[Link].

org

EXAMEN PRÁCTICO DE ANÁLISIS VOLUMÉTRICO (CICLO FORMATIVO

TÉCNICO DE LABORATORIO):

 Determinación del contenido en azufre de un sulfato soluble3

1. Fundamento ¬¥¢¬›¨

Precipitación en condiciones adecuadas del sulfato en forma de BaSO4 que se filtra, se

lava y se calcina: Ba2+ + SO42- → BaSO4

2. Modo de operar

Se pesan del orden de 0,3 g de muestra y se disuelve en unos 100 ml de agua. Se

añade 1 ml de ácido clorhídrico concentrado y se calienta a ebullición. En un vaso
pequeño se calientan 20 ml de cloruro de bario al 5% y se añaden, lentamente, sin
dejar de agitar sobre la solución caliente del problema hasta precipitación total. Se
continúa la agitación durante 1 minuto y se deja reposar 24 h sobre baño de arena.

Comprueba si la precipitación fue completa añadiendo más cloruro de bario. Filtra

sobre papel Albet 1242 y lava hasta eliminación de cloruros.

Se pasa el precipitado a un crisol de porcelana previamente calcinado y pesado y se

calienta muy suavemente para secar y quemar el papel a la menor temperatura
posible. Calcina a 850oC.

3. Resultados

a) Expresar los resultados según la tabla:

Muestra
Peso de muestra g
Peso crisol + calcinado g
Peso crisol vacío g
Peso de calcinado g
Correcciones (cenizas papel) g
Peso de sulfato de bario g
Informe del resultado en % Na2SO4

Para superar este examen desde un punto de vista práctico deberá cometerse un error
no superior al 0,2%.

3
Este examen necesita dos días diferentes de trabajo.

297
 SEMINARIO DE PROBLEMAS DE GRAVIMETRÍA ¬¥¢¬›¨

1. Una muestra de un pienso pierde un 16% de agua cuando se seca a 110oC y un
4% cuando se seca al aire. La muestra secada al aire contiene un 14% de
proteínas. Cuál será el porcentaje de proteínas en la muestra original y en la
muestra completamente seca.

2. Qué volumen de disolución de nitrato de plata 0,1234 M se necesita para precipitar

completamente el cloruro de una muestra de sal que pesa 0,2380 gramos y que
contiene un 99,21% en NaCl.

3. Calcula la molaridad de una disolución de HCl, si una alicuota de 25,00 ml dio un

precipitado de 0,3127 g de AgCl cuando se trató con un exceso de nitrato de plata.

4. Calcula el peso mínimo de urea (MM = 60,01) necesario para precipitar el Mg

contenido en 0,462 g de muestra que contiene un 88,5% de MgCl2.
Mg 2+ + urea + agua → Mg(OH)2 (s) + CO2 + 2 NH4+

5. El tratamiento de 0,5124 g de una sal de Fe (III) con un exceso de BaCl2 dio 0,3086
g de Ba SO4. Calcula el porcentaje de sulfato de Fe (III) en la muestra.

6. Una moneda de plata que pesa 0,4512 g se disuelve en ácido nítrico y se precipita
la plata como AgCl, que pesa 0,2402 g. Calcula el porcentaje de plata en la
moneda.

7. Una muestra de As2S3 impuro, que pesa 0,4412 g, se oxida cuantitativamente a

sulfato. Si contiene un 45,45 % de As2S3, ¿qué peso de BaSO4 se obtendrá?

8. Una muestra de mineral de cromo que pesa 0,6510 g se oxida a cromato y se

precipita en forma de PbCrO4, que se disuelve en ácido y se precipita como
PbSO4, que pesa 0,6228 g. Calcula el % de Cr2O3 en el mineral.

9. Una muestra de un silicato que pesa 0,6410 g da un residuo insoluble de SiO2 y

Fe2O3. El análisis de este residuo que pesa 0,5100 g indica que contiene un 5,00 %
de Fe. Calcula el porcentaje de SiO2 en la muestra.

10. Una muestra de 0,7500 g que contiene aluminio da un precipitado de 0,5000 g de

8-hidroxiquinolato de aluminio Al (C9H6ON)3. Calcula el porcentaje de Al2O3 en la
muestra.

11. Qué peso de muestra de feldespato que contiene 6,7 % de K2O debe tomarse
para obtener un precipitado de KClO4 que pese 0,4100 g

12. Se analizaron varias muestras de aleación de plata para determinar el contenido

en plata obteniéndose como resultados 95,67; 95,61; 95,71; 95,45 y 95,60% de
plata. Calcula:

a) el valor de la media aritmética después de aplicar algún test para rechazar

resultados dudosos (Ver apéndice)

b) error absoluto y error relativo de cada porcentaje.

298
 SEMINARIO DE PROBLEMAS DE VOLUMETRÍAS ¬¥¢¬›¨

1. Calcula el peso de muestra necesaria para gastar 40 ml en la normalización de

KOH 0,12 N frente al ácido oxálico dihidratado.

2. Calcula el pH de la solución que resulta al mezclar 40 ml de hidróxido de bario (II)

0,025 M con 10 ml de sulfúrico 0,0500 N.

3. Una alícuota de 20 ml de vino blanco de mesa se diluyó hasta 100 ml en matraz

aforado. La valoración de una alícuota de 50,0 ml de esta solución necesitó
34,88 ml de NaOH 0,05 N fc = 0,9860. Expresa la acidez del vino en % p/v de
ácido tartárico (2,3-dihidroxi butanodioico).

4. El peso de una muestra que contiene carbonato sódico es de 0,2202 g. Se trata

con 50 ml de HCl 0,1008 N, se hierve para expulsar el CO2 y el exceso de HCl
requiere 18,1 ml de disolución de NaOH 0,1024 N. ¿Cuál será el porcentaje de
carbonato de sodio en la muestra?

5. 50 ml de un agua necesitaron 4,8 ml de ácido 0,0100 N para su neutralización en

presencia de fenolftaleina y 10,6 ml más para el viraje del naranja de metilo. Indica
la concentración en mg/l de carbonato y hidrógenocarbonato del agua.

6. Cuál es el % de Mn en un mineral si una muestra de 0,5000 g se disolvió en ácido

nítrico y se valoró como Mn2+ con permanganato de potasio 0,9677 N gastándose
8,51 ml de permanganato de potasio. Reacción: nitrato de manganeso (II) +
permanganato de potasio + ? → óxido de manganeso (IV) (sólido) + nitrato de
potasio + ?; ?: agua y ácido nítrico

7. Una alícuota de 25,00 ml de una solución que contiene clorato se acidificó y se

valoró con una sal de hierro (II) gastando 23 ml 0,0837 N según la reacción: clorato
de sodio + sulfato de hierro (II) + ácido sulfúrico → sulfato de hierro (III) + cloro (g)
+ sulfato de sodio +agua. Calcula la concentración de la solución en g/l de clorato
sódico.

8. Calcula el % de óxido de manganeso (IV) en un mineral si el yodo liberado de una

muestra de 0,1944 g según la reacción: óxido de manganeso (IV) (s) + yoduro de
potasio + ácido clorhídrico → cloruro de potasio + cloruro de manganeso (II) + yodo
+ agua requiere 32,30 ml de Na2S2O3 0,0722 N. Escribe la reacción de valoración

9. Se determinó el sulfuro de una agua salobre alcalinizando 100 ml de muestra con

amoníaco y valorando con 8,04 ml de nitrato de plata 0,015 N. La reacción sin
ajustar es: ión plata + sulfuro → sulfuro de plata. Expresa el resultado de este
análisis en ppm (mg/l) de sulfuro de hidrógeno.

10. Una disolución patrón de AEDT se preparara por disolución de 5,000 g de

Na2H2C10H12O8N2·2H2O (MM = 372,23) y se enrasa a 250,0 ml. a) Calcula la
molaridad del AEDT preparado; b) 100,0 ml del agua del grifo, tamponada a pH 10
gasta 35,00 ml de una disolución de AEDT preparada por la disolución 1:10 de la
solución patrón, en la valoración del calcio y magnesio. Calcula la dureza total
expresada en oHT (1oHT = 10 mg CaCO3/litro).

299
 [Link]

Índice UNIDAD DE TRABAJO Nº 15

ANÁLISIS INSTRUMENTAL

1. El análisis instrumental. Características e importancia
En la industria se usan mucho los métodos analíticos instrumentales, también
denominados en alguna ocasión métodos físico-químicos.

A veces se considera a los instrumentos analíticos como “cajas tontas” que no es

necesario entender, que sólo sirven los resultados que dan. En ellos hay dos partes
que debemos diferenciar:

- la mecánica y la electrónica del aparato: qué debemos conocer, no solamente

en el manejo, sino también para el correcto mantenimiento del equipo.
- el fundamento del aparato: cuáles son las características y propiedades en las
que se basa su funcionamiento.
Ejemplo:

En una experiencia en un laboratorio de análisis de aceites en el que se estaban dando valores

de viscosidad con un viscosímetro digital. Los ensayos se hacían a temperaturas relativamente
altas 60, 80, 100oC. Los resultados comenzaron a ser demasiado bajos debido a la
acumulación de grasa en el eje de rotación del viscosímetro. La comprobación con un
viscosímetro tipo Ostwald de los datos obtenidos y posterior limpieza del aparato, permitió
obtener los resultados correctos. Este es un defecto muy común: creer que todo lo que nos
proporciona una medida digital es correcto, sin hacer ningún control previo.

La nomenclatura utilizada en análisis instrumental es compleja, y se sistematiza con

los siguientes sufijos:

Sufijo Significado Ejemplo

or se refiere a un aparato o mecanismo marcador, monocromador…
ancia propiedad de un aparato absorbancia, transmitancia…
idad indica la propiedad de una sustancia densidad, conductividad…
metro indica un aparato de medida amperimetro, colorímetro…
scopio indica aparato óptico o de visión microscopio, telescopio…
scopia indica observación microscopía, espectroscopia…
grafo indica un aparato de registro de observaciones cromatógrafo, sismógrafo…
grama indica el registro producido por un instrumento cromatograma, sismograma…

2. Clasificación de los métodos instrumentales

El análisis instrumental engloba todas las técnicas analíticas que necesitan de un
aparato o instrumento para realizar la determinación. Estas técnicas instrumentales se
dividen en:
- Técnicas electroquímicas (Potenciometrías, Conductimetrías,
Electrogravimetrías...)
- Técnicas ópticas, se incluyen las denominadas espectroscópicas
(espectrofotometrías visible-UV, absorción atómica, fotometría de llama) y las
no espectroscópicas (Refractometrías, Polarimetrías...)
- Técnicas cromatográficas (Cromatografía de gases, Cromatografía líquida...)

301
Según la propiedad física que se mida, los métodos de análisis se clasifican en:

Métodos de análisis Propiedad física Técnica

 Masa Gravimetría
Clásicos
Volumen Volumetría
Absorción de la radiación Espectrofotometría (Visible-UV-IR-AA)
Emisión de la radiación Fotometría de llama
Refracción de la radiación Refractometría
Rotación de la radiación Polarimetría
Instrumentales
Potencial eléctrico Potenciometrías
Conductividad eléctrica Conductimetrías
Cantidad de electricidad Culombimetría
Corriente eléctrica Amperometría

3. Instrumento analítico
Lo que se mide en un instrumento es una propiedad que tiene la sustancia. En
general, el instrumento actúa:

- Generando una señal, que puede provenir de una sustancia, como en el caso
de la emisión del sodio en la fotometría de llama, o bien puede ser generada por
el mismo aparato, como es la radiación visible emitida por una lámpara de
tungsteno y absorbida por una sustancia.

- Transformando la señal en una de naturaleza diferente (transducción). Por

ejemplo la radiación se transforma en corriente eléctrica, que es más fácil medir.

- Amplificando la señal, al hacerlo, aumentamos la sensibilidad del instrumento.

La amplificación se consigue mediante la electrónica.

- Presentando la señal sobre un registro, sobre una escala o sobre el display de

una pantalla.

Generador Sustancia Transductor Amplificador

0 100
señal

Registrador

4. Métodos de trabajo en análisis instrumental

La mayoría de las técnicas analíticas instrumentales usan métodos de trabajo que son
muy similares. Los más utilizados son el método de la calibración con una serie de
patrones y el método de las adiciones estándar.

MÉTODO DE CALIBRACIÓN CON PATRONES: consta de dos partes:

Calibrado del aparato: se calibra con soluciones de concentración conocida

(patrones). Éstas se preparan por estos métodos:

302
 - Método directo: se pesan cantidades exactas de sustancias patrón y se llevan a
un volumen conocido, lo que da lugar a una concentración conocida.
- Método de las diluciones: se sigue el método directo para preparar una solución
 “madre” y a partir de ésta se preparan soluciones “hija” diluyendo volúmenes
conocidos de la solución madre.

Medida de la muestra: se mide la solución muestra y se determina su concentración

mediante la curva de calibrado realizada previamente con las soluciones de
concentración conocida.

En la figura se muestran dos de estos métodos:

1) PREPARACIÓN SOLUCIONES PATRÓN 2) CURVA DE CALIBRADO

p
p1 p2 p3

Propiedad medida
C

V1 V2 V3

C1 C2 C3

Método directo

C1 C2 C3
C1 C2 C3

Método diluciones

3) MEDIDA DE LA MUESTRA
Propiedad medida

Cm

Ejemplo:

En la determinación del hierro con o-fenantrolina es necesario preparar soluciones de

concentración conocida de hierro en el rango de 0-20 mg de Fe (0-5-10-20). La sustancia
patrón que se utiliza es la sal de Mohr FeSO4·(NH4)2SO4·6H2O (MM = 392,14 g/mol). Indica
como preparar las soluciones patrón utilizando a) método directo b) método indirecto o de las
diluciones

a) Siguiendo el método directo vamos a ver como se calcularía la concentración para un punto
y el resto se haría igual.

303
 [Link]

Para la concentración de 5 mg Fe/litro, para evitar errores interesa pesar una cantidad lo mayor
posible. Por tanto, se elige como volumen de preparación 1 litro y la cantidad a pesar en forma
de sal de Mohr es de 5 mg = 0,005 g de Fe.

