☆Transcrito por Constanza
Mancilla Brecas
Proceso o pasaje de información de la molécula molde de ADN a ARNm.
Esta síntesis o copia opera de la siguiente forma, la cadena molde es leída de 3´ a 5´ y la nueva hebra
sinterizada de ARN lo hace de 5´ a 3´.
La ARN polimerasa es la encargada de la sint de ARN, sintetizan en 5´ 3´ utilizando una monohebra
leyéndola de 3´5´, complementando con la lectura correcta de bases
✓ Remplaza Timina por URACILO
✓ Los nucleótidos que se incorporan
en la cadena polinucleótida en
crecimiento son ribonucleótidos.
✓ ARN utiliza ribonucleosidos
trifosfafo.
✓ En el ribonucleosido trifosfatado,
uno de los enlaces que se esta
incorporando aporta la energía
para su unión covalente al
extremo 3´de la cadena en
crecimiento liberando un
pirofosfato, cuya hidrolisis aporta
la energía necesaria .
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ADNpolimerasa bacteriana
Es la encargada de generar 2 ARN,
Es la encargada de llevar el proceso de
transcripción.
Tiene una subunidad SIGMA,en el caso
de la ADN bacterianas es muy
importantes porque es la subunidad
que reconoce el sitio del PROMOTOR, la
zona de un gen que interacciona con la
polimerasa para poder iniciar el proceso
de transcripción
PROMOTORES EN BACTERIAS: SECUENCIA CODIFICANTE
✓ Presencia de secuencias altamente conservadas en regiones PROMOTORAS.
LA CAJA TATA
Secuencia de bases que es relativamente común
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Podemos ver como se construye de donde sale esa secuencia de bases común a la mayoría de los
promotores
SECUENCIA CONSENSO
A -10 la caja tata
No quiere decir que todos los promotores tengan la misma secuencia, sino que en cada posición de esta
secuencia consenso esta aquella base que esta representada en cada uno de los promotores.
En el ejemplo la mayoritaria es T.
Fuerza del promotor: fuerza con la cual el promotor puede activarse y promover transcripción.
Cuanto mas similar la secuencia consenso mas fuerte es el promotor.
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• Debemos tener en cuenta a la hora de analizar un promotor, es que su secuencia de bases son
asimétricas.
No es lo mismo que leer de derecha a izquierda que de al revés.
• Esta asimetría es importante porque le ayuda a la polimerasa saber donde desplazarse
• La información de una secuencia no es lo mismo que una secuencia complementaria.
• No siempre es la misma cadena la que tiene la información o secuencia codificante, la orientación de
los promotores hará que la polimerasa de desplace en uno y no en el otro .
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• ARNpolimerasa bacteriana esta constituida por varias subunidades proteicas,
2) el FACTOR SIGMA, una vez que este se encuentra unida al resta de las subunidades de la polimerasa tenemos una
HOLOENZIMA, es decir todas las subunidades en posición. (ayuda, es como una chaperona )
ARNpoli puede interaccionar con el Promotor de esos gen de la bacteria.
Es clave para iniciar la transcripción
TRANSCRIPCIÓN
1) Separar las 2 cadenas, por acción de la Subunidad SIGMA se genera una burbuja y ahí la ARN POLI puede
empezar a sintetizar un corto fragmento de ARN.
4) Para poder continuarse debe disociarse le FACTOR SIGMA de la HOLOENZIMA, así la enzima núcleo puede avanzar
en la lectura y en el proceso de transcripción .
Sitio activo de la enzima, la enzima actúa como una helicasa., va desenrollando, sintetizando, y empieza a emerger de
la enzima.
6) Este proceso ocurre hasta que en una región se transcribe y se genera una complementariedad de bases, y que por
lo tanto puede plegarse sobre si misma que detienen la acción de la ARN POLIMERASA y permite la disociación del
complejo.
7)Esta región autocomplementaria que al ser transcrita genera una estructura en el ARN recién sintetizado se conoce
como TERMINADOR, determina el desesamblaje de este proceso.
