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Recombinacion en Hongos

El documento aborda conceptos fundamentales de genética, incluyendo el genotipo, cultivo en medios sintéticos, y la meiosis, destacando la formación de tetradas y patrones de segregación. Se presentan ejemplos de cruzamientos en diferentes especies, como Neurospora y Sordaria, para calcular distancias genéticas y analizar la ligadura de genes. Además, se discuten métodos para determinar la posición relativa de genes respecto al centrómero y la frecuencia de recombinación.
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Recombinacion en Hongos

El documento aborda conceptos fundamentales de genética, incluyendo el genotipo, cultivo en medios sintéticos, y la meiosis, destacando la formación de tetradas y patrones de segregación. Se presentan ejemplos de cruzamientos en diferentes especies, como Neurospora y Sordaria, para calcular distancias genéticas y analizar la ligadura de genes. Además, se discuten métodos para determinar la posición relativa de genes respecto al centrómero y la frecuencia de recombinación.
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Universidad Nacional Mayor de San Marcos

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Genética General

Olga Bracamonte Guevara


•Genotipo
correspondiente al
fenotipo.
•Cultivo en laboratorio
en medios sintéticos
(+ agar).
• morfología de las
colonias detectable
•Existencia de
auxotrofos.
•Ciclo de vida corto.
Cuatro productos
meioticos
Tetradas

Meiocito
2n

Meiosis I Meiosis II
División
mitótica Ascosporas
con 8
núcleos
octadas

tetradas 4:4

Meiocitos después de la
formación de cromátidas

Primera
división
meiotica Segunda
división
Mitosis
meiotica
patrón de segregación sin
entrecruzamiento, en la primera
división meiótica o patrón MI
Patrón de
segregación
en la
segunda
división
meiótica
o Patrón M II.
Primera
división
Segunda
división

Mitosis
[Link] 2 : 4 :2

cuatro tipos que


aparecen con la misma frecuencia
Patrón MI

Patrón MII
Un sobrecruzamiento -> 1/2 parentales ( P ) y
1/2 recombinantes ( R )

Solamente estas
dos son
recombinantes
2/4 = 50%
1. Tetradas ordenadas: El porcentaje de ascas con
segregación en MII, es una medida de la
intensidad del ligamiento.

um = FR =
(1/2 ascas MII) X 100
total ascas
Una cepa de Neurospora que necesita metionina
(m) fue cruzada con una de tipo común (+) con los
resultados que se muestran. Calcular la distancia
entre este gen (m) y el centrómero.
+ m
P:
1-2 3-4 5-6 7-8

Numero 1+2 3+4 5+6 7+8


de ascas
12 + m + m [Link]
10 m + + m [Link]
R
8 m + m + [Link]
13 + m m + [Link]
60 m m + +
P 4:4
47 + + m m
Total de ascas: 12+10+8+13+60+47 = 150
Ascas MI: 60+47 = 107
Ascas MII: 12+10+8+13 = 43
14um m

um = FR =
(1/2 x 43)X 100 = 14 um
150
En cierta especie
de Ascobolus que tiene
tétradas ordenadas, se Tipo de Tétradas Nº de tetradas de
cada tipo
está realizando un
estudio de la 4A:4a 95
segregación de un 4a:4A 88
determinado locus [Link] 4
(A,a). Para ello, se han [Link] 8
[Link] 7
analizado los
[Link] 2
diferentes tipos de
TOTAL 204
tétradas producidas,
encontrándose los
siguientes resultados :
¿ A qué distancia está el locus A,a de su
centrómero ?

um = o.o5 =
(1/2 x MII)
600

5.14 um
En Sordaria fimicola, el color de las esporas esta regida por
dos alelos uno de ascas negras, (N) y blancas (n). Luego de
un tiempo de observación se encontraron ascas que
presentaban la siguiente configuración:
4N:4n = 38 MI
2N:2n:2N:2n = 6 MII
2n:4N:2n = 3 M II
4n:4N = 42 M I
2n:2N:2n:2N = 6 M II
2N:4n:2N = 5 M II
a) Cual será el origen de cada tipo de asca
b) ¿A qué distancia está el locus de coloración de las
esporas de su centrómero?
En el moho del pan (Neurospora crassa) que tiene
octadas ordenadas, la distancia del locus A,a a su
centrómero es de 5 cM. Cuando se lleva a cabo un
cruzamiento de una cepa A por otra a, se obtienen 600
ascas. Indique cuántas de las 600 ascas serán MII.

