluir azul en Azul muy
24 4 + 16 mL Azul y Agua
agua claro
Diluir verde en
25 5 + 5 mL Verde y Agua Verde claro
agua
Diluir rojo en
26 10 + 20 mL Rojo y Agua Rosado
agua
Diluir amarillo Amarillo
27 6 + 14 mL Amarillo y Agua
en agua diluido
Diluir azul en
28 3 + 17 mL Azul y Agua Azul pálido
agua
Diluir verde en
29 5 + 15 mL Verde y Agua Verde pálido
agua
Diluir púrpura
30 10 + 10 mL Púrpura y Agua Púrpura claro
en agua
Notas:
• ¿Realizado?: Marcar con un ✓ cada vez que completan el ejercicio.
• Observaciones: Anotar si hubo burbujas, pérdidas de volumen, mezcla incompleta, error en
el color esperado, etc.