COLEGIO LIBRE DE ESTUDIOS UNIVERSITARIOS
DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS
CLEU CAMPUS OAXACA
PLAN DE PRÁCTICA
CICLO 2023-2024
LICENCIATURA EN CRIMINOLOGÍA, CRIMINALÍSTICA
Y TÉCNICAS PERICIALES
SEXTO SEMESTRE
GRUPO: “H”
Q.F.B. DANIELA ALEJANDRA GARCÍA PÉREZ
DOCENTE
Nombre de la asignatura
GENÉTICA FORENSE
INTEGRANTES DEL EQUIPO
1.- GALIZ MENDEZ KARLA IVONNE
2.- GUTIÉRREZ GAMAS LILIANA
ITHAVIANI
3.- SIERRA ESPINOSA KEVIN YAEL
Este registro traza con el punto 8.5.2 Identificación y trazabilidad, de la norma ISO 9001:2015. Entrega cada periodo
Revisión No. 6 Fecha de revisión: 07 de agosto de 2020 No. HCLA 50.05
Sistema CLEU Derechos Reservados Archivado en: CLA 50.09- CLA 50.09.03
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Nombre del Docente: Q.F.B. DANIELA ALEJANDRA GARCÍA PÉREZ
Nombre de la Asignatura: GÉNETICA FORENSE
Nombre de la Unidad: UNIDAD VI “METODOLOGÍA PARA EL MANEJO DE LOS INDICIOS
BIOLÓGICOS”
Nombre del tema de estudio: 6.2 TÉCNICAS PARA LA EXTRACIÓN DE ADN
Nombre de la Práctica: EXTRACIÓN DE ADN
Práctica No. 3 Interna X Externa
Grado y Grupo: 6 ¨H¨
Fecha (s): 25/04/2024
Horarios: 18:00 – 20:00 Hrs.
Programa: LICENCIATURA EN CRIMINOLOGÍA, CRIMINALÍSTICA Y TÉCNICAS PERICIALES,
PLAN SEMESTRAL PERIODO “B”, CICLO 2023-2024.
Introducción
El estudio de las ciencias y su avance permite ver, medir y obtener información sobre el
objeto de estudio. Las células epiteliales que recubren el interior de la boca se renuevan
continuamente, especialmente cuando masticamos y comemos.
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar, tiene que
romperse la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula, y
posteriormente romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Además de
proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo.
La lisis de las células se consigue mediante la adición de tampones con concentraciones
elevadas de iones que ayudan a romper la estructura tridimensional de macromoléculas
como las proteínas y que forman parte de su estructura celular. La adición de un detergente
como el SDS (Dodecil Sulfato Sódico) es necesaria a menudo para eliminar las membranas.
Generalmente, el ADN se encuentra asociado a proteínas, por lo que se suele añadir
proteasas al tampón de extracción, a la vez que usamos el acetato (amónico o sódico) para
precipitar dichas proteínas.(Tuya, & Montero, 2016)
El buffer de lisis contiene detergentes capaces de disgregar los fosfolípidos de las
membranas y disolver otros componentes celulares como azúcares y grasas.
La proteasa es un enzima con capacidad proteolítica que se utiliza para degradar las
proteínas de la mezcla, incluidas las enzimas capaces de degradar el ADN que queremos
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obtener. La temperatura óptima a la que esta enzima actúa son 50ºC (National Library of
Medicine, 2016).
Para la
visualización de las hebras de ADN se tiene que ´´concentrarse´´ precipitando el ADN en
presencia de sales y alcohol. Las sales neutralizan la carga negativa del ADN permitiendo
que las moléculas se agreguen unas a otras. El ADN es insoluble en presencia de sal y
alcohol. (Gill, 2019).
Justificación de la práctica:
Con la denominación de genética forense se define el uso de ciertas técnicas empleadas
en genética para la identificación de los individuos en base al análisis del ADN, La correspondencia o
no del ADN localizado, con el correspondiente del sospechoso, al estar concatenado con otros medios
probatorios, como lo son los testimoniales, documentales o peritajes diferentes a los que nos ocupa,
puede dar la certeza a los juzgadores para dictar una sentencia
Propósito de la práctica:
• Proporcionar a los alumnos la oportunidad de ver su propia esencia genética.
• Ayudar a los estudiantes a comprender las propiedades del ADN.
