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Tipos de Siembra Microbiológica en Laboratorio

En esta práctica de laboratorio se observó la morfología y estructura de microorganismos en muestras de agua dulce y yogurt utilizando técnicas de microscopía y tinción. Se identificaron diferentes tipos de células procariotas y eucariotas, destacando la importancia de factores como la preparación de muestras y el tiempo de tinción en los resultados. Los hallazgos evidencian la diversidad microbiana y su relación con el ambiente, cumpliendo los objetivos de análisis morfológico y citológico.
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Tipos de Siembra Microbiológica en Laboratorio

En esta práctica de laboratorio se observó la morfología y estructura de microorganismos en muestras de agua dulce y yogurt utilizando técnicas de microscopía y tinción. Se identificaron diferentes tipos de células procariotas y eucariotas, destacando la importancia de factores como la preparación de muestras y el tiempo de tinción en los resultados. Los hallazgos evidencian la diversidad microbiana y su relación con el ambiente, cumpliendo los objetivos de análisis morfológico y citológico.
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Química y Farmacia - Laboratorio

Código de la asignatura: 20100


Período académico – 2025 - 1

OBSERVACIÓN DE CÉLULAS PROCARIOTAS Y OBSERVACIÓN DE MICROORGANISMOS DE


AGUA DULCE
Samuel Holguin, Diana Lozada, Luna Martínez, Maria Portela
Palabras clave: Estructuras, microorganismos, microscopía.

En esta práctica de laboratorio se realizó la observación de microorganismos presentes en muestras de agua dulce
estancada y en yogurt, con el propósito de identificar sus principales características morfológicas y estructurales. Para
ello, se emplearon técnicas de microscopía y tinción que permitieron distinguir células, así como analizar su organización
celular.

Introducción. Frotis inadecuado


El estudio de los microorganismos ha sido fundamental La muestra pudo presentar irregularidades, posiblemente
para comprender la diversidad de la vida y su papel en debido a un esparcido demasiado grueso o burbujas de
los ecosistemas. La observación microscópica ha aire, generando capas superpuestas de muestra,
permitido identificar la existencia de bacterias, dificultando el paso de luz y la visualización.
protozoarios y algas unicelulares, organismos esenciales Lavado incorrecto
en procesos biológicos y ecológicos. Durante el proceso de eliminación del exceso de
En esta práctica, se llevó a cabo la observación de colorante, se removió demasiado azul de metileno,
microorganismos en muestras de agua dulce estancada y dejando las bacterias sin teñir, en condiciones ideales,
en yogurt, permitiendo analizar diferencias morfológicas y este colorante distingue la pared celular de bacterias
estructurales entre células. Se emplearon técnicas de como Lactobacillus (bacilos gram positivos comunes en
tinción y microscopía para resaltar características yogur), permitiendo identificar su forma y agrupaciones.
citológicas clave, como la presencia de flagelos, cilios y Tiempo de tinción insuficiente
organelos especializados. El colorante no tuvo suficiente contacto con la muestra, lo
El objetivo principal de este estudio fue reconocer las que impidió una fijación adecuada, 5 minutos es
características estructurales y funcionales de los suficiente para que el azul de metileno penetre las
microorganismos presentes en ambas muestras, células, un tiempo menor dejaría las bacterias sin teñir.
destacando su importancia en la microbiología y su En un procedimiento correcto, se deberían observar
relación con el ambiente y la alimentación. bacterias teñidas de azul oscuro, con formas de bacilos o
Metodología. cocos, y posiblemente en cadenas (Estreptococos) o
En la primera parte de esta práctica, se buscó observar e agrupaciones, el objetivo de 100X (con aceite de
identificar células procariotas, por medio de la realización inmersión) habría permitido observar detalles como la
de un frotis bacteriano a partir de una muestra de yogur, estructura de la pared celular, pero su uso no fue efectivo
optimizando la distribución celular mediante dilución con debido a la falta de tinción adecuada.
H₂O destilada. El uso del mechero (fijación térmica),
permitió adherir las células al vidrio evitando pérdidas
durante la tinción, se eliminó la grasa utilizando C₂H₅OH
para una tinción uniforme, se utilizó azul de metileno para
resaltar la morfología bacteriana y con ayuda del
microscopio poder distinguir diferentes tipos de
agrupaciones.
Resultados y discusión.
OBSERVACIÓN DE CÉLULAS PROCARIOTAS
En la práctica de observación de bacterias del yogur, no
Dibujo de lo que debió ser observado en la muestra de yogurt
se logró visualizar estructuras bacterianas bajo el con azul de metileno en los lentes objetivos 4X, 10X y 40X.
microscopio, luego de una exhaustiva reflexión, se llegó a Fuente propia.
la conclusión de que algunos de los siguientes factores
afectaron los resultados: En la siguiente práctica, se observaron numerosos
microorganismos móviles, identificados como protozoos
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(e.j., Paramecium, Amoeba) y algas unicelulares (e.j., El cultivo con repollo actuó como sustrato orgánico,
Euglena). favoreciendo la proliferación de microorganismos
degradadores (protozoos) y algas coloniales, lo que
explica la mayor diversidad y movimiento observado.

