DIAGNÓSTICO DE HEMOPARÁSITOS EN BOVINOS MEDIANTE LA TÉCNICA
DE TINCIÓN DE WRIGHT
DIAGNOSIS OF HEMOPARASITES IN BOVINE USING THE WRIGHT STAINING
TECHNIQUE
James Lara S1 Est. M.V.Z, Pastrana Florez S2 Est. M.V.Z, Piñeres Herazo M3
Est. M.V.Z, Lopez Usuga L4 Est. M.V.Z, Vergara Diaz M5 Est. M.V.Z.
Estudiantes de la Universidad de Córdoba, Facultad de Medicina Veterinaria y
Zootecnia, Departamento de Ciencias Pecuarias.
RESUMEN
El objetivo de este estudio fue evaluar la presencia de hemoparásitos en bovinos
mediante la técnica de tinción de Wright, un método de diagnóstico hematológico
ampliamente utilizado. Materiales y Métodos. Se recolectaron muestras de sangre
periférica, se prepararon frotis delgados, se procesaron siguiendo el protocolo de
aplicación de colorante Wright y se hizo observación microscópica con aceite de
inmersión Resultados. No se evidenció la presencia de hemoparásitos en las
muestras analizadas, lo que resalta la baja sensibilidad de la técnica para identificar
infecciones de baja parasitemia. Conclusión. Aunque la tinción de Wright es una
herramienta útil, económica y accesible en el diagnóstico hematológico, presenta
limitaciones en la sensibilidad para la detección de hemoparásitos, por lo que se
recomienda complementar con métodos moleculares para confirmar los
diagnósticos y aumentar la precisión.
Palabras clave. Diagnóstico hematológico, muestras sanguíneas, hemoparásitos,
tinción de Wright.
ABSTRACT
The objective of this study was to evaluate the presence of hemoparasites in cattle
using the Wright staining technique, a widely used hematological diagnostic method.
Materials and methods. Peripheral blood samples were collected, thin smears were
prepared, processed following the Wright dye application protocol, and microscopic
observation was made with oil immersion. Results. The presence of hemoparasites
was not evident in the samples analyzed, which highlights the low sensitivity of the
technique to identify infections with low parasitemia. Conclusion. Although Wright
stain is a useful, economical and accessible tool in hematological diagnosis, it has
limitations in sensitivity for the detection of hemoparasites, so it is recommended to
complement it with molecular methods to confirm diagnoses and increase precision.
Keywords. Hematological diagnosis, blood samples, hemoparasites, Wright stain.
INTRODUCCIÓN
Los hemoparásitos son microorganismos que afectan la sangre de los animales
domésticos, incluidos los bovinos, causando enfermedades de alto impacto en la
producción ganadera. Estas infecciones generan anemia, fiebre, pérdida de peso y,
en casos graves, la muerte del animal, lo que conlleva importantes pérdidas
económicas en la industria ganadera [1].
El diagnóstico de hemoparásitos es un desafío debido a las variaciones en los
niveles de parasitismo en los animales infectados. Los métodos tradicionales como
la observación microscópica de frotis sanguíneos tratados siguen siendo
ampliamente utilizados en regiones con recursos limitados, debido a su bajo costo y
facilidad de aplicación [2]. La técnica de tinción de Wright, basada en el método
Romanowsky, es una herramienta fundamental en este contexto. Este método
permite diferenciar las estructuras celulares en función de su afinidad por los
colorantes ácido-básicos, como el azul de metileno y la eosina, facilitando la
identificación preliminar de hemoparásitos y otras alteraciones celulares.
A pesar de sus ventajas, la técnica de tinción de Wright tiene limitaciones, como su
baja sensibilidad en infecciones con parasitemias bajas o en etapas iniciales de la
enfermedad. Esto puede llevar a resultados negativos falsos, especialmente en
estudios de vigilancia epidemiológica [3]. Por ello, es fundamental complementar
esta metodología con técnicas moleculares, como la reacción en cadena de la
polimerasa (PCR), para confirmar la presencia de hemoparásitos y mejorar la
precisión diagnóstica [4].
En este estudio, se utilizó la tinción de Wright para evaluar la presencia de
hemoparásitos en bovinos, destacando tanto sus ventajas como sus limitaciones en
el diagnóstico de estas infecciones.
MATERIALES Y MÉTODOS
- Tipo de estudio: El presente estudio es de tipo cualitativo observacional y
busca identificar la presencia de parásitos sanguíneos en muestras de sangre
de bovinos.
