Universidad Privada Franz Tamayo

Carrera de Bioquímica y Farmacia

GUIA DE PRACTICAS DE BIOQUIMICA II

Docente: Dr. Rolando Prudencio Quelca Llanque

Semestre: 4to.

El Alto – Bolivia
2025
 Información General

El trabajo en el laboratorio requiere la implementación y cumplimiento de una serie de

normas de seguridad que ayudan a prevenir posibles accidentes debido al
desconocimiento de lo que se está́ haciendo o a una posible negligencia de estudiantes
que estén trabajando en el laboratorio. Por lo que se requiere seguir las siguientes
normas generales de comportamiento al acceder a este espacio:

1. Portar correctamente los implementos de protección (gafas, guantes, bata de algodón

manga larga, zapato cerrado). Se debe hacer uso de pantalón largo, zapatos cerrados,
no usar gorras, ni dispositivos electrónicos (como audífonos y celulares) que
distraigan su atención. En caso de cabello largo se debe sujetar durante el desarrollo
de las prácticas y evitar el uso de accesorio de joyería grandes que podrían dar lugar
a accidentes.

2. En el laboratorio se prohíbe ingresar comida y bebidas, además de No fumar.

3. Antes de manipular un reactivo químico observar la etiqueta y consultar las fichas de

seguridad, para estar consciente de la peligrosidad de la sustancia que empleará en
su trabajo.

4. El manejo de material de vidrio debe hacerse con cuidado para evitar accidentes.

5. Evitar cualquier perturbación, vibraciones o golpes que conduzcan a errores en

mediciones con los dispositivos usados en el laboratorio, recuerde que la mayoría de
los instrumentos presentes en los laboratorios son de precisión, sensibles y requieren
de un trato especial.
Reportes de laboratorio:
Con la elaboración del reporte se busca preparar al estudiante para que en el ejercicio de
su carrera profesional pueda presentar informes de actividades, elaborar propuestas,
reportar y analizar resultados confiables.

Contenido del reporte:

1. Nombre de la práctica.
2. Introducción.
En él se indica la finalidad de la práctica, se presenta de forma general un
resumen de la teoría que se pretende corroborar con una descripción de la
terminología usada en la práctica.
3. Antecedentes.
Esta sección contiene toda la información necesaria para comprender el tema
que se está revisando en la práctica.

4. Objetivos.
5. Parte experimental.
Corresponde a lo que realmente se hizo en el laboratorio, evitando que sea una
copia textual de la guía de laboratorio, las observaciones deben ser escritas de
manera concisa, pero claras y redactadas de forma impersonal.

6. Cálculos y resultados.
En esta parte se muestra las ecuaciones químicas, se describe lo observado en la
práctica. Se pueden reportar en forma de gráficos o tablas.

7. Discusión de resultados.
Se presentan los argumentos teóricos comparados con los resultados
experimentales obtenidos, se analizan las diferencias de los datos teóricos con
los experimentales, indicando las posibles causas.

8. Conclusiones.
 Se expresan en forma resumida los resultados del análisis efectuado, derivado
del trabajo experimental y de las interrogantes planteadas.

9. Bibliografía.
Se enlista el material bibliográfico consultado para la realización del reporte. A
continuación, se muestran algunos ejemplos de cómo se debe reportar la
bibliografía dependiendo de las fuentes más comunes.
• Libros
Autor o editor, (año de publicación), titulo, (edición), lugar de publicación, casa editora.
Páginas consultadas.
Ejemplo:
Chang, R. (2010). Química, 10ª edición, México, D. F. Mc Graw Hill. Pp. 210-226.
• Revistas
Autores, (fecha de publicación). Título del artículo. Título de la revista, número del
volumen y del ejemplar, número de las páginas del artículo.
Ejemplo:
Aguilar y Pineda (2009). Cáñamo: Una alternativa textil ecológica. Revista de Química
Textil, No. 195, noviembre-diciembre 2009, 334-337.
• Medios electrónicos
Autor, (fecha de publicación), titulo, identificación de la referencia para acceder a la
información (URLo DOI), URL (UniformResourceLocator). Dirección de internet
Ejemplo:
[Link]
[Link]
10. Medidas de seguridad.
Incluir la información de seguridad de reactivos manejados en la práctica.
11. Disposición de reactivos.
Indicar las medidas tomadas para la disposición de los desechos generados en la
práctica.
Mecanismo evaluación:
La evaluación se llevará a cabo como se muestra a continuación:

Evidencia de desempeño Criterio de desempeño Porcentaje (%)

Asistencia Presentarse al laboratorio

con el material de seguridad 0
para trabajar.
Participación Participar activamente en
las actividades del 15
laboratorio.
Bitácora Registra cálculos,
observaciones y la entrega
30
en tiempo y forma con
limpieza, identificación
visible limpieza y orden.
Reporte Entregar todas las prácticas
en tiempo y forma, bajo el
25
formato establecido con
limpieza y orden.
Examen Responde acertadamente 30

Total 100
1. REGLAMENTO GENERAL DE LABORATORIOS

La seguridad y la protección de la salud son elementos indispensables para un ambiente

de estudio y trabajo seguro en el laboratorio de química. Todo estudiante, instructor o
empleado debe observar las siguientes reglas en el laboratorio de química:

1. Está terminantemente prohibido fumar y traer comida al laboratorio. No almacene

bebidas ni comestibles en el refrigerador.