En este mismo cruzamiento, se ha estudiado el locus B,b


y se ha visto que 150 de las 600 ascas son de tipo M II;
Indique a qué distancia genética de su centrómero está
el locus B,b.
c) Construya con estos datos un mapa de ligamiento.
1. Ligados o no
2. Distancia entre ellos
3. Brazo cromosómico
ab ab
ab a+
DP TT
++ +b
++ ++

ab a+
ab ab
DP TT
++ +b
++ ++

ab a+
a+ a+
TT DNP
++ +b
+b +b
1. Ligados o no
1a. DP vs DNP
No ligados (segregación independiente) : DP ≈ DNP
Ligados: DP > DNP (≈ 102 o 103 veces mayor)
a b
ligados DP TT

a+ b+

no ligados
DP TT
1a. Frecuencia de Recombinantes

FR ≈ 50% -> no ligados (segregación


independiente)
TT DNP
FR < 50% -> ligados
2. Distancia entre dos genes

um = FR = (1/2TT + DNP) / total] X 100


ab ab
ab a+
DP TT
++ +b
++ ++
ab a+
ab ab
DP TT
++ +b
++ ++
ab a+
a+ a+
TT DNP
++ +b
+b +b
3. Brazo cromosómico
3a. distancia gen-centrómero
- lo ya visto:
um = FR = (1/2 MII) / total] X 100
3b. patrones MII
- mismo brazo cromosómico:
las ascas con patrón MII para el gen más
cercano al centrómero, mayoritariamente
presentan el mismo MII para el gen más alejado
- diferente brazo cromosómico:
no se cumple lo anterior
el mismo MII
para b que para a
porque están en el mismo
brazo cromosómico
Una cepa doble mutante de Neuropora crassa que producía
ascosporas blancas (ws) y de textura delicada (del), se cruzó
con una cepa normal y se obtuvieron las siguientes tétradas:
DP DNP TT TT DP DNP TT
ws del ws + ws del ws del ws del ws + ws del

ws del ws + ws + + del + + + del + +

+ + + del + del ws + ws del ws + + del

+ + + del + + + + + + + del ws +
94 19 64 10 18 3 6
1. ¿Ligados o independientes?
2. Si ligados, calcular la distancia genética entre ellos.
3. Posición relativa respecto al centrómero.
4. Si ligados, ¿en el mismo o distinto brazo cromosómico?
5. Determinar el origen más sencillo de cada una de las tétradas.
ws del ws + ws del ws del ws del ws + ws del

ws del ws + ws + + del ++ + del ++

++ + del + del ws + ws del ws + + del

++ + del ++ ++ ++ + del ws +
94 19 64 10 18 3 6
DP DNP TT TT DP DNP TT

1. ¿Ligados o independientes? -> ligados DP >> DNP

DP: 94 + 18 = 112; DNP: 19 + 3 = 22

˚ genes ligados
˚˚
ws del ws + ws del ws del ws del ws + ws del

ws del ws + ws + + del ++ + del ++

++ + del + del ws + ws del ws + + del

++ + del ++ ++ ++ + del ws +
94 19 64 10 18 3 6
DP DNP TT TT DP DNP TT
2. Si ligados, calcular la distancia genética entre ellos.
um = FR = (1/2TT + DNP) / total] X 100
distancia ws-del =
1/2 ( 64+10+6) + 19+3) / 94+19+64+10+18+3+6] X 100 =
 (1/2 * 80) + 22) / 214 ] X 100 = 28,972 um
ws del ws + ws del ws del ws del ws + ws del

ws del ws + ws + + del + + + del + +

+ + + del + del ws + ws del ws + + del

+ + + del + + + + + + + del ws +
94 19 64 10 18 3 6
3. Posición relativa respecto al centrómero.
4. Si ligados, ¿en el mismo o distinto brazo cromosómico?

