CIENCIAS BÁSICAS
GESTION DEL CONOCIMIENTO VERSIÓN: 01
APRENDIZAJE Y DOCENCIA PAGINA No. 1
MANEJO DEL COMPONENTE PRÁCTICO
DIVISION SALUD
ESPACIO ACADÉMICO:
AREA CIENCIAS BIOLÓGICAS
BIOLOGÍA
GUÍA NÚMERO: 7 TÍTULO DE LA PRÁCTICA: ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
1. INTRODUCCIÓN
Las reacciones bioquímicas son necesarias para que la célula mantenga su actividad metabólica. Estas reacciones son
aceleradas por las enzimas. Las enzimas son proteínas que ejercen el rol de catalizadores.
Una enzima actúa sobre un sustrato. El sustrato se adhiere a una cavidad presente en la superficie de la enzima. Esta
cavidad se llama sitio activo. El sitio activo tiene una configuración tridimensional complementaria a la del substrato. La
asociación entre la enzima y el sustrato constituye el complejo enzima-sustrato. Esta asociación puede ser bloqueada por
un inhibidor competitivo con una forma tridimensional casi idéntica a la del sustrato fisiológico.
Una enzima puede hidrolizar el substrato rompiendo los enlaces químicos con la ayuda de moléculas de agua. Una enzima
puede catalizar la formación de enlaces químicos para construir moléculas complejas. Se producen también moléculas de
agua y la reacción recomienza. Este es el ciclo catalítico. Las enzimas, catalizan reacciones específicas, pero sin embargo
tienen distintos grados de especificad. La enzima sacarasa es muy específica, rompe los enlaces B-glucosidicos de la
sacarosa.
Tomado de: https://www.educ.ar/recursos/14326/las-enzimas/fullscreen/fullscreen
2. OBJETIVOS
2.1 Objetivo general:
Evidenciar la presencia de enzimas en muestras de origen biológico y estudiar el efecto de diferentes factores sobre
la actividad enzimática
2.2 Objetivos específicos:
• Contrastar el efecto de las variaciones de pH y temperatura con la velocidad de la actividad enzimática
• Inferir la importancia del mantenimiento del pH y temperatura a nivel biológico para garantizar la actividad
enzimática
Propósito de gestión ambiental:
Promover la cultura ambiental y el respeto por la biodiversidad en los estudiantes de los programas académicos de la
seccional, a través de la disposición adecuada de los residuos generados durante la ejecución de las prácticas de
laboratorio que se desarrollan como parte de su proceso de formación profesional, garantizando la protección y
preservación de los ecosistemas.
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS:
4.1 Materiales • Guardián
• Papa, hígado. 3.1 Reactivos
• vidrio de reloj, hojillas de bisturí, cuchillo, gasa, • Peróxido de hidrógeno
embudo, vaso de precipitado, mortero con • Soluciones de pH
pistilo, 13 tubos de ensayo por grupo. 4.3 Equipos
• Lancetas • Baño serológico o plancha
• Pinzas de madera
4. PROCEDIMIENTO y RESULTADOS
Teniendo en cuenta los conceptos revisados, realice las siguientes actividades practicas
4.1. Experimento 1: ESPECIFICIDAD DEL SUSTRATO
1. Rotular 4 tubos de ensayo (1-4)
2. Preparar homogenizado, a partir de pedazos de papa e hígado por separado en una licuadora o mortero y moler con
un poco de agua hasta diluir parte de la muestra.
3. Poner en los tubos 1 y 2, 1ml de extracto de papa y en los tubos 3 y 4, 1ml de homogenizado de hígado
4. Añada 1 ml de agua en los tubos 1 y 3
5. Añada 1 ml de peróxido de hidrógeno a los tubos 2 y 4
4. Observe y anote los resultados en la siguiente tabla
PEROXIDO DE REACCION
TUBO MUESTRA AGUA
HIDROGENO (SI) (NO)BURBUJEO
1 Papa 1ml
2 Papa 1ml
3 Hígado 1 ml
4 Hígado 1 ml
Preguntas para el análisis
• Observe en cuales tubos hay desprendimiento de burbujas de oxígeno, compare los cuatro tubos. Describa lo
observado.