2. Tiene que usar gafas de seguridad mientras trabaje en el laboratorio.

3. Use zapatos cerrados.

4. Rotule los envases que contengan reactivos o solventes. Incluya la fecha e iniciales
del usuario.

5. Observe las precauciones de uso indicadas en todos los envases de reactivos y

solventes.

6. Devuelva los reactivos y solventes a su lugar de almacenamiento.

7. Use guantes y delantal de goma para manejar corrosivos (ácidos o bases

concentradas). Recuerde no añadir agua a ácidos concentrados.

8. Nunca encienda un mechero con fósforos; utilice un encendedor apropiado.

9. NO pipetee soluciones con la boca.

10. Siga las instrucciones en los envases de reactivos y solventes para disponer de
desperdicios. Si tiene duda consulte a su supervisor.

11. Observe buenas normas de higiene y limpieza en el laboratorio.

12. Mantenga las puertas de gabinetes y gavetas cerradas si no están en uso.

13. Todo equipo usado debe quedar limpio. No almacene cristalería en los fregaderos.

14. Cierre las llaves de gas, aire comprimido y agua al salir.

15. Apague las luces y demás equipo eléctrico al salir.

16. Todo trabajo “en proceso” debe rotularse como tal. Indique claramente la fecha y
nombre del usuario.

17. Familiarícese con los equipos de seguridad y primeros auxilios. Asegúrese que sabe
usarlos.
2. COMPETENCIA GLOBAL DE LA ASIGNATURA

Analizar la estructura, propiedades y actividades de las biomoléculas, en base a los

conocimientos teóricos y prácticos de la Bioquímica, resaltando su importancia en los
seres vivos y su aplicación en los campos Farmacéutico y Bioquímico.
Desarrolla experimentos de identificación de biomoléculas proteicas, glucosídicas y
lipídicas de acuerdo a guía de laboratorio.

3. CONTENIDO.

PRACTICA Nro 1. IDENTIFICAR NÚCLEOS EN CÉLULAS ANIMAL Y VEGETAL (SEMANA 2, 3)

PRÁCTICA Nro 2. REACCIONES DE CARBOHIDRATOS (SEMANA 6 Y 7)
PRACTICA Nro 3. REACCIONES DE LUGOL ALMIDON (SEMANA 8 Y 9)
PRÁCTICA Nro 4. ACCIÓN ENZIMÁTICA (SEMANA 10 Y 11)
PRACTICA Nro 5. RECONOCIMIENTO DE LIPIDOS (SEMANA 12 Y 13)
PRACTICA Nro 6. IDENTIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS (SEMANA 14 Y 15)
PRACTICA Nro 7. EXTRACCION DE ADN (SEMANA 16 Y 17)
 LABORATORIO 1
IDENTIFICAR NÚCLEOS EN CÉLULAS ANIMALES
Y VEGETALES
Tiempo de duración: 1.5 h
1. OBJETIVO

IDENTIFICAR NÚCLEOS EN CÉLULAS ANIMALES Y VEGETALES.

2. Materiales:

Parte 1:
Laboratorio: Observación de células
vegetales.
• Microscopio.
• Bisturí.
• Pinzas de disección acodadas.
• Porta y cubre objetos.
• Catáfilos de cebolla.
• Toalla nova.
• Solución Hipertónica (sal).
• Gotario.
• Agua destilada (Solución
Hipotónica)Parte 2:
Laboratorio: Observación de células
animales.
• Microscopio.
• Pinzas de disección.
• Tórula.
• 2 portaobjetos.
• Cubreobjetos.
• Caja de Petri.
• Azul de metileno.
• Toalla nova.
• Mucosa bucal.
 3. Métodos:

Parte 1:

Laboratorio: Observación de un trozo de catáfilo de cebolla:

Tiempo estimado: 45 minutos

1. Extraiga un trozo de catáfilo de cebolla (Allium cepa), con ayuda de su bisturí y de sus pinzas.
Lo puede obtener de la cara convexa de una de las capas de una cebolla.
2. Coloque el trozo de catáfilo sobre la placa petri con 3 gotas de solución hipertónica durante 3
minutos. Posterior a esto, lleve su muestra al portaobjeto y tápela con un cubreobjeto
(Procure extender la epidermis con mucho cuidado de modo de evitar burbujas).
3. Coloque el cubreobjetos y retire con toalla nova el exceso de colorante.
4. Observe su muestra al Microscopio.
5. Dibuje con aumento total de 40x.
6. Retire el cubreobjeto y proceda a agregar 3 gotas de agua destilada.
7. Observe su muestra al Microscopio.
8. Dibuje con aumento total de 40x.

