UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA

DETERMINACIÓN DE CU POR ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA

TÉCNICA DE ESTÁNDARES EXTERNOS

INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

Autores
OBESO PALACIOS FABRIZIO GUILLERMO

Experiencia Curricular
Análisis Instrumental

Grado y Sección
VI Ciclo - Sección B

Docente Coordinador
Cruz Monzón, José Alfredo

Docente de Práctica
Alex Rodríguez Rodríguez

Trujillo - Perú
2024
 Practica de Laboratorio N°08
Determinación de Cu por espectroscopía de absorción atómica técnica de
estándares externos

1. OBJETIVOS
● Aprender a preparar soluciones stock y de trabajo para AAS
● Aprender a preparar muestras para el análisis por AAS
● Cuantificar el contenido de cobre en distintos tipos de muestras problema
usando la AAS

2. FUNDAMENTO TEÓRICO
ESPECTROFOTOMETRÍA

La espectrofotometría de absorción UV-VIS se ocupa de evaluar la reducción en la

intensidad de un haz luminoso tras atravesar una muestra. Esta técnica se utiliza
habitualmente para la identificación de grupos funcionales, detección de impurezas, así
como para el análisis cualitativo y cuantitativo de analitos, especialmente fármacos que
presentan grupos cromofóricos, entre otras aplicaciones. La absorbancia, que indica la
capacidad de una sustancia para absorber luz de una longitud de onda específica, se
encuentra en proporción al número de moléculas absorbentes en el haz luminoso del
espectrofotómetro (la concentración molar del analito), de acuerdo con la ley de
Lambert-Beer (Castellanos, 2018)

Se utiliza un espectrofotómetro para realizar el análisis cuantitativo de sustancias

químicas, biológicas, orgánicas o inorgánicas midiendo la cantidad de luz absorbida por
el compuesto en una solución. El espectro de luz se divide en tres regiones principales:
ultravioleta (UV) que va desde 190 nm hasta 380 nm, luz visible (Vis) que abarca desde
380 nm hasta 750 nm, y luz infrarroja cercana (NIR en inglés) que se extiende desde
800 nm hasta 2500 nm (Moreno et al., 2021).

LEY DE BEER
El enunciado de la ley de Beer dice ¨ la intensidad de un haz de luz monocromática, que
incide perpendicularmente sobre una muestra, decrece exponencialmente con la
concentración de la muestra, según esta ley: A = K.C. A: absorbancia de la muestra K:
constante que depende de la longitud de onda, de la sustancia que se analiza y del tipo
de celda usada. C: Concentración de la muestra. Se deduce que la ecuación A= K.C,
no es más que una recta y como no tiene el término n pasará por el origen de
coordenadas. Por consiguiente, K será la pendiente. La ley de Beer se cumple para
soluciones diluidas, para valores de concentraciones altas. La medición de absorbancia
de luz por las moléculas se realiza en los espectrofotómetros. Se dice que se cumple
con la ley de Beer, cuando al graficar la concentración & respuesta en absorbancia, se
obtiene una línea recta, en cambio, cuando no se obtiene una línea recta, al graficar
absorbancia contra concentración, se dice que existe una desviación de la ley de Beer.
(Tatayo, 2018)

COBRE (CU+2) EN AGUA

El cobre, al formar parte del conjunto de metales pesados, representa una amenaza
sustancial para la salud cuando ingresa al organismo. La expansión de actividades
agrícolas e industriales propicia la aparición de contaminación por metales pesados, la
cual ejerce una influencia considerable en la sociedad debido a su persistencia y
capacidad para biomagnificarse a lo largo de la cadena alimentaria. Este fenómeno se
replica en los animales y sus respectivas cadenas tróficas (Aveiga et al., 2022).

De acuerdo con varios organismos internacionales acerca de las concentraciones de

cobre, estos no pueden ser superiores a 2 ppm debido a que pueden causar efectos
tóxicos para los seres humanos. Para abordar este problema, se han propuesto
soluciones de ingeniería, como la bioadsorción, que utiliza compuestos orgánicos para
la adherencia de metales pesados. Un estudio de Moreira et al. (2022) exploró el uso
de cáscaras de naranja y banano en la bioadsorción, logrando una remoción máxima
del 97,10% de cobre a un pH de 5,5 en 30 minutos. La cáscara de banana también
demostró una adsorción del 69,57% a un pH de 5,8 en el mismo tiempo.
3. MATERIALES Y REACTIVOS
1) Reactivos grados analíticos: Cu(NO3)2. 5 H2O; HCl(ac), HNO3 (ac) ,agua bidestilada
2) Fiolas de 50, 100 y 250 mL
3) Vasos de precipitación de 100 a 250 mL
4) Micropipetas de 20 – 200 µL y 100 – 1000 µL
5) Equipos de filtración
6) Equipo de absorción atómica provisto de lámpara de Cu