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• Ese transcripto se libera en forma espontanea
• En algunos casos este proceso no ocurre y necesita de la ayuda de una proteína adicional, que
es mediadora de la disociación de ADN-ARN, es la PROTEINA RO se utiliza la designación de
determinadores:
• RHO INDEPENDIENTES, donde la secuencia solo con la formación del bucle es suficiente para
detener el proceso
• RHO DEPENDIENTE, es donde necesita a la PROTEINA RHO ADICIONAL para finalizar.
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RESUMEN
• Burbuja permite la copiq de un corto segmento
• ARN recién sintetizados tienen entre 70-80-10.000 nucleótidos
• Se necesita como sustrato ribonucleosido trifosfato y un molde
• A diferencia de la ADN POLIMERASA no necesita un CEBADOR, no necesita un extremo 3´OH
LIBRE para iniciar
• No tiene capacidad autocorrectiva .
Una característica y distintiva
En el caso de bacteria o
procariotas, la
TRANSCRIPCIÓN ocurre en
forma SIMULTANEA con la
TRADUCCION del fragmento,
este el fenómeno de
Amplificacíón
Debido al carecer de la
membrana que separa los
compartimentos
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• I: producen la
transcripción de los
ribosomas grandes
ARNr
• II: ARNm, arn de
interferencia
• III: transcribe los de
transferencia, arn
ribosomas 5s,
ARNt
• ARN de interferencia como una manera de controlar la
expresión génica, interfieren en secuencia especificas de
ARNm
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• Trancripcion Eucariota por
la ARN polimerasa II,
requiere de FACTORES
PROTEICOS o de
PROTEINAS ADICIONALES
que se conocen como
FACTORES DE
TRANSCRIPCIÓN.
• Transcripción esta
detenida y para poder
iniciar se necesita unos
FACTORES PROTEICOS que
interaccionen con el
PROMOTOR previamente
a que la ARN poli pueda
dar inicio al proceso
La regulación del inicio de la transcripción no solo ocurre en relación a secuencia que están hacia el lado
negativo del inicio de la transcripción sino también hacia el lado positivo, o ubicadas a distancias.
Hay secuencias que terminan en inicio de la Acción de la ARN POLIMERASA.
A esas secuencia donde se va a unir la ARN polimerasa (celeste) tiene que unirse previamente esas proteínas
de FACTORES GENERALES DE TRANSCRIPCION.
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No solo hay secuencias que marcan el inicio, sino también hay REGIONES ACTIVADORAS
que pueden estar ubicadas hacia distancia del comienzo de la transcripción
✓ ADN de las bacteria es desnudo, tiene diferentes tipos de proteínas asociadas, en
EUCARIOTA muchas veces median el empaquetamiento, muchas veces ofrecen una
dificultad para el avance de la ARN POLIMERASA.
✓ ARN POLIMERASA: deben superar la dificultad de separar las monohebras y
remodelar las proteínas que generan empaquetamiento del ADN que dificultan su
transcripción
✓ CROMATINA: Conjunto de proteínas y ADN
✓ COMPLEJOS REMOLADORES DE CROMATINA: proteínas necesarias, por ejemplo la
HISTONA ACETILASA, que produce un cambio en el patrón de acetilación de las
histonas que son las proteínas que permiten el compactamiento del ADN y que al
acetilarse producen un cambio en la asociación permitiendo un remodelado para
que la ARN POLIMERASA pueda avanzar sin problema.
✓ Estas proteínas generalmente regulan la EXPRESIÓN GÉNICA .
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✓ Región PROMOTORA, esta cerca del inicio de transcripción o de la región codificante.
✓ La interacción de los FACTORES GENERALES DE TRANSCRIPCIÓN, que permiten la
interacción de la POLIMERASA.
✓ ACTIVADORES O REPRESORES ubicados a miles de pares de distancia
Proceso de TRANSCRIPCION en
EUCARIOTAS, es un proceso que
depende de muchas proteínas, de
proteínas regulatorias, de factores
de transcripción.