Parte 2:

Descripción de la actividad:
Laboratorio: Observación de células animales.
Tiempo estimado: 45 minutos.

1. Introduzca una tórula en la cavidad bucal.

2. Raspe suavemente la cara interna de la mejilla.
3. Haga una extensión pasando solo una vez la tórula sobre el portaobjetos.
4. Agregue unas gotas de azul de metileno.
5. Ponga encima un cubre-objetos, de forma que éste caiga suavemente, así evita todo riesgo de
quequeden burbujas de aire entre el porta y el cubre.
6. Retire con toalla nova el exceso de colorante.
7. Observe a través del microscopio.
8. Dibuje con aumento total de 40x.
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4. Resultados:

1.- Dibuja en tu cuaderno lo observado en la actividad realizada, expresando las estructuras observada
según el tejido.

5. Discusión:

1.- En grupos de LABORATORIO discute las diferencia existente entre la célula animal y vegetal. Todo
estoenmarcado a lo observado. Para guiar la discusión pueden responder la siguiente pregunta ¿la
existencia de una pared celular tiene alguna ventaja?

6. Conclusión:

1. Mediante la discusión creada en base a lo anterior, anota los principales puntos en que se
dierondurante la discusión.

2. Elijan a un miembro del grupo, el cual será el encargado para dar a conocer las opiniones
vertidaspor la discusión realizada por el grupo al curso.

3. El curso tendrá el tiempo necesario para reflexionar lo mencionado por el encargado del
grupo(expositor), para su vez dar opiniones con respecto a lo afirmado.
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LABORATORIO 2

REACCIONES DE CARBOHIDRATOS

5.1. OBJETIVO

Analizar las propiedades características de los carbohidratos, derivadas de su

estructura, realizando reacciones generales de identificación.

5.2. FUNDAMENTO TEÓRICO

Los carbohidratos se definen como polihiroxialdehídos, polihidroxicetonas o

aquellos compuestos que por hidrólisis los producen.

Se clasifican, con base en su estructura química, por el número de unidades en:

monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos.

Los monosacáridos, la unidad de carbohidrato, pueden ser de tipo aldosas

(cuando poseen un grupo aldheido en su estructura) o cetosas (cuando están
compuestos por un grupo cetona). Por el número de carbonos se clasifican ,
en triosas y triulosas, tetrosas y tetrulosas, pentosas y pentulosas, hexosas y
hexulosas, heptosas y heptulosas, etc denominándose oligosacáridos, dichos
monosacáridos se hallan unidos por enlaces glicosídicos que pueden ser
hidrolizados por enzimas o ácidos bajo ciertas condiciones. Para finalmente
reclasificarse cada una de ellas por el número de sus centros quirales.

Por otro lado, los polisacáridos son carbohidratos que contienen un gran número
de monosacáridos unidos por enlaces glicosídicos; son hidrocoloides, no forman
verdaderas soluciones, no tienen color ni sabor y su peso molecular puede llegar
hasta varios millones. Cuando un polisacárido esta constituido por un solo tipo
de monosacáridos se llama homopolisacáridos y si lo está por diferentes
monosacáridos se llama heteropolisacáridos.
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5.3. MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales Reactivos Muestras

Tubos de ensayo Etanol al 96% Glucosa Sólida y al
Pipetas Acido sulfúrico 2%
Gradilla concentrado Miel al 2%
Baño maría a ebullición HCI concentrado y Cerveza al 2%
Vaso de precipitados de 100 diluido 1:3 Sacarosa sólida y al
ml Sulfato de cobre 2%
Marcador Hidróxido de potasio Fructosa al 2%
Masking tape Yodo metálico Almidón y al 0.2%
Yoduro de potasio Leche en polvo al 2%

PROCEDIMIENTO

Diluciones: Preparar las siguientes diluciones:

1) Glucosa al 2%.- Pesar 2 g de glucosa y disolver en 100 ml de agua destilada, refrigerar.

2) Maltosa al 2%.- Pesar 2 g de maltosa y disolver en 100 ml de agua destilada, refrigerar.
3) Sacarosa al 2%.- Pesar 2 g de sacarosa en 100 ml de agua destilada, refrigerar.
4) Fructosa al 2%.- Pesar 2 g de fructosa en 100 ml de agua destilada, refrigerar.
5) Solución de glucógeno al 0.2%.- Pesar 200 mg de glucógeno y disolver en 100 ml de
agua caliente, al agua caliente agregar poco a poco el glucógeno. Refrigerar.
6) Solución de almidón al 2%.- Pesar 2 g de almidón comercial y disolver en 100 ml de
agua caliente, al agua caliente agregar poco a poco el almidón. Refrigerar.
7) Reactivo de Fehling:

• Solución A.- Pesar 34.65 g de sulfato de cobre y disolver 300 ml de agua destilada,
llevar a 500 ml con agua y conservar en frasco con tapón de hule.
• Solución B.- Pesar 125 g de KOH y 173 g de tartrato de sodio y potasio, y llevar con
agua destilada a 500 ml, conservar en frasco revestido de parafina y con tapón de
hule.

