Listeria monocytogenes
Fundamentos de medios de cultivo
Caldo LEB: El caldo LEB (Lactosa Esencia de Butilato) es un medio de cultivo utilizado
en microbiología para la detección y aislamiento de Listeria monocytogenes y otros
Listeria spp. Este caldo es especialmente útil para el enriquecimiento de muestras que
contienen Listeria, favoreciendo su crecimiento en condiciones selectivas. Contiene
nutrientes que permiten la multiplicación de Listeria, mientras inhibe otras bacterias
competidoras.
Agar Oxford: El agar Oxford es un medio selectivo utilizado para el aislamiento de
Listeria monocytogenes. Contiene telurito de potasio, el cual inhibe el crecimiento de
muchas bacterias no deseadas, permitiendo el desarrollo de Listeria. Además, las
colonias de Listeria en este medio tienden a ser de color negro debido a la reducción del
telurito, lo que facilita su identificación.
Agar Palcam: El agar Palcam es otro medio selectivo utilizado para el aislamiento de
Listeria monocytogenes. Este medio contiene ácido nalidíxico, un antibiótico que inhibe
el crecimiento de muchas bacterias gramnegativas, lo que favorece la proliferación de
Listeria. También contiene otros componentes que permiten una mejor selectividad para
Listeria, y las colonias pueden presentar características específicas que ayudan en su
identificación.
Agar Triptosa Ácido Nalidíxico (ATN): El agar Triptosa Ácido Nalidíxico (ATN) es un
medio selectivo que contiene triptosa y ácido nalidíxico. Este medio se utiliza
principalmente para el aislamiento de Salmonella spp.. El ácido nalidíxico inhibe el
crecimiento de bacterias grampositivas y algunas bacterias gramnegativas, favoreciendo
el crecimiento de Salmonella. Este medio es útil en la identificación de infecciones
bacterianas causadas por Salmonella en muestras clínicas y alimentos.
Agar Tripticasa de Soya Extracto de Levadura (TSAYE): El agar TSAYE (Tripticasa de
Soya Extracto de Levadura) es un medio nutritivo que favorece el crecimiento de una
amplia gama de bacterias, incluidos patógenos comunes como Escherichia coli y
Staphylococcus aureus. Contiene triptosa, soya y extracto de levadura, que
proporcionan nutrientes esenciales para el crecimiento bacteriano. Es un medio utilizado
en microbiología general para la investigación bacteriana y la enumeración de
microorganismos en alimentos, agua y muestras clínicas.
Características de Listeria monocytogenes y su importancia en la industria de
alimentos.
Listeria monocytogenes es una bacteria grampositiva, móvil, facultativamente anaerobia
y resistente a una amplia gama de condiciones adversas, como temperaturas bajas, altos
niveles de sal y cambios en el pH. Su capacidad para crecer a temperaturas de
refrigeración (0-4°C) la convierte en una amenaza significativa para los alimentos
almacenados a bajas temperaturas, como lácteos, carnes procesadas y productos listos
para el consumo. Este patógeno es responsable de la listeriosis, una infección grave que
afecta especialmente a grupos vulnerables como mujeres embarazadas, neonatos,
personas mayores e inmunocomprometidos. La infección puede causar síntomas graves
como meningitis y aborto espontáneo. Su resistencia a diversos métodos de
conservación y su habilidad para sobrevivir en ambientes difíciles hace que su control en
la industria alimentaria sea complejo, subrayando la importancia de mantener estrictos
controles de higiene y temperatura en la producción y almacenamiento de alimentos
para prevenir brotes.
Métodos rápidos y técnicas moleculares que existen en el mercado para la
identificación de Listeria monocytogenes en alimentos.
Existen varios métodos rápidos y técnicas moleculares para la identificación de Listeria
monocytogenes en alimentos, los cuales ofrecen ventajas significativas en términos de
velocidad, sensibilidad y precisión. Algunos de los más utilizados son:
1. Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR): La PCR es una técnica molecular
ampliamente utilizada para detectar Listeria monocytogenes de manera rápida y
precisa. Permite amplificar secuencias específicas de ADN de la bacteria,
incluso en muestras con una baja concentración de microorganismos. La PCR
puede identificar de forma específica Listeria monocytogenes a partir de
alimentos en pocas horas, reduciendo el tiempo de análisis en comparación con
métodos tradicionales.
2. PCR en tiempo real (qPCR): La PCR en tiempo real, también conocida como
PCR cuantitativa, ofrece una ventaja adicional al permitir la detección y
cuantificación simultánea de Listeria monocytogenes en tiempo real. Esta
técnica es más rápida y sensible, permitiendo la identificación precisa y la
evaluación de la cantidad de la bacteria presente en una muestra en tiempo real.
3. Microarreglos de ADN (DNA microarrays): Los microarreglos de ADN son
plataformas que permiten la identificación simultánea de múltiples patógenos,
incluidos diferentes serotipos de Listeria. A través de la hibridación de
secuencias de ADN específicas, los microarreglos permiten una detección rápida
y precisa de Listeria monocytogenes en muestras complejas.
4. Secuenciación de próxima generación (NGS): La secuenciación de próxima
generación permite la secuenciación masiva de ADN, facilitando la identificación
precisa de Listeria monocytogenes y su caracterización genómica. Si bien es más
costosa y requiere mayor tiempo que otras técnicas, ofrece un alto nivel de
precisión y permite el análisis de cepas y su relación filogenética.
5. Inmunoensayos (ELISA): Los ensayos inmunoenzimáticos (ELISA) son pruebas
rápidas que detectan antígenos específicos de Listeria monocytogenes en
alimentos. Estos métodos son rápidos, fáciles de usar y relativamente
económicos, aunque tienen una sensibilidad ligeramente inferior en comparación
con las técnicas moleculares.
6. Biosensores y nanomateriales: Los biosensores basados en técnicas
electroquímicas o basadas en nanopartículas ofrecen una detección rápida y
directa de Listeria monocytogenes. Estos sensores pueden integrarse en
dispositivos portátiles para la detección en el punto de muestreo, lo que permite
una identificación rápida y sobre el terreno en industrias alimentarias.
7. Tecnología de inmunocromatografía: Este método utiliza tiras reactivas o
cartuchos para la detección rápida de Listeria monocytogenes en alimentos
mediante la interacción de anticuerpos específicos con los antígenos
bacterianos. Es un método simple, rápido y de bajo costo, ideal para la detección
en situaciones de campo o en líneas de producción.