Si en 1 mol de FeSO4·(NH4)2SO4·6H2O →1 atomo-gramo de Fe
392,14 g → 55,85 g Fe
x → 0,005 g Fe; x = 0,0351 g FeSO4·(NH4)2SO4·6H2O

Resultando, que pesaríamos 0,0351 g de FeSO4·(NH4)2SO4·6H2O y llevaríamos a un matraz

aforado de 1 litro. Los demás resultados se muestran en la tabla:

Concentración, mg Fe/litro Volumen, ml Peso de FeSO4·(NH4)2SO4·6H2O, g

0 01
5 1000 0,0351
10 1000 0,0702
20 1000 0,1404
1
: en el blanco o cero se suele utilizar un matraz con todos los reactivos que añadamos a la
muestra, pero sin solución madre.

Este caso, aparte de la cantidad de agua destilada utilizada, tendría el inconveniente de que las
cantidades a pesar son muy pequeñas, si exceptuamos la de 20 mg/l, esto puede dar lugar a
errores en la calibración.

b) En el método indirecto o de las diluciones se prepara una solución “madre”, y a partir de esta
solución madre se preparan las soluciones “hijas”.

Vamos a preparar una solución madre que contenga 100 mg/l de Fe. En este caso podemos
preparar 500 ml. Por lo tanto la cantidad a pesar en forma de sal de Mohr es de:
100 mg/l · 0,5 l = 50 mg = 0,050 g

Si en 1 mol de FeSO4.(NH4)2SO4.6H2O → 1 atomo-gramo de Fe

392,14 g → 55,85 g Fe
x → 0,050 g Fe; x = 0,3511 g FeSO4.(NH4)2SO4.6H2O

Resultando, que pesaríamos 0,3511 g de FeSO4.(NH4)2SO4.6H2O y llevaríamos a 1 matraz

aforado de 500 ml, y esta sería la solución “madre”.

Para preparar la solución hija de 5 mg/l de Fe, aplicamos la fórmula: Vi ⋅ C i = Vf ⋅ C f

donde Vi y Ci representan el volumen a tomar y la concentración inicial de la solución
concentrada, en este caso la solución madre, y Vf y Cf representan el volumen y la
concentración final de la solución “hija”.

Elegimos el volumen final de la solución hija, que puede ser 100 ml. Debemos elegir un
volumen que nos permita utilizar la pipeta aforada adecuada, ya que si salen valores como 7,5
no disponemos de la adecuada. Aplicando la fórmula:
V ⋅ Cf 100 ⋅ 5 mg / l
V i ⋅ C i = Vf ⋅ C f ⇒ V i = f = = 5 mg Fe / l
Ci 100 ml
Los demás valores se resumen en la tabla:

Concentración, mg Fe/litro Volumen solución madre, ml Volumen solución hija, ml

0 0 100
5 5 100
10 10 100
20 20 100

304
Este método es más exacto, pero hay que realizar las diluciones exactas y para ello hay que
manejar el material volumétrico correctamente. Aquí los enrases bien hechos son
fundamentales.
En ninguno de los dos métodos es necesario pesar las cantidades exactas que nos salgan por
cálculo, es suficiente hacerlo con aproximación para después recalcular las cantidades
exactamente. Sirva como ejemplo el siguiente:

Peso sal Mohr 0,7080 g

Volumen final 1.000 ml
Concentración solución madre 100,8 mg Fe/l
Volumen solución madre Volumen solución
Concentración, mg/l Fe
(ml) hija (ml)
0 100 0
5 100 5,0
10 100 10,1
20 100 20,2

MÉTODO DE LA ADICIÓN ESTÁNDAR:

Consiste en añadir a la muestra un único volumen conocido de una solución de
concentración perfectamente establecida (adición simple de estándar o patrón) o bien
una serie de volúmenes progresivos de esta disolución. En cualquier caso, a partir de
las medidas de una determinada propiedad analítica, correspondientes a la muestra y
a la muestra incluyendo las adiciones patrón, se puede determinar la concentración de
la sustancia analizada. Este método, aunque una dificultad adicional en el trabajo de
laboratorio y en el tratamiento de los resultados, proporciona una mayor calidad en los
resultados obtenidos y minimiza el error que se efectúa al comparar la respuesta de la
muestra problema con la obtenida con los patrones, en particular cuando esta
soluciones presentan un medio químico diferente (error de matriz).

5. Ventajas e inconvenientes del análisis instrumental frente a

los métodos químicos de análisis
En general, los métodos instrumentales son más rápidos que los denominados
métodos clásicos (gravimetrías y volumetrías). También son más selectivos, al poder
variar las condiciones de medida, adecuando cada una al componente a determinar.
Suelen tener una mayor sensibilidad y detectar menor cantidad de componente que
los métodos clásicos.

En cuanto a precisión, se suele decir que los métodos instrumentales son más
exactos. Esto puede ser verdad en muchos casos, pero los errores no se cometen en
la medida de la propiedad en el aparato, sino en las operaciones previas, que son las
mismas que las utilizadas en los métodos clásicos. Entre las operaciones previas
están:

- Muestreo para obtener una muestra representativa de todo el material

- Acondicionamiento de la muestra, disolución, concentración...
- Separación del componente del resto de los que puedan interferir en la medida.

Por último, resaltar que tanto los métodos clásicos como los instrumentales necesitan
del mismo elemento de precisión, que es la balanza analítica.

305
 Índice
UNIDAD DE TRABAJO Nº 16
MÉTODOS ELÉCTRICOS DE ANÁLISIS

Los métodos electroanalíticos son aquellos métodos que de una u otra manera
relacionan alguna propiedad de la corriente eléctrica con la concentración de una
sustancia problema. Según la propiedad medida pueden clasificarse en:
- Potenciometrías: miden la diferencia de potencial producida entre dos
electrones sumergidos en una solución
- Conductometrías: miden la conductancia (inversa de la resistencia) de una
solución.
- Electrogravimetrías: miden la cantidad de sustancia depositada por una
corriente eléctrica.

1. Potenciometrías
¿Qué es una pila? Es un sistema que consta de dos metales diferentes unidos por un
conductor y sumergidos en una disolución conductora (electrolito). Una pila voltaica
produce corriente eléctrica. En la pila Daniell, una de las más conocidas, las
reacciones que se producen son las siguientes:
Zn - 2e- → Zn2+ (oxidación)
Voltímetro
Cu2+ + 2e- → Cu (reducción)
V Zn + Cu2+ → Zn2+ + Cu
Puente salino

El proceso global implica el paso de electrones de

Zn Cu una semipila a otra en la unidad de tiempo, es
decir, una fuerza electromotriz que se pueda medir
con un voltímetro, que cesará cuando se establezca
2+ el equilibrio:
2+
Zn Cu Zn + Cu2+ š Zn2+ + Cu

EXPERIENCIA DIDÁCTICA: CONSTRUCCIÓN DE UNA PILA DANIELL

1. INTRODUCCIÓN ¬¥¢¬›¨

La primera pila la construyó Volta en 1793, representó un hito histórico que con el simple contacto de dos
elementos metálicos se obtuviera una fuente de energía, capaz de dar calor, descomponer el agua o
iluminar una habitación oscura. El nombre de “pila” viene por la forma apilada en que se colocaban los
discos de cobre y cinc, separados por cartones empapados en sal.

2. FUNDAMENTO

Una pila voltaica proporciona energía eléctrica. La pila Daniell consta de dos semipilas verificándose en
una de ellas la oxidación (ánodo) y en la otra la reducción (cátodo) y se observa la producción de corriente
eléctrica midiendo la fuerza electromotriz. Por convenio, el proceso anódico se representa a la izquierda y
la separación de fases entre el electrodo sólido y la solución líquida con una barra. El puente salino se
representa con doble barra. Así, la pila Daniell se representa como: Zn|Zn2+ (0,1M)||Cu2+ (0,1M)|Cu

3. MATERIALES-REACTIVOS
REACTIVOS MATERIAL
Lámina de cobre
Lámina de cinc
Solución 0,1 M de CuSO4 Vasos de 250 ml
Solución 0,1 M de ZnSO4 Puente salino
Solución saturada de KNO3 Voltímetro o polímetro (téster)
Papel de tornasol
Solución de cloruro de sodio 5%

307
 [Link]

4. MODO DE OPERAR

1. Se ponen 100 ml de CuSO4

Voltímetro
Puente 0,1 M en un vaso y se
 salino sumerge una lámina de Cu; en
el otro vaso se ponen 100 ml
de ZnSO4 0,1 M y se sumerge
0 10
una lámina de Zn.

2. Une mediante un tubo en U

que se llena completamente
con solución saturada de
Zn Cu
KNO3 y se tapa con unos
algodones (no debe haber
burbujas de aire). En el
momento de iniciar la
+ Papel tornasol - experiencia se le da vuelta
rápidamente comunicando los
Detección dos vasos.
de la polaridad

3. Se unen los electrodos con los bornes del voltímetro mediante las conexiones adecuadas y se mide el
voltaje desarrollado.

5. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS

Expresa el potencial de la pila en Voltios

6. OBSERVACIONES

Se puede comprobar el polo de cada electrodo poniendo en contacto la pila con un portaobjetos y sobre
éste un papel de tornasol humedecido en una solución salina y conectada con la pila. El cambio de color
nos indicará el signo, donde se ponga rojo indicará que hacia ahí migran los iones H+ y por tanto será el
signo negativo, donde se pone azul migrarán los iones OH- y ese será el signo positivo.

Representación de las pilas

Algunos principios y convenios para pilas adoptados por la IUPAC son:

1) El electrodo en el que se produce la reducción se denomina cátodo.

2) El electrodo donde se produce la oxidación se denomina ánodo.
3) La pila se representa con el ánodo a la izquierda. Así, la pila anterior se
representa: Zn|Zn2+ (0,1M)||Cu2+ (0,1M)|Cu donde las barras constituyen
separación de fase entre el metal sólido y el líquido de la disolución. La doble
barra representa el puente salino.
Potenciales de electrodo
Se considera el potencial de una pila E como: Epila = Ecatodo - Eanodo. En el caso anterior
sería: Epila = ECu - EZn.

Voltímetro
V
Puente salino Si construimos la siguiente pila:
H2 gas
Zn Zn|Zn2+ (1M)||H+(1M)||H+|H2 (p = 1atm)|, Pt.
(p = 1atm.)

+
Al medir, encontraríamos un potencial de
2+ H 1M
Zn 1M 0,763 Voltios.

308
Si al electrodo constituido por una lámina de platino sobre la que burbujea hidrógeno
gaseoso en una disolución de [H+] = 1 mol/l, se le asigna por convenio el potencial
cero, entonces el potencial de la semipila de Zn es de 0,763 V.

A este potencial medido a 25oC y 1 atmósfera de presión se denomina potencial de
electrodo normal y se representa por E0. Por convenio, la IUPAC indica que todos los
potenciales de electrodo se escriban como reducciones.

Ejemplos:

1. Calcula el potencial de la pila Daniell a 25oC y a 1 atmósfera de presión a partir de los

potenciales de electrodo. Al observar la tabla de potenciales de electrodo encontramos:

Zn2+ + 2e- → Zn E0 = -0,763 V

Cu2+ + 2e- → Cu E0 = 0,337 V

Para aproximarnos al problema, vamos a tener en cuenta que cuanto más positivo sea el
potencial más espontáneo, es decir, tendrá lugar antes la reducción que presente un potencial
normal de reducción superior.

Esto quiere decir que el proceso más fácil de producirse es el de reducción del Cu2+. O sea:
Cu2+ + 2e- → Cu (reducción) cátodo.

Pero para que haya paso de corriente, en la semipila del Zn debe realizarse la oxidación:
Zn - 2e- → Zn2+ (oxidación) ánodo. Y por tanto el potencial de la pila sería:

Epila = Ecatodo - Eanodo = 0,337-(-0,763) = 1,100 V

Téngase en cuenta que el potencial de la pila debe ser siempre positivo, sino no sería una pila
voltaica.

2. Se quiere proteger una chapa de acero (Fe) con un recubrimiento de cinc o cadmio. ¿Cuál
de los dos elementos es más fácilmente oxidable y por tanto peor?

La solución del recubrimiento, sin entrar en consideraciones económicas, es impedir el

problema de la corrosión que se da en los materiales férreos como el acero. Se trata de
encontrar un recubrimiento que lo proteja eficazmente. Al observar la tabla de potenciales
encontramos:

Zn2+ + 2e- → Zn E0 = -0,763 V

Cd2+ + 2e- → Cd E0 = -0,403 V

Cuanto más positivo sea el potencial más espontáneo. Esto quiere decir que el proceso más
fácil de producirse es el de reducción del Cd2+. O sea: Cd2+ + 2e- → Cd (reducción).

Lo que implica que es más fácilmente oxidable el Zn que el Cd: Zn - 2e- → Zn2+ (oxidación)

Por tanto, el cadmio protege mejor la chapa de acero (Fe). Es evidente que hoy día se emplean
ingentes cantidades de Zn en proteger al hierro de su oxidación y a este proceso se denomina
galvanizado, pero esto se hace exclusivamente por razones de precio.

Métodos potenciométricos
En todo sistema potenciométrico debemos considerar:

Electrodo de referencia: tiene un potencial constante independiente de la

concentración de la sustancia a determinar.

309
 El más usado ha sido el de calomelanos, que es
Hilo de platino
asequible construir en el laboratorio, como se ve
en la figura, aunque lo habitual es comprarlo.