5.4. PRÁCTICA 1: REACCIÓN DE FEHLING

La reacción de Fehling está basada en la acción reductora que tienen los azúcares sobre
los iones cúpricos en medio alcalino, como se representa a continuación:

Carbohidrato + Cu2 + álcali_ Carbohidrato oxidado + Cu+

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El reactivo de Fehling está constituido por dos soluciones que se mezclan al momento de
usarse (Solución A de sulfato de cobre y solución B de tartrato de sodio-potasio en medio
alcalino). El poder reductor de los oligo y polisacáridos depende, del número de carbonilos
potencialmente libres que no estén involucrados en enlaces glicosídicos.

5.4.1. PROCEDIMIENTO

a) Enumerar los tubos del 1 al 7

b) Colocar en el tubo correspondiente 1 ml de las soluciones a probar
c) Agregar 0.5 ml del reactivo de Fehling A y 0.5 ml del reactivo de Fehling B y mezclar.
d) Calentar en baño maría a ebullición durante 5 minutos.
e) Un precipitado rojo ladrillo es una prueba positiva, mientras negativo si no existe cambio
de color

5.4.2. RESULTADOS

No. Carbohidratos Resultado Observación

de
Tubo
1 Glucosa Sólida y al
2%
2 Miel al 2%
3 Cerveza al 2%
4 Sacarosa sólida y al
2%
5 Almidón y al 0.2%
6 Leche en polvo al 2%
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Para una mejor interpretación apóyate en la siguiente figura

5.5. PRÁCTICA 2: INVESTIGACIÓN DE AZÚCAR NO REDUCTORES

5.5.1. PROCEDIMIENTO

Como se veía en la experiencia 1 la sacarosa da la reacción de Fehling negativa, por no

presentar grupos hemiacetálicos libres. Ahora bien, en presencia del ácido clorhídrico (HCl)
y en caliente, la sacarosa se hidroliza descomponiéndose en los dos monosacáridos que la
forman (glucosa y fructosa).

Tomar una muestra de 1 ml de sacarosa y añadir unas 10 gotas de ácido clorhídrico al 10%.
Calentar a la llama del mechero durante un par de minutos. Dejar enfriar y realizar la Prueba
de Fehling. Observa el resultado. La reacción positiva nos dice que hemos conseguido
romper el enlace O-glucosídico de la sacarosa. (Se recomienda antes de aplicar la reacción
de Fehling, neutralizar con bicarbonato, Fehling sale mejor en un medio que no sea ácido.)
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Figura 1 Figura 2

5.5.2. RESULTADOS

Carbohidratos Resultado Observación

Sacarosa
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LABORATORIO 3

REACCIONES DE LUGOL (ALMIDON)

1. PROCEDIMIENTO

Este método se usa para identificar polisacáridos. El almidón en contacto con

unas gotas de Reactivo de Lugol (disolución de yodo y yoduro potásico) toma un
color azul-violeta característico. La coloración producida por el Lugol se debe a
que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón. No es por
tanto, una verdadera reacción química, sino que se forma un compuesto de
inclusión que modifica las propiedades físicas de esta molécula, apareciendo la
coloración azul violeta.

• Poner en un tubo de ensayo unos 3 cc. del glúcido a investigar.

• Añadir unas gotas de lugol.
• Si la disolución del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reacción
es positiva.

Basándote en esta característica, complementa la práctica de la siguiente forma:

• Una vez que tengas el tubo de ensayo con el almidón y el lugol, que te habrá
dado una coloración violeta, calienta el tubo a la llama y déjalo enfriar
• Vuelve a calentar y enfriar cuantas veces quieras
• Observar el cambio de coloración
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2. RESULTADO

Carbohidratos Resultado Observación

Almidón

3. CONCLUSIÓN

4. CUESTIONARIO
1. En qué productos naturales encontramos a la glucosa, maltosa, galactosa?

2. Menciona a todos los monosacáridos existentes, así como sus estructuras.

3. ¿Cuál es la diferencia estructural entre el almidón y el glucógeno?

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4. ¿Qué se llama la unión entre los monosacáridos? Y cuántos tipos existen?

5. ¿qué monosacáridos forman sacarosa y lactosa?

6. ¿qué son los peptidoglicanos?