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En Procariotas
A medida que el
ARN se esta
sintetizando
puede ser leído
por los ribosomas
y la maquinaria de
traducción y
puede ser leído .
En Eucariotas
Existen una separación espacio temporal de estos procesos por una separación de membranas.
✓ Se transcribe en el núcleo
✓ Se traduce en el citoplasma
¿Qué courre en el medio?
Esta separación permite que el ARN transcrito pueda ser procesado.
Los ARNm en forma general sufren o experimenta un PROCESO DE MADURACIÓN, que tiene que
ver con la modificación de sus extremos (del 5´ sintetizado y 3´) y con la eliminación dentro de ese
transcripto primario de regiones no codificantes.
El ADN de células EUCARIOTAS tiene regiones CODIFICANTES y NO COFICANTES
✓ CODIFICANTES
✓ NO COFICANTES
Al momento de ser transcritos, ambas regiones son copiadas y previo a ser traducido las regiones
NO COFICANTES tienen que ser eliminadas.
ENTONCES…Lo que sintetiza la ARN polimersa es un transcripto primario que puede estar en
distintas etapas de procesamiento, y el conjunto de estos transcriptos se le conoce ARN
HETEROGENEO NUCLEAR.
Cuando estos transcriptos son completamente procesados, es decir sus 2 extremos modificados y
las regiones NO CODIFICANTES eliminadas, se habla de ARN MADURO
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✓ El primer extremo que se modifica en un ARN que
se esta transcribiendo es:
Extremo 5´por la adición de la CAPERUSA.
Esta adición de la CAP es un proceso co-
transcripcional, ocurre una vez que se inicio l
atranscripcion, pero simultaneo a cuando la molécula
se esta sintetizando
• En que consiste su adición ?
Consiste en la adición covalente de un nucleótido
modificado 7METIL-GUANOSINA. Por una unión 5´-5´
✓ La ARN polimerasas II, tiene en su extremo C TERMINAL una serie de proteínas, que tiene que ver con el
procesado del transcripto primario, hay proteínas para la modificación de 3´, de 5´, con el corte y empalme de
secuencia codificantes o eliminación de las secuencias no codificantes.
✓ Cuando el ARN esta siendo transcripto esta proteínas se desplazan hacia el para poder catalizar las reacciones
donde están involucradas.
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• Cuando uno transcribe una región de ADN , se transcriben INTRONES y EXONES
• Para poder traducir este ARN PRIMARIO O RECIEN SINTETIZADO, se deben eliminar los INTRONES
• Como podemos ver, los 2
extremos EXON en el Transcripto
PRIMARIO.
• Una vez que se elimina los
INTRONES, se empalman los
EXONES y nos queda madura.
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• Es los lugares marcado de los INTRONES donde interactúan
PROTEINAS O RIBONUCLEOPROTEINAS que llevan adelante el
proceso , son agregados de ARN pequeños con ptroteina.
3) Producen el plegamiento de los 2 exones, provocando un lazo.
Un nucleótido muy reactivo produce un ataque
4) Ataque y desplazamiento de INTRON-EXON, quedando extremo
3´ OH del primer EXON. Y este extremo produce el CLIVAJE del
INTRON y la unión al EXON continuo.
5) EXONES palmados e INTRON queda como lazo y es degradado
por a la vez que las riboproteinas pequeñas son reciladas.
Las RIBOPROTEINAS constituyen un
complejo llamado ESPLICEOSOMA, el cual es
el lugar donde se produce el SPLAICING o
CORTE y EMPALME durante la maduración
del ARN.
Estas proteínas tienen además otras
funciones:
- De poder ubicar o posicionar a los
participantes de la reacción para que esta se
produzca de modo efectivo.
- Reordenamiento del EXON.
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A: B:
En algunos organismos ocurre sin
proteínas.