Anexo:
https://youtube.com/shorts/UBObNsOoSeM?feature=shar
ed

Los aumentos altos permitieron detallar organelos, pero


limitaron el campo de visión, lo que podría haber omitido
microorganismos más grandes o coloniales.
Dibujo de lo observado en la muestra de agua estancada con
azul de metileno en los lentes objetivos 4X, 10X y 40X. Fuente La preparación inadecuada de montajes húmedos
propia. (burbujas, exceso de colorante) afectó la claridad en
algunas observaciones.
En 4X, se distinguieron estructuras generales (e.j.,algas).
En 10X, se identificaron formas y movimientos rápidos de La dominancia de algas en agua estancada indica un
microorganismos (protozoos saprofitos). ambiente con luz y nutrientes, mientras que la
En 40X, se visualizaron detalles como las paredes abundancia de bacterias en muestras con excremento
celulares de las algas. refleja un sistema en descomposición.
Anexo: Estos hallazgos coinciden con la teoría de que los
https://youtube.com/shorts/v7YnDvbZjEk?feature=shared microorganismos son bioindicadores de la calidad del
agua y los procesos ecológicos.

Conclusiones.
En esta práctica se logró conocer e identificar bacterias
en el yogurt y diferentes tipos de microorganismos en
muestras de agua dulce, lo que permite reconocer
características morfológicas y citologicas esenciales,
tales como formas bacterianas (cocos,bacilos, etc)
utilizando tecnicas de tincion que facilitaron su
visualización. En la práctica de observación de
Dibujos de las muestras de agua estancada con repollo y microorganismos de agua dulce, se evidenciaron varios
excremento observados bajo el lente objetivo 40x. Fuente tipos de organismos celulares presentes en ambientes
propia acuáticos, destacando protozoos y microalgas con
distintas estructuras. Los objetivos propuestos se
Se registró una alta actividad de microorganismos cumplieron satisfactoriamente, logrando identificar y
móviles, principalmente protozoos ciliados y algas analizar las características histológicas y morfológicas de
coloniales. los organismos estudiados .
. Preguntas de la guía.
En 40X, se identificaron cloroplastos en algas y 4.1. ¿Cuáles son los tres tipos de dominios de vida
estructuras reproductivas en protozoos. que han sido propuestos para la
clasificación de los organismos (Carl Woese, 1990)?
Esta muestra mostró una diversidad media, posiblemente
Carl Woese propuso en 1990 un sistema de clasificación
por un tiempo corto o indebido de aislamiento, el cual no
biológica que agrupa a los organismos en tres dominios
fue suficiente para obtener los nutrientes liberados
de la vida, basado principalmente en diferencias en la
durante la descomposición del repollo.
secuencia del ARN ribosomal (ARNr) y otras
La presencia de algas en el agua estancada sola sugiere características moleculares y celulares. Estos tres
condiciones fotosintéticas favorables (luz y nutrientes). dominios son:
En contraste, el excremento de caballo promovió el
crecimiento de bacterias heterótrofas y protozoos 1. Dominio Bacteria
descomponedores, reduciendo la competencia por •También conocido como eubacterias o bacterias
recursos con las algas. verdaderas.
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•Son organismos procariotas, es decir, no poseen núcleo


material del que tidiglicano cano (plantas),
celular ni organelos membranosos internos.
está hecha la o proteinas quitina
•Su material genético se encuentra en una región
pared celular? (hongos) o
llamada núcleoide.
ausente
•Poseen paredes celulares compuestas principalmente
(animales)
por peptidoglicano.