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LABORATORIO 4
ACCIÓN ENZIMÁTICA
1. OBJETIVO

• Definir qué es una enzima y cómo estas actúan en reacciones dentro de la célula.
• Identificar diferentes factores que pueden afectar la actividad enzimática.
• Diferenciar entre inhibición competitiva y no-competitiva.

2. FUNDAMENTO TEÓRICO

Una enzima es una proteína que cataliza las reacciones químicas en los seres vivos.
Existen dos factores que alteran o modifican la actividad enzimática: la temperatura y el pH.
Las enzimas poseen un pH característico donde su actividad es máxima: por encima o
debajo de ese pH la actividad disminuye. La relación pH - actividad enzimática, constituye
un factor de regulación intracelular de la actividad enzimática.

La velocidad de las reacciones enzimáticas aumenta por lo general con la temperatura,

dentro del intervalo en que la enzima es estable y activa. La velocidad por lo general se
duplica por cada 10 C° de aumento de temperatura. Sin embargo las enzimas se
desnaturalizan cuando la elevación de la temperatura sobrepasa cierta temperatura límite.
La cual a su vez es la temperatura óptima de trabajo. A bajas temperaturas, las reacciones
disminuyen mucho o se detienen, pero la acción catalítica reaparece cuando la temperatura
se eleva a valores normales.

En una reacción enzimática, la temperatura es muy importante, ya que las

temperaturas bajas inhiben el sitio activo. Las temperaturas altas a más de 37ªC
desnaturalizan la parte proteica o Apoenzima. Al igual que sucede con la mayoría
de las reacciones químicas, las reacciones enzimáticas incrementan su
velocidad con la temperatura. Las enzimas, al ser proteínas, se desnaturalizan
por acción del calor y se inactivan a partir de cierto punto. La temperatura influye
en la actividad enzimática. El punto óptimo representa el máximo de actividad. A
temperaturas bajas, las enzimas se hallan muy rígidas y cuando se supera un
valor considerable (mayor de 50) la actividad cae bruscamente porque, como
proteína, el enzima se desnaturaliza.

La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos

animales y vegetales. La función de esta enzima en los tejidos es necesaria
porque durante el metabolismo celular, se forma una molécula tóxica que es el
peróxido de hidrógeno, H2O2 (agua oxigenada). Esta enzima, la catalasa, lo
descompone en agua y oxígeno, por lo que se soluciona el problema. La catalasa
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se encuentra en casi todas las células aeróbicas, actúa rompiendo el peróxido

de hidrógeno en agua y oxígeno que se produce en las células.
catalasa
2H O 2H O+O
2 2 2 2
3. MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales Reactivos
• 4 Vasos de precipitado de 100 ml • Peróxido de hidrógeno (agua oxigenada
• Pizeta volumen 20)
• 1 Agitador de vidrio • Acido clorhídrico
• Pañuelos desechables • Hígado
• Mortero y pistilo. • Papa
• 1 espátula • Espinaca
• 12 Tubo de ensayo de 10 ml
• Gradilla para tubo de ensayo
• Pipeta Pasteur
• Pipeta de 10 ml
• Gasa

4. PROCEDIMIENTO
• Triture el hígado, papa y la espinaca en morteros diferentes y filtre en una gasa obteniendo una
solución homogénea.
• Identifique 4 tubos de ensayo.
• Nombre con las letras A, B, C y D
• Ponga 3 ml de:

A - homogenizado de Hígado

B - homogenizado de Papa

C - homogenizado de Espinaca

D – agua destilada (tubo control)

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• Haga una marca hasta donde llega cada homogenizado.

• Ponga 3 ml de peróxido de hidrógeno en cada tubo de ensayo.
• Observe la reacción por tubo y marque el cambio en líquido.

5. RESULTADOS

Homogeneado Características de burbujas

A. Hígado

B. Espinaca

C. Papa

D. agua
destilada

PRÁCTICA 2: EFECTO DE LA TEMPERATURA

PROCEDIMIENTO
• Rotular 5 tubos de ensayo
• Añadir 5 ml de hígado homogenizado a cada uno (o cualquier solución problema).
• Colocar los tubos en las siguientes condiciones:

Tubo 1 = 100°C (poner tubo por 5 minutos)

Tubo 2 = 37°C (poner tubo por 5 minutos)

Tubo 3 = Temperatura ambiental

Tubo 4 = En hielo (dejar por 30 minutos)

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• Añada 2 ml de peróxido al tubo 1. Observe los resultados y el tiempo que tarda en producirse
las burbujas.
• Tome el tiempo inicial al añadir el peróxido y el tiempo cuando empiece a producirse las
burbujas.
• Repetir con los demás tubos.
• Coloque sus resultados (tiempo de reacción vs. temperatura) en la siguiente Tabla

6. RESULTADOS

Homogeneado Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4

100°C 37°C (Ambiente) (hielo)

