UNIVERCIDAD DEL MAGDALENA
FACULTAD DE INGENIERÍA –
PROGRAMA INGENIERÍA
AGRONÓMICA
UNIVERSIDAD DEL MAGDALENA FACULTAD Procedimiento
DE INGENIERÍA – PROGRAMA INGENIERÍA
1. Preparación de cortes histológicos
AGRONÓMICA
1. Se seleccionaron muestras de órganos
CURSO DE FITOPATOLOGÍA
vegetales con síntomas visibles de infección.
INFORME DE ACTIVIDAD PRÁCTICA
OBSERVACIÓN DE CORTES HISTOLÓGICOS DE
ÓRGANOS CON SÍNTOMAS Y SIEMBRA EN
MEDIOS DE CULTIV
PROFESORES:
Alberto Rafael Páez Redondo, PhD, MSc
Fitopatología
Gloria Patricia Castillo Urquiza, IA MSc PhD
2. Las muestras fueron lavadas con agua
INTRODUCCIÓN
corriente y secadas con papel absorbente
La presente práctica tuvo como objetivo para eliminar impurezas superficiales.
analizar la presencia de estructuras fúngicas
3. Con un bisturí desinfectado con etanol al
en tejidos vegetales afectados y evaluar su
70%, se cortaron fragmentos de
crecimiento en medios de cultivo. A través
aproximadamente 5 cm, asegurándose de
de la observación microscópica y el
incluir la zona de avance de la lesión.
aislamiento en agar PDA, se buscó identificar
posibles agentes causales de la patología en 4. Los fragmentos fueron colocados sobre
estudio. una superficie firme y se realizaron cortes
finos con bisturí.
5. Los cortes se transfirieron a un
MATERIALES Y MÉTODOS
portaobjetos con una gota de colorante y se
Materiales fijaron con calor suave.
Se utilizaron muestras de órganos vegetales 6. Se cubrieron con un cubreobjetos y se
con síntomas evidentes de enfermedad, observaron al microscopio con aumentos de
reactivos como etanol al 70%, hipoclorito de 10X y 100X.
sodio al 2%, agua destilada estéril y medios
de cultivo PDA. Como instrumental, se
emplearon bisturíes, pinzas, mecheros, 2. Aislamiento en medio de cultivo
placas Petri y microscopios.
1. Se tomaron fragmentos de tejido necesario un mayor tiempo de incubación y
sintomático y se sumergieron en hipoclorito la aplicación de técnicas complementarias
de sodio al 2% por un minuto. para caracterizar el hongo aislado.
2. Posteriormente, se enjuagaron dos veces CONCLUSIONES
en agua destilada estéril.
Se logró observar estructuras fúngicas en los
3. Los fragmentos se secaron con papel cortes histológicos. El medio PDA permitió el
absorbente estéril y se depositaron en crecimiento de micelio, lo que sugiere la
medios de cultivo PDA en placas Petri. presencia de un hongo fitopatógeno. Se
recomienda continuar con la incubación y
4. Se presionaron ligeramente para asegurar
realizar pruebas adicionales para la
el contacto con el medio y se sellaron las
identificación del organismo.
cajas con vinipel.
5. Las placas se incubaron en condiciones
controladas, realizándose observaciones CUESTIONARIO DE EVALUACIÓN Y
diarias. RESPUESTAS
1. ¿Qué diferencias encontraron entre
síntomas y signos?
RESULTADOS
Los síntomas son las manifestaciones visibles
En la observación microscópica de los cortes
en la planta, como manchas o necrosis. Los
histológicos no se evidenciaron estructuras
signos son estructuras del patógeno, como
bacterianas, pero sí algunas hifas fúngicas
micelio o esporas visibles al microscopio.
dispersas en el tejido vegetal.
Después de 24 horas de incubación en el
medio PDA, se empezó a evidenciar un 2. ¿Cómo diferenciar histológicamente una
crecimiento incipiente de micelio en la infección fúngica de una bacteriana?
superficie del agar.
Las infecciones fúngicas se caracterizan por
A los 3 días, el crecimiento del micelio era la presencia de hifas y estructuras
más notorio, presentando una textura reproductivas en el tejido vegetal. Las
algodonosa y color blanco. infecciones bacterianas se identifican por la
acumulación de células bacterianas,
No se observaron estructuras reproductivas
generalmente observadas con tinciones
ni esporas en esta fase inicial.
especiales.
3. ¿Cómo determinar si una enfermedad es
Espacio para fotos: de origen bacteriano o fúngico solo con
análisis microscópico?
DISCUSIÓN
Se observa la presencia de estructuras
El crecimiento de micelio en el medio PDA fúngicas (hifas, esporas) o de bacterias
indica la presencia de un hongo como posible (células pequeñas en grupos o dispersas). En
agente causal de la enfermedad. Sin algunos casos, se requiere tinción diferencial
embargo, la ausencia de esporas dificulta la para confirmación.
identificación precisa del microorganismo. Es
4. ¿Qué harían si en PDA crecen varios
microorganismos en la misma placa?
Se deben realizar subcultivos en medios
selectivos para aislar cada microorganismo y
analizar sus características morfológicas y
bioquímicas.
5. ¿Qué concluyen si un patógeno no crece
en un medio selectivo
Puede indicar que el medio no es adecuado
para su crecimiento o que el microorganismo
requiere condiciones específicas. Se pueden
probar otros medios de cultivo.
6. ¿Por qué una colonia fúngica aislada
podría no causar enfermedad al ser
inoculada en una planta sana?
Puede deberse a que el hongo no es el
verdadero agente causal de la enfermedad, a
que necesita condiciones específicas para la
infección o a que la planta tenga resistencia
natural.