2. Dominio Archaea a) ¿Qué materiales, equipos y/o sustancias tendrías


•También son procariotas, pero presentan diferencias que utilizar para hacer resaltar las
significativas con las bacterias. características citológicas en los organismos que
•Sus membranas celulares están compuestas por lípidos estás viendo?
de cadena ramificada, lo que les permite sobrevivir en Para resaltar las características citológicas de los
ambientes extremos (altas temperaturas, alta salinidad o microorganismos se pueden emplear los siguientes
ambientes ácidos). elementos:
•No poseen peptidoglicano en sus paredes celulares. •Microscopio óptico con diferentes aumentos (40X, 100X,
etc.).
3. Dominio Eukarya •Tinción biológica, como:
•Incluye todos los organismos eucariotas, es decir, •Azul de metileno (para destacar el núcleo y el
aquellos cuyas células poseen un núcleo definido y citoplasma).
organelos membranosos. •Yodo (para evidenciar gránulos de almidón o estructuras
•Este dominio abarca una amplia diversidad de seres internas).
vivos, desde organismos unicelulares hasta pluricelulares •Verde de Janus (para identificar mitocondrias).
complejos. •Portaobjetos y cubreobjetos para montar las muestras.
•Se divide en cuatro grandes reinos: Protista, Fungi, •Aguja de disección para manipular las muestras.
Plantae y Animalia. •Pipetas Pasteur para colocar pequeñas cantidades de
4.2. complete el siguiente cuadro, describiendo las muestra en el portaobjetos.
características que separan a los •Agua destilada y soluciones buffer para mantener el
dominos equilibrio osmótico en las muestras.
b) Para el tipo de cubierta externa (membrana celular,
Caracteristicas Archaea Bacteria Eukaria
periplasto, pared celular,
claves
ornamentaciones).
•Azul de toluidina: Resalta la pared celular en organismos
¿Tiene No No Si
vegetales y algunas algas.
envoltura
•Rojo Congo: Permite identificar estructuras celulares y
nuclear?
paredes con celulosa.
•Tinción de Gram: Diferencia bacterias Gram positivas y
¿Tiene Si Si No
Gram negativas, resaltando la estructura de sus paredes
cromosoma
celulares.
circular?
c) Para gránulos de reserva (pirenoides en su caso) y
¿El ADN está Si No Si plastidios (forma y
asociado a posición).
proteínas •Verde de Janus: Tiñe específicamente mitocondrias y
histonas? plastidios.
•Lugol (yodo yodado): Resalta los gránulos de almidón en
¿Presenta No No Si organismos vegetales y algunas algas.
organelos? d) Para núcleo o núcleos (forma y posición).
•Colorante de Feulgen: Tiñe específicamente el ADN en
¿Presenta Si Si Si el núcleo.
flagelos? •Azul de metileno y orceína acética: Permiten observar
claramente el núcleo y su localización en la célula.
¿Unicelular o Unicelular Unicelular Ambos 2. ¿Las especies de microalgas son indicadoras de
multicelular? es particularidades ecológicas (calidad
del agua, perturbaciones, sucesión, etc.) en un
¿Cuál es el Pseudopep Peptidogli Celulosa mismo cuerpo de agua?
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Sí, las microalgas son excelentes bioindicadores debido dulceacuícola adyacente?


