ble . En segundo lugar, el amoníaco desplaza al grupo fosfato .
para transformarla en glutamina (Glu-NH 2 ). Dado que el Evaluación de conceptos
proceso completo resulta exergónico, ocurre de forma espon-
tánea (fig. 8- 10). 1. En la mayor parte de los casos, ¿de qué manera el ATP
transfiere energía desde los procesos exergónicos a los
endergónicos dentro de la célula?
La regeneración de ATP
2. ¿Cuáles de los siguientes grupos tiene más energía libre:
Un organismo que trabaja emplea ATP de forma continua, ácido glutámico + amoníaco + ATp, o glutamina + ADP +
pero el ATP es una fuente renovable que puede regenerarse por ® ,? Explique su respuesta.
la adición de fosfato al ADP (fig. 8-12). La energía libre reque-
Véanse las respuestas en el Apéndice A.
rida para fosforilar ADP proviene de las reacciones de degrada-
ción exergónicas (catabolismo) de la célula. Esta ida y vuelta
del fosfato inorgánico y de la energía se llama ciclo del ATP y
acoPla los procesos generadores de energía (exergónicos) con
los que la consumen (endergónicos). El ciclo del ATP se realiza
. ,
Concepto
a un ritmo asombroso. Por ejemplo, una célula muscular que
está realizando trabajo recicla su depósito completo de ATP en
menos de un minuto. Este recambio representa 10 millones de Las enzimas aceleran las reacciones
moléculas de ATP consumidas y regeneradas por cada segundo
en cada célula. Si el ATP no se generara por la fosforilación del
metabólicas al disminuir
ADP, los seres humanos emplearían casi su peso completo en las barreras energéticas
ATP cada día.
Dado que ambas direcciones de un proceso reversible no pue- Las leyes de la termodinámica nos dicen qué ocurrirá y qué no
den ser cuesta abajo la generación de ATP a partir de ADP y ®¡ ocurrirá en ciertas condiciones concretas, pero no informan acer-
necesariamente es un proceso endergónico: ca de la velocidad de estos procesos. Una reacción química espon-
tánea ocurre sin la necesidad de energía externa, pero puede
ADP +®¡ ~ ATP +HP ocurrir tan lentamente que resulte imperceptible. Por ejemplo,
aunque la hidrólisis de sacarosa (el azúcar de mesa) a glucosa y
~G = +7 ,3 kcal/mol (+30,5 kJlmol) (condiciones estándar)
fructosa sea exergónica, puesto que ocurre espontáneamente con
liberación de energía libre (~ G = - 7 kcal/mol), una solución de
Debido a que la formación de ATP a partir de ADP y ®¡no es sacarosa disuelta en agua estéril permanecerá años a temperatu-
espontánea se debe emplear energía libre para que ocurra. Las ra ambiente sin que se produzca hidrólisis apreciable. Sin embar-
vías catabólicas (exergónicas), en especial la respiración celular, go, si añadimos una pequeña cantidad de un catalizador como la
proporcionan la energía para el proceso endergónico de síntesis enzima sacarasa a la solución, toda la sacarosa se hidrolizará en
de ATP Las plantas también emplean energía lumínica para pro- un lapso de segundos (fig. 8-13). ¿Cómo puede efectuar esto la
ducir ATP enzima?
Así, el ciclo del ATP es un torniquete a través del cual pasa Un catalizador es un agente químico que acelera una reac-
la energía durante su transferencia desde la vía catabólica a la ción sin ser consumido por ella; una enzima es una proteína
anabólica. De hecho , la energía química potencial temporaria- catalítica. (Otra clase de catalizadores biológicos, hechos de RNA
mente almacenada en el ATP impulsa la mayor parte del traba- y llamados ribozimas, se analizan en los capítulos. 17 y 26). En
jo celular. ausencia de regulación enzimática, el tráfico químico a través de
las vías metabólicas se volvería desesperadamente congestionado
porque muchas reacciones químicas demandarían mucho tiem-
po. En las siguientes dos secciones se analizará qué es lo que
impide que una reacción espontánea ocurra más rápido y de qué
manera una enzima cambia la situación.