El electrodo de calomelanos saturado es el más
utilizado, siendo su representación:
Hg Solución
saturada KCl ||Hg2Cl2(sat), KCl(sat)|Hg
KCl
Hg2Cl2 Hg2Cl2 + 2e- ⇔ 2Hg + 2Cl- E0 = 0,244 V
Hg

En la actualidad, el electrodo de referencia

comercial más común es el llamado de plata-cloruro de plata (Ag/Ag Cl).
Electrodo indicador: mide la concentración de la sustancia a través del potencial
desarrollado, es decir responde a las variaciones de concentración. Un electrodo
indicador sencillo es el de plata-cloruro de plata que consiste en una solución de
cloruro de potasio saturada con cloruro de plata:
||AgCl(sat.), KCl (sat)|Ag
AgCl + e- ⇔ Ag(s) + Cl- E0 = 0,2223 V
Éste también, modificado convenientemente, se utiliza como electrodo de referencia.
Los electrodos indicadores se clasifican, según su funcionamiento y diseño, en:
Electrodos metálicos: cuando el metal del electrodo está en equilibrio con el catión
del metal.
Electrodos de membrana: se mide el potencial que se establece a través de una fina
membrana de vidrio que separa dos soluciones con diferentes concentraciones. El
más importante es el indicador de pH, que consta de:
- Electrodo interno, que es de referencia, generalmente el de Ag-AgCl.
- Electrodo indicador, que se basa en una membrana de vidrio que tiene la
propiedad de intercambiar los iones Na+ por los iones H+ de la solución. Este
intercambio de iones a ambos lados de la membrana da lugar a un potencial,
que está relacionado con la concentración de iones H+.

cabeza Membrana de vidrio

conexión
orificio
solución interna capa interna capa capa interna solución
de relleno
solución HCl (0,1 M) de gel de de gel externa
conexión hidratado vidrio seco hidratado

electrodo
referencia

diafragma

solución interna
membrana

Electrodo de membrana de vidrio para medir el pH

310
 [Link]

Este tipo de electrodos que integran en un solo cuerpo tanto al electrodo de referencia
como al indicador se llaman combinados.

El electrodo combinado de pH funciona como una pila que genera una tensión en
voltios que convierte el peachímetro en unidades de pH. Se caracteriza por dos
valores:

- Pendiente: es la ganancia en tensión correspondiente a una unidad de pH.

Para una unidad, la ganancia teórica es de 59,16 mV/pH a 25oC. Cuando el
valor real es el 80% del valor teórico, el electrodo no es operativo.

- Punto cero: es el valor de la tensión cuando el electrodo se introduce en una

solución tampón de pH = 7. Este punto está comprendido entre -25 y +25 mV.
Fuera de este intervalo, el electrodo se considera como defectuoso.

En relación al mantenimiento, los electrodos deben estar siempre húmedos. Para ello,
deben conservarse en la solución de mantenimiento o en su defecto en KCl 3 M.

Los electrodos indicadores utilizados en las determinaciones pueden ser:

Electrodo indicador de cationes: (Mn+). El potencial observado se representa por la

ecuación:

0,059
Eobservado = K + logCM siendo CM la concentración del catión (metal).
n

Para el caso particular del electrodo de vidrio para la medición de pH la ecuación a

aplicar es: E obs. = K − 0, 059 pH

Electrodo indicador de aniones: (An-) El potencial observado se representa por la

ecuación:

0,059
Eobservado = K − logCA siendo CA la concentración del anión.
n
Métodos de Trabajo: para la calibración del electrodo son,

- Método directo, mediante calibrado del electrodo con soluciones de

concentración conocida. Para ello se mide el potencial y se traza la recta de
potencial frente al logaritmo de la concentración. Esta recta nos sirve para
determinar la concentración de la muestra.

- Método de adición estándar, se mide el potencial de la muestra y

posteriormente se añade un volumen de una disolución de concentración
conocida (estándar). Mediante cálculos se puede determinar la concentración
de la muestra.

Ejemplo:

La concentración de fluoruro de una solución se determinó mediante un electrodo indicador y

un electrodo de referencia. El sistema de electrodos desarrolló un potencial de -0,4117 V al
sumergirlo en 25,0 ml de muestra y -0,4965 V después de la adición de 2,0 ml de NaF
0,0545 M. Calcula la concentración de fluoruro (F -) en la muestra.

311
 Al tratarse de un anión:
0,059
Eobservado  K log Cm siendo Cm la concentración del anión F -.
1

0,059
En el caso de la muestra: 0,4117  K log Cm
1
Y en el caso de la muestra más el estándar:

0,059 0,059 V – C Vs – Cs
0,4965  K log Cm s K log m m
1 1 Vm Vs

Sustituyendo y restando:

0,059
0,4117  K log Cm (1)
1
0,059 25 – Cm 2 – 0,0545
0,4965  K log (2)
1  25 2
0 , 059 25 – C m 2 – 0 , 0545 0 , 059
0 , 4117  0 , 4965  log log C m
1 27 1
a
Teniendo en cuenta que: log a log ba  log resulta:
b
25 – C m 2 – 0 , 0545
0 ,059 27 0 ,059 25 – C m 2 – 0 , 0545
0 , 0848  log  log
1 Cm 1 27 – C m

Dividiendo por 0,059 y aplicando la inversa del logaritmo queda:

25 – Cm 2 – 0 , 0545 0 ,109 4
27 , 371  ⇒ 739 – Cm  25 – Cm 0 ,109 ; Cm   1,5 – 10 moles / litro
27 – Cm 714
Este problema también puede resolverse aplicando la siguiente fórmula:

⎛ VS ⎞ ⎛ 2 ⎞
Cp – ⎜ ⎟ 0,0545 – ⎜ ⎟
⎝ Vm – VS ⎠ ⎝ 27 ⎠ 4
Cm  E 2 E1  ⎡ 0 ,4965  0 ,4117  1,5 – 10 moles/litro
⎛ Vm VS ⎞ ⎣ ⎦⎤
⎛ 27 ⎞
10 S ⎜ ⎟ 10 0 ,059
⎝ Vm ⎠ ⎜ ⎟
⎝ 25 ⎠

FICHA DE TRABAJO Nº 38 ¬¥¢¬›¨

DETERMINACIÓN DE LA ACIDEZ DE UN VINO TINTO. PEACHIMETRÍA

1. INTRODUCCIÓN

Los ácidos que contiene el vino son varios: tartárico, cítrico, acético..., pero todos estos ácidos pueden
expresarse como acidez total en unidades de ácido tartárico en g/l. Esta acidez total es la suma de de los
ácidos valorables a un pH = 7.

En vinos blancos puede determinarse la acidez total en presencia de fenolftaleina, pero en vinos tintos
debe determinarse mediante peachímetría, ya que es difícil observar el cambio de color de los
indicadores. El gas carbónico se elimina previamente del vino por agitación en frío y con vacío parcial.

2. FUNDAMENTO

Se valora la acidez total con NaOH previamente normalizado, determinando el volumen a pH = 7

mediante una representación gráfica pH-volumen NaOH.

312
3. MATERIALES-REACTIVOS

REACTIVOS MATERIALES
Kitasato de 1000 ml
 Pipeta aforada 25 ml vino
Hidróxido de sodio (lentejas) Bomba de vacío
Hidrógeno ftalato de potasio Matraz Erlenmeyer
Fenolfaleina 1% p/v Vaso de 100 ml
Vino tinto Bureta
Agitador magnético con barra agitación.

4. MODO DE OPERAR

1. Se prepara NaOH 0,1 N

2. Se normaliza con hidrógenoftalato de potasio (HFK):

- se pesa la cantidad de HFK necesaria para gastar unos 40 ml de NaOH 0,1N. Se disuelve en 50 ml de
agua y se añaden 2 gotas de fenolftaleina 1% como indicador y se valora hasta el viraje a un color rosa.
- se determina el factor según lo visto en volumetrías.

3. Se ponen 50 ml de vino en un kitasato de 1 litro y se elimina el CO2 mediante una bomba de vacío
hasta que no se desprendan burbujas.

4. Se toman 25 ml medidos exactamente de vino sin CO2 y se colocan en un vaso de 100 ml con una
varilla de agitación. Se coloca sobre un agitador magnético.

Bureta
5. Se calibra el electrodo de vidrio con soluciones reguladoras
de pH = 4 y pH = 7. El procedimiento a seguir es:

-se introduce el electrodo en la solución de pH = 7. Se espera

Medidor a que se estabilice.
de pH
-después de enjuagar el electrodo y secarlo, se introduce en
Electrodo
de pH la solución de pH = 4. Se debe esperar a que el aparato dé
por concluido el proceso de calibración.

-como última comprobación se introduce la solución en pH= 7.

6. Coloca el electrodo en el vino. Pon en marcha el agitador y valora con NaOH 0,1 N observando la
variación de pH y añadiendo gota a gota cerca del punto final (pH = 7)

7. Se va anotando el pH y el volumen de NaOH.

pH V-NaOH, ml

5. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS

1. Representa en papel milimetrado pH frente a volumen de NaOH añadido.

2. Determina el volumen de NaOH consumido a un pH = 7

3. Con el volumen de NaOH a pH = 7, determina la acidez total, expresada en g de tartárico /l.

6. CUESTIONES Y PROBLEMAS

1. La legislación no permite una acidez total superior a 4,5 g/litro. Compara este valor con el valor del vino
determinado.

313
 [Link]

FICHA DE TRABAJO Nº 39 ¬¥¢¬›¨

DETERMINACIÓN DE LA RIQUEZA EN ÁCIDO ACETILSALICÍLICO DE LA ASPIRINA


1. INTRODUCCIÓN

El ácido acetilsalicílico es el componente activo de la aspirina.

2. FUNDAMENTO

Se valora la acidez de la aspirina con NaOH previamente normalizado, determinando el volumen en el

punto de equivalencia calculando el punto de inflexión de la curva pH-volumen NaOH.

3. MATERIALES-REACTIVOS
REACTIVOS MATERIALES
Mortero con mano
Probeta 100 ml
Hidróxido de sodio (lentejas)
Bomba de vacío
Hidrógeno ftalato de potasio
Matraz Erlenmeyer 250 ml
Fenolfaleina 1% p/v
Vaso de 100 ml
Muestra: aspirina comercial
Bureta
Agitador magnético con barra agitadora.

4. MODO DE OPERAR

1. Se prepara NaOH 0,1 N, pesando la cantidad calculada para el volumen a preparar.

2. Se normaliza con hidrógenoftalato de potasio (HFK) siguiendo el proceso de la ficha de trabajo anterior.

3. Se calibra el electrodo de vidrio con soluciones reguladoras de pH = 4 y pH = 7. El procedimiento a

seguir es:

- se introduce el electrodo en la solución de pH = 7. Se espera a que se estabilice.

- después de enjuagar el electrodo y secarlo, se introduce en la solución de pH = 4. Se debe esperar a
que el aparato de por concluido el proceso de calibración.
- como última comprobación introducir la solución en pH = 7.

4. Pesa del orden de 0,3 g de aspirina en la balanza analítica, previamente triturada en mortero; disuelve
en 50 ml de disolución alcohólica (etanol:agua = 1:1) y coloca sobre un agitador magnético. Pudiera
parecer que no se disuelve, pero los restos sólidos son debido al excipiente (almidón).

5. Coloca el electrodo en la solución etanólica. Pon en marcha el agitador y valora con NaOH 0,1 N
observando la variación de pH, añadiendo NaOH hasta 10 ml de 2 en 2 ml y posteriormente ir con
precaución añadiendo de 1 en 1 ml. Cerca del pH = 6 ir de 0,1 ml en 0,1 ml hasta llegar a pH =11.

Se puede calcular el consumo de NaOH con el porcentaje de ácido acetilsalicílico del prospecto y así
saber la velocidad adecuada de valoración. Si se valora cerca del punto de equivalencia gota a gota el
incremento de volumen es de 0,05

6. Se va anotando pH y volumen de NaOH.

pH V-NaOH, ml

5. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS

1. Desarrolla la siguiente tabla:

V-NaOH $V pH $pH $pH/$

$V $ 2pH/$
$V2

314
donde Δ = representa el incremento entre el valor inmediato y el anterior y Δ2 representa el incremento de
los incrementos entre el valor inmediato y el valor anterior.
2. Realiza la gráfica pH frente a volumen de NaOH
 3. Representa el Δ2pH/ΔV2 frente al volumen. Es suficiente
con dos puntos y el volumen en el punto de equivalencia se
obtiene por el punto donde la recta corta al eje de las X para
Δ pH
ΔV
2

la línea Y = 0. También se puede determinar el punto de

2

equivalencia por interpolación, según:

⎛ Δ2pH / Δ2 V (máximo ) ⎞
Vp. e. = V1 + ΔV × ⎜ 2 ⎟
0 ⎜ Δ pH / Δ V (máximo ) − Δ pH / Δ V (mínimo ) ⎟
2 2 2
⎝ ⎠

Vp.e. donde V1 = volumen al cual el Δ2pH / Δ2 V tiene el máximo

valor. El volumen que determina el máximo valor de la
13,5 V , ml 13, 6 función se sobreentiende que corresponde al punto
NaOH
inmediatamente anterior a la anulación de la función. De
forma análoga, el volumen correspondiente al mínimo
coincide con el punto inmediatamente posterior.
Este cálculo viene de un razonamiento matemático, basado en que la derivada segunda debe ser cero
para una curva con punto de inflexión.
4. Determina el contenido en ácido acetilsalicílico de la aspirina en % p/p.
6. CUESTIONES Y PROBLEMAS
1. Determina el pH en el punto de equivalencia, con la gráfica pH-Volumen NaOH entrando con el
volumen en el punto de equivalencia.
2. Elige un indicador adecuado para esta valoración teniendo en cuenta el pH en el punto de equivalencia
y consultando una tabla de indicadores.
3. Como ejemplo de determinación del contenido en ácido acetilsalicílico (MM = 180,16 g/mol) de la
aspirina en % p/p, se presentan los siguientes resultados:
1. Normalización del NaOH 0,1 N
1ª Determinación 2ª Determinación
peso ácido oxálico = 0,1927 0,1990 mg
V-NaOH 0,1 N 32,10 32,80 ml
Fc = 0,9524 0,9625
Fc - medio = 0,9575
2. Determinación del volumen de NaOH en el punto de equivalencia
2 2
V-NaOH pH ΔpH/ΔV Vmedio Vmedio Δ pH/ΔV
13,4 6,61
13,5 7,15 5,4 13,45
13,6 10,19 30,4 13,55 13,5 25,0
13,7 10,83 6,4 13,65 13,6 -24,0
Vfinal (p.e.) = 13,55 ml
3. Cálculo de la riqueza de la aspirina
Peso aspirina = 0,297 g
% acetilsalicílico = 78,7

4. Un ejemplo más completo sobre como determinar el punto de equivalencia se muestra en la tabla. El
volumen en el punto de equivalencia se puede determinar por dos métodos:
a) Método geométrico, consiste en trazar dos tangentes a la rama superior e inferior de la curva de
valoración. A continuación se determina la altura entre ambas (a) y se lleva sobre la curva la altura media
(a/2) y se baja la perpendicular desde la curva al eje de abscisas. El punto de corte es el volumen en el
punto de equivalencia.