a su sensibilidad a cambios ambientales. Algunas de sus Sí, existen diferencias notables:
funciones como indicadores ecológicos son: •En ambientes marinos, predominan protozoos como las
•La presencia de ciertas algas, como las del género foraminíferas y los radiolarios, que poseen esqueletos
Euglena, indica aguas contaminadas con materia calcáreos o silíceos.
orgánica. •En ambientes dulceacuícolas, son comunes los ciliados,
•Algas del grupo Diatomeas suelen predominar en amebas y flagelados, que suelen adaptarse mejor a las
ambientes con alta concentración de nutrientes. variaciones en temperatura y pH.
•Cambios en la densidad y diversidad de microalgas •Los protozoos marinos suelen tener mayor
pueden reflejar perturbaciones ambientales como el especialización en formas de vida planctónicas, mientras
aumento de contaminantes o variaciones en el pH del que los de agua dulce tienden a formar comunidades en
agua. el sedimento o en películas biológicas.
3. ¿Cuál grupo de protozoos es dominante en un 7. Mencione las Principales Características
cuerpo de agua? Morfológicas de las Microalgas
La dominancia de protozoos en un ecosistema acuático Las microalgas presentan diversas características
depende de las condiciones ambientales. En general: morfológicas, entre las que destacan:
•En aguas ricas en materia orgánica, predominan los •Tamaño microscópico (entre 1 µm y 200 µm).
ciliados como Paramecium. •Formas variadas, como esféricas, elípticas, filamentosas
•En ambientes con poca oxigenación, son comunes los o coloniales.
ameboides como Amoeba proteus. •Presencia de pigmentos fotosintéticos, como clorofila,
•En aguas bien oxigenadas, pueden abundar los carotenoides y ficobilinas, que les otorgan colores
flagelados como Euglena. verdes, rojos o pardos.
4. En una muestra de agua con organismos vivos: •Pared celular rígida, compuesta de celulosa, sílice u
¿Cómo podrías diferenciar a una otros materiales.
microalga de un protozoo? •Algunas presentan flagelos o estructuras de
En una muestra de agua con organismos vivos, se desplazamiento.
pueden diferenciar las microalgas de los protozoos •Pueden formar colonos, cadenas o vivir de forma
observando su coloración y estructuras internas: las unicelular.
microalgas presentan pigmentación característica (verde, 8. Con la Información d
roja o parda) gracias a sus cloroplastos y suelen contar ponible en la web y con lo observado realiza este
con una pared celular, lo que indica su capacidad para cuadro comparativo de los géneros observados en
realizar la fotosíntesis, mientras que los protozoos, al muestra de agua estancada. (Puede agregar más filas
carecer de estos pigmentos, se manifiestan si se requiere).
generalmente como células incoloras y exhiben
mecanismos de locomoción activos, como pseudópodos,
Genero Forma de Tamaño Número Organ
cilios o flagelos, que permiten identificarlos con mayor
la y Forma de o
facilidad al microscopio.
célula/cu del núcleos locom
5. Investigue los términos de esporozoito, trofozoito,
bierta cuerpo (organelo ocion
merozoito y gomonto. Defina
externa s)
Citostoma y Vestíbulo.
•Esporozoito: Fase infecciosa de algunos protozoos del
Parameci cubierta Célula Dos Cilios
grupo Apicomplexa, que permite invadir células huésped.
um externa ovalada núcleos
•Trofozoito: Fase activa y de alimentación de los
flexible y (macronúcl
protozoos. Es la etapa en la que se desarrollan y crecen.
recubierta alargada eo y
•Merozoito: Forma resultante de la reproducción asexual
de cilios, micronúcle
en algunos protozoos, especialmente en el ciclo de vida
sin pared o).
del Plasmodium (causante de la malaria).
celular
•Gomonto: Estado de algunos protozoos durante el cual
están adheridos a un sustrato o dentro de un huésped.
Amoeba Membran Tamaño Generalme Pseudo
•Citostoma: Estructura especializada en ciertos protozoos
a celular muy nte un podos
que funciona como “boca celular” para ingerir alimentos.
sin pared, variable núcleo
•Vestíbulo: Región que rodea el citostoma y facilita el flujo
con forma (algunas
de partículas hacia la célula.
vacuolas ameboid especies
6. ¿Existen diferencias en cuanto especies de
contráctile e más).
protozoos entre un sistema marino y uno
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s, forma
variable e
irregular

Euglena Película Célula Un núcleo. Flagelo


proteica, alargada,
con coloració
cloroplast n verde
os y un por
estigma cloroplas
tos

Volvox Células colonia, Cada Flagelo


en colonia cada célula s en
esférica célula tiene un cada
rodeadas con núcleo célula
por matriz cloroplas propio
gelatinosa tos
, cada
célula con
pared de
celulosa

Spirogyra Filamento Filament Cada No


s os largos célula con present
formados y un núcleo; a (de
por delgados cloroplasto desplaz
células s a por
cilíndricas helicoidale corrient
con pared s. es de
de agua)
celulosa,
cloroplast
os en
espiral

Bibliografía.

1.​ Guía de trabajo.


2.​ Google Search. (s. f.).
https://www.google.com/search?q=Protozoos&rlz=1C
1ALOY_esCO958CO958&oq=proto&gs_lcrp=EgZja
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DIGCAcQRRg90gEIMjMwNmowajmoAgCwAgE&sou
rceid=chrome&ie=UTF-8
3.​ Proyecto Biosfera. (s. f.).
https://servicios.educarm.es/cnice/biosfera/datos/alum
no/2bachillerato/micro/contenidos7.htm
4.​ Khan Academy. (s. f.).
https://es.khanacademy.org/science/biology/bacteria-a
rchaea/prokaryote-structure/a/prokaryote-structure

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