Las síntesis de ATP a partir de La h idrólisis de ATP a
ADP + ®¡ requiere energía ADP + ®¡ genera energía
La barrera de la energía de activación
Cada reacción química que ocurre entre las moléculas impli-
ca tanto la ruptura de enlaces como la formación de ellos. Por
ejemplo , la hidrólisis de la sacarosa implica la ruptura del enlace
entre la glucosa y la fructosa y uno de los enlaces de una molé-
cula de agua, y luego la formación de dos enlaces nuevos, como
se muestra en la figura 8-13. El cambio de una molécula a otra
Energfa del catabolismo Energfa para el trabajo generalmente implica el paso de la molécula inicial a un estado
(exergónica, procesos celular (endergónica,
procesos que consumen
altamente inestable antes de que pueda ocurrir la reacción. Esta
que generan energfa)
energfa) contorsión de la molécula puede compararse con el anillo de un
llavero metálico cuando uno fuerza la curvatura para añadir una
Á Fig. 8-12. El ciclo del ATP. La energía li berada por reacciones de nueva llave. El anillo del llavero es altamente inestable en su
degradación (catabo lismo) en la cé lula se emplea para fosforilar A Dp, forma abierta, pero vuelve a su estado estable una vez que las lla-
regenera ndo el ATP. La energía almacenada en el ATP impulsa la mayor ves han sido introducidas y han recorrido todo el camino alrede-
parte del trabajo ce lular. dor del anillo. Para llegar al estado de contorsión en el que los
150 UNIDAD DOS La célula
HO
KFO~o /r:;o~
~H20H
+
Sacarosa
+
~~H'OH
H OH OH H H OH OH H
Sacarosa Fructosa
C12 H22 0 11 C6H1P6
.& Fig. 8-13. Ejemplo de una reacción catalizada por enzimas: la hidrólisis de sacarosa por la enzima sacarasa.
enlaces pueden cambiar, las moléculas reactivas deben absorber Los reactivos AB y CD deben absorber Los enlaces se
energía de su entorno. Cuando se forman los nuevos enlaces de suficiente energ ía del entorno como rompen se forman
las moléculas producidas, la energía se libera en forma de calor para alcanzar el estado de transición otros nuevos y se
inestable, en el que pueden romperse libera energía al
y las moléculas vuelven a sus formas estables con energías más los enlaces. ambiente.
bajas.
La inversión inicial de energía para que una reacción inicial
-la energía necesaria para contorsionar las moléculas de reactivo
de modo que puedan modificarse los enlaces- se conoce como
energía libre de activación o energía de activación, abreviada
EA en este libro. Podemos considerar la energía de activación stado de transición
como la cantidad de energía requerida para empujar a los reac-
tantes más allá de una barrera energética o una cuesta, de modo
que pueda iniciarse la parte "cuesta abajo" de la reacción. La
figura 8-14 muestra los cambios de energía para una reacción
exergónica hipotética que intercambia porciones de las dos molé-
culas de reactivo:
AB + CD ~ AC + BD
La energización o activación de los reactivos es representada
por la porción cuesta arriba del gráfico, mientras que el conteni-
do de energía libre de las moléculas de reactivo aumenta. En el Productos
cénit, los reactivos se encuentran en una condición inestable
conocida como estado de transición: ellos están activados y en esta Progreso de la reacción ~
situación es posible la ruptura y la formación de nuevos enlaces.