315
 b) Método de la derivada segunda, donde se representa la derivada segunda frente al volumen medio de
los volúmenes medios, que si se ha ido valorando a intervalos regulares coincide con el volumen de
hidróxido de sodio. Es suficiente representar dos puntos que corresponden a los máximos valores positivo
y negativo. El punto que corta al eje de ordenadas, correspondiente al cero de abscisas es el volumen en
el punto de equivalencia.

V-NaOH, ml pH ΔV, ml ΔpH V=

(V1 + V2 )
ΔpH/ΔV
2
Δ pH/ΔV
2
V=
(V 1 + V2 )
2 2
0,00 3,66
1,00 0,74 0,50 0,74
1,00 4,40 -0,55 1,75
4,00 0,76 3,00 0,19
5,00 5,16 -0,08 5,25
5,00 0,55 7,50 0,11
10,00 5,71 0,12 9,75
4,00 0,93 12,00 0,23
14,00 6,64 0,37 13,13
0,50 0,30 14,25 0,60
14,50 6,94 0,60 14,45
0,30 0,36 14,65 1,20
14,80 7,30 0,20 14,74
0,05 0,07 14,82 1,40
14,85 7,37 3,60 14,85
0,05 0,25 14,88 5,00
14,90 7,62 3,80 14,90
0,05 0,44 14,93 8,80
14,95 8,06 17,60 14,95
0,05 1,32 14,98 26,40
15,00 9,38 -0,80 15,00
0,05 1,28 15,03 25,60
15,05 10,66 -17,20 15,05
0,05 0,42 15,07 8,40
15,10 11,08 -5,00 15,10
0,05 0,17 15,13 3,40
15,15 11,25 -1,00 15,15
0,05 0,12 15,18 2,40
15,20 11,37 -1,26 15,39
0,80 0,91 15,60 1,14
16,00 12,28 -0,96 16,05
1,00 0,18 16,50 0,18
17,00 12,46 -0,08 16,88
0,50 0,05 17,25 0,10
17,50 12,51 0,09 17,75
1,50 0,28 18,25 0,19
19,00 12,79

20 14

12
10
a
10
2
Δ pH / ΔV

a/2
pH

0 8
2

6
-10
4
-20
14,8 14,9 15 15,1 15,2 2
V-NaOH 0 5 10 15 20
V-NaOH

316
 [Link]

FICHA DE TRABAJO Nº 40 ¬¥¢¬›¨

DETERMINACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE NITRATOS

1. INTRODUCCIÓN
Se determina el contenido en nitratos mediante un electrodo indicador de éstos.

2. FUNDAMENTO

La relación que existe entre la concentración de un anión y el potencial desarrollado entre el electrodo de
0,059
referencia y el indicador viene dado por la ecuación de Nernst: Eobservado  K logC
n
Para determinar la concentración de la muestra se puede hacer

a) Mediante método adición estándar: En este método se mide:

1. El potencial (E1) de un volumen de muestra (Vm)

2. El potencial (E2) después de añadir un volumen conocido (Vs) de concentración estándar (Cs).
La concentración de la muestra después de aplicar la ecuación de Nernst resulta:

⎡ E2 E1 ⎛ V V ⎞ ⎛ V ⎞⎤
o
el valor de S depende de la temperatura y a 25 C vale, en teoría,
Cm  Cs – ⎢10 S – ⎜ m s ⎟ – ⎜ s ⎟⎥ 0,05916 si el potencial se mide en voltios
⎢ ⎝ Vm ⎠ ⎝ Vm ⎠⎥⎦
⎣

b) Mediante curva de calibrado, en que se representa el potencial frente al logaritmo de la concentración.

Este método será el que vamos a realizar.

3. MATERIALES-REACTIVOS

REACTIVOS MATERIALES
Potenciómetro tipo Crison® con
Nitrato de potasio PRS
- electrodo referencia
Solución iónica (se prepara disolviendo 60 g de
- electrodo indicador de nitratos
Al2(SO4)3 · 18H2O en 80 ml de agua, calentando,
Matraces 100 ml
dejando enfriar y llevando a 100 ml)
Micropipeta

4. MODO DE OPERAR

1. Prepara soluciones de concentración conocida en el rango de 0-100 mg/l N O3 . Ver esquema

1000 mg/l
Utilizar agua desionizada
N O3 para todas las diluciones

2. Prepara potenciómetro
Muestra con el electrodo de
(agua pozo) referencia (mismo cable
que el de vidrio), electrodo
25 ml
5 ml indicador de nitratos y
1 ml 2 ml 10 ml sonda de temperatura.

3. Introduce soluciones
2 ml solución patrón en vasos de
iónica
250 ml con agitadores.
100 100 100 100 100
Concentración = ?

4. Mide el potencial de cada una de las soluciones y de la muestra introduciendo el par de electrodos en
cada una de las soluciones y manteniendo la agitación constante. Entre medida y medida deben
enjuagarse los electrodos y secar, sin dañar la membrana del electrodo indicador.

5. Representa el potencial frente al logaritmo de la concentración de nitratos. Ver ejemplo

317
5. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS
a) Expresa el resultado en mg/l de N O3− sustituyendo el valor del potencial en la ecuación de la recta de
calibrado y determinando la concentración, teniendo en cuenta la dilución:

1. Preparación de las soluciones patrón
Peso KNO3 = g
Volumen ml
Concentración mg/l N O3−
2. Calibrado del electrodo indicador
Alicuotas V-final, ml [N O3− ], mg/l Potencial, mV log CNO−
3

3. Medida de la muestra
Muestra
Dilución
Potencial mV
Informe del resultado mg/l N O3−

6. OBSERVACIONES

1. Es importante que los vasos donde se van a hacer las medidas estén limpios y secos antes de añadir
las muestras.

7. CUESTIONES Y PROBLEMAS

Según los datos obtenidos determina el contenido en nitratos, si 25 ml de un agua de pozo se diluyó a
100 ml y se midió su potencial resultando 195 mV. Determina el contenido en nitratos del agua.

Peso KNO3 = 0,4077 g

Volumen = 250 ml
Concentración = 1001,1 mg/l N O3−
Alicuotas V-final, ml [NO3], mg/l Potencial, mV log CNO3
1 100 10,0 231 1,00
2 100 20,0 210 1,30
5 100 50,1 191 1,70
10 100 100,1 171 2,00
25 100 Muestra 195
240
r2 = 0,997 puntos = 4 Primero representamos el potencial observado
230 frente al logaritmo de la concentración de
Eobservado = 288,2 -58,3 log C −
220 NO3− nitratos NO 3 . Después obtenemos una
Eobservado, mV

210 ecuación de la recta que nos permite determinar

−
200 la concentración de NO 3 aplicando la ecuación:
190 Eobs = 288,2 - 58,3 log CNO−
3
180
Resultando: 195 = 288,2 - 58,3 log CNO−
3
170
y despejado queda:
160
0,8 1 1,2 1,4 1,6 1,8 2 2,2
log CNO− =
( 288,2 − 195 ) = 1,598
Log CNO−
3 58,3
3
CNO− = 39,6 mg/litro.
3
Debido al efecto dilución, el agua contiene 25 · C = 100 · 39,6 ⇒ CNO3 = 158,5 mg/litro, concentración
excesiva de nitratos, que recomendaría la no potabilidad del agua.

318
2. Conductometrías
Las soluciones con electrolitos son conductoras de la corriente, ya que los iones
migran al aplicar una diferencia de potencial mediante dos electrodos inmersos en la
solución.
Los iones positivos son atraídos por el electrodo negativo (cátodo) y los iones
negativos son atraídos por el electrodo positivo (ánodo). El flujo de corriente depende
del potencial aplicado y de la resistencia de la solución entre los electrodos, según la
Diferencia de potencial
Ley de Ohm, se expresa como: Resistencia=
Intensidad de la corriente
1
La inversa de la resistencia se denomina conductancia (C = ) y se expresa como:
R
Intensidad de la corriente
Conductancia =
Diferencia de potencial

La unidad de conductancia es el Siemens, que es equivalente al ohm-1. La

conductancia es directamente proporcional a la superficie de los electrodos (A) e
1 A
inversamente proporcional a la distancia entre los electrodos (d). Así: = C = κ⋅
R d
-
donde :
+
R = resistencia en ohm
C = conductancia en Siemens (ohm-1)
d κ = conductancia específica en [Link]-1 ([Link]-1)
A d = distancia entre electrodos en cm
A = área de los electrodos en cm2
d
Para una célula electrolítica con electrodos fijos, la razón
A
Célula de conductividad es una constante y se denomina constante de la célula (K).
κ = Cm ⋅ K

La constante de la célula se determina con una solución cuya conductancia se conoce.

Para ello se elige comúnmente soluciones de cloruro de potasio.
Aplicaciones
La medida de la conductancia está relacionada con la cantidad de iones.
1. Esta medida se utiliza para ver la conductancia de un agua. Cuanto más pura es
una agua menor conductividad.
2. Valoraciones conductométricas: Si valoramos HCl con NaOH se observa que la
conductancia va disminuyendo, esto es debido a que los iones H+ se eliminan del
medio después de reaccionar con el OH- añadido para formar H2O. En el punto de
equivalencia, la concentración de iones H+ y OH- se encuentran en un mínimo. Más
allá del punto de equivalencia se produce un aumento de la conductividad debido a los
iones Na+ y OH- en exceso.
En general, el cambio no es tan brusco como en las potenciometrías y cuanto más
baja sea la concentración mejor es el cambio. Se debe corregir la conductancia,
V+v
multiplicando por el factor de dilución , donde V = volumen inicial y v = volumen
V
de reactivo valorante añadido.

319
 [Link]

FICHA DE TRABAJO Nº 41 ¬¥¢¬›¨

DETERMINACIÓN DE LA CONDUCTANCIA ELÉCTRICA DE UN AGUA

1. INTRODUCCIÓN
La medida de la conductividad de una muestra de agua (conductancia) nos indica la concentración total
de iones.

2. FUNDAMENTO

Las medidas de conductividad dependen de la constante de la celda empleada. Por ello las medidas se
expresan en conductancia específica que es la conductancia de una columna de agua comprendida entre
2
dos electrodos metálicos de 1cm de superficie y separados el uno del otro por 1 cm.

1 A
 C  K–
R d
-1
R = resistencia en ohm, C = conductancia en Siemens (ohm ), K = conductancia específica en
-1 -1 2
Siemens/cm (ohm · cm ), d = distancia entre electrodos en cm, A = área de los electrodos en cm

Para una célula electrolítica con electrodos fijos, la razón d/A es una constante y se denomina la
constante de la célula (K), K  C – K

3. MATERIALES-REACTIVOS

REACTIVOS MATERIALES
Agua desionizada Conductímetro
Cloruro de potasio PA Célula de conductividad específica
Solución patrón de cloruro de potasio PA 0,01M. Termómetro de 0 a 50oC graduado en 0,1oC
Esta solución tiene una conductancia de Equipo termostático capaz de mantener una
1271 µS/cm a 20oC temperatura constante de 20oC.

Nota: De la siguiente tabla pueden elegirse otras soluciones patrones:

Concentración KCl (M) K) MS/cm
Conductancia específica (K
1·10 -4 13,44
-4
5·10 66,46
-3
1·10 132,20
-3
5·10 644,80
-2
1·10 1271,00
-2
2·10 2488,00
-2
5·10 5996,00
-1
1·10 11600,00
-1
5·10 22320,00
4. MODO DE OPERAR
o o
1. Mide la conductancia de una solución patrón (Cp) de KCl a 20 C ±1 C. Determina la constante de la
K
célula como K 
Cp
o o
2. Mide la conductividad de la muestra (Cm) a 20 C ±1 C. Determina la conductancia específica aplicando
la constante de la célula K  Cm – K .

5. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS

a) Expresa los resultados según:

Muestra agua
o
Temperatura C
Conductancia solución patrón (Cp) S
-1
Constante de la célula (K) cm
Conductancia de la muestra (Cm ) S
Conductancia específica del agua (K) S/cm

320
 FICHA DE TRABAJO Nº 42 ¬¥¢¬›¨
DETERMINACIÓN CONDUCTOMÉTRICA DE CLORUROS CON NITRATO DE PLATA

1. FUNDAMENTO

Aunque en las valoraciones conductométricas con precipitación, los cambios no son tan buenos como en
las volumetrías ácido-base, se ha elegido esta valoración, ya que el punto final es difícil de ver con
indicadores.

2. MATERIALES-REACTIVOS

REACTIVOS MATERIALES
Agua desionizada
Solución patrón de cloruro de potasio PA 0,01M
(esta solución tiene conductividad de 1271 µS/cm
o Conductímetro
a 20 C)
Célula de conductividad
AgNO3 0,01 N
Indicador (K2CrO4 5 %)
Muestra de agua

3. MODO DE OPERAR

1. Prepara AgNO3 0,01 N (utilizar agua ultrapura)

2. Se determinan los cloruros por el método de Mohr (Ver volumetrías de precipitación)

3. Coloca el montaje con la célula de forma análoga a las potenciometrías con agitador.

4. Se toman 50 ml de muestra de agua natural y se procede a la valoración añadiendo de 1 en 1 ml hasta

2 ml antes y 2 ml después del punto final obtenido por el método de Mohr (ojo, en el método utilizamos
100 ml). En este caso iremos de 0,1 en 0,1 ml

5. Cada vez que se añada AgNO3 se espera un tiempo suficiente de agitación para que la medida se
estabilice.

6. Se toman los datos según la tabla:

50 v
V-AgNO3, ml Conductancia, S Conductancia corregida
50

4. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS

a) Representa la conductancia corregida frente al volumen de AgNO3 y determina el volumen en el punto

de equivalencia.

b) Determina el contenido en cloruros del agua y compara el método conductométrico con el método de
Mohr.