- Localización: Las pruebas fueron realizadas en el laboratorio de
parasitología de la Universidad de Córdoba, sede Berástegui, Facultad de
MVZ.
- Muestreo y recolección de información: Se recolectaron muestras
sanguíneas de 8 vacas que residen en el municipio de Berástegui, Córdoba.
Estas muestras tomadas se conservaron en condiciones de refrigeración y
posteriormente se trasladaron al laboratorio para su respectivo análisis
(Figura 1).
Figura 1. Toma de muestra sanguínea en la vena coccígea en bovino.
- Procedimiento pruebas parasitológicas
Tinción de Wright
Es una técnica de laboratorio ampliamente utilizada en hematología para observar
células sanguíneas y tejidos hematopoyéticos bajo el microscopio. Es una variación
de la tinción de Romanowsky, que combina colorantes básicos y ácidos, permitiendo
diferenciar varios componentes celulares.
Se usa para teñir y diferenciar glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas en un
extendido sanguíneo. Además de identificar anemias, leucemias, infecciones y
parásitos como Babesia, Anaplasma y microorganismos intracelulares, como
protozoarios en la sangre.
Se realizó el siguiente procedimiento (Figura 2):
● Luego de tener el frotis de sangre preparado y seco, se procede a colocarlo
en el puente de tinción.
● Luego con ayuda de una pipeta de pasteur cubrir el portaobjetos con 1 a 2 ml
de colorante Wright solución.
● tras 1 minuto, añadir un volumen igual de buffer 7,2, soplar para
homogeneizar hasta permitir que la mezcla adquiera un brillo verde metálico.
● Se deja actuar de 3 a 6 minutos.
● lavar con agua corriente, dejar secar a temperatura ambiente.
● observar al microscopio.
Figura 2. Procedimiento de extendido sanguíneo y tinción de Wright.
Esta prueba tiene una alta sensibilidad y especificidad para la babesiosis y
anaplasmosis y altamente específica, pero poco sensible para la tripanosomiasis.
Centrifugado
El centrifugado de la sangre para determinar el hematocrito es una técnica común
en medicina veterinaria que se utiliza para medir la proporción de glóbulos rojos en
relación al volumen total de sangre. Este procedimiento es clave para diagnosticar
anemias, deshidratación y otras condiciones que afectan el sistema hematológico de
los animales.
Procedimiento (Figura 3):
● Se utiliza un tubo capilar de vidrio o plástico para llenar aproximadamente el
75% del volumen del capilar con sangre.
● Se sella un extremo del capilar con masilla especial o cera.
● Los capilares cargados se colocan en una centrifugadora microhematocrito y
se centrifuga a aproximadamente 10,000-12,000 rpm durante 5 minutos
(según las especificaciones del equipo).
● Se utiliza una tabla o lector de hematocrito para medir la proporción de la
columna de glóbulos rojos con respecto a la columna total de sangre.
● El resultado se expresa como un porcentaje.
Figura 3. Procedimiento de centrifugado y lectura de hematocritos.
Esta prueba es rápida, económica y fácil de realizar, además proporciona
información clave sobre la salud del paciente.
- Análisis estadístico
Para el análisis estadístico, los resultados se agruparon según la técnica de
diagnóstico utilizada (tinción de Wright) y la especie hemoparasitaria detectada.
Se realizó una comparación descriptiva de la efectividad de la tinción en los
resultados obtenidos en la población de bovinos analizada. Además, se evaluó la
distribución de resultados según factores como la edad, sexo y ubicacion
geográfica de los animales, para identificar posibles patrones o asociaciones con
la presencia o ausencia de hemoparásitos.
Los resultados se expresaron usando el sistema convencional de cruces (+) la
cual da la presencia de un número determinado de formas parasitarias. el número
de cruces va relacionado con el campo microscópico que presente mayor número
de formas parasitarias de la siguiente manera:
Una cruz (+) si el campo presenta de 1 a 3.
Dos cruces (++) si el campo presenta de 4 a 7.
Tres cruces (+++) si el campo presenta de 8 a 10.
Cuatro cruces (++++) si el campo presenta más de 10.
RESULTADOS
En la tabla 1 se encuentran los datos de los animales muestreados, a los cuales se
les tomaron las muestras de sangre para detectar la presencia de hemoparásitos.
Tabla 1. Datos de los animales muestreados
# animal Sexo Nombre Edad # Partos Condición
(años) corporal
1 Hembra Negrita 6 2 3.0
2 Hembra Canela 7 3 2.5
3 Hembra Sofia 5 1 2.5
5 Hembra Amanda 9 4 3.0
En la tabla 2 se observan los resultados de la tinción de wright los cuales fueron
negativos.