Corte y empalme se produce de forma
autocatalítica en estas regiones de EXONES
Tenemos 2 modelos de prueba de lo
planteado
❖ en este caso el corte y empalme puede
ocurrir no solo por las proteínas que
tiene asociado el ESPLICEOSOMA, sino
también por capacidades autocatalíticas
del ARN participantes (RIBOSIMAS)
Un mismo transcripto primario
puede ser procesado de
diferentes maneras, lo general
es que a veces se corten
EXONES en vez de INTRONES.
Tenemos uno.
No confundir con
POLISISTRONIA, que es cuando
de un mismo promotor se
transcriben diferentes
proteínas.
Ejemplo la TROPOMIOSINA, es diferente dependiendo del tejido, que se trascribió distinto.
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✓ Una vez que el ARN se sintetizo, lo que queda para que termine de
madurar es PROCESAR su extremo 3´.
✓ En este extremo 3´ se adhisiona una COLA POLI A (una secuencia
polinucleotidica de nucleótidos de base A)
✓ Ya transcripto, se produce un clivaje en una región particular de ese
trancripto al final del EXTREMO 3´ del mismo y con acción de una
POLIMERASA llamada POLI A POLIMERASA, se produce la sintetis de
ese pequeño fragmento de ADENINA para dar finalizado el proceso .
Cual es la razón de estos
procesamientos?
✓ La eliminación de INTRONES es
porque sino los ARN no pueden ser
traducidos, ya que aparecerían
secuencias sin sentido.
✓ Modificacion de los extremos de
un ARN, tiene que ver con
protección ante degradación de
PROTEASAS.
❖ Si en un laboratorio se le elimina la COLA
POLI A, 7METIL-GUANOSINA, estos ARN son
más factibles de ser degradado.
Pero si un ARN se sintetizo, solo será exportado
al citosol para su posterior TRADUCCIÓN si
cumple con la condición de estar
completamente procesado.
El pasaje del núcleo al citosol se produce a través del ✓ Una vez que el ARN ya esta en el citosol, requiere de
COMPLEJO de los POROS NUCLEARES, que selecciona a los extremos 5´con la CAPERUSA y la POLI A para poder
ARN sintetizados de manera correcta de los no correctos interaccionar con los factores que inician la SINTESIS
para ser trasladados al citosol. PROTEICA.
✓ Este reconocimiento tiene que ver con las proteínas que ✓ Estos factores solo pueden unirse al ARNm cuando este tiene
interaccionan con la molécula de ARN cuando esta siendo ambos extremos procesador
procesada
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Si eliminamos los extremos, este lazo no se puede formar ni
se llevará a cabo.
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Procesamiento de otros ARN en Procariotas
PROCESAMIENTO DE ARN
✓ Se referirá a lo que le ocurre al ARNm, modificación de su extremo 5´ con el agregado de la
CAPUCHA, el 3´ con el agregado de la COLA POLI A y el corte de los intrones y empalme de los
exones
Algunos ARNt se originan de un transcripto Para ARNr grandes, se originan de un ARNr
único, por acción de ARNasas puedo PRECURSOR que por acción de NUCLEASAS genera
eliminar ARN espaciadores. ARNr mas pequeños o que darán constitución al
ribosoma.
En Eucariotas
✓ Tengo un precursor 45s y apartir de la acción de
determinadas ARNasas produce la fragmentación
y el origen de ARN que voy a utilizar para la
construcción del RIBOSOMA
✓ Seria de ARN POLIMERASA I
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ARNt
✓ Tienen el extremo 3´, una secuencia que
siempre es la misma CCA.
✓ Que se origina por transcripto del ADN
primario
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En el caso de PROCARIOTAS:
- La transcripción ocurre en simultaneo con la traducción, no hay
separación de espacio- tiempo.
- No existe maduración
En el caso de EUCARIOTAS:
- La transcripción ocurre en distintos momentos y lugares comparado con
la traducción, ya que están separadas por membranas
- Si existe maduración
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