• ¿Cuáles son los tubos de control?
• ¿Por qué se forman las burbujas?
• ¿En cuál de las muestras se produjo más burbujas?
• ¿Qué gas se está produciendo?
• ¿Qué sugiere la evidencia o los resultados de los experimentos realizados? ¿Contienen catalasa?
• ¿Qué otros organismos se podrían probar?
4.2 Experimento 2. INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA
1. Rotular 4 tubos de ensayo (1-4) y añada 5 mL de extracto (homogenizado) de papa a cada uno.
2. Colocar los tubos en las siguientes condiciones:
• Tubo 1 = 100°C (poner tubo por 5 minutos)
• Tubo 2 = 37°C (poner tubo por 5 minutos)
• Tubo 3 = Temperatura ambiente
• Tubo 4 = En congelador (dejar por 30 minutos)
3. Añadir 2 mL de peróxido al tubo 1. Tome el tiempo inicial al añadir el peróxido y el tiempo cuando empiece a
producirse las burbujas. Repetir con los demás tubos.
4. Grafique sus resultados (tiempo de reacción vs. temperatura)
TUBO DE TEMPERATURA TIEMPO
ENSAYO
1 100°c
2 37°c
3 Temperatura ambiente (25°C)
4 -20°C
Preguntas para el análisis
• ¿Cuál es la relación entre la temperatura y la actividad enzimática?
• ¿Qué significa que la temperatura puede afectar la velocidad de reacción de las enzimas?
• ¿Qué efecto podría tener una fiebre alta prolongada sobre el funcionamiento de las enzimas?
4.3 Experimento 3. Influencia del pH:
1. Rotular 3 tubos de ensayo A – C.
2. Añada 1 cm de homogenado de hígado a cada tubo.
3. Añada 3 ml de HCL 3M (pH 4) al tubo A
4. Añada 3 ml de NaOH 3M ( pH 10) al tubo B
5. Añada 3 cm de agua ( pH 7) al tubo C
6. Agite suavemente hasta mezclar
7. Añada 3 cm de peróxido de hidrógeno a cada tubo.
8. Observe y anote las reacciones. Grafique los resultados obtenidos en el ensayo sobre cómo influyó el pH en la actividad
enzimática
TUBO pH INTENSIDAD DE LA REACCIÓN (Cantidad de burbujas)
A 4
B 10
C 7
Preguntas para el análisis
• ¿Cuál es la relación entre el pH y la actividad enzimática?
• ¿Qué significa que el pH puede afectar la velocidad de reacción de las enzimas?
• Las enzimas del estómago funcionan mejor con un pH de 2. ¿Cómo afectaría un pH de 4 en el estómago a la digestión?
5. DISPOSICIÓN DE RESIDUOS
Cada estudiante debe elaborar la siguiente tabla (ejemplo abajo) en la cual deberá clasificar los residuos generados
durante la practica a partir de los establecidos en materiales e indicar de qué forma deben ser descartados al finalizar el
laboratorio, de acuerdo con MANUAL BÁSICO PARA EL MANEJO DE RESIDUOS GENERADOS EN EL LABORATORIO DE
INVESTIGACIÓN Y CIENCIAS BÁSICAS (LICB). Disponible el aula virtual.
Nombre del residuo Tipo (Solido o liquido) Clasificación Forma de descarte
Solución de NaOH Liquido Solución básica Botella plástica
6. LAVADO DE MATERIAL
Al terminar la práctica cada estudiante debe lavar el material de acuerdo con el protocolo de lavado del
Laboratorio de Investigación y Ciencias Básicas disponible en:
7. BIBLIOGRAFÍA
• Mathews, Christopher. (2002) Bioquímica. Madrid: Pearson 3 ed. 1335 p.
• Cooper G. y Hausman R. (2017) La Célula. 7 ed. Marbán, Madrid.
• Karp G. (2014), Biología Celular y Molecular, Conceptos Y Experimentos. 7 ed. Mc Graw Hill.
• Serrano A. (2016) Manual Prácticas de Biología. Universidad Santo Tomás.
