UNIVERSIDAD
AUTONOMA DE BAJA
CALIFORNIA
Laboratorio Bioquímica Estructural
Integrantes
Manuel Alejandro Gama Martínez
Sandoval Hernández Jesús Alberto
Jorge Leonardo Guerrero Soria
Montes Hernández Ángel Emilio
Docente:
Montaño Soto Myriam Tatiana
Práctica 9. Análisis de lípidos
OBJETIVO
Por medio de algunos experimentos el alumno logrará comprender algunas de las características más
apreciables de un lípido como lo son su carácter hidrofóbico tensión superficial, su comportamiento en otras
reacciones como en la hidrólisis y emulsificación.
FUNDAMENTO
Los lípidos son moléculas orgánicas que se caracterizan generalmente por ser insolubles en agua y muy solubles
en solventes orgánicos. Esta propiedad física refleja la naturaleza hidrofóbica de su estructura hidrocarbonada.
En esta práctica se van a realizar una serie de pruebas cualitativas para poner de manifiesto algunas propiedades
de los lípidos como son: solubilidad, detección de peróxidos, saponificación, identificación de colesterol y
tinción.
MATERIALES Y REACTIVOS.
● 4 tubos de ensayo 13 x 100 con rosca
● Gradilla.
● Etanol.
● Tetracloruro de carbono
● Éter e lico.
EXPERIMENTO 1. Prueba de solubilidad.
Las grasas y aceites son generalmente solubles en solventes orgánicos no polares; sin embargo, son casi
inmiscibles en agua.
A temperaturas superiores a sus puntos de fusión, tanto las grasas como los ácidos grasos son totalmente
miscibles con una gran variedad de hidrocarburos, ésteres, éteres, cetonas, entre otros.
MÉTODO
1. Enumerar cuatro tubos de ensayo y prepararlos de la siguiente forma:
2. Tubo 1,2 3 4 y colocar 1 mL de aceite vegetal
3. A continuación al tubo 1 adicionar 2 mL de agua, al tubo 2: 2mL de etanol, al tubo 3: 2 mL de tetracloruro de
carbón y al tubo 4: 2 mL de éter etílico
4. Agitar los tubos vigorosamente y dejar reposar por 5 minutos.
5. Observar el grado de solubilidad y anotar los resultados, (a menor solubilidad, mayor turbidez).
RESULTADOS
Tabla de resultados
N° de Tubo 1 mL de aceite añadir Solubilidad y turbidez
Tubo 1 2 mL agua No hubo mezcla entre ambos líquidos (Polar)
Tubo 2 2 mL etanol No hubo mezcla entre ambos líquidos (Polar)
Tubo 3 4 mL CCl4 Hubo solubilización (No Polar)
Tubo 4 2 mL éter Hubo solubilización (No Polar)
EXPERIMENTO 2. Detección de peróxidos.
El enranciamiento de las grasas y aceites es un proceso natural por el cual la composición de las mismas se altera
con el tiempo, lo que provoca, entre otras cosas, un cambio en las propiedades organolépticas del mismo, es
decir, un cambio en su sabor; siendo, uno de los atributos más negativos del aceite, indicador de que han sufrido
un proceso oxidativo intenso.
MATERIALES Y REACTIVOS.
● 2 tubos de ensayo 13 x 100 con rosca
● Gradilla.
● Muestra de aceite vegetal
● Muestra de aceite de cocina usado
● KI al 5%
● Mezcla de ácido acé co-cloroformo
MÉTODO
1. Colocar en un tubo de ensayo 2 ml. de aceite vegetal y 2 ml. de mezcla de ácido acético-cloroformo.
2. Tapar el tubo, agitar fuerte y una vez mezclados adicionar 2 gotas de KI, agitar nuevamente.
3. Aflojar el tapón del tubo, esperar 10 minutos y observar cambios.
4. Repetir los pasos para la muestra de aceite usado
Nota 1: el aceite de cocina puede ser obtenido de un establecimiento en donde se reúse el aceite con fin de
obtener un mejor resultado a la prueba de índice de peróxidos.
RESULTADOS
Tabla de observaciones
Al adicionar En aceite vegetal En aceite de cocina usado
No se mira notoriamente una Hay una ligera tinción café en la
Mezcla acético-cloroformo separación de fase. mezcla
La mezcla luce incolora.
La mezcla se tornó a un color Se observa un color amarillo turbio
2 Gotas de KI amarillo claro con una capa de con la misma capa café oscura que
color café oscuro hasta arriba en el aceite sin usar
Se observó una clara separación Se observa una capa de grasa color
entre el aceite y una fase incolora, café que se separó de la demás
Después de 10 min
no hubo cambio en el aceite mezcla, que terminó siendo de un
vegetal. color naranja.