Competencia(s) a desarrollar con la realización de la práctica:
• El alumno comprenderá las propiedades del ADN para realizar su extracción.
• Reforzaran el conocimiento general de la estructura y función del ADN.
• Aplicaran los conocimientos adquiridos en clase de forma teórica para así comprenderlas de
mejor.
• Manipularan material genético
Material a utilizar y que el estudiante deberá adquirir:
1.- guantes 2.- cubrebocas 3.- Rotuladores de tinta indeleble
Equipo o material prestado de laboratorio:
1.- Tampón de 2.- Proteasa 3.- Cloruro sódico 4.- Agua estéril 5.- Tubos de 5 ml
lisis de fondo
redondeado
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6.- Microtubos 7.- Microtubos de 8.- Tubos de 9.- Tapas de 10.- Pipetas de
transparentes colores rosca sin tapa rosca de plástico
transparentes diferentes colores
11.- Gradillas de 12.- Torundas 13.- Parafilm
corcho para citologías
Necesario presentarse con lo siguiente para que se le permita el acceso a laboratorio:
Equipo de seguridad:
1.- Bata cerrada ……… (X)
2.- Cubre bocas ……… (X)
3.- Guantes de látex ……… (X)
4.- Cabello recogido ……… (X)
5.- Lentes de seguridad ……… (X)
6.- Gorro ……… ( )
7.- Bitácora ……… (X)
8.- Botas ……… ( )
Área o instalaciones que requiere para la realización de la práctica:
LAB. CRIMINALÍSTICA ( ) LAB. CRMINOLOGÍA ( )
SIST DE IDENTIFICACIÓN ( ) LAB. DE GÉNETICA ( X )
CASA DE HECHOS ( ) LAB. DAC, DOC Y GRAF ( )
JARDÍN ( ) SALA DE JUICIOS ORAL ( )
OTRO:______________________________
Recomendaciones a seguir en prácticas:
En caso de existir algún accidente dentro de laboratorio proceder según lo estipulado en el manual
de primeros auxilios, conservar la calma y consultar a un especialista según sea al caso.
Procedimiento para la realización de la práctica:
1. Tomar un microtubo transparente con 1 ml de tampón de lisis de la gradilla situada e n tu
puesto de trabajo, y rotúlalo con tus iniciales utilizando el rotulador de tinta indeleble.
2. Con suavidad raspa con la escobilla el interior de tu mejilla derecha, y el espacio situado entre
tu mejilla y la encía durante 1 minuto; trata de recoger la mayor cantidad de células posible.
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3. Introduce la escobilla con las células de la mucosa en el tubo que contiene el tampón de lisis.
Gira la escobilla para liberar las células de la escobilla en el tampón. Frota las cerdas de la
escobilla contra el borde del tubo para transferir la mayor cantidad posible de células en el tubo.
4. Usando una s e g u n d a escobilla limpia, raspa suavemente las células del interior de tu
mejilla izquierda, entre l a mejilla y la en cía , p o r el paladar, y debajo de la lengua durante
1 minuto; de nuevo, t ra ta de recoger l a mayor cantidad posible de material. Introduce
la escobilla en el mismo tubo de antes y transfiere las células a su interior.
5. Cierra el tubo y, suavemente, voltéalo 5 veces para mezclar los componentes.
6. Con una pipeta de plástico, añade 1 gota del tubo r o t u l a d o como “prot” en el tubo que
contiene tus células. Cierra el tubo y suavemente voltéalo 5 veces para mezclar los
componentes.
7. Pon los tubos d e tu grupo e n la gradilla d e corcho e incúbalos a 50 ºC durante 10 minutos.
Saca tus tubos del baño.
8. Con una pipeta de plástico, añade 2 gotas del tubo rotulado como “sal” en el tubo que
contiene el extracto de tus células. Cierra el tubo y suavemente voltéalo 5 veces para
mezclar los componentes.
9. Rotula con tus iniciales un tubo limpio de 5 ml y fondo redondeado y pasa el contenido de tu
microtubo a este tubo.
10. Toma una pipeta de p l á s t i c o y llénala con alcohol frío.
11. Inclina 45 º el tubo de fondo redondeado y lentamente añade el alcohol, dejando que caiga con
cuidado por la pared interna del tubo.
12. Deja el tubo en posición vertical y en reposo durante 5 minutos.
13. Después de 5 minutos, sella la boca del tubo con un trozo de Parafilm y voltea lentamente el
tubo 5 veces para facilitar que el ADN, que ha empezado a precipitar, se agregue.