Espinaca

+ = se forma poca espuma. + + = se forma espuma pero no se rebalsa del

recipiente, + + + = las burbujas se rebalsan del recipiente
4.6. PRÁCTICA 3: EFECTO DEL PH

6.1. PROCEDIMIENTO
• Rotular 3 tubos de ensayo A, B y C.
• Añada 1 cm de homogenizado de espinaca a cada tubo.
o Añada 3 cm de HCL 3M al tubo A
o Añada 3 cm de NaOH 3M al tubo B
o Añada 3 cm de agua destilada al tubo C
• Añada 3 cm de peróxido de hidrógeno a cada tubo.
• Observe y anote las reacciones

6.2. RESULTADOS
Homogeneado HCL NaOH Agua destilada
Hígado
+ = se forma poca espuma. + + = se forma espuma pero no se rebalsa del
recipiente, + + + = las burbujas se rebalsan del recipiente

6.3. CONCLUSIÓN
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7. CUESTIONARIO
1. ¿Qué es la catalasa?

2. ¿Por qué se forma espuma cuando se junta la muestra con la catalasa?

3. Qué funciones cumple la catalasa en el organismo?

4. En la práctica, cómo nos damos cuenta que la actividad enzimática es nula o no existe?

5. ¿Cómo influye la temperatura en la acción enzimática?

6. ¿Cómo influye el pH en la acción enzimática?

7. ¿Qué otras enzimas tienen la misma función de la catalasa en el organismo?

8. En la práctica, ¿qué reactivo se utiliza para darle un pH ácido al homogenizado?

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LABORATORIO 5

RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

1. OBJETIVO

Poner de manifiesto ciertas propiedades de los lípidos, algunas de las cuales pueden
servirnos para su identificación.

2. FUNDAMENTO TEÓRICO

Los lípidos, compuestos distribuidos en plantas y animales, poco o nada solubles en el

agua, mientras solubles en compuestos orgánicos, se hallan formando parte de las
membranas de las membranas celulares, material de reserva energética del hombre,
además de servir como aislante térmico y vehículo de compuestos liposolubles.

De acuerdo a la complejidad de sus moléculas que le conforman se clasifican en lípidos

simples como los acilgliceroles y las ceras y lípidos complejos como fosfolípidos,
glicolípidos y otros.

Los acilgliceroles o acilglicéridos son moléculas de glicerol cuyos grupos

alcohólicos reaccionan con ácidos grasos. De acuerdo al número de funciones
alcohólicas esterificadas por ácidos grasos se obtienen monoacilgliceroles,
diacilgliceroles y triacilgliceroles.

Triacilglicerol (los 3 grupos carboxilo están esterificados)

La solubilidad, punto de fusión, la isomería óptica de los acilgliceroles dependen de los

ácidos grasos que conforman la estructura; mientras la capacidad de hidrólisis,
hidrogenación y oxidación se debe a la ruptura y/o formación de enlaces simples o dobles.

Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose

en los dos elementos que la forman: glicerina y los ácidos grasos. Estos se combinan con
los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones (saponificación), que son en
definitiva las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. La reacción es la siguiente:
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3. MATERIALES Y REACTIVOS

• Baño María
• Mechero.
• Gradillas con tubos de ensayo
• Vaso de precipitado con agua
• Aceite vegetal
• Tinta roja en frasco cuentagotas
• Solución de Hidróxido sódico al 20%.
• Éter o cloroformo.

4. PRÁCTICA 1. FORMACIÓN DE JABÓN

4.1. PROCEDIMIENTO

1. Colocar en un vaso pp 30ml de aceite vegetal y 30ml de una solución de

hidróxido sódico al 20%.
2. Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos.
3. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior
clara, que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina
formada; la superior amarilla de aceite no utilizado, y la intermedia, de
aspecto grumoso, que es el jabón formado.
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CONCLUSIÓN:

5. PRÁCTICA 2. PRUEBA DE SOLUBILIDAD

5.1. PROCEDIMIENTO

Las grasas de acuerdo al largo de las cadenas carbonadas que la conforman son insolubles
en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotitas
formando una "emulsión" de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en
reposo, por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que por su menor densidad
se sitúa sobre la de agua. Por el contrario, las grasas son solubles en los llamados
disolventes orgánicos como el éter, benceno, xilol, cloroformo, etc.

Proceder de la siguiente manera:

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1. Tomar 4 tubos de ensayo y poner en cada uno de ellos 2ml de agua + los
reactivos a continuación:
• Alcohol
• Cloroformo
• Éter
• Benceno

2. Añadir a cada tubo 1ml de aceite y agitar fuertemente. Observar la formación de

gotitas o micelas y dejar en reposo. Se verá como el aceite se ha disuelto en el
éter y en cambio no lo hace en el agua, y el aceite subirá debido a su menor
densidad.