-> considerar patrones M I y M II


para ws y del de manera independiente
ws del ws + ws del ws del ws del ws + ws del

ws del ws + ws + + del ++ + del ++

++ + del + del ws + ws del ws + + del

++ + del ++ ++ ++ + del ws +
94 19 64 10 18 3 6
5. Determinar el origen más sencillo de cada una de las tétradas.
FR (centrómero a ws) = (1/2MII ) / total] X 100
= 1/2(10+18+3+6 )] / total X 100 = 8.64

FR (centrómero a del) = (1/2MII ) / total] X 100


= 1/2(64+18+3+6 )] /214 total X 100 = 21.26
3. Brazo cromosómico

um = FRws = (1/2 MII) / total] X 100

10 18 3 6

FRws = (1/2*37) / 214] X 100 = 8.64%

64 18 3 6

FRdel = (1/2*91) / 214] X 100 = 21.2%


ws del

8.64 um 21.2 um
Mismo análisis que ordenadas (sin importar
el orden), excepto que ¡no se puede
determinar la distancia de un gen al
centrómero!
2. Tetradas desordenadas: En especies diferentes
a Neurospora.
Cruza ++ * ab

Productos meioticos = ++,++,ab,ab Ditipos Progenitores (DP)

Productos meioticos = +b,+b,a+,a+ Ditipos No Progenitores


(DNP)
Un cruzamiento sencillo o uno
doble de tres hebras produce un
tetratipo (TT).

¼ ++, ¼ +b, ¼ a+, ¼ ab

Cuando :

DP diferente a DNP , entonces


ligados.

um = FR =
(1/2 TT+DNP)
Total de tétradas
En Chlamydomonas, un cruzamiento entre una
mutantes arg (arginina) con una pab (deficiente de
acido paramino benzoico), generó la siguiente
descendencia: arg + x + pab

119 1 71
arg + arg pab arg +
arg + arg pab arg pab
+ pab + + + pab
+pab + + + +

Están estos genes ligados? De ser así cuanto de recombinación


existiría entre estos genes?
P: arg+ * +pab

119 1 71
arg + arg pab arg +
arg + arg pab arg pab
+ pab + + + pab
+pab + + + +
DP DNP TT

DP vs DNP ----- 119≠ 1 ˚ ligados


˚˚
(DNP +1/2 TT) (1 +1/2 *71) = 19.1
um = FR = = 191
Total de tétradas
Tetradas obtenidas del cruzamiento arg + + * + pab thr

arg + + arg + + arg + + arg + + arg + +


arg + + arg pab thr arg + thr arg pab + arg pab thr
+ pab thr + + + + pab + + + thr + + thr
+pab thr + pab thr + pab thr + pab thr + pab +
1 54 103 2 6

arg + thr arg + thr arg + thr arg pab +


arg pab + arg pab thr arg + thr arg pab thr
+ + + + pab + + pab + + + +
+ pab thr + + + + pab + + + thr

3 6 2 1
Recombinacion entre arg + * + pab arg + + * + pab thr

arg + + arg + + arg + + arg + + arg + +


arg + + arg pab thr arg + thr arg pab + arg pab thr
+ pab thr + + + + pab + + + thr + + thr
+pab thr + pab thr + pab thr + pab thr + pab +
1 54 103 2 6
DP TT DP TT TT

arg + thr arg + thr arg + thr arg pab +


arg pab + arg pab thr arg + thr arg pab thr
+ + + + pab + + pab + + + +
+ pab thr + + + + pab + + + thr

3 6 2 1

TT DP DNP
TT

FR arg-pab = [1/2 (54+2+6+3+6) + 1] / 178] X 100 = 20.5


Recombinacion entre arg + * + thr arg + + * + pab thr

arg + + arg + + arg + + arg + + arg + +


arg + + arg pab thr arg + thr arg pab + arg pab thr
+ pab thr + + + + pab + + + thr + + thr
+pab thr + pab thr + pab thr + pab thr + pab +
1 54 103 2 6
DP TT TT DP TT

arg + thr arg + thr arg + thr arg pab +


arg pab + arg pab thr arg + thr arg pab thr
+ + + + pab + + pab + + + +
+ pab thr + + + + pab + + + thr

3 6 2 1
TT DNP DNP TT

FR arg-thr = [1/2 (54+103+6+3+1) + 8] / 178] X 100 = 51


Recombinación thr-pab arg + + * + pab thr

arg + + arg + + arg + + arg + + arg + +


arg + + arg pab thr arg + thr arg pab + arg pab thr
+ pab thr + + + + pab + + + thr + + thr
+ pab thr + pab thr + pab thr + pab thr + pab +
1 54 103 2 6
DP DP TT TT TT

arg + thr arg + thr arg + thr arg pab +


arg pab + arg pab thr arg + thr arg pab thr
+ + + + pab + + pab + + + +
+ pab thr + + + + pab + + + thr