Descripciones de lo observado:
Fibrillas de DNA suspendidas en el medio de precipitación
Actividad de evaluación:
• Desempeño de habilidad individual en el desarrollo de la práctica.
• Desempeño colectivo en el desarrollo de la práctica
• Reporte de la práctica
EVALUACIÓN DE PRÁCTICA
OBSERVACIONES:
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RESULTADOS OBTENIDOS:
Fotografía 2.- se toma una Fotografía 3.- Se
Fotografía.1- Se Toma un micropipeta y se rotula con toma las células del
1 ml de tampón de lisis de la inicial del sujeto de la sujeto en la cavidad
la gradilla. muestra. oral haciendo un
raspado dos veces.
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Fotografía 4.- Se Fotografía 5.- se añade
introduce la escobilla 1 gota del tubo rotulado Fotografía 6.- Donde se
con las células de la
como “prot” en el tubo molió una fresa con el
mucosa en el tubo que que contiene tus mortero.
contiene el tampón de
células.
lisis.
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Fotografía 9.- Se le
agrega agua hasta la
Fotografía 7.- Con una Fotografía 8.- Se le marca de 12ml.
pipeta de plástico, coloco el contenido de la
añade el concentrado de fresa que fue molida en
las células. el mortero.
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Fotografía 10.- Se Fotografía 11.- Se le Fotografía 12.- Los tubos
agrega sal. añadió 2ml de jabón a la de la muestra de saliva y
muestra de la fresa, de la muestra de la fresa
posteriormente se sella se colocaron en la
con parafilm. gradilla de corcho y se
incúban a 50 ºC durante
10 minutos en baño
maría.
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Fotografía 13.- Con una Fotografía 14.- Se toma Fotografía 15.- se inclina
pipeta de plástico se un tubo limpio de 5 ml 45 º el tubo de fondo
añade 2 gotas del tubo fondo redondeado y se redondeado y
rotulado como “sal” en pasa el contenido del lentamente añade el
el tubo que contiene el microtubo a ese tubo. alcohol, dejando que
extracto de tus células. caiga con cuidado por la
Se cierra el tubo y pared interna del tubo.
suavemente se voltea
5 veces para mezclar
los componentes.
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Fotografía 17.- la
Fotografía 16.- La muestra después ser Fotografía 18.- Se pone
solución se cuela para colada, se le añade la muestra en la luz para
tener el mayor alcohol. Con esto se poder observar con
concentrado de muestra. aisla el ADN del resto del mayor claridad las
material que se fibrillas de la muestra de
encuentra en las células la saliva.
de la fresa.
Después de 5 min se
pueden observar
tenuemente las fibrillas.
CONCLUSIONES:
El ADN o ácido desoxirribonucleico, es una base de datos en la cual está contenida toda la
información e instrucciones que determinan la forma y características de un organismo y sus
funciones. Es responsable, además, de la transmisión de estas características a través de la
reproducción gracias a su poder de replicación, constituyendo la base de la herencia.
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Gracias al estudio del ADN se puede, además, conocer cuáles enfermedades se tiene el riesgo
de padecer; descubrir al autor de un crimen; identificar restos humanos; verificar la paternidad;
o hasta diseñar un tratamiento.
Los resultados obtenidos en esta práctica nos permiten concluir que la saliva es una muestra
que nos permite obtener ADN de muy buena calidad y cuya manera de realizar no es tan
complicada y no ocupa mucho tiempo para la obtención de ADN. El ADN es insoluble en
alcohol, por lo que se puede precipitar con etanol frío o isopropanol y recuperar mediante un
proceso de centrifugación.
BIBLIOGRAFÍA DE APOYO:
1.- Lisker R., Introducción a la Genética, 2002, Ed., El manual moderno.
2.- Lorente J. A., Un detective llamado ADN, 2004, Ed., Temas de hoy.
3.- Klug W. S., Conceptos de Genética, 2006, Ed. Pearson.
FECHA DE ENTREGA DEL: 72 HORAS DESPUES DE REALIZADA LA PRÁCTICA
Q.F.B. DANIELA ALEJANDRA GARCÍA Q.F.B. OSCAR EDUARDO GARCÍA
PÉREZ LÓPEZ
Docente Coordinadora del laboratorio
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