5.2. RESULTADO

Muestra Tamaño y aspecto de Observa la densidad

las gotitas o micelas
Alcohol
Cloroformo
Éter
Benceno

CONCLUSIÓN

CUESTIONARIO
1. Explique las propiedades físicas de los ácidos grasos.
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2. ¿Cómo se le designan los nombres a las grasas?

3. ¿qué son los ácidos grasos esenciales? Y ¿cuáles son?

4. ¿qué es la obesidad?

5. ¿qué funciones cumplen los depósitos de grasa en nuestro organismo?

6. ¿Qué es el colesterol y cuáles son sus funciones en el organismo?

7. ¿Cuáles son las lipoproteínas y cuáles son sus funciones?

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LABORATORIO 6

IDENTIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

1. OBJETIVO

Analizar las propiedades características de las proteínas, derivadas de su

estructura, realizando reacciones generales de identificación.

2. FUNDAMENTO TEÓRICO

Las proteínas son macromoléculas formadas por subunidades denominadas aminoácidos

unidos entre sí por enlaces peptídicos que le confieren una estructura compleja.

Cada aminoácido está conformado por un carbono quiral y que tiene la siguiente fórmula
general:

Donde R representa diversos grupos funcionales en los aminoácidos y de acuerdo a ésta

se los clasifica en ácidos, básicos y neutros. Mientras el resto de los grupos funcionales
unidos al carbono quiral son el grupo amina, carboxilo e hidrógeno.

La unión entre los aminoácidos ocurre entre el grupo amino de un aminoácido con el grupo
carboxilo del siguiente mediante un enlace peptídico, la formación de un péptido ocurre por
la unión de más de seis aminoácidos.

La estructura molecular de las proteínas se debe a los niveles de organización

denominándose estructura primaria la unión lineal de aminoácidos, secundaria a la
orientación de los enlaces entre los átomos de C-N-C logrando laminas plegadas o
enrrolladas, terciaria a la conformación tridimensional y cuaternaria a la interacción de dos
o más cadenas polipeptídicas.

Las proteínas, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua soluciones
coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de coágulos al ser calentadas
a temperaturas superiores a los 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos,
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alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su

desnaturalización por los agentes indicados, que al actuar sobre la proteína la desordenan
por la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria.

La desnaturalización de las proteínas ocurre cuando éstas son sometidas a la

acción de agentes físicos o químicos que logran la ruptura de las uniones que
mantienen los niveles de organización.

3. MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales Reactivos
• Tubos de ensayo • Acido acético
• Pipetas • Acido nítrico
• Gradilla • Hidróxido de sodio
• Baño maría a ebullición • Agua destilada
• Vaso de precipitados de 100 ml • Clara de huevo
• Marcador • Sulfato cúprico
• Masking tape • Acetato de plomo

4. PRÁCTICA 1. COAGULACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

4.1. PROCEDIMIENTO

Para ver la coagulación de las proteínas se puede utilizar clara de huevo, para
conseguir más volumen puede prepararse para toda la clase una dilución de
clara de huevo en agua, de forma que quede una mezcla aún espesa. Colocar
en un tubo de ensayo 2 ml clara de huevo+agua. Añadir 5 gotas de ácido acético
y calentar el tubo a la llama del mechero.
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CONCLUSIÓN:

5. PRÁCTICA 2. REACCIÓN XANTOPROTEICA

5.1. PROCEDIMIENTO

Es debida a la formación de un compuesto aromático nitrado de color amarillo, cuando las

proteínas son tratadas con ácido nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en
aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos bencénicos, especialmente en
presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali vira a un
color anaranjado oscuro.
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1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 ml de solución problema (clara de

huevo ).
2. Añadir 1 ml de HNO3 concentrado.
3. Calentar al baño maría a 100 ºC.
4. Enfriar en agua fría.
5. Añadir gota a gota una disolución de sosa al 40%.

CONCLUSIÓN:

6. PRÁCTICA 3. REACCIÓN DE BIURET

6.1. PROCEDIMIENTO

La producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se

debe a la presencia del enlace peptídico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse
los aminoácidos. Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali
concentrado, se forma una sustancia compleja denominada biuret. Que en
contacto con una solución de sulfato cúprico diluida, da una coloración violeta
característica.

1. Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 ml de albúmina de huevo.

2. Añadir 2ml de solución de hidróxido sódico al 20%.
3. A continuación 4 ó 5 gotas de solución de sulfato cúprico diluida al 1%. Debe
aparecer una coloración violeta-rosácea característica.
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CONCLUSIÓN

7. PRÁCTICA 4. REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS

7.1. PROCEDIMIENTO

Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se

basa esta reacción en la separación mediante un álcali, del azufre de los aminoácidos, el
cual al reaccionar con una solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.