La fase de formación de enlaces de la reacción corresponde a la .& Fig. 8-14. Perfil energético de un reacción exergonlca. Las
parte cuesta bajo de la curva, que muestra la pérdida de energía "moléculas" son hipotéticas, con A, B, C y D, representando porciones
libre por parte de las moléculas. de las moléculas. Desde el punto de vista termodinámico, ésta es una
La energía de activación con frecuencia se aporta en forma de reacción exergónica, con una dG negativa, y la reacción ocurre espon-
calor, que las moléculas de reactivo absorben del entorno. Los táneamente . Sin embargo, la energía de activación (EA) genera una
barrera que determina la velocidad de la reacción.
enlaces de los reactivos se rompen únicamente cuando las molé-
culas han absorbido suficiente energía como para volverse ines-
tables y, por tanto, más reactivas (en el estado de transición, en
el pico de la curva en la figura 8-14). La absorción de energía tér-
mica incrementa la velocidad de las moléculas de reactivo de alcanzar la cima de la barrera de la energía de activación antes de
modo que colisionan con mayor frecuencia y más fuerza. que la reacción pueda proceder. En el caso de algunas reacciones,
Además, la agitación térmica de los átomos en la molécula deter- la EA es lo suficientemente limitada como para que a una tempe-
mina que sea más probable que se rompan los enlaces. A medi- ratura ambiente haya suficiente energía térmica para que la
da que las moléculas se establecen en sus disposiciones de unión mayor parte de los reactantes alcancen el estado de transición en
nuevas, más estables, la energía se libera al entorno. Si la reac- un tiempo corto. En la mayoría de los casos, sin embargo, la EA
ción es exergónica, EA obtendrá dividendos, ya que la formación es tan alta y el estado de transición se alcanza en tan raras oca-
de nuevos enlaces libera más energía que la que fue invertida en siones que la reacción difícilmente se producirá. En estos casos,
romper los enlaces viejos. la reacción ocurrirá a una velocidad notable solamente si los
La reacción que se muestra en la figura 8-14 es exergónica y reactivos se calientan. Las bujías de encendido del motor de un
se produce de forma espontánea. Sin embargo, la energía de acti- coche energizan la mezcla gasolina-oxígeno de modo que las
vación proporciona una barrera que determina la velocidad de la moléculas alcancen el estado de transición y reaccionen; única-
reacción. Los reactivos deben absorber suficiente energía para mente entonces puede producirse la liberación explosiva de
CAP í TUL o 8 Introducción al metabolismo 151
energía que impulsa los pistones. Sin una chispa, la mezcla de los tos, cuando hay dos o más reactivos) para formar un complejo
hidrocarburos del combustible y del oxígeno no reaccionara por- enzima-sustrato. Mientras que la enzima y el sustrato se man-
que la barrera de EA es demasiado alta. tienen unidos, la acción catalítica de la enzima convierte el
sustrato en producto (o productos) de la reacción. El proceso com-
De qué manera las enzimas disminuyen pleto puede resumirse del siguiente modo:
la barrera de EA Complejo
Enzima + Enzima +
Las proteínas, el DNA y otras moléculas complejas de la célu- enzima- Producto(s)
Sustrato(s)
la, son ricas en energía libre y tienen el potencial de descompo- sustrato
nerse espontáneamente, es decir, las leyes de la termodinámica
favorecen su degradación. Estas moléculas persisten solamente Por ejemplo , la enzima sacarasa (la mayoría de los nombres
porque a las temperaturas típicas para las células pocas molécu- de las enzimas terminan en -asa) cataliza la hidrólisis del disa-
las pueden superar la barrera de la energía de activación. Sin cárido sacarosa a sus dos monosacáridos, glucosa y fructosa
embargo, las barreras para algunas reacciones deben ser supera- (fig. 8-13).