3 6 2 1
TT TT
TT DNP

FR thr-pab= [1/2 (103+2+6+3+6+1) + 2] / 178] X 100 = 35.1


FR = (1/2TT + DNP) / total] X 100

FR arg-pab= (1/2 *71 + 1) / 178] X 100 = 20.5

FR arg-thr = 1/2 (167) + 8 / 178 X 100= 51

FR thr-pab = 1/2 (121) + 2 / 178 X 100= 35.1

arg 20.5um pab thr


35.1 um

51 um
Los principios básicos para la determinación de
ligamiento en haploides, son los mismos que en
diploides.
El análisis de los productos meióticos, bien sea
estudiando los gametos, o bien observando la
descendencia de un cruce, será la prueba de la
ocurrencia o ausencia de sobrecruzamiento.
Cuanto más alejados estén dos loci dentro de una
estructura de ligamiento, más probable será que
ocurra un sobrecruzamiento entre ellos.
Para realizar experimentos con haploides se aíslan
las cepas de genotipos diferentes y se cruzan entre
sí, como por ejemplo en Chlamydomonas.
El análisis de tetradas de un cruzamiento de
Chlamydomonas que implicaba a los loci pf
(paralyzed flagella) y nic (requerimiento de la
vitamina nicotinamida) originó los siguientes
resultados:
DP = 70, DNP = 2 y TT = 28.
Calcule la relación de ligamiento entre pf y nic.
En Chlamydomonas los genes denominados a, b y c están
ligados. Los siguientes datos son tétradas obtenidas a partir
de un cruzamiento que implicaba a estos tres loci.

abc abc abc abc a++ ab+ abc


a++ a+c abc a++ ab+ a+c ab+
+b+ +b+ +++ +bc ++c +bc ++c
++c +++ +++ +++ +bc +++ +++
10 440 160 10 10 360
10
a) Cuales son los genotipos de los progenitores?
b) Determinese las distancias de mapa entre a, b y c.
c) Determínese el origen mas sencillo de cada una de las siete
clases de tétradas.
d) Cual es el coeficiente de coincidencia.
Al cruzar una cepa salvaje de Neurospora con otra auxótrofa
para adenina y triptófano se encontraron las siguientes
ordenaciones de ascas:
49 ade trp / ade trp / + + / + +
7 ade + / ade + / + trp / + trp
31 ade trp / ade + / + trp / + +
2 ade trp / + trp / ade + / + +
8 ade trp / + + / ade trp / + +
1 ade + / + trp / ade + / + trp
2 ade trp / + + / ade + / + trp
a) ¿Están ligados los genes ade y trp? b) Construye un
mapa genético indicando la posición relativa y las distancias
al centrómero de ambos marcadores. c) Explica la formación
de cada uno de los siete tipos de ascas.
En Chlamydomonas los genes a, b y c se
encuentran ligados. En un cruce en el que
estaban implicados los tres loci, se
recuperaron las siguientes tétradas:
abc abc abc abc a++ ab+ abc
a++ a+c abc a++ ab+ a+c ab+
+b+ +b+ +++ +bc ++c +bc ++c
++c +++ +++ +++ +bc +++ +++
10 10 440 160 10 10 360

a) ¿Cuáles son los genotipos de los padres?


b) Determinar la distancia en el mapa entre a, b y c.
El análisis de las tétradas ordenadas de Neurospora procedentes
de un cruzamiento abc x +++ originó los siguientes tipos de
tétradas

abc ab+ abc ab+ abc ab+


abc ab+ +bc +b+ a+c a++
+++ ++c a++ a+c +b+ +bc
+++ ++c +++ ++c +++ ++c
300 300 100 100 100 100

a) Están ligados estos genes? Si es así ¿Cuáles son estos?.


b) Si todos los genes están ligados, ¿Cuál es la distancian de
mapa? Calcúlese la distancia entre cada uno de los genes y su
centrómero
c) Construya un mapa genético a partir del análisis.

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