0% encontró este documento útil (0 votos)
20 vistas26 páginas

Uso adecuado del microscopio en laboratorio

La práctica de laboratorio se centra en el uso correcto del microscopio y la elaboración de preparaciones microscópicas. Los estudiantes aprenderán a identificar las partes del microscopio, realizar preparaciones temporales y elaborar reportes de laboratorio. Se proporcionan instrucciones detalladas sobre el manejo, cuidado y limpieza del microscopio, así como el procedimiento para observar muestras.

Cargado por

Shirley pro
Derechos de autor
© © All Rights Reserved
Nos tomamos en serio los derechos de los contenidos. Si sospechas que se trata de tu contenido, reclámalo aquí.
Formatos disponibles
Descarga como PDF, TXT o lee en línea desde Scribd
0% encontró este documento útil (0 votos)
20 vistas26 páginas

Uso adecuado del microscopio en laboratorio

La práctica de laboratorio se centra en el uso correcto del microscopio y la elaboración de preparaciones microscópicas. Los estudiantes aprenderán a identificar las partes del microscopio, realizar preparaciones temporales y elaborar reportes de laboratorio. Se proporcionan instrucciones detalladas sobre el manejo, cuidado y limpieza del microscopio, así como el procedimiento para observar muestras.

Cargado por

Shirley pro
Derechos de autor
© © All Rights Reserved
Nos tomamos en serio los derechos de los contenidos. Si sospechas que se trata de tu contenido, reclámalo aquí.
Formatos disponibles
Descarga como PDF, TXT o lee en línea desde Scribd

Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén.

Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

PRÁCTICA DE LABORATORIO NO. 1


USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO.
TECNICAS PARA HACER PREPARACIONES MICROSCOPICAS

I. INTRODUCCION.
La Biología Celular es una ciencia que se originó y ha avanzado gracias
a la implementación tecnológica; y más específicamente con el
desarrollo de mejores técnicas microscópicas.

Por ello, es necesario apoyar las explicaciones teóricas con prácticas


de laboratorio; en donde cada persona puede realizar sus propias
observaciones y sacar conclusiones.

El poder de resolución del ojo humano logra identificar objetos de


hasta de 200 micras, por lo que se hace necesario recurrir a
instrumentos ópticos que faciliten la observación de objetos de
menor tamaño, como las células; este instrumento es el
microscopio, que consiste en juegos de lentes que agrandan o
amplifican la imagen.

Para observar los objetos a través del microscopio óptico compuesto,


es necesario colocarlos sobre una laminilla de vidrio (Porta objetos)
y generalmente se le coloca otra laminilla de vidrio más delgada
(Cubre objetos); en esta forma se obtiene la preparación
microscópica; la que puede durar poco tiempo (preparación
temporal), o puede ser guardada (preparación permanente), lo que
nos da la clasificación de preparaciones de acuerdo a su duración.

En esta práctica se darán los lineamientos generales para el uso


correcto del microscopio, cómo hacer preparaciones microscópicas
y efectuar el reporte de laboratorio.

II. OBJETIVOS.
Al finalizar la práctica, el estudiante será capaz de:

1
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

 Identificar las partes ópticas y mecánicas del microscopio y su


función
 Elaborar preparaciones microscópicas temporales.
 Utilizar correctamente el microscopio óptico compuesto
 Elaborar correctamente reportes de laboratorio.

III. MATERIALES:

MATERIALES APORTADOS POR MATERIALES APORTADOS POR


EL ESTUDIANTE LA UNIDAD DIDACTICA
 Porta Objetos y Cubre  Microscopio óptico
Objetos compuesto.
 Papel impreso (periódico)  Pipeta con agua destilada
con letra pequeña  Xilol
 Tijeras y cuchilla descartable
nueva
 Lápiz y Crayones
 Trozo de corcho
 Papel limpia lentes
 Papel mayordomo(1 rollo por
cada estudiante)
 Jabón líquido de manos (1
bolsa por cada 5 estudiantes)

IV. FUNDAMENTACION TEÓRICA:

DESCRIPCION DEL MICROSCOPIO.