5. OBSERVACIONES

7. CÁLCULOS Y RESULTADOS

1) Ejemplo de representación de los datos obtenidos experimentalmente

V-AgNO3, ml 10 10,4 10,5 11 11,7 11,9 12,3 13 13,1 13,4 13,7 13,8
Conductancia
244 242 240 238 234 233 230 227 231 234 236 237
(mS/cm )
C-corregida* 293 292 291 290 289 288 287 286 291 297 301 302

321
 Conductancia corregida, μs/cm 305

300 La conductancia corregida es el producto

 de multiplicar la conductancia medida por
295 el factor de dilución que es
(V + v )
V
290 donde V = volumen inicial de la solución
y v = volumen de reactivo agregado.
285
9 10 11 12 13 14
Volumen-AgNO3

Como puede verse el punto de equivalencia estaría entre 13 y 13,1 ml.

Aunque la curva no es perfecta, puede deducirse que la conductancia al principio va disminuyendo como
consecuencia de la eliminación de iones cloruro de la disolución y después del punto de equivalencia se
observa que la conductancia aumenta, debido al exceso de nitrato de plata.

3. Electrogravimetrías
Las electrogravimetrías se vienen utilizando desde mediados del siglo XIX. Están
basadas en la Ley de Faraday que dice que 1 Faraday, o sea 96490 culombios,
deposita 1 equivalente gramo (peso equivalente expresado en gramos).

Batería La electrogravimetría se basa habitualmente

en la deposición catódica de un elemento.
Por diferencia de pesada en el cátodo antes
V V = voltímetro
A y después del paso de corriente, se puede
M A = amperímetro
determinar la cantidad de elemento
M = motor de agitación
depositado.
Ánodo
Cátodo de rejilla La electrogravimetría es una técnica
sencilla, pero debido al coste de los
Solución con electrolito electrodos de platino las hace difícil de
Aparato para las electrogravimetrías
realizar en laboratorios de enseñanza.

Entre sus aplicaciones están:

- Determinación de metales (Cu, Zn, Co).

- Determinación de mezclas de metales, como es el caso del latón donde pueden
determinarse los elementos cobre y cinc.

Ejercicio 1:

¿Qué peso de cobre se depositará en el cátodo en la electrólisis de una solución de cobre (II)
durante 10 minutos pasando una corriente de 1,500 Amperios? Escribe la semireación
catódica. 1 Faraday = 96490 culombios.

La reacción catódica será: Cu2+ + 2e- → Cu ↓

La cantidad de electricidad que pasa a través de la celda galvánica será:

Q = I · t = 1,5 A · 600 s = 900 Culombios (C)

322
 [Link]

63 ,54
Si se necesita 1 Faraday para depositar 1 equivalente gramo. O sea: g de Cu
2
96490 C →63,54/2 g Cu
 900 ⋅ 63 ,54
900 C → x ; x = = 0,2963 g Cu
2 ⋅ 96490

Ejercicio 2:

Calcula el tiempo necesario para que una corriente de 1,05 A deposite 0,251 g de Pb+2 como:
a) Pb en el cátodo b) PbO2 en el ánodo

a) La reacción catódica y la cantidad de electricidad que pasa a través de la celda galvánica

será: Pb2+ + 2e- → Pb

207 ,2
Si se necesita 1 Faraday para depositar 1 equivalente gramo: g de Pb, para depositar
2
0,251 g se necesitarán:

207 ,2
96490 C → g Pb
2
96490 ⋅ 0 ,251
x C → 0,251 g ; x= = 233,8 C
207 ,2
2
Q 233,8 C
Q = I ⋅t ⇒ t = = = 223 segundos = 3 minutos 43 segundos
I 1,05 A

b) En el ánodo se pueden determinar algunas sustancias formando precipitados insolubles que

se adhieren fácilmente al electrodo, siendo el caso del plomo, que en presencia de ácido nítrico
se oxida a dióxido de plomo de acuerdo a la reacción anódica: Pb2+ + 2H2O -2e- → PbO2 + 4H+

En este caso, cada mol de Pb2+ necesitará 2 moles de electrones para depositarse como PbO2
(en el apartado anterior 1 mol de Pb2+ se separaba como Pb después de captar, también, dos
moles de electrones).

El tiempo necesario será el mismo aunque en la obtención de PbO2 la masa depositada sea
superior.

323
 Química y Análisis Químico

Índice
UNIDAD DE TRABAJO Nº 17
ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE-ULTRAVIOLETA

1. Naturaleza de la radiación
La luz, los Rayos X y las ondas de radio son una forma de radiación. Toda esta
radiación se denomina radiación electromagnética y viaja por el espacio a unos
300000 km/s. La radiación tiene un comportamiento dual, es decir, se puede
comportar como:

ONDA: en algunos fenómenos como el de la reflexión, que podemos experimentar con

un simple espejo, la luz del sol, se comporta como cualquier otra onda. Si se propaga
en el espacio, puede representarse como:
e L
Recordando que v  , la velocidad de la onda c 
t T
donde:
+
c = velocidad de la luz (3 · 1010 cm/s)
Fuerza eléctrica

L
T L = longitud de onda, la distancia entre dos máximos
A A consecutivos, se expresa en nanómetros (10-9 m) en la
tiempo
zona visible
T = periodo, es el tiempo que tarda una onda en
completar un ciclo, se expresa en segundos.
- A = amplitud
⎛ 1⎞
N = es la inversa del periodo ⎜ N  ⎟ y se denomina
⎝ T⎠
frecuencia. La frecuencia se expresa en s-1.

PARTÍCULA: en algunos fenómenos se comporta como partícula. Este es el caso del

efecto fotoeléctrico, que podemos observar en una simple célula fotoeléctrica que abre
la puerta de un garaje cuando el haz de partículas es interrumpido por el coche que
entra.

La radiación electromagnética desde el punto de vista de partícula se estudia como un

flujo de partículas o "paquetes" de partículas denominados fotones. La energía de un
c
fotón depende de su frecuencia según la relación: E  h – N  h – 1
L
Se puede concluir que las radiaciones de menor longitud de onda son más
energéticas.

Ejemplo:

Los Rayos X (λ = 10-10 m) son unas 10000 veces más energéticos que la luz emitida por una
bombilla de filamento incandescente (λ = 10-6 m). La radiación emitida por una explosión
nuclear (radiación gamma) y una onda de telefonía móvil únicamente se diferencian en la
frecuencia, y por tanto en la energía.

2. Interacción de la materia con la radiación

Los átomos o moléculas pueden absorber radiaciones de una determinada longitud de
onda.
1 -34
h es la constante de Planck (6,63 · 10 Js)

325
Química y Análisis Químico

Cuando un átomo o molécula absorbe energía

pasa de su estado normal (M) a un estado
hν
M* M* excitado (M*). Este cambio se representa por:

M + hν → M* y se denomina absorción.
hν M M
Absorción Emisión Cuando un átomo o molécula pasa de su estado
excitado a su estado normal se representa como:

M* → M + hν y se denomina emisión.

3. Absorción de la radiación
Cuando pasa radiación a través de un medio sólido, líquido o gaseoso, pueden
eliminarse ciertas frecuencias por el proceso que se denomina absorción. Los objetos
"se ven" porque transmiten o reflejan parte de la radiación que les llega. Un jersey se
verá violeta (azul + rojo), porque transmite el color violeta, pero absorberá el color
complementario al azul y rojo, que es el amarillo.

La luz al pasar a través de un prisma se separa en colores cuyas longitudes de onda

son en nm: violeta (380-450), azul (450-495), verde (495-570), amarillo (570-590),
naranja (590-620) y rojo (620-750). Por encima del rojo está el infrarrojo (IR) y por
debajo de 380 nm está el ultravioleta (UV). Indicar que estas radiaciones no las
detecta el ojo humano.

Recordar que este fenómeno se puede observar en el arco iris al pasar la luz solar a
través de las finas gotas de agua.

Ley de Beer

Si hacemos pasar una radiación de longitud de onda constante monocromática a

través de una solución de concentración c, se cumple la ley de Beer que dice que la
“absorbancia de una solución es proporcional a la concentración y al camino óptico”,
que es la distancia que recorre la radiación en la solución.
A = a⋅b⋅c
donde:
A = absorbancia, igual a -log T, siendo T la
transmitancia, propiedad que relaciona la
potencia de la radiación de llegada a la solución,
Po y la potencia de la radiación emitida P.

c
a = absortividad específica, sólo depende de la
Po
P sustancia y de la longitud de onda. Si c se
Radiación b expresa en moles/l, a se llama absortividad molar
λ y se representa por ε.
Solución
b = camino óptico, viene a ser el ancho del
P recipiente donde está contenida la solución. Las
T= T = transmitancia
Po unidades se dan en cm.
c = concentración de la solución. Las unidades
pueden ser: g/l, mg/l…

326
 [Link]
Química y Análisis Químico

La Ley de Beer tiene sus limitaciones y no es aplicable a soluciones con

concentraciones superiores a 0,01 M, ya que a partir de esta concentración la relación
absorbancia-concentración no suele ser lineal.

Ejemplo:

Con un espectrofotómetro se determina la absorción de una muestra con una cubeta de 1 cm y

se encuentra que absorbe el 20% de luz a 520 nm. También se sabe que la absortividad a esa
longitud de onda es 2,0 l/ (g · cm). Indica: a) Transmitancia b) Absorbancia c) Concentración.

a) Si se absorbe el 20% de la radiación, quiere decir que se transmite el 80% de la radiación. El

porcentaje de transmitancia es de 100-20 = 80% =0,8.

b) Si aplicamos la relación de absorbancia-transmitancia:

1 1
A = log = log = 0 , 0969
T 0,8
c) Si aplicamos la Ley de Beer:
l 0 , 0969 g
A = a ⋅ b ⋅ c ⇒ 0 , 0969 = 2 ⋅ 1 cm ⋅ c ⇒ c = = 0 , 048 g / litro
g ⋅ cm 2 l

Aparatos

En todo espectrofotómetro podemos encontrar:

Fuente de radiación: una simple bombilla con filamento de tungsteno puede servir
como fuente de radiación para trabajar en la región del visible.

Para la región del ultravioleta se usa como fuente de radiación un tubo de descarga en
el que se encuentra un gas (hidrógeno o deuterio). Estas lámparas se agotan con el
tiempo y es necesario tomar la precaución de apagarlas si no se utilizan.

Selector de longitud de onda: se pueden utilizar simples vidrios coloreados como

son los filtros. A los aparatos que utilizan filtros se le denomina fotómetros. Los filtros
se eligen del color complementario a la solución. Si tenemos una solución de color
verde (amarillo + azul), elegimos un filtro de color rojo que es el complementario del
verde.

En los espectrofotómetros se utiliza el monocromador de prisma que consta de:

- Prisma: cuando pasa la radiación a través de un prisma se refracta y el efecto

es una separación en distintas longitudes de onda (colores).

- Rendijas de entrada y salida: se utilizan para restringir el paso a la radiación no

deseada.

- Lentes colimadoras: proporcionan un haz de radiación paralela

También se puede utilizar como monocromador una red de difracción, que consta de
una rejilla que dispersa la radiación incidente. Las rejillas de difracción llevan del orden
de 6000-12000 líneas (muescas) por cm. Se selecciona y se separa esta radiación
con rendijas y espejos cóncavos para obtener una radiación monocromática.

327
Química y Análisis Químico

Espejos
cóncavos

λ1
λ1 λ2
Red de Rendija
Lente λ2
colimadora Lente
difracción de entrada
Rendija Rendija focalizadora de salida
de entrada de salida

Monocromador de red Monocromador de prisma

Recipiente para la muestra: son cubetas de cuarzo o de vidrio de alta calidad. En

general son de un ancho de 1 cm, aunque puede haber de 2 y 0,5 cm. También
existen cubetas de plástico, pero sólo sirven para trabajar en el visible, no deben
utilizarse cuando se trabaja en la región del ultravioleta.

Detector de radiación: cuando el ojo humano es el detector y el cerebro el

amplificador el aparato se denomina colorímetro.

Una célula fotoeléctrica puede servir como detector. A más radiación mayor emisión
de electrones y por tanto más corriente. Tiene la ventaja de ser barata, pero el
inconveniente es que se "cansa" y no da siempre la misma respuesta. En su lugar en
los espectrofotómetros actuales se emplean los fototubos, que son múltiples células
fotoeléctricas que multiplican la radiación incidente.

Los espectrofotómetros pueden ser de:

- Simple haz: la radiación procedente de la fuente de radiación incide sobre la
muestra o sobre el disolvente (blanco). La posición de la cubeta se cambia para
hacer la medida.

- Doble haz: la radiación pasa a través de la muestra y el disolvente

alternativamente, comparándose continuamente el que pasa a través de la
muestra con el que pasa a través de la solución.

Disolvente
Detector
Obturador Atenuador Disolvente

Monocromador
> >
> >
Fuente Muestra Espejos
Fuente Filtro Muestra Detector
Espejo
rotor

Fotómetro de filtro Espectrofotómetro de doble haz

328
 Química y Análisis Químico

Método de Trabajo

El método de trabajo a seguir en los métodos espectrofotométricos es:


Selección de longitud de onda

Se toma una solución de concentración intermedia y se determina la absorbancia para

un intervalo de longitudes de onda (estos datos proporcionan el espectro de
absorción). Este barrido de longitud de onda se puede hacer automáticamente o
manualmente, seleccionando longitudes de onda a intervalos de 2, 5 ó 10 nm. La
longitud de onda óptima es aquella donde la absorbancia es mayor (transmitancia
menor). Si el aparato no es de doble haz, es necesario ajustar el cero cada vez que se
realice una medida a diferente longitud de onda.