das ocasionalmente para que las células lleven a cabo los proce-
sos necesarios para la vida . El calor acelera una reacción y Sacaras a + Sacarasa- Sacarasa +
permite que los reactivos logren el estado de transición con Sacarosa + ~== Complejo Glucosa +
mayor frecuencia, pero esta solución sería inadecuada para los H20 Sacarosa-H 20 Fructosa
sistemas biológicos. En primer lugar, las altas temperaturas des-
naturalizan las proteínas y matan las células. En segundo lugar, La reacción catalizada por cada enzima es muy específica;
el calor acelerará todas las reacciones, no simplemente las nece- una enzima puede reconocer su sustrato específico aun entre
sarias. Los organismos, por tanto, utilizan una alternativa: la compuestos íntimamente relacionados como los isómeros. Por
catálisis. ejemplo , la sacarasa únicamente actuará sobre la sacarosa y no
Una enzima cataliza una reacción disminuyendo la barrera de se unirá a otros disacáridos como la maltosa. ¿Qué explica este
EA (fig. 8-15) , lo que permite que las moléculas de reactivo reconocimiento molecular? Recuerde que las enzimas son pro-
absorban suficiente energía para alcanzar el estado de transición teínas y que éstas son macro moléculas con conformaciones tri-
aún a temperaturas moderadas. Una enzima no puede cambiar la dimensionales únicas. La especificidad de una enzima resulta
i1G de una reacción; no puede transformar una reacción ender- de su forma, que es consecuencia de su secuencia de amino-
gónica en exergónica. Las enzimas sólo pueden acelerar las reac- ácidos.
ciones que de cualquier modo ocurrirían finalmente, pero esta Únicamente una región restringida de la molécula enzimáti-
función posibilita que la célula tenga un metabolismo dinámico ca se une al sustrato. Esta región , llamada sitio activo , típica-
para dirigir el tráfico químico de la célula de forma ligera a tra- mente es un bolsillo o un surco en la superficie de la proteína
vés de ella. Dado que las enzimas son muy selectivas en las (fig. 8-16a) . Habitualmente, el sitio activo está formado sola-
reacciones que catalizan, determinan qué procesos químicos mente por unos pocos aminoácidos de la enzima y el resto de
ocurrirán en la célula , en cualquier momento en particular. la molécula proteica proporciona el marco que determina la
configuración del sitio activo. La especificidad de una enzima
se atribuye a un encastre compatible entre la forma de su sitio
Especificidad de sustrato de las enzimas activo y la forma del sustrato. El sitio activo, sin embargo, no
El reactivo sobre el cual actúa una enzima se conoce como el es un receptáculo rígido para el sustrato . Cuando el sustrato
sustrato de la enzima. La enzima se une a su sustrato (o sustra- entra al sitio activo, las interacciones entre sus grupos químicos
y las que tiene con los aminoácidos de la proteína , determinan
que la enzima cambie su forma ligeramente, de modo que el
sitio activo se une aún con mayor facilidad alrededor del sus-
trato (fig. 8-16b) . Este ajuste inducido es como un apretón
de manos. El ajuste inducido conduce a los grupos químicos
del sitio activo a posiciones que aumentan su capacidad para
catalizar la reacción química.
La ~A con una
t ! enzima es
más baja Catálisis en el sitio activo de la enzima
En una reacción enzimática, el sustrato se une al sitio activo
(fig. 8-17) . En la mayoría de los casos, el sustrato se mantiene
óG no se ve en el sitio activo por medio de interacciones débiles, como puen-
afectada por tes de hidrógeno y enlaces iónicos. Las cadenas laterales (grupos
con una enzima
la enzima R) de unos pocos aminoácidos que constituyen el sitio activo
catalizan la conversión del sustrato al producto, y el producto
Productos sale del sitio activo. Luego, la enzima está libre para tomar otra
molécula de sustrato en su sitio activo . El ciclo completo ocurre
Progreso de la reacción --. con tanta rapidez que una misma molécula de enzima actúa típi-
camente sobre cerca de 1000 moléculas de sustrato por segun-
.. Fig. 8-15. Efecto de las enzimas en la velocidad de reacción. do . Algunas enzimas son mucho más rápidas. Las enzimas, como
Sin afecta r al cambio de energía libre (toG) de una reacción, una enzi- otros catalizadores, emergen de la reacción con su forma original.
ma la acelera al reducir su energía de activación (EA). Por lo tanto, cantidades muy pequeñas de enzima pueden tener
152 UNIDAD DOS La célula
~ Fig. 8-16. Ajuste inducido entre una
enzima y su sustrato. (a) En este modelo
gráfico realizado por ordenador el sitio acti-
vo de esta enzima (hexocinasa, que se
muestra en azu l) forma un surco en su
superficie. Su sustrato es glucosa (rojo) .