1. Poner en el tubo de ensayo de 2 ml de albúmina de huevo (clara de huevo).

2. Añadir 2 ml de solución de hidróxido sódico al 20%.
3. Añadir 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5%.
4. Calentar el tubo hasta ebullición.
5. Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado
sulfuro de plomo, utilizándose el azufre de los aminoácidos, lo que nos sirve
para identificar proteínas que tienen en su composición aminoácidos con
azufre.

CONCLUSIÓN
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CUESTIONARIO
1. Define proteína

2. Dibuja los cuatro niveles de organización de una proteína

3. ¿Cuál es la diferencia entre una proteína simple y una conjugada?

4. Dá dos ejemplos de proteínas simples

5. ¿cuál es la importancia de las proteínas en la alimentación?

6. Menciona 5 características de la hemoglobina

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PRACTICA 7
EXTRACCIÓN DE ADN
1. OBJETIVO

• El objetivo fundamental de esta práctica es utilizar unas sencillas técnicas para

poder extraer el ADN de un tejido animal y por el aspecto que presenta, confirmar
su estructura fibrilar.
• A partir de la longitud enorme de las fibras también se confirma que en el núcleo
el ADN se encuentra replegado.

2. FUNDAMENTO

El ADN se halla en casi la totalidad de los núcleos celulares específicamente en la

cromatina, una pequeña cantidad en mitocondrias y cloroplastos, es una molécula lineal de
gran longitud, densamente empaquetada en el cromosoma humano y formada por dos
cadenas polinucleotídicas enrrolladas en hélice alrededor de una hélice.

Entre sus funciones están el depósito de nuestra información genética, responsable de su

transmisión de padres a hijos de una generación a otra, síntesis de proteínas en las células.

Cada hélice, está conformado por la polimerización en cadenas lineales de unidades

llamadas nucleótidos, un nucleótido a su vez está conformado por una base nitrogenada,
ácido ortofosfórico y un azúcar (desoxirribosa).

Ejemplo de un nucleótido:

En la estructura del ADN se hallan cuatro tipos de bases nitrogenadas: citosina, timina,
adenina y guanina, que se complementan formando puentes de hidrógeno uniéndose como
se muestra en la figura siguiente:
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Los diversos nucleótidos se unen entre sí por enlaces éster, el fosfato forma un puente
desde carbono 5 de la pentosa de un nucleótido al carbono 3 de la pentosa del nucleótido
anterior y las bases nitrogenadas al unirse mediante los puentes de hidrógeno le confieren
la rotación respectiva como se observa en la figura siguiente:
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3. MATERIALES Y REACTIVOS

• Hígado de pollo
• Varilla de vidrio
• Mortero
• Vasos de precipitado
• Pipeta
• Probeta
• Alcohol de 96º
• Cloruro sódico 2M
• SDS
• Arena
• Trocito de tela para filtrar
• Gasa

4. PROCEDIMIENTO

• Triturar medio higado de pollo en un mortero. Añadir arena para que al triturar se
puedan romper las membranas de y queden los núcleos sueltos. FIGURA 1
• Añadir al triturado, 50 cc de agua. Remover hasta hacer una especie de papilla o
puré. FIGURA 2

• Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan
quedado por romper. FIGURA 3
• Medir el volumen del filtrado con una probeta. FIGURA 4
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• Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro sódico 2M. Con esto conseguimos producir
el estallido de los núcleos para que queden libres las fibras de cromatina. FIGURA 5
• A continuación se añade 1 ml de SDS. (Nota: Si no se dispone de este producto puede
sustituirse por un detergente de vajillas, tipo Mistol o similar). La acción de este
detergente es formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN. Así nos
quedará el ADN libre de las proteínas que tiene asociadas. FIGURA 6

• Añadir mediante una pipeta 50 cc de alcohol de 96º. Hay que hacerlo de forma que el
alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interfase, precipita
el ADN. FIGURA 7
• Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección. En la fotografía
número 9 se indica con mayor precisión las capas. Sobre la varilla se van adhiriendo
unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupación de
muchas fibras de ADN. FIGURA 8
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Esta práctica puede completarse con una tinción específica de ADN. Tenemos que tomar
una muestra de las fibras que se van depositando sobre la varilla de vidrio y depositarlas
sobre un porta objeto. Teñir durante unos minutos con un colorante básico. Observar al
microscopio.

Capa de alcohol
Restos de ADN
Capa de filtrado
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5. DIBUJAR EL RESULTADO

6. CONCLUSIÓN

1. CUESTIONARIO
1. ¿Qué diferencia existe entre ADN y ARN?

2. ¿A qué se llama complementariedad de las bases?

3. ¿Qué son los plásmidos?

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4. ¿Cuál es la clasificación del ARN?

5. ¿Cuál es la función de nucleótido libres?

6. ¿Cuál es la diferencia entre nucleósido y nucleótido?

7. Dibuje al nucleótido adenina trifosfato (ATP)

Fecha de presentación de la Guía a la Dirección de Carrera: 05 de Febrero de 2025

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