Título: Coloraciones
Materia: Histología y Embriología
Profesor/a: Equipo Docente
Fecha: 2023
Facultad de Kinesiología y
Fisioterapia
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COLORACIONES
¿ Por qué son necesarias ?
◆ Los diversos elementos de los tejidos
poseen poco más o menos el mismo
índice de refracción lo que hace que
el reconocimiento sea una tarea
difícil
◆ Las reacciones de coloración tienen
por objetivo aumentar el contraste
de las estructuras biológicas e
identificar componentes
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COLORACIONES
◆ Un colorante es un cuerpo coloreado que
puede comunicar su color a otro cuerpo.
◆ La coloración es la propiedad que tienen
ciertos cuerpos de ejercer una absorción
selectiva sobre la luz.
◆ Un cuerpo se ve de tal color porque
trasmite por trasparencia o por difusión
las radiaciones complementarias de las
que él absorbe.
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COLORACIONES: Clasificación
◆ QUÍMICAS
* Directas
* Indirectas ( mordiente)
◆ FÍSICAS
* por solubilidad
* por adsorción
* impregnación
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Por solubilidad
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Impregnación argéntica: fibras reticulares
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CLASIFICACIÓN DE COLORANTES
◆ Colorantes naturales.
◆ Colorantes artificiales.
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COLORANTES NATURALES
Tienen un principio colorante
producido por la naturaleza
• HEMATOXILINA: extraída de la
madera del Campeche. Se comporta
como un colorante básico
• ORCEÍNA: extraído de líquenes.
• AZAFRÁN
• CARMÍN
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COLORANTES ARTIFICIALES
Derivados de la anilina
⧫ Básicos: el grupo cromóforo es básico. Ej:
clorhidrato de azul de metileno
⧫ Acidos: el grupo cromóforo es ácido. Ej:
eosinato de sodio
⧫ Neutros: los grupos cromóforos son ácidos
y bá[Link]:eosinato de azul de metileno
⧫ Fluorescentes: se usan en
inmunohistoquímica. Ej: fluoresceína
⧫ Liposolubles: se incorporan fácilmente a
los lípidos. Ej: Sudán
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AFINIDAD DE LOS
COLORANTES
◆ BASOFILIA: cuando algún elemento
tiene afinidad por colorantes básicos.
Ej:nucleoproteínas ácidas ( se
colorean de azul oscuro)
◆ ACIDOFILIA: cuando algún
elemento tiene afinidad por
colorantes ácidos. Ej: componentes
básicos del citoplasma ( se colorean
de rosado a rojo)
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AFINIDAD DE LOS
COLORANTES
◆ ORTOCROMASIA: cuando los
colorantes confieren a las estructuras
el color propio de los mismos.
Ej: hematoxilina es azul y colorea de
azul
eosina es roja y colorea de rojo
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AFINIDAD DE LOS
COLORANTES
◆ METACROMASIA: es el proceso por el
cuál un colorante cambia de color cuando
se lo enfrenta a un tejido.
Condiciones para que se produzca
metacromasia:
- Colorantes: básicos con tendencia a
polimerizar. Ej: azul de toluidina
- Tejidos: ricos en grupos aniónicos. Ej.:
sustancia intercelular de tej. Conectivo,
heparina, sustancia intercelular de
cartílago
Se tiñen de color rojo
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Coloración de hematoxilina y
eosina
◆ HEMATOXILINA: tiñe NÚCLEOS
◆ EOSINA: tiñe CITOPLASMA
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Coloración de hematoxilina y eosina
◆ Los núcleos aparecen de color violáceo (hematoxilina) y el
citoplasma de color rosado (eosina).
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Coloración de hematoxilina y eosina
◆ En células productoras de proteínas los núcleos aparecen
de color violáceo (hematoxilina) y el citoplasma de color
azul (hematoxilina).
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Coloración de hematoxilina y eosina
◆ En células productoras de lípidos los núcleos aparecen de
color violáceo (hematoxilina) y el citoplasma de color
rosado(eosina).
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CITOQUÍMICA E HISTOQUÍMICA
◆ Reacciones para la localización
de sustancias inorgánicas:
- Reacción del azul de Prusia ( tinción
de Perls): para identificar depósitos
de hierro en médula ósea
- Reacción de von Kossa: para
identificar depósitos de calcio
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CITOQUÍMICA E HISTOQUÍMICA
◆ Reacciones basadas en el
reactivo de SCHIFF: selectivo para
grupos aldehídos
- Reacción de PAS: para
polisacáridos (glucógeno-
proteoglucanos- glucoproteínas-
glucolípidos)
- Reacción de Feulgen: para DNA
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Coloraciones Especiales
◆ Tinción con hematoxilina-eosina (imagen de la
izquierda) y PAS -hematoxilina (imagen de la
derecha) de las vellosidades del intestino de humano
cortadas transversalmente.
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Tinción de Perls ( para Hierro) Tinción de Feulgen ( para DNA)
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INMUNOCITOQUÍMICA
◆ Técnicas inmunológicas para
identificación y localización de
sustancias ( Antígeno)
◆ Se utilizan Anticuerpos específicos
combinado con un colorante
fluorescente
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◆ Inmunocitoquímica para mitocondrias
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Métodos de coloración más
usados
◆ Para sangre: coloración de May-
Grünwald- Giemsa
◆ Para reticulocitos: coloración
supravital con azul brillante de
cresilo
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Sangre: coloración May- G- Giemsa Reticulocitos: coloración azul
brillante de cresilo
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Autorradiografía
◆ Esta técnica se utiliza para localizar radiactividad
emitida por isótopos depositados en diferente
tejidos, que tienen capacidad de interactuar con
los cristales de bromuro de plata de las
emulsiones fotográficas.
◆ En una radioautografía la sustancia en estudio es
incorporada a la célula y localizada mediante una
emulsión fotográfica. El corte de tejido se pone
en contacto con la emulsión fotográfica durante
un breve tiempo.
◆ La radioautografía se revela como una fotografía
común.
◆ Superponiendo la imagen fotográfica con las
células procesadas para ser examinadas con el
microscopio, se puede determinar la localización
del radioisótopo.
◆ De las técnicas radioautográficas la más utilizada
es la que emplea Facultad
emulsiones
de Kinesiología liquidas.
y El
radioisótopo más usado es el tritio.
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Autorradiografía
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CRIOFRACTURA
◆ Por medio de la criofractura la membrana se parte a través
de la región hidrofóbica (plano de dehiscencia), dejando
expuestas dos caras de la membrana (E y P). De esta
forma se aprecian claramente las proteínas que participan
en la membrana plasmática.
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CRIOFRACTURA
◆ Imagen al MET de una réplica obtenida por criofractura
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