EXPERIMENTO 3. Saponificación.
La hidrólisis básica también se llama saponificación por su relación con la hidrólisis de las grasas o aceites con
NaOH, que se emplea para hacer jabón. El ácido carboxílico que se produce durante la hidrólisis reacciona con
la base fuerte y se convierte en el correspondiente ión carboxilato. Los jabones naturales son sales sódicas o
potásicas de ácidos grasos, ácidos orgánicos con largas cadenas de hidrocarburos.
MATERIALES Y REACTIVOS.
● Vaso de precipitado de 50 ml
● Varilla de vidrio
● Vaso de precipitado de 400 ml
● Parrilla eléctrica
MÉTODO
1. Colocar 10 ml. de aceite vegetal en un vaso de precipitado de 50 mL
2. Agregar 5 ml. de NaOH.
3. Mezclar muy bien hasta formar una pasta
4. Calentar en Baño María durante 15 minutos.
5. Dejar reposar el contenido y observar cambios.
RESULTADOS
Tabla de observaciones
No se logró realizar la saponificación, creemos que es porque faltó temperatura a la hora de calentar causando
que no se espesaba.
Se concluyó que no se obtuvo ningún producto.
Nota: Puede anexar imagen de experimento
EXPERIMENTO 4. Prueba de Lieberman para colesterol
El colesterol es un esterol (lípido) que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma sanguíneo de los
vertebrados. En la molécula de colesterol se puede distinguir una cabeza polar constituida por el grupo hidroxilo
y una cola o porción apolar formada por el carboxilo de núcleos condensados y los sustituyentes alifáticos. Así,
el colesterol es una molécula tan hidrófoba que la solubilidad de colesterol libre en agua es de 10 -8 M y, al igual
que los otros lípidos, es bastante soluble en disolventes apolares como el cloroformo.
MATERIALES Y REACTIVOS
• 2 tubos de ensayo 13x100 con rosca
• Colesterol
• 1 huevo (solo la yema)
• Cloroformo anhidro
• Ácido acético anhidro
• Ácido sulfúrico concentrado
MÉTODO
1. En un tubo colocar unos 0.5 gramos de colesterol seco y 3 ml de cloroformo anhidro, con el tubo cerrado,
mezclar suavemente.
2. Añadir 10 gotas de ácido acético y 2 gotas de ácido sulfúrico concentrado.
3. Con el tubo cerrado agitar bien, y dejar reposar aflojando la tapa del tubo, describa el color obtenido en la
reacción.
4. Repetir el experimento con 1 ml de yema de huevo
RESULTADOS
Tabla de observaciones
Colesterol seco Yema de huevo
Color oscuro colorado. Presentó un color ámbar con pequeños trozos de
yema
DISPOSICIÓN DE RESIDUOS
❖ El contenido de los tubos será vertido en ácidos
EXPERIMENTO 5. Tinción
Los lípidos (acilglicéridos) se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán IV. Esto es
debido a que el Sudán IV es un colorante lipófilo (soluble en grasas). Por esa afinidad a los ácidos grasos hace
que la mezcla de éstos con el colorante se ponga de color rojo, mezclándose totalmente y convirtiéndose en un
colorante específico utilizado para revelar la presencia de grasas.
MATERIALES Y REACTIVOS
• 2 tubos de ensayo 13x100 con rosca
• Gradilla
• Aceite de oliva
• Sudan IV
• Tinta roja
MÉTODO
1. Disponer en una gradilla dos tubos de ensayo, colocando en ambos 2 ml de aceite de oliva.
2. Añadir a uno, 4 o 5 gotas de solución alcohólica de Sudán IV.
3. Al otro tubo añadir 4 o 5 gotas de tinta roja.
4. Con los tubos cerrados, agitar enérgicamente ambos tubos y dejar reposar 10 minutos.
5. Observe y registre sus resultados
RESULTADOS
Tabla de observaciones
Tubo con Sudan IV Presentó coloración, debido que el colorante se mezcló con el aceite
Tubo con tinta roja La tinta de pluma está hecha en base con agua, por lo que no hubo
homogeneidad con el aceite
CUESTIONARIO
1. Da una definición de lípido.
Grasa, sustancia orgánica insoluble en agua que se encuentra en el tejido adiposo y en otras partes del
cuerpo de los animales, así como en los vegetales, especialmente en las semillas de ciertas plantas; está
constituida por una mezcla de ácidos grasos y ésteres de glicerina y sirve como reserva de energía.
2. Explica con reacciones químicas en qué consiste la saponificación.
La saponificación es un proceso químico en el cual
los triglicéridos (las moléculas que componen las
grasas) reaccionan con una base (compuesto
alcalino, con pH alto), como la sosa cáustica, dando
como resultado la formación de jabón y glicerina.