(b) Cuando el sustrato entra al sitio activo,
induce un cambio en la forma de la proteí-
na. Este cambio permite que se formen
en laces más débiles, lo que determina que
el sitio activo abrace al sustrato y lo man-
tenga en su lugar.
(a) (b)
~ Fig. 8-17. El sitio activo
y el ciclo catalítico de una
enzima. Una enzima puede f) Los sustratos son
convertir una o más molécu- mantenidos en el sitio activo
las de reactivo en una o más por interacciones débiles
moléculas de producto. La como puentes de hidrógeno
enzima mostrada aquí con- y enlaces iónicos.
vierte dos moléculas de sus-
trato en dos moléculas de
producto. 8 El sitio activo (y los grupos R
de sus aminoácidos) pueden bajar
Sustratos la EA y acelerar la reacción al :
Complejo • actuar como molde para
enzima-sustrato la orientación del sustrato,
• Tensar los sustratos y
estabilizar el estado de
transición,
• suministrar un microambiente
o
El sitio
activo queda
favorable,
• participación directamente
en la reacción catalítica.
disponible
para dos
nuevas
moléculas
de sustrato.
Enzima
o Los sustratos
se convierten a
productos.
un enorme impacto m etabólico al funcionar una y otra vez en productos. La enzima cataliza siempre la reacción en dirección
ciclos catalíticos. al equilibrio.
La mayoría de las reacciones metabólicas son reversibles y Las enzimas emplean una variedad de mecanismos que dis-
una enzima puede catalizar tanto una reacción directa como la minuyen la energía de activación y aceleran una reacción Cfig. 8-
inversa. Que prevalezca una reacción u otra dependerá sobre 17, paso e). En primer lugar, en las reacciones que involucran
todo de las concentraciones relativas de los reactivos y d e los dos o más reactivos el sitio activo proporciona un molde para
cAPiTULO 8 Introducción al metabolismo 153
que los sustratos se aproximen en la orientación adecuada cidad de un reacción enzimática se incrementa al aumentar la
para que la reacción ocurra entre ellos. En segundo lugar, a temperatura, en parte porque los sustratos colisionan con los
medida que el sitio activo de la enzima suj eta con fuerza los sus- sitios activos con mayor frecuencia cuando las moléculas se
tratos unidos, la enzima puede estirar las moléculas de sustrato mueven con rapidez. Sin embargo, por encima de cierta tem-
hacia su configuración de estado de transición, tensando y cur- peratura, la velocidad de la reacción enzimática cae abrupta-
vando enlaces químicos críticos que deben romperse durante la mente. La agitación térmica de la molécula de enzima rompe
reacción. Dado que la EAes proporcional a la dificultad de rom- los puentes de hidrógeno, los enlaces iónicos y otras interac-
per los enlaces, la distorsión del sustrato determina que éste se ciones débiles que estabilizan la estructura activa, la molécu-
aproxime al estado de transición y de este modo reduce la canti- la proteica finalmente se desnaturaliza. Cada enzima tiene una
dad de energía libre que debe absorberse para lograr un estado temperatura óptima a la cual la velocidad de reacción es máxi-
de transición. ma. Estando la enzima sin desnaturalizar, esta temperatura
En tercer lugar, el sitio activo también puede proporcionar un permite el mayor número de colisiones moleculares y la con-
micro ambiente que es más conducente a un tipo particular de versión más rápida de los reactivos a producto. La mayoría de
reacción que la solución misma sin la enzima. Por ejemplo, si el las enzimas humanas tienen temperaturas óptimas entre 35 oC
sitio activo tiene aminoácidos con cadenas acídicas (grupos R), y 40 oC (cercanas a la temperatura corporal humana). Las bac-
el sitio activo puede ser un bolsillo de bajo pH en una célula que terias que viven en manantiales de agua caliente contienen
es, por lo demás, neutra. En estos casos, un aminoácido acídico enzimas con temperaturas óptimas de 70 oC o superiores (fig.
