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Hidrolisis Alcalina

El método de Roese-Gottlieb modificado se utiliza para la hidrólisis alcalina de fórmulas para lactantes y leches en polvo, empleando amoniaco y alcohol etílico para extraer grasa. Se detallan los reactivos, materiales y el procedimiento para realizar la extracción y análisis de grasa, incluyendo cálculos para determinar el porcentaje de grasa en la muestra. La reproducibilidad de la prueba se establece con un margen de error máximo de 0,1% entre duplicados.

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Hidrolisis Alcalina

El método de Roese-Gottlieb modificado se utiliza para la hidrólisis alcalina de fórmulas para lactantes y leches en polvo, empleando amoniaco y alcohol etílico para extraer grasa. Se detallan los reactivos, materiales y el procedimiento para realizar la extracción y análisis de grasa, incluyendo cálculos para determinar el porcentaje de grasa en la muestra. La reproducibilidad de la prueba se establece con un margen de error máximo de 0,1% entre duplicados.

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1.2 Método de Roese-Gottlieb (Hidrólisis alcalina).

Para fórmulas para lactantes, fórmulas de continuación,


leches en polvo, entre otros.
1.2.1 Fundamento
El método descrito es una modificación al de Roese-Gottlieb. Se utiliza amoniaco para suavizar la caseína,
alcohol etílico para romper la emulsión y la combinación grasa-proteína, así como favorecer la extracción de la
grasa por el éter etílico. Se usa también éter de petróleo que disminuye la solubilidad del éter etílico en la
capa acuosa. Extraída la grasa ésta se estima por diferencia de peso.
1.2.2 Reactivos y materiales
1.2.2.1 Reactivos
Hidróxido de amonio G.R.
Alcohol etílico de 96°
Eter etílico (libre de peróxidos)
Eter de petróleo (P.E. 30 - 60°C)
1.2.2.2 Materiales
Tubos de Roese-Gottlieb o de Mojonier
Vasos de precipitados de 125 ml
Pipetas de 10 ml graduadas en 0,1 ml
Perlas de vidrio
1.2.3 Aparatos e instrumentos
Desecador
Estufa para secar que alcance una temperatura entre 70 a 80°C
Baño de agua caliente o placa caliente
Balanza analítica con sensibilidad de 0,1 mg
1.2.3 Procedimiento
1.2.3.1 Pesar de 1 a 2 g de muestra y colocarlos en el tubo, agregar 9 ml de agua hirviendo y agitar
vigorosamente hasta que la muestra esté disuelta, enfriar a la temperatura ambiente. Agregar 1,5 ml de
hidróxido de amonio y mezclar perfectamente. Agregar 10 ml de alcohol etílico, tapar y agitar fuertemente;
agregar 25 ml de éter etílico, tapar y agitar vigorosamente por 90 segundos. Agregar 25 ml de éter de
petróleo, tapar y volver a agitar suavemente por 90 segundos. Centrifugar a 600 rpm o dejar reposar hasta
que el líquido superior esté prácticamente claro. Decantar la capa etérea en un vaso de precipitado a peso
constante. Lavando el labio y el tapón del tubo con una mezcla de partes iguales de los dos éteres. Agregar
estos lavados al vaso. Repetir la extracción del líquido sobrante en el tubo, dos veces más utilizando 25 ml de
cada disolvente. Efectuar una tercera extracción con 20 ml de cada disolvente. Evaporar los disolventes del
vaso en una placa caliente o un baño de vapor, a una temperatura apropiada que permita la eficiente
evaporación, secar la grasa en estufa a 80°C, enfriar y pesar.
1.2.3.2 Después de introducir el producto en el tubo Mojonnier, añadir aproximadamente 0,1 g de amilasa
y un agitador magnético, para facilitar la suspensión, luego adicionar de 8 a 10 ml de agua destilada a 45°C,
evitando que el nivel de agua suba demasiado.
Colocar el tubo Mojonnier tapado por 2 h al baño de agua a 65°C. Remuévase ligeramente de vez en
cuando.
Comprobar que el almidón se haya degradado por completo: al añadir dos gotas de solución de yodo
aproximadamente 0,1 N no debe formarse coloración azul. En caso contrario, volver a colocar el tubo al baño
de agua hasta que desaparezca la coloración. Enfriar el tubo Mojonnier y continúe con el procedimiento.
1.2.4 Cálculos

PG X 100
% G=___________

Pm
En donde:
% G = Por ciento de grasa
PG = Peso de la grasa extraída
PM = Peso de la muestra
1.2.5 Reproducción de la prueba
En la reproducción de la prueba, la diferencia máxima permisible para la determinación efectuada por
duplicado, no debe ser mayor de 0,1%, en caso contrario se recomienda repetir la determinación.

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