4. PROCEDIMIENTO
A. Preparación de soluciones
1. Solución stock de 250 ppm Cu
2. Preparación de soluciones estándar de Cu
• Tomar 5 fiolas de 50 mL y numerarlas
• Tomar los volúmenes adecuados de solución stock para la recta de
calibrado requerida
• Aforar a la marca con la solución de HNO3 al 1%
3. Preparación de muestra
3.1. Muestra de sedimento solido: Determinar la humedad y del residuo
solido
• Pesar 0.2500 g de material seco y depositar en vaso de 250 mL
• Agregar 20 mL de agua regia (3 HCl + 1 HNO3) y calentar a ebullición en
campana de gases
• Calentar hasta casi sequedad del vaso
• Agregar 50 mL de agua destilada y 5 mL de HNO3 (ac)
• Hervir hasta redisolución de las sales
• Filtrar en caliente y directamente a fiola de 100 mL
• Lavar el solido residual del papel filtro con HNO3 al % hacia la fiola
• Aforar a la marca con la solución de HNO3 al 1%

3.2. Muestra de agua residual

• Tomar un vaso de 400 mL y depositar 100 mL de agua problema directa
sin filtrar
• Agregar 20 mL de agua regia (3 HCl + 1 HNO3) y calentar a ebullición en
campana de gases
• Calentar hasta casi sequedad del vaso
• Agregar 50 mL de agua destilada y 5 mL de HNO3 (ac)
 • Hervir hasta redisolución de las sales
• Filtrar en caliente y directamente a fiola de 100 mL
• Lavar el solido residual del papel filtro con HNO3 al % hacia la fiola
• Aforar a la marca con la solución de HNO3 al 1%

B. Técnica de estándares externos

• Encender el equipo y especificar la longitud de ond para el Cu
• Lavar el nebulizador dejando pasar agua bidestilada
• Utilizando el blanco, calibrar el instrumento a cero de absorbancia
• Leer cada uno de los estándares registrando sus valores de absorbancia
• Obtener la ecuación de recta
• Leer la muestra registrando su valor de absorbancia
• Reemplazar la absorbancia de muestra en la recta de calibrado y despejar ppm
Cu (grafico)
• Determine la concentración real

5. CÁLCULOS
• Ecuación de la recta
𝑌 = 𝐴 + 𝐵(𝑋)
𝐴𝑏𝑠 = 𝐴 + 𝐵(𝑝𝑝𝑚 𝐶𝑢)
Donde:
Abs = Absorbancia
A = ordenada
B = pendiente de la recta ajustado
(ppm Cu) = concentración cobre

Datos Experimentales
a. Se requiere determinar la concentración de Cu en una muestra de agua
residual utilizando la técnica de AAS a la flama, para lo cual, el laboratorio
cuenta con Cu(NO3)2 . 5 H2O del 99.2% de pureza y fiolas de 50 mL para los
estándares y muestras. Entonces determine

1. Determine los gramos a tomar de la sal para preparar 100 mL de una solución
que sea de 250 ppm Cu
 Concentra. Sol. Madre a preparar (ppm Cu2+) = 250
Volumen a preparar (L) = 0.1
Reactivo a utilizar = Cu(NO3)2 . 5 H2O
Masa molar (g/mol)= 277.45
Pureza (%) = 99.2
Masa atómica Cu (g/mol) = 63.45
Masa a tomar del Cu(NO3)2 . 5 H2O 0.0996

𝑚𝑔 𝐶𝑢2+ 1 𝑔 𝐶𝑢2+ 277.45 𝑔 Cu(𝑁𝑂3 )2 . 5𝐻2 𝑂

𝑊Cu(𝑁𝑂3 )2 .5𝐻2 𝑂 = 250 × 0.1 𝐿 × 3 ×
𝐿 10 𝑚𝑔𝐶𝑢2+ 63.45 𝑔 𝐶𝑢+2
𝑊Cu(𝑁𝑂3 )2 .5𝐻2 𝑂 = 0.1093 𝑔 Cu(𝑁𝑂3 )2 . 5𝐻2 𝑂

Pero como el reactivo esta solo al 99.2% entonces:

1
𝑊Cu(𝑁𝑂3 )2 .5𝐻2 𝑂 (𝑔) = 0.1093 × = 0.1101 𝑔
0.992

2. Determinación de la [ ] para un peso real tomado de 0.1028 g Cu(NO3)2 . 5 H2O

Masa real tomada de Cu(NO3)2 . 5 H2O = 0.1028
Volumen a preparar (L) = 0.1
Reactivo utilizado = Cu(NO3)2 . 5 H2O
Masa molar = 277.45
Pureza = 99.2
Masa atómica Cu (g/mol) 63.45
Concentración real (ppm Cu2+) = 233.2124

0,1028𝑔Cu(𝑁𝑂3 )2 . 5𝐻2 𝑂(0.992) 63.546𝑔𝐶𝑢+2 103 𝑚𝑔𝐶𝑢2+

[𝐶𝑢2+ ] = × .
0.1𝐿 277.56𝑔 Cu(𝑁𝑂3 )2 . 5𝐻2 𝑂 1𝑔 𝐶𝑢2+
[𝐶𝑟 6+ ] = 233.4727 𝑝𝑝𝑚

3. Los volúmenes teóricos a tomar de la solución stock para preparar los

estándares que se muestran a continuación
Aplicando ecuación de dilución : 𝐶1 × 𝑉1 = 𝐶2 × 𝑉2