Tabla 2. Datos obtenidos mediante tinción de wright
# Animal # Carga Resultado Tipo de
Hematocrito parasitaria hemoparásito
1 33 - No presenta No presenta
2 26 - No presenta No presenta
3 30 - No presenta No presenta
5 36 - No presenta No presenta
En la tabla 3 se observan los resultados de hematocritos en los animales, sabiendo
que el rango de hematocritos normales un bovinos es de 28 - 38 % se puede
observar que el animal #2 tiene un porcentaje bajo (26%) lo que puede estar
asociado a Anemia (pérdida de sangre o hemólisis) o hemoparásitos como
Anaplasma, Babesia y trypanosoma. Los demás animales están dentro del rango
normal.
Tabla 3. porcentaje de hematocritos en cada animal muestreado.
# Hematocrito
Animal (%)
1 33
2 26
3 30
5 36
ANÁLISIS DE RESULTADOS
Los resultados de la tinción de Wright, presentados en la Tabla 2, indican que no se
detectó la presencia de hemoparásitos en ninguno de los animales analizados. La
ausencia de hemoparásitos y la carga parasitaria negativa sugieren que las
muestras evaluadas no presentan evidencia directa de infecciones activas por
parásitos como Babesia, Anaplasma o Trypanosoma.
Este resultado es relevante ya que indica que, al momento del muestreo, no se
observaron parásitos intraeritrocitarios en el frotis sanguíneo teñido.
La Tabla 3 muestra los niveles de hematocrito en los animales evaluados,
comparados con el rango de referencia para bovinos (28 - 38%). Se destaca el caso
del animal #2, con un hematocrito de 26%, que está por debajo del rango normal, lo
que podría ser indicativo de anemia.
Las posibles causas de anemia incluyen:
● Pérdida de sangre o hemólisis: Debido a factores como infestaciones
parasitarias no detectadas directamente en el frotis, enfermedades
subyacentes o deficiencias nutricionales.
● Infecciones subclínicas por hemoparásitos: Aunque no se observaron
parásitos en el frotis sanguíneo teñido, una carga parasitaria baja o
infecciones en etapas tempranas podrían no ser visibles mediante esta
técnica.
Los animales restantes presentan niveles de hematocrito normales (33%, 30%, y
36%), lo que sugiere una adecuada funcionalidad eritrocitaria.
Resultados negativos de la tinción: La ausencia de detección de hemoparásitos
no descarta completamente la posibilidad de infecciones subclínicas. Técnicas
adicionales como PCR o serología podrían proporcionar una mayor sensibilidad
diagnóstica.
Animal con anemia leve: Aunque no se observan hemoparásitos en el frotis, el
hematocrito bajo en el animal #2 sugiere la necesidad de un seguimiento clínico
más detallado para descartar otras causas de anemia, como deficiencias
nutricionales, infecciones bacterianas o problemas metabólicos.
Condición corporal: Los valores de condición corporal (2.5-3.0) refleja un animal
con una condición corporal muy baja , pero no necesariamente demacrado, pero los
valores más bajos (especialmente en animales #2 y #3) podrían estar relacionados
con desafíos metabólicos o infecciones subclínicas.
La especificidad de la tinción de Wright en este estudio es cercana al 100% , ya que
no se identifican falsos positivos.
La eficacia global de la técnica está limitada por su baja sensibilidad, lo que sugiere
que los resultados negativos no descartan infecciones subclínicas o con baja carga
parasitaria.
La sensibilidad sería muy baja.
DISCUSIÓN
BIBLIOGRAFÍA
1. De Waal DT. Avances en la comprensión del impacto de los hemoparásitos
en la productividad del ganado. [ Internet ]. 2012. Disponible en :
[Link]
2. Irwin PJ. Parasitología veterinaria: diagnóstico y tratamiento de
enfermedades parasitarias en animales domésticos . Wiley-Blackwell; 2009.
3. Mahoney DF, Ross J. El papel de la tinción de Wright en el diagnóstico de
hemoparásitos. J Vet Diagn Invest . 1972; 7(2): 154-162.
4. Salih DA, El Hussein AM, Singla LD. Enfoques diagnósticos para
enfermedades hemoparasitarias transmitidas por garrapatas en el ganado. J
Vet Med Anim Health. 2007;3(2):58-66. Disponible en :
[Link]
