CUESTIONARIO DE ESPECTROFOTOMETRÍA EN LA REGIÓN ULTRAVIOLETA.
1.- Cuál es el fundamento teórico de la espectrofotometría en la región ultravioleta.
Es un tipo de espectroscopia de absorción donde a una muestra se le va administrar
radiación electromagnética, donde la luz que absorbe dependerá de su concentración, para
realizar estas lecturas se necesita de un espectrofotómetro.
2.- Indicar la relación existente entre la longitud de onda, energía y frecuencia.
Su relación entre las 3 existen en que si tenemos una longitud de onda corta, habrá más
energía y frecuencia, si se disminuye la energía o la frecuencia tendremos unas mayor
longitud de onda
3.- Enunciar la ley de Beer
La ley establece que una sustancia absorbe una cantidad de energía proporcional al paso
de la luz y a la concentración de la sustancia, donde una sustancia más concentrada
absorbe más luz que una menos concentrada.
Está dada por la ecuación. A = ϵ.d.c
4.- Esquematizar un espectrofotómetro de haz sencillo, doble haz y de arreglo de diodos.}
En el haz sencillo la luz solo pasa en una dirección entre la fuente y el detector a luz
transmitida por la muestra pasa al detector originándose una corriente eléctrica que por
medio de diferentes circuitos permite observar una señal, ya sea el movimiento de una
aguja o señal digital o un registro gráfico.
El de doble haz, la luz se divide en 2 por una serie de espejos, uno haz de luz pasará por la
muestra del blanco y el otro haz por la muestra problema, las cuales llegan al detector y dan
la señal correspondiente, la ventaja de este equipo es que cualquier variación en la
intensidad afecta a los 2 haces por lo que las lecturas son constantes.
La muestra se ilumina de manera conjunta, es decir, con todos los componentes
espectrales de la luz a la vez, por lo que absorbe simultáneamente la luz de diferentes
longitudes de onda.
5.- ¿Qué fuente de radiación se emplea en la región ultravioleta?
Su fuente es una lámpara de deuterio.
6.- Mencionar tres tipos de monocromadores.
Están los monocromadores de prismas los cuales tienen una alta eficiencia de utilización de
la luz y no producen luz de orden superior y muy poca luz parásita, los monocromadores de
rejilla donde proporcionan una dispersión constante y requiere el uso de filtros para
utilizarse y por último tenemos los monocromadores de IR, consiste en un sistema variable
de ranuras de entrada y salida, uno o más elementos dispersantes y varios espejos para
reflejar y enfocar el haz de radiación
7.- Describir las características del porta-muestra en la región ultravioleta.
El porta muestras debe ser oscuro y estar completamente aislado, con el fin de evitar
errores en la medición debido a luz extraviada o cualquier otra interferencia. Así mismo,
este debe estar alineado con el haz de luz y por consiguiente no debe bloquearlo
8.- Principales cuidados que se deben tener con un espectrofotómetro.
- Limpiar el espectrofotómetro.
- Limpiar el cable de energía.
- Revisar si la lámpara está en buen estado.
- Prender el equipo y verificar si todo funciona de manera correcta.
- No azotarlo.
- No tirar ningún tipo de comida o agua.
- Utilizar el espectrofotómetro siguiendo su manual.
- Al acabar de usarlo regresarlo a su configuración predeterminada.
9.- ¿Cómo se obtiene un espectro molecular y que utilidad tiene?
La combinación de los átomos en moléculas crea unos estados energéticos únicos y, por lo
tanto, se crean espectros únicos de las transiciones entre los estados.
Los espectros moleculares pueden obtenerse debido a:
•Estados de espín de los electrones
•Rotaciones moleculares
•Vibración molecular
•Estados electrónicos
Su utilidad es para la identificación y caracterización de la materia así como también para
la cuantificación de la misma ya que existente una relación entre la señal producida y la
concentración de una sustancia en una muestra.
10.- En qué consiste el método de comparación con un estándar?
Consiste en comparar la respuesta de un estándar que ha sido aprobado respecto al analito
analizado y mediante un modelo matemático podemos que tanta cercanía tienen los valores
y ver si el análisis llevado en el laboratorio fue el correcto,
11.- ¿Que características debe tener una molécula para poder ser determinada por
espectrofotometría en la región ultravioleta
Algunas de sus características son que sean enlaces dobles o triples, que tengan algún
enlace peptídico, que tenga un grupo carbonilo, un grupo aromático, donde dependen
factores como el pH y concentración que alteran las lecturas del UV.
12.- ¿Que diferencia existe entre calibración y ajuste en espectrofotometría en la región
ultravioleta?
La calibración comprende un conjunto de pruebas realizadas con el fin de conocer los
errores inherentes que puede presentar el instrumento cuando realiza una medición y el
ajuste optimiza el parámetro instrumental para obtener mediciones precisas.
Referencias.
- all I. Espectroscopia ultravioleta-visible: conceptos básicos [Internet]. Mt.com.
2023 [citado el 05 del 02 del 2024]. Disponible en:
https://www.mt.com/mx/es/home/applications/Application_Browse_Laboratory
_Analytics/uv-vis-spectroscopy/uvvis-spectroscopy-explained.html#:~:text=Un
%20espectrofot%C3%B3metro%20UV%2DVIS%20es,antes%20de
%20atravesar%20la%20muestra.
- Abril Díaz N, Antonio Bárcena Ruiz J, Fernández E, Cejudo A, Novo J,
Peinado J, et al. 8. Espectrofometría: Espectros de absorción y cuantificación
colorimétrica de biomoléculas [Internet]. 2017.[citado el 05 del 02 del 2024].
Disponible en:
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMET
RIA.pdf
- Space E. Longitud de Onda y Frecuencia | Decodifica Imágenes enviadas
desde la ISS [Internet]. Esero.es. 2024 [citado el 05 del 02 del 2024].
Disponible en:
https://esero.es/practicas-en-abierto/decodifica-imagenes-iss/longitud_de_on
da_y_frecuencia.html#:~:text=Relaci%C3%B3n%20entre%20Frecuencia
%20y%20Longitud%20de%20Onda&text=A%20mayor%20frecuencia%2C
%20menor%20es,emitida%20hasta%20que%20se%20recibe.
- Tipos de espectrofotómetros [Internet]. Labprocess | Productos de laboratorio
y control de procesos. 2020 [citado el 05 del 02 del 2024]. Disponible en:
https://www.labprocess.es/tipos-de-espectrofotometros
- INSTRUMENTOS �PTICOS EN MEDIDAS DE ABSORBANCIA [Internet].
Innovacionumh.es. 2024 [citado el 05 del 02 del 2024]. Disponible en:
https://repositorio.innovacionumh.es/Proyectos/P_22CursoMateriales/
Miguel_Angel_Sogorb/Wimba/Espectroscopia_04.htm
- Spengler M. Berthold Technologies GmbH & Co.KG [Internet]. Berthold
Technologies GmbH & Co.KG. Berthold Technologies GmbH & Co.KG; 2023
[citado el 05 del 02 del 2024]. Disponible en:
https://www.berthold.com/es/bioanalytic/knowledge/glosario/monocromador/
#:~:text=MONOCROMADORES%20SIMPLES%2C%20DOBLES%20Y
%20%22CU%C3%81DRUPLES%22&text=Esto%20puede%20parecer
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