Medida de la concentración de la muestra:

1. Se selecciona la longitud de onda recomendada en el procedimiento o la obtenida

experimentalmente por el método anterior.

2. Se ajusta el cero con el disolvente (suele ser agua con todos los componentes de la
muestra, pero sin ella).

3. Se mide la absorbancia de las soluciones patrón de concentración conocida, éstas

deben estar preparadas con sustancias lo más puras posible. Es importante que las
concentraciones estén en el rango donde se cumpla la ley de Beer (absorbancia
menor de 1,5), es decir, donde haya proporcionalidad entre A y C.

4. Se mide la absorbancia de la muestra. Si no entra dentro del rango de

concentración será necesario diluirla.

5. Se representa gráficamente absorbancia (ordenadas) frente a concentración

(abscisas) de los patrones y se ajusta mediante una recta. Esta recta representa la
curva de calibrado.

6. Se determina la concentración de la muestra, mediante la curva de calibrado.

Amáxima λóptima
Absorbancia

Absorbancia

Amuestra

C2

C1

C2 > C1
Cmuestra

Longitud de onda, nm Concentración

329
 [Link]
Química y Análisis Químico

FICHA DE TRABAJO Nº 43 ¬¥¢¬›¨

DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE HIERRO EN VINOS BLANCOS

1. INTRODUCCIÓN

Un alto contenido de hierro en el vino y poca acidez da lugar a una precipitación de compuestos de hierro
(tanatos y fosfatos), que se manifiesta en un enturbiamiento, denominado “quiebra férrica”. Este fenómeno
es particularmente importante en los vinos blancos.

2. FUNDAMENTO

El hierro oxidado por el agua oxigenada a ión férrico (Fe3+), en medio ácido, forma un complejo de color
rojo con el tiocianato que absorbe en la radiación visible a una L = 508 nm. Fe3+ + 2SCN- → Fe (SCN)2+
color rojo
3. MATERIALES-REACTIVOS

REACTIVOS MATERIAL

Ácido clorhídrico 36 % (concentrado)

Espectrofotómetro
Agua oxigenada 30 % p/v (concentrado)
Tubos de ensayo grandes (24 x 200)
Tiocianato de potasio 200 g/l.
con gradilla
Solución madre :100 mg/l Fe a partir de una solución de
Matraces aforados
la sal de Mohr (FeSO4 · (NH4)2SO4 · 6H2O )
Pipetas aforadas
Vino blanco

4. MODO DE OPERAR

1. Prepara 500 ml de la solución madre en matraz aforado a partir de la sal de Mohr. Esta disolución debe
contener del orden de 100 mg/l de Fe.

2. Prepara soluciones hijas que contengan 5, 10, 20, 25 mg/l de Fe eligiendo las pipetas y matraces
adecuados. Como ejemplo, si queremos preparar la solución de 20 mg/l tendremos que diluir la solución
madre 5 veces, que podría ser de 10 a 50.

3. Coloca 10 ml de cada una de las soluciones anteriores en los tubos de ensayo y añadirles por este
orden 1 ml de HCl concentrado 5 gotas de H2O2 30 % p/v y 1 ml de KSCN (200g/l). Agita y mantén
cerrados.

4. Procede del mismo modo añadiendo todos los reactivos, pero sin añadir solución madre para el blanco

5. Coloca 10 ml de vino en un tubo de ensayo y añade, por este orden, 1 ml de HCl concentrado 5 gotas
de H2O2 conc. y 1 ml de KSCN. Agita y mantén cerrados.

6. A continuación se calibra el aparato, siguiendo el procedimiento, aunque puede variar de un modelo a

otro:

- Ajusta el espectrofotómetro al 0 y al 100% de transmitancia a L = 508 nm. Si dispone de la medida de

transmitancia es mejor iniciar el aparato con esta medida ya que así podemos calibrar el aparato con dos
puntos, mientras que si medimos en absorbancia la puesta a punto del aparato se hace con un solo
punto.

- Pasa el mando a absorbancia (0-2) y comprueba el cero con el blanco. En caso necesario ajusta con el
mando de ajuste.

- Mide la absorbancia de cada una de las soluciones, comprobando el cero cada vez que se hace una
medida.

- Mide la absorbancia de la muestra de vino.

7. Representa absorbancia frente a concentración (mg/l Fe) en papel milimetrado y determina el contenido
en mg/l Fe.

330
 Química y Análisis Químico

5. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS

Peso FeSO4 · (NH4)2SO4 · 6H2O g
Volumen ml
 Concentración solución madre mg/l Fe
SOLUCIONES HIJA
Volumen solución madre, ml Volumen final, ml Conc., mg Fe/l Absorbancia
0 0 0

Muestra
Informe del resultado mg/l Fe

6. OBSERVACIONES

1. Es importante hacer todas las medidas inmediatamente después de preparar las soluciones. A
continuación se muestra un esquema del procedimiento.

Pesa FeSO4 · (NH4)2SO4 · 6H2O c = 100 mg/l Fe

2,3456

100

5 10 20 25

c= c= c= c=

100 100 100 100

BLANCO MUESTRA

10 ml 10 ml
10 10 10 10
agua vino
destilada blanco

- 1 ml HCl concentrado

- 5 gotas H2O2 concentrado

- 1 ml KSCN

Tubos
ensayo
Mide en el espectrofotometro a una λ = 508 nm las soluciones,
empezando por el blanco y midiendo de menor a mayor concentración

331
Química y Análisis Químico

FICHA DE TRABAJO Nº 44
DETERMINACIÓN DE NITRATOS EN AGUA. MÉTODO DE ABSORCIÓN EN EL ESPECTRO
ULTRAVIOLETA
¬¥¢¬›¨
1. INTRODUCCIÓN
El control de los nitratos en el agua es un parámetro importante, ya que contenidos superiores a 50 mg/l
son peligrosos para nuestro organismo. La causa principal de esta contaminación es por los fertilizantes
utilizados.

2. FUNDAMENTO

La medida de la absorción por los nitratos se produce en la zona UV a una longitud de onda de 220 nm.
La curva de calibración sigue la ley de Beer en el intervalo de 0-48 mg/l. Pueden existir interferencias
importantes (materia orgánica, nitritos...), por eso es necesario corregir la influencia de la materia orgánica
midiendo la absorbancia a 275 nm.

3. MATERIALES-REACTIVOS
REACTIVOS MATERIALES
Nitrato de potasio PA
Solución A (abuela): prepara una solución que contenga
Micropipeta automática 1-5 ml
3500 mg/l de N O 3 a partir de KNO3 PA
Matraces aforados
Solución B (madre): preparar una solución que contenga Pipetas aforadas
una concentración de 350 mg/l a partir de la solución A
Acido clorhídrico 1 N
4. MODO DE OPERAR

1. Prepara una serie de soluciones hija a partir de la solución madre, diluyendo 1, 2, 3 y 5 ml a 50 ml lo

que da lugar a un rango de concentración que va de 7 a 35 mg/l. Prepara estas soluciones con agua
ultrapura, o en su defecto con agua desionizada. Añade 1 ml de HCl 1 N y enrasa.
2. Toma 10 ml de muestra (agua de pozo, filtrada si es necesario a través de una membrana de 0,45 Mm)
y llevar a un matraz de 50 ml. Añade 1 ml de HCl 1 N y enrasar. El blanco se hace de la misma forma,
pero sin muestra. Mide la absorbancia de las todas las soluciones a 220 nm y a 275 nm

3. Representa la absorbancia a 220 nm - 2 veces la absorbancia a 275 nm frente a la concentración en

nitratos, expresada en mg de N en papel milimetrado
4. Calcula el contenido en nitratos, mediante comparación con la curva de calibrado, teniendo en cuenta
el factor de dilución.
5. EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS
Peso KNO3 g
Volumen ml
Concentración solución “abuela” = mg/l N
Volumen solución Concentración
Volumen final
“abuela” solución madre, mg

SOLUCIONES HIJA
Volumen solución Volumen Concentración
A220 A275 A220 - 2A275
madre, ml solución hija, ml mg N/l
0 0 0 0 0

Muestra
Volumen muestra ml
Factor de dilución
mg/l N
Informe del resultado
mg/l N O 3

332
 [Link]
Química y Análisis Químico

 3500 mg/l
−
N O3
Utiliza agua desionizada
para todas las diluciones

350 mg/l
−
N O3

1 ml 2 ml 3 ml 5 ml 10 ml
Muestra

(agua pozo)

50

1 ml HCl 1N

50 50 50 50 50
Muestra
Blanco

6. OBSERVACIONES

1. En caso de que la muestra no entre dentro del rango de calibración, es necesario hacer una dilución
mayor, hasta que entre en el rango.

2. En cada medida comprobar el blanco y si es necesario ajustar.

4. Absorción atómica. Fotometría de llama

Una técnica similar a la anterior en los métodos de trabajo es la Absorción atómica. En
ésta, una muestra es aspirada a una llama, donde se evapora el disolvente. Con este
proceso se consiguen átomos individuales que absorben una radiación producida por
una lámpara de cátodo hueco, que emite una radiación selectiva debido a que tiene
como cátodo emisor de radiación el mismo elemento que se va a analizar.

333
Química y Análisis Químico

En esta técnica se analiza la radiación absorbida que está relacionada con la

concentración de átomos existente en la muestra (Ley de Beer).

Es una técnica muy versátil y se utiliza ampliamente en el análisis de elementos ya

que es más rápida que las gravimetrías. El método de trabajo es similar al visto
anteriormente:

1) Se prepara una curva patrón con soluciones de concentración conocida en las

mejores condiciones de absorción. Para ello se debe ajustar la llama y la
lámpara, aunque actualmente estos procesos vienen automatizados.

2) Se analiza la muestra, comparando su absorción con la curva patrón:

Otro método de trabajo es el método de adición estándar, que consiste en:

Muestra 1) Se mide la absorción de una muestra que se diluyó

llevando una alícuota (Vm) de muestra a un volumen
V ⋅C
total V ⇒ A m = K ⋅ m m donde K es una constante
Cm V
que engloba todos los parámetros de la determinación

Vm Vm 2) Se añade un volumen conocido (Vs) de

Vs concentración conocida (Cs) a un volumen de muestra
Cs (Vm) y se lleva todo al mismo volumen V, midiendo la
V ⋅ C + Vs ⋅ Cs
absorción, resultando A m + s = K ⋅ m m .
V
Dividiendo una ecuación por otra, teniendo en cuenta
C Cm+s que la determinación, se hace en las mismas
V V condiciones, por tanto K es igual, se despeja Cm
Am C ⋅V
Método de adición estándar quedando: C m = ⋅ s s
A m+ s − A m Vm

Monocromador

Espejo
Lámpara de Mechero Detector
semiplateado
cátodo hueco Espejo
rotatorio

Esquema de un espectrofotómetro de absorción atómica

Ejemplo:

Se destruyó la materia orgánica por vía húmeda de 20 ml de una muestra de un aceite

lubricante usado y a continuación se diluyó a 100 ml en matraz aforado. De aquí se tomó una
alícuota de 25 ml con pipeta aforada y se llevó a 50 ml. A otra alícuota de 25 ml se le añadió 10
ml de una solución estándar de cromo (VI) con una concentración de 2 mg/litro. Las dos

334
 Química y Análisis Químico

soluciones fueron aspiradas en una llama de aire-acetileno produciendo a 357,87 nm una

absorción de 0,525 y 0,692 respectivamente.

Determina el contenido en mg/litro de cromo en el aceite.

20 ml muestra
Aplicando la ecuación anteriormente deducida:
Am C ⋅V
Cm = ⋅ s s =
Am +s − Am Vm
100 Cm
0,525 2 mg Cr / l ⋅10 ml
= ⋅ = 2,52 mg / l Cr
0,692 − 0,525 25 ml
25 ml 25 ml
Debido a que hay dilución aplicamos la ecuación:
10 ml
2 mg/l Cr V ⋅ C = V '⋅ C' , despejando C que es la
concentración de la muestra sin diluir:

V ' · C' 100 ⋅ 2,52

C= = = 12,57 mg / l Cr
C Cm+s V 20
A = 0,525 A = 0,692

Fotometría de llama

Existen algunos elementos del grupo de los alcalinos y alcalinotérreos que al ser
aspirados en una llama producen una emisión de radiación. La emisión de la radiación
se relaciona con la concentración.

Para análisis rutinarios de sodio y potasio se utiliza un fotómetro de filtro y los métodos
de trabajo son análogos a los vistos anteriormente.

335
 [Link]
Química y Análisis Químico

Cuestiones y problemas resueltos

1. La región que más se emplea en análisis infrarrojo es de 2 a 15 μm. Expresa este
 intervalo en nanómetros (nm)

Respuesta:
Se trata de una cuestión de cambio de unidades, teniendo en cuenta las siguientes
equivalencias:

1 nm = 10-9 m
1 μm = 10-6 m
1 nm → 10-9 m
2 ⋅ 10 −6
x → 2 · 10-6 m; x = = 2000 nm
10 −9
El intervalo estaría comprendido entre 2000 -15000 nm. Es interesante resolver este
problema también por factores de conversión:
10 −6 m 1nm 10 −6 m 1nm
2 μm = 2 μm ⋅ ⋅ −9 = 2000 nm ; 15 μm = 15 μm ⋅ ⋅ = 15000 nm
1μm 10 m 1μm 10 −9 m

2. Indica las fuentes de radiación en el visible y en el UV

Respuesta:
Para el visible: lámpara de tungsteno; para el ultravioleta: lámpara de deuterio.

3. Cuáles son las unidades de absortividad cuando la concentración se da en mg/l.

Respuesta:
A l 1
Si aplicamos la Ley de Beer A = a · b · c y despejamos a = ==
b⋅cg g ⋅ cm
cm ⋅
l
4. El color de una solución se debe a la luz de longitud de ondas que no han sido
absorbidas y se elige el filtro que parezca tener el color complementario. ¿Qué filtro
emplearíamos para determinar la absorbancia de una solución de color roja?
Respuesta:2
El filtro que emplearíamos sería aquel que transmitiera las radiaciones azules y
amarillas, que son las que absorbe la solución, sería de color azul + amarillo = verde.