Std ppm final Aforar a ppm inicial Vol a tomar Vol a tomar
teórico (mL) (µL)
1 0 50 233.4727 0.0000 0.00
 2 0.30 50 233.4727 0.0625 64.5
3 0.60 50 233.4727 0.1285 128.5
4 0.90 50 233.4727 0.1927 192.7
5 1.20 50 233.4727 0.2570 257.0
6 1.50 50 233.4727 0.3212 321.2

4. Las concentraciones reales de los estándares preparados al tomar los

volúmenes ajustados que se detallan
Std Vol redond. Vol redond. ppm Aforar a ppm Cr6+
a tomar (µL) a tomar (mL) inicial (real)
1 0 0 233.4727 50 0.00
2 60 0.060 233.4727 50 0.2802
3 120 0.120 233.4727 50 0.5603
4 180 0.180 233.4727 50 0.8405
5 240 0.240 233.4727 50 1.1207
6 300 0.300 233.4727 50 1.4008

5. La concentración de Cu en la muestra problema, si se tomaron 1500 µL y se

depositaron en una fiola de 50 mL aforando a la marca con HNO3 al 1%, con
lo cual el equipo reporta una absorbancia de 0.042

Volumen de muestra de agua tomada para análisis = 1.5 mL

Fiola ppm Cr6+ Absorbancia

(real)
1 0.00 0
2 0.2802 0.051
3 0.5603 0.101
4 0.8405 0.156
5 1.1207 0.211
6 1.4008 0.269
Muestra 0.042

6. Construcción de la recta de calibrado y determinación de concentraciones

de Cr+6 en muestra de agua problema
 ppm vs Absorbancia y = 0.1917x - 0.003
R² = 0.9992
0.3

0.25

0.2
Absorbancia

0.15

0.1

0.05

0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6
-0.05
ppm Cu

Ecuación general
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 = 0.1917 × [𝐶𝑢2+ ] − 0.003

Si la muestra posee una absorbancia de 0.042, entonces:

0.042 = 0.1917 × [𝐶𝑢2+ ] − 0.003

[𝐶𝑢2+ ] = 0.2347 𝑝𝑝𝑚

Como la muestra extraída es de 1.5 mL y el total en la fiola es de 50 mL, se

multiplica por el siguiente factor:

50
[𝐶𝑢2+ ] 𝑟𝑒𝑎𝑙 = 0.2347 𝑝𝑝𝑚 × ( )
1.5
[𝐶𝑢2+ ] = 7.8233 𝑝𝑝𝑚

b. Determinación de la concentración de Cu en una muestra de 2.5 mL de agua

contaminada aforada a 100 mL (Práctica presencial de laboratorio). Los
valores de absorbancia son los siguientes

Concentración de Cu Absorbancia
0 0
0.5 0.0765
1.0 0.1140
 ppm vs Absorbancia y = 0.114x + 0.0065
R² = 0.9625
0.14

0.12
Absorbancia 0.1

0.08

0.06

0.04

0.02

0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
ppm Cu

Ecuación general
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 = 0.114 × [𝐶𝑢2+ ] + 0.0065

Si la muestra posee una absorbancia de 0.088, entonces:

0.088 = 0.114 × [𝐶𝑢2+ ] + 0.0065

[𝐶𝑢2+ ] = 0.7149 𝑝𝑝𝑚

Como la muestra extraída es de 2.5 mL y el total es de 100 mL, se multiplica por

el siguiente factor:

100
[𝐶𝑢2+ ] 𝑟𝑒𝑎𝑙 = 0.7149 𝑝𝑝𝑚 × ( )
2.5
[𝐶𝑢2+ ] = 28.596 𝑝𝑝𝑚

6. CONCLUSIONES
❖ Se procedió a la preparación de una solución estándar y de trabajo para llevar a cabo
la práctica de laboratorio. Se emplearon estándares externos y la técnica de
Espectroscopía de absorción atómica. Se llevó a cabo la preparación de la muestra
para el análisis correspondiente y la visualización de las ecuaciones derivadas tanto
de datos teóricos como prácticos.
❖ A través de este proceso, se cuantificó la concentración de cobre en dos muestras
problema, ambas ajustadas a sus ecuaciones respectivas. Se determinó que, en el
caso de la muestra teórica, la concentración de la solución era de 7,8233 ppm de
cobre, mientras que, en la práctica de laboratorio, la concentración alcanzó un valor
de 28,596 ppm.
7. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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8. ANEXOS
Figura N°01: Preparación de las soluciones estándar de la solución de trabajo

Figura N°02: Aforamiento de las soluciones estándar en la fiola

Figura N°03: Solución muestra, trabajo y los estándares finales