puede facilitar la transferencia de H+ al sustrato como un paso 8-18a) .
clave en la catalización de la reacción. Así como las enzimas tienen una temperatura óptima, tam-
Un cuarto mecanismo de catálisis es la participación directa bién tienen un pH al cual son más activas. Los valores óptimos
del sitio activo en la reacción química. En ocasiones, este proce- de pH de las enzimas caen en el espectro de 6 a 8, pero hay
so incluso involucra un breve enlace cava lente entre el sustrato y excepciones. Por ejemplo, la pepsina, una enzima digestiva del
una cadena lateral de un aminoácido de la enzima. Los pasos estómago, trabaja mejor a pH 2. Un ambiente acídico de este tipo
posteriores de la reacción restablecen las cadenas laterales a sus desnaturaliza la mayoría de las enzimas, pero la estructura activa
estados originales, de modo que el sitio activo es igual después de la pepsina se adapta para mantener su estructura tridimensio-
de la reacción que antes de ella. nal funcional en el ambiente acídico del estómago. Por el contra-
La velocidad a la cual una cantidad particular de enzima con- rio , la tripsina, una enzima digestiva que reside en el ambiente
vierte un sustrato en un producto es, en parte, función de la alcalino del intestino, tiene un pH óptimo de 8 y se desnaturali-
concentración inicial del sustrato: cuanto más moléculas de sus- zaría en el estómago (fig. 8-18b) .
trato haya disponibles, más a menudo accederán a los sitios acti-
vos de las moléculas de enzimas. Sin embargo, hay un límite
para la velocidad de reacción a la cual puede acelerarse por la
adición de más sustrato a una concentración fija de enzimas. En
cierto punto, la concentración de sustrato será lo suficientemen- Temperatura óptima para Tem peratura óptima para
te alta como para que todas las moléculas de enzimas tengan sus
sitios activos afectados. Tan pronto como el producto sale de un
t
e
-o
una enzima humana típica una enzima de bacterias
termófilicas
sitio activo, entra otra molécula de sustrato. En esta concentra- ·u (tolerantes
u
ro al calor)
ción de sustrato se dice que la enzima está saturada, y la veloci- ~
dad de reacción es determinada por la velocidad a la que el sitio
activo puede convertir al sustrato en producto. Cuando una
población enzimática se satura, la única manera de incrementar
la velocidad de formación del producto consiste en añadir más
enzima. Las células, en ocasiones, realizan esto sintetizando más 20 40 60 80 100
moléculas de enzima. Temperatura (OC) -----..
(a) Temperatura óptima para las dos enzimas
Efecto de las condiciones locales sobre
la actividad enzimática.
t
e
-o
pH óptimo para la pepsina
(enzima gástri ca)
pH óptimo
para la tripsina
(enzima
La actividad de una enzima - su eficacia- se ve afectada por ·u
u intestinal)
factores ambientales generales, como la temperatura y el pH. ro
~
También puede verse afectada por productos químicos que influ-
yen específicamente en la enzima.
Efectos de la temperatura y del pH
Recuérdese del capítulo 5 que las estructuras tridimensionales 2 3 456 7 8 9 10
pH -----..
de las proteínas son sensibles a su ambiente. En consecuencia,
(b) pH óptimo para dos enzimas
cada enzima opera mejor en algunas condiciones que en otras,
porque estas condiciones óptimas favorecen la estructura más acti- • Fig. 8-18. Factores ambientales que afectan a la actividad
va para la molécula de enzima. enzimática. Cada enzima tiene (a) una temperatura y (b) un pH
La temperatura y el pH son factores ambientales importan- óptimos que fa vorecen la conformación más activa de la molécula
tes en la actividad de una enzima . Hasta cierto punto, la velo- proteica.
154 UNIDAD DOS La célula