5. Cómo se denominaría el equipo empleado en la cuestión anterior.

Color observado Color complementario

Violeta Verde-amarillento
Azul Amarillo
Azul – verdoso Anaranjado
Verde – azulado Rojo
Verde Púrpura
Verde – amarillento Violeta
Amarillo Azul
Anaranjado Azul – verdoso
Rojo Verde –azulado

336
 Química y Análisis Químico

Respuesta:
Por el hecho de emplear filtros como selector de longitud de onda, el equipo se
denomina fotómetro.

6. Qué significan las siglas : nm, UV, IR, AA, λ, ε
Respuesta:

nm: nanómetro; UV: ultravioleta; R: Infrarrojo; AA: Absorción atómica; λ: longitud de
onda; ε: absortividad molar

7. Un endoscopio es un aparato de...

Respuesta:
Observación
8. Un compuesto con masa molecular de 280 g/mol absorbió el 65% de la radiación
incidente a cierta longitud de onda en una celda de 2 cm a una concentración de
150 mg/l. Calcula la absortividad molar a esa longitud de onda.

Respuesta:

Aplicando la Ley de Beer y teniendo en cuenta que si absorbe el 65% radiación

transmite el 35%, por tanto: T = 35%; A = -log T = -log (0,35) = 0,456
Para poder determinar la absortividad como absortividad molar la concentración
deberá expresarse en moles/litro (M)
0,15 g
280 g / mol
M= = 5, 36 ⋅ 10 − 4 mol/l .
1litro
A 0,456 l
A = a⋅b⋅c ⇒ a = = −4
= 425,6
b ⋅ c 5,36 ⋅ 10 moles / l ⋅ 2 cm mol ⋅ cm

En la bibliografía la absortividad molar se designa por el símbolo ε.

9. Una solución 1,04 · 10-4 M del complejo de hierro Fe (SCN)2+ tiene una absorbancia
de 0,726 a 580 nm, medida en una cubeta de 1 cm. Calcula:
a) El porcentaje de transmitancia de esta solución
b) La absortividad molar del complejo a esta longitud de onda
c) El espesor de la cubeta necesario para igualar la absorbancia de esta solución con
otra del mismo complejo 4,16 · 10-5 M
d) La absorbancia de una solución 3,64 · 10-5 M del complejo cuando se mide en una
cubeta de 1,50 cm.
Respuesta:
a) Relacionando absorbancia con transmitancia:
A = − log T ⇒ T = anti log (− A ) = anti log (− 0, 726 ) = 0, 188 , que expresado en %
T(%) = 18,8 %

A 0,726 l
b) A = ε ⋅ b ⋅ c ⇒ ε = = −4
= 6980,8
b ⋅ c 1 cm ⋅ 1,04 ⋅ 10 moles / l mol ⋅ cm

337
Química y Análisis Químico

c) Si las absorbancias son iguales quedaría:

b ⋅ c 1cm ⋅ 1,04 ⋅ 10 −4 moles / l
A1 = A 2 ⇒ ε1 ⋅ b1 ⋅ c1 = ε 2 ⋅ b2 ⋅ c 2 ⇒ b2 = 1 1 = = 2,5 cm
c2 4,16 ⋅ 10−5 moles / l

Se han simplificado las absortividades, ya que son iguales porque la absortividad
depende sólo de la longitud de onda y del tipo de sustancia. En este caso, la sustancia
es la misma y la longitud de onda a la que se miden las dos soluciones es también la
misma: 580 nm.
l mol
d) A = a ⋅ b ⋅ c ⇒ A = 6980, 8 ⋅ 1, 5 cm ⋅ 3, 64 ⋅ 10 − 5 = 0, 381
mol ⋅ cm l

10. El fósforo de la orina puede determinarse tratándolo con Mo (VI) y reduciéndolo al

complejo de fosfomolibdato con ácido aminonaftolsulfónico para dar el color
característico del azul de molibdeno. Este absorbe a 660 nm. Se trató una alícuota
de 1 ml de orina con reactivo de molibdato y ácido aminonaftolsulfónico y se diluyó
a un volumen de 50,0 ml. Se trataron de manera similar una serie de estándares de
fosfato. Se midió la absorbancia de las soluciones contra un blanco y se obtuvieron
los siguientes datos.

Solución (mg P/l) Absorbancia

1 0,2
2 0,41
3 0,61
4 0,82
muestra de orina 0,63

a) Calcula la concentración de fosfatos en la orina en mg/litro

Respuesta:
a) Para resolver este problema es necesario representar gráficamente la absorbancia
frente a concentración. Se debe incluir el 0 de absorbancia para una concentración
cero, que es el blanco utilizado para ajustar el espectrofotómetro.
Sustituyendo el valor de la absorbancia de
0,9 0,63 en la curva de calibrado obtenemos
0,8 una concentración de 3,1 mg/l P. La
0,7 concentración en la orina sería:
0,6
V1 ⋅ C1 = V2 ⋅ C 2 ⇒
Absorbancia

0,5
0,4 50 ⋅ 3,1mg / l
C1 = = 0,155 mg / l
0,3 1ml
0,2 .

0,1 Y la concentración de fosfatos será según

0 relación de pesos:
0 1 2 3 4 5 P → P O 34−
Concentración (mg P/litro)
31 g P → 95 g P O 34−
0,155 ⋅ 95
0,155 g P → x ; x= = 0,475 g P O 34−
31

La concentración sería de 475 mg/litro de P O 34− .

338
 [Link]
Química y Análisis Químico

EXAMEN PRÁCTICO DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL (CICLO FORMATIVO

TÉCNICO DE LABORATORIO)
¬¥¢¬›¨
Determinación espectrofotométrica del contenido en manganeso de un acero

1) Prepara 250 ml de solución de permanganato de potasio 0,01 N lo más exacto

posible, pesando en la balanza analítica, o bien, se puede preparar a partir de una
solución de KMnO4 0,1 N previamente normalizado con Na2C2O4.

2) Calcula la concentración en mg Mn/l de la solución anterior

3) Prepara soluciones hija con la bureta y matraces de 100 añadiendo 5, 10, 15, 20 ml
de la solución anterior (si se utilizan matraces de 50 ml utilizar volúmenes de 3, 5, 7 y
10).

4) Mide las soluciones patrón a una L = 540 nm y representa la curva de calibrado de

absorbancia frente a mg/l Mn.

5) Determina el contenido en Mn de un acero: se pesan en balanza analítica de 0,25-

0,3 g de acero y se coloca en vaso de 250 ml, añade 20 ml de agua y 5 ml de ácido
nítrico. Hierve lentamente con vaso cubierto hasta que se disuelva, reponer agua
evaporada. Hierve durante 1 ó 2 minutos, retira la muestra del calor y añade 0,5 g de
persulfato de amonio. Hierve lentamente durante 10 minutos. Diluye con 25 ml de
agua, añade 15 ml de fosfórico y 0,2 g de peryodato de potasio. Hierve la disolución
suavemente durante unos 5 minutos para desarrollar el color, si este color no aparece
añade más peryodato para asegurar la oxidación completa. Enfría la disolución y
transfiérela cuantitativamente a un matraz aforado de 100 ml. Determina la
absorbancia.

6) Mediante la gráfica determina la concentración en mg/l Mn de la solución

7) Calcula el contenido en Mn del acero expresando el resultado en % Mn p/p)

Peso KMnO4 = g
Volumen = ml
Concentración = mg/l KMnO4
Concentración solución madre = mg/l Mn
SOLUCIONES HIJA
Volumen (ml) Concentración (mg Mn/l) Absorbancia
0 0 0

Peso muestra g
Absorbancia muestra Concentración (mg Mn/l)
Muestra
Porcentaje Mn, % p/p

339
 Química y Análisis Químico

Índice UNIDAD DE TRABAJO Nº 18

MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS

1. Clasificación
Los métodos cromatográficos son métodos que sirven para:
- Separar: separan las sustancias presentes en mezclas complejas, difícilmente
determinables de otra manera. Así, se puede diferenciar el jamón procedente de
alimentación con pienso del alimentado con bellota, con el análisis por
cromatografía de los ácidos grasos.
- Identificar: se identifican las sustancias comparando el tiempo de desarrollo
(retención) de los componentes desconocidos con el que presentan sustancias
patrón.
- Determinar: se determina la cantidad de componente comparando la señal del
componente con la señal que proporciona un patrón de concentración conocida.
En los métodos cromatográficos podemos distinguir dos fases: la fase estacionaria que
puede ser sólida o líquida y la fase móvil que puede ser gaseosa o líquida. Una
clasificación, según las fases, la podemos ver en la siguiente tabla:

Fase estacionaria Fase móvil Cromatografía Siglas

Líquida Gaseosa Gas-Líquido CGL
Líquida Líquida Líquida CL, CC, HLPC
Sólido Líquida Plana CP, CCF, CII
CGL: Cromatografía gas-líquido
CL: Cromatografía líquida
CC: Cromatografía Columna
HPLC: Cromatografía líquida alta resolución.
CP: Cromatografía plana, Cromatografía sobre papel
CCF: Cromatografía capa fina
CII: Cromatografía de intercambio iónico

2. Cromatografía líquida en columna

Los componentes de una mezcla se separan pasando un disolvente (eluyente) con la
suficiente polaridad para arrastrarlos al fondo de la columna. En la cromatografía en
columna disponemos de:
ADSORBENTE: entre los adsorbentes tenemos los siguientes, ordenados de menor a
mayor actividad: celulosa < almidón < azúcar < silicato de magnesio < óxido de
magnesio < gel de sílice < alúmina < carbón activado. Los adsorbentes más utilizados
son:
- Alúmina (Al2O3): el óxido de aluminio es un adsorbente muy polar con un área
superficial del orden 150 m2/g. Contiene del orden de 3% de agua y el grado de
actividad depende de esta cantidad. Se puede regenerar deshidratándolo a
360oC durante 5 horas.
- Gel de sílice (H2SiO3): fase muy polar con un área del orden de 500 m2/g.
Menos activo químicamente que la alúmina, prefiriéndose cuando se trata con
compuestos orgánicos activos. La gel de sílice es muy estable a pH ácidos o
neutros, pero a pH básicos, superiores a 7,5, se disuelve.

341
Química y Análisis Químico

Muestra Disolvente

A+B
 Muestra
A
B

A
Adsorbente
B
A
Detector

B A
Tapón
lana de vidrio
Señal

Eluyente
B A

Tiempo, t

La fuerza con la que se adsorbe una molécula depende de la polaridad de la

molécula, polaridad del adsorbente y polaridad de la fase móvil.

En general, cuanto más polar sea un componente más fuertemente será adsorbido. La
polaridad aumenta entre los compuestos: alcanos < alquenos < éteres < ésteres
≈ cetonas ≈ aldehídos < alcoholes ≈ aminas < agua,

DISOLVENTE (eluyente): entre los disolventes utilizados en orden de menor a mayor

polaridad están: éter de petróleo < tetracloruro de carbono < benceno < cloroformo <
éter < acetonitrilo < piridina < acetona < etanol < metanol < agua < ácido acético.

En general, la cromatografía en columna utiliza un adsorbente polar tal como alúmina

o silica gel y una fase móvil no polar. A ésta se la denomina cromatografía en fase
normal, en este tipo, el componente menos polar eluye primero y si se aumenta la
polaridad de la fase móvil disminuye el tiempo de elución.

Cuando la fase estacionaria o adsorbente es no polar y la fase móvil es polar se

denomina cromatografía en fase inversa. En este tipo, el componente más polar eluye
primero y si aumentamos la polaridad de la fase móvil aumentamos el tiempo de
elución.
Ejercicio:

Indica en qué orden eluirán los siguientes compuestos de una columna que contiene un relleno
no polar y utiliza como fase móvil un disolvente polar: acetona, benceno, acetamida, hexano.

La cromatografía de este tipo se denomina cromatografía de fase inversa, ya que

históricamente se utilizó primero la fase normal en la que la fase estacionaria era polar. El
orden de elución será: cuanto menos polar sea el compuesto, más se retendrá en la fase no
polar, por aquello de “semejante disuelve a semejante”. El orden de polaridad en este caso es:
acetamida > acetona > benceno > hexano y el orden de elución será: 1º acetamida, 2º acetona,
3º benceno y 4º hexano.

342
 [Link]
Química y Análisis Químico

Aspectos prácticos:

1) Se prepara la columna, que es una columna de vidrio con llave de regulación, pero también
puede utilizarse una bureta de vidrio. Lleva en el fondo vidrio fritado o si la preparamos
podemos poner fibra de vidrio y encima una pequeña capa de arena (1 cm). El relleno de la
columna debe estar uniformemente distribuido, sin que haya burbujas de aire. Para ello puede
prepararse una papilla con el mismo disolvente de elución y añadirla golpeando suavemente la
columna para liberar las burbujas y así obtener un relleno más uniforme. Un disolvente
adecuado para sistemas no polares es el isooctano.

Si se preparara una columna empacada seca, es necesario cubrir el adsorbente

inmediatamente con disolvente y no dejar evaporar el disolvente. Si se desarrolla calor durante
este proceso es necesario dejar enfriar la columna antes de cualquier operación. La relación
altura/diámetro de las columnas debe ser como mínimo 20/1. La cantidad de adsorbente estará
comprendida entre 50-100 g de adsorbente por gramo de muestra.

2) Se coloca un pequeño volumen de muestra disuelto en la parte superior de la columna. Para

que la muestra se introduzca uniformemente se puede hacer de dos maneras:

a) Haciendo una papilla con el propio adsorbente y colocándola en la cabeza de la columna

b) Colocando un disco de papel de filtro en la cabeza y añadiendo la muestra sobre este papel.

3) A continuación se procede a la elución con el disolvente elegido. La elución se efectúa con

un disolvente análogo al empleado en la disolución de la muestra.

4) Se recogen alícuotas de volúmenes iguales de eluyente en tubos de ensayo individuales, a

intervalos regulares. Las porciones recogidas se secan por la evaporación del disolvente,
obteniendo así en el mejor de los casos, los componentes separados.

5) A continuación se analizan por separado los contenidos de cada tubo; el área bajo cada pico
será proporcional a la cantidad de soluto. Cuando la velocidad del disolvente es constante se
puede automatizar el proceso de recolección de muestras.

Esta cromatografía es la que da el nombre a la técnica y se utilizó por primera vez en la

separación de los componentes de la clorofila de las plantas.

3. Cromatografía líquida alta resolución

La cromatografía líquida de alta resolución es conocida con las siglas HPLC (high-
performance liquid chromatography) y es también llamada cromatografía líquida de
alta presión (high-pressure liquid chromatography).

Esta técnica procede del desarrollo de la cromatografía en columna. Al principio, para

disminuir el tiempo de elución se optó por:

- Disminuir el tamaño de las columnas: al disminuir su altura disminuía la

resolución.

- Disminución del tamaño de partícula del relleno: al hacerlo se conseguía

mejorar la resolución, pero aumentaba el tiempo de elución. Por tanto, la
recomendación sería utilizar columnas pequeñas y adsorbentes con diámetro de
partícula pequeño, pero no se resolvía el tema del tiempo de elución.

La solución para disminuir el tiempo de elución fue utilizar altas presiones, ya que el
vacío daría más problemas al utilizar compuestos volátiles.

343
Química y Análisis Químico

Equipo
Para conseguir una velocidad adecuada de la fase móvil con partículas de diámetro de
3-10 μm se necesitan bombas de alta presión, que sean capaces de desarrollar
presiones del orden de 400 atmósferas y mayores, consiguiendo flujos entre 0,5 y
4 ml/minuto. Hay dos tipos de bombas:

- Desplazamiento continuo: un émbolo fuerza al disolvente a desplazarse dentro

de un cilindro. Este tipo de bombas proporciona un flujo lineal y libre de
impulsos (análogo al émbolo de una jeringuilla), sin embargo, la ejecución del
cromatograma, está limitada a la cantidad de solvente que se encuentra en el
interior del cilindro, siendo necesario parar y recargar cuando se agota el
disolvente.
- Desplazamiento intermitente: en este caso usa un simple pistón con movimiento
alternativo y pueden tener una o dos cámaras de bombeo. Este tipo de bombas
introduce una pequeña fluctuación en la línea base, al no ser el flujo continuo.
No obstante, se suelen disponer dos bombas de este tipo en ángulo de 180o y
mientras una carga la otra descarga.

Columna

Depósitos
Válvula disolvente
Válvulas
Bomba proporcionales
Válvula Bomba
simple pistón
Horno Amortiguador
Detector impulsos
Muestra
Válvula
Columna Pre-columna Válvula
inyección
Depósito Registrador
disolvente Recogida
fracciones

Bomba desplazamiento alternativo Componentes básicos de un equipo HPLC

La fase móvil puede pasar a través de la columna en forma:

- Isocrática: en que la elución del disolvente o mezcla de disolventes permanece

constante durante la ejecución del programa.

- Gradiente: la composición de la fase móvil varía durante la ejecución del

programa. Variando la composición de la mezcla de disolventes se mejora la
resolución de los componentes de la muestra y se reduce el tiempo de análisis.

La inyección se hace con jeringa a través de un septum de goma, aunque este

sistema se emplea sólo cuando las presiones son inferiores a 100 atmósferas.
En este caso se detiene el flujo de disolvente mediante una válvula y a
continuación se inyecta, volviendo a circular el disolvente que arrastra la
muestra hacia la columna. Esta técnica, aunque se sigue usando, no es muy
recomendable, por las altas presiones de la columna y la rápida degradación de
los materiales del septum por la fase líquida.

344
 Química y Análisis Químico

Muestra Muestra


Bucle Bucle
Purga Purga

Columna Columna

Disolvente Bucle Disolvente

Bucle
Muestra
Columna Columna
Disolvente Disolvente Disolvente
más muestra
Posición de carga Posición de inyección

- La inyección de la muestra puede realizarse también mediante una válvula de

muestreo: consiste en una válvula rotatoria, que contiene varios puntos y un
bucle por donde circula la muestra. Cuando la válvula está en una determinada
posición se carga la muestra en el bucle; a continuación se inyecta la muestra
cuando la válvula se gira de nuevo y se sitúa en posición de inyección.

Todos los componentes de la muestra deben ser solubles en el disolvente, por tanto
es recomendable disolver la muestra en el mismo disolvente de elución.
Las columnas HPLC empacadas con partículas de pequeño diámetro requieren altas
presiones para forzar el líquido a pasar a través del lecho. Presiones del orden de 680
atmósferas utilizan columnas de diámetros de 2-3 mm. Las columnas son
normalmente de un tamaño de 4-6 mm de diámetro por 5-25 cm de longitud y son de
diversos materiales, siendo el más usado el de acero inoxidable AISI-316. Se pueden
utilizar de vidrio para presiones bajas (100 atm) y también pueden ser de titanio
cuando los compuestos ataquen el acero inoxidable.

Los lechos de partícula son bolas de vidrio de 20-50 μm de diámetro y son

comercializadas con aproximadamente 1 μm de material poroso en la superficie. Esta
superficie porosa consigue que el líquido forme una fina capa alrededor de las
partículas. En algunas columnas se recomienda el uso de una precolumna para
protegerla de componentes no deseables que pueda contener la muestra, se
suministran con un test de compuestos, para reproducir las condiciones de
funcionamiento. Los detectores son de cinco tipos:
1) Ultravioleta, que aprovecha que muchos compuestos orgánicos con dobles enlace
absorben en esa zona del espectro. La longitud de onda es de 254 nm. No obstante,
existen compuestos que absorben fuertemente en el UV, pero no pueden utilizarse
porque saturan la respuesta del detector. También se utilizan otras longitudes de onda
214, 229, 280, 308, 360, 410, 440 y 550 nm.
2) Refractómetro diferencial: compara el índice de refracción entre el disolvente antes
de entrar en la columna y el disolvente con la muestra a la salida de la columna.
3) Fluorescencia: están basados en la fluorescencia que presentan algunos efluentes.
Son detectores muy sensibles pero también muy selectivos. La fluorescencia se mide
mediante una fotocélula.

345
 [Link]
Química y Análisis Químico

4) Conductividad: estos detectores se utilizan para la detección de iones y son más

bien utilizados en la cromatografía de intercambio iónico.

5) Diodo array o multicanal son detectores que pueden hacer un barrido en longitud de
onda de la muestra, lo que hace que se incremente su selectividad y su sensibilidad.

Fase móvil

Uno de los mayores problemas en HPLC es la formación de burbujas, especialmente

en el detector, para eliminarlas se recomienda desgasear la fase móvil con helio.

Para eliminar las partículas que puedan dañar la columna o incrementar la presión del
sistema se utilizan dos métodos: pasar el disolvente a través de una membrana de
Nylon o de PTFE (teflón) de 0,20 μm-0,45 μm de diámetro de poro y utilizar filtros
dentro de los recipientes de disolvente y antes de la entrada a la bomba. Estos filtros
son de acero inoxidable con una porosidad de 2 -10 μm y conviene cambiarlos y
limpiarlos cada 6 meses.

4. Cromatografía sobre capa fina

El adsorbente está soportado sobre una superficie plana (vidrio, plástico). La elución o
desarrollo del cromatograma se consigue por el movimiento capilar ascendente del
disolvente a través de la capa fina del adsorbente.

Los adsorbentes más usados en capa fina son: gel de sílice y celulosa. En cuanto a la
elección del disolvente adecuado se tendrán en cuenta las mismas reglas que en
cromatografía en columna. La visualización del cromatograma depende de:

- Si los compuestos son coloreados basta con una inspección ocular, como en la
separación de indicadores o de tintas.

- Si los compuestos no son coloreados es necesario el revelado, que consiste en

hacer visible las manchas de los componentes. Esto se consigue por exposición
a la luz ultravioleta, vapores de yodo, carbonización con ácido sulfúrico (100oC)
y mediante la adición de reactivos usados en el análisis funcional. Así, se utiliza
el FeCl3 para detectar fenoles, la ninhidrina para detectar aminoácidos…

Si la cromatografía se realiza igual que las sustancias “testigo” sirve para identificar los
componentes. Para ello se define el Rf que es la relación:

desplazamiento del componente a

Rf = =
desplazamiento del frente del disolvente b

donde las distancias se miden desde el centro de la mancha colocada en la parte

inferior del papel y el centro de la mancha que se produce como consecuencia de la
separación. El frente del disolvente será la línea que quede en la parte superior del
papel.

Se observa que Rf ≤ 1 y la precisión con que se mide es suficiente para poder

identificar los componentes con valores tabulados de Rf, siempre que se realice la
separación en las mismas condiciones.

346
 Química y Análisis Químico

Ejercicio:

Para identificar los aminoácidos de un zumo de naranja se siguió el siguiente procedimiento:


Se exprimió la fruta y se filtró. De aquí se tomó 2 ml de zumo y se añadió 5 ml de etanol para
precipitar las proteínas y las sales y se vuelve a filtrar. A continuación se aplicó una gota del
filtrado en una placa 20 cm x 20 cm recubierta de silica gel. También se aplicaron algunos de
los aminoácidos presentes en la fruta como patrones. Se desarrolló la placa utilizando como
disolvente una mezcla de butanol-ácido acético-agua en la proporción de 80/20/20 en volumen
(ml). Una vez desarrollada la placa el frente de disolvente alcanzó los 14 cm. Se sacó la placa y
se reveló con ninhidrina al 0,3 % en butanol. A continuación se seca en estufa hasta la
aparición de manchas. Se midió la posición de cada mancha y los resultados fueron:

Patrones Muestra
Aminoácido Mancha Posición, cm Mancha Posición, cm
Ácido aspártico 1 2,8 1 2,9
Alanina 2 4,1 2 3,8
Valina 3 5,6 3 5,6
Fenilalanina 4 6,9 4 6,8
Triptófano 5 7,3 - -

Identifica cada uno de los aminoácidos.

Para resolver el problema determinamos todos los valores de Rf. Así, para el ácido aspártico el
valor de:

a 2 ,8
Rf = = = 0,20 y para la mancha del zumo es:
b 14
2 ,9
Rf = = 0,207 = 0,21 prácticamente el mismo valor que el ácido aspártico.
14

Los demás resultados se muestran en la tabla:

Patrones Muestra
Aminoácido Mancha Posición, cm Rf Mancha Posición, cm Rf
Ácido aspártico 1 2,8 0,20 1 2,9 0,21
Alanina 2 4,1 0,29 2 3,8 0,27
Valina 3 5,6 0,40 3 5,6 0,40
Fenilalanina 4 6,9 0,49 4 6,8 0,49
Triptófano 5 7,3 0,52

Concluyendo que la muestra tiene los siguientes aminoácidos: ácido aspártico, alanina
(dudosa), valina y fenilalanina.

Una manera de confirmar que realmente la sustancia separada es la alanina es añadirle una
cantidad de ésta a la muestra, volver a desarrollar el cromatograma en las mismas condiciones
y ver si aparece alguna mancha diferente a las cuatro resueltas. Si no aparece, es que el
aminoácido identificado es alanina. También debería aparecer mayor superficie de mancha.

347
Química y Análisis Químico

Aspectos prácticos en la preparación de placas1

1) Antes de preparar la mezcla, trata el vaso donde se va a hacer la mezcla y la varilla de

agitación con una sustancia hidrofóbica como el dimetildiclorosilano. Para ello, disuelve 2 ml de
dimetildiclorosilano en 100 ml de tolueno y enjuaga todo el vidrio. Finaliza enjuagando todo el
material con metanol y agua destilada.

2) Se prepara una papilla con las cantidades que nos indique el fabricante del equipo de
aplicación. En la tabla se dan los espesores y las cantidades para formar la papilla con gel de
sílice:
Masa adsorbente,
Espesor μm Agua, ml
g
150 3 6
250 5 7
375 7,5 15
500 10 18

3) Agita durante al menos 5 segundos la papilla.

4) Pon un vidrio limpio y seco sobre un papel de filtro. Añade la papilla sobre el borde inferior y
desplaza la varilla de vidrio a lo largo del vidrio con un movimiento constante y sin darla vuelta.
Hay en el mercado mecanismos aplicadores que aseguran un grosor de película uniforme.

5) Se seca la placa calentándola en una estufa a 90oC durante 1 hora. Se sacan y se

conservan, si es posible, en un desecador.

6) Se aplica con una micropipeta, a 1 cm del extremo inferior de la placa, la muestra a

desarrollar en forma de disolución utilizando un disolvente volátil. Se deja evaporar el
disolvente antes de introducir la placa en la cámara de desarrollo. Se obtienen mejores
resultados con gotas pequeñas que con gotas grandes.

7) Se coloca la placa en la cámara de desarrollo con la parte sin cubrir apoyada en la superficie
de la cámara. También se pueden introducir dos placas que se apoyen una contra otra y
sujetar mediante un clip. El disolvente de la cámara no debe cubrir la posición de la muestra

8) Se procede al desarrollo de la mezcla y se debe dejar hasta que el disolvente recorra

aproximadamente las ¾ partes del total del camino a scendente en la placa.

9) Se sacan las placas de la cámara de desarrollo y se dejan secar al aire.

10) Se revelan las manchas por alguno de los métodos descritos. Si se encuentran valores de
Rf < 0,4 el cromatograma debe repetirse en otras condiciones para aumentar la resolución.

Hay que indicar que esta técnica, por su sencillez, se utiliza ampliamente en pruebas periciales
(drogas, tintas...)

Aplicador

Placas de vidrio

Aplicación de la muestra
con micropipeta Cámara de desarrollo

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Aunque lo más habitual es comprar las placas preparadas, se incluyen algunas recomendaciones para el caso que
interese su preparación.

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