PARTE MECANICA: Está compuesta por el pie, la platina y el tubo. EL
PIE: Es una pieza maciza y pesada, para asegurar la estabilidad del
aparato y servir de soporte a sus demás partes. Suele estar provista
de charnela, que permite la inclinación de la parte superior.
LA PLATINA: Es una pieza metálica, redonda o cuadrada, donde se
colocan las preparaciones; tiene en el centro una abertura circular
por la que pasarán los rayos luminosos procedentes del sistema de

2
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

iluminación. En los microscopios corrientes puede ser fija o estar


endosada a un carro con dos tornillos y cremallera que permitan dos
movimientos de translación, para centrarla, y también, si los tornillos
están graduados, para medir sus desplazamientos.
La preparación se sujeta, en las platinas fijas, con dos palanquitas
móviles, y en las platinas de carro, por un reborde, en forma de
escuadra y pestillo, que le impide cualquier movimiento imprevisto.
El pie se prolonga por encima de la platina, en arco más o menos
curvo. La parte superior de este arco es la que sostiene el tubo y su
mecanismo de traslación vertical.
Esta tiene suma importancia, pues permite enfocar el objetivo
mediante dos movimientos uno rápido, gracias a una cremallera, y
otro lento, con un tornillo micrométrico.
PIE, BASE O SOPORTE: sostiene el cuerpo del microscopio.
COLUMNA O BRAZO: se utiliza para transportarlo.
CARRO Y TORNILLOS DEL CARRO: con ellas se puede movilizar la
preparación microscópica hacia atrás, adelante y hacia los lados.
TORNILLO MACROMÉTRICO: sube y baja la platina.
TORNILLO MICROMÉTRICO: afina la imagen una vez enfocada.
MECANISMO DE REVOLVER: en él se encuentran incrustados los
lentes objetivo y se utiliza para rotar aumentos entre seco, débil y el
objetivo de inmersión.
EL TUBO: En él está instalado el sistema óptico. Está constituido por
dos tubos o cuerpos. Uno de ellos, externo, en el que se encuentran
la cremallera y el ocular, y otro, interno, adosado al anterior, donde
está el objetivo. En la parte superior hay una división milimétrica que
permite modificar la distancia entre objetivo y ocular. Son corrientes
en los aparatos modernos los binoculares, que facilitan la visión con
los dos ojos, y los revólveres porta-objetivos, con los cuales se
pueden cambiar los objetivos instantáneamente, sin desenfocar la
preparación. Tubo del ocular: en él están incorporados lo lentes del
ocular.
DIAFRAGMA: abertura ubicada por debajo de la platina que permite
abrir o cerrar el paso de la luz. Al abrirlo la intensidad de luz es
mayor, al cerrarlo disminuye la intensidad.

3
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

PARTE OPTICA.
OBJETIVOS (LENTES OBJETIVO): Son los elementos más importantes
del microscopio. Están formados por la reunión de varias lentes para
corregir las aberraciones. Deben tratarse con mucho cuidado, pues
cualquier golpe puede variar la posición de las lentes y averiarlas. Se
atornillan a la parte inferior del tubo o al revólver porta objetivos.

La lente inferior del objetivo lente frontal. De ella depende


principalmente la mayor o menor ampliación. Es siempre plano-
convexa, de foco muy corto y de diámetro tanto menor cuanto
mayor sea el aumento. Detrás de esta lente hay otras, que son las
que corrigen las aberraciones cromáticas y esféricas.

OBJETIVOS EN SECO: Son los que se emplean más corrientemente.


Entre la lente frontal y el cubreobjetos sólo hay aire. A este grupo
pertenecen los objetivos de menores aumentos. Las lentes frontales
tienen de 3 a 10 milímetros de diámetro. Poseen gran profundidad
de foco, lo cual permite observar diferentes planos paralelos del
objeto.

OBJETIVOS DE INMERSION: Se llama así a aquellos en los cuales, para


la observación, deben interponerse entre la lente frontal y la
preparación un líquido que, por su índice de refracción apropiado,
permita una mayor luminosidad. Este líquido puede ser agua, aceite,
mono bromuro de naftaleno, etc. Estos objetivos son de gran
aumento y de gran poder definidor. Se emplean en Bacteriología y
Parasitología. Requieren gran luminosidad y empleo de
condensador.

CUALIDADES DE LOS OBJETIVOS: Los objetivos deben poseer tres


cualidades: poder definidor, poder penetrante y poder de resolución.
 El poder definidor consiste en la propiedad de presentar con
limpieza y corrección los contornos de la imagen.

4
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

 El poder penetrante es la propiedad de presentar, sin variar el


enfoque, perfectamente detallados, varios planos del espesor
de una preparación.
 El poder de resolución permite apreciar delicados detalles de
estructura, diferenciando un punto o zona del resto de la
muestra.

OCULARES (LENTES OCULARES): Los forman dos lentes separadas


por un diafragma, y van montados en la extremidad superior del
tubo. La lente superior se llama lente ocular; la inferior, lente de
campo. Hay dos tipos de oculares; los positivos o de Ramsden, que
tienen dos lentes planoconvexas, y cuyas convexidades se oponen
una a la otra y los negativos, o de Huyghens, que se llaman también
de compensación, por tener compensadas las desigualdades del
espectro y en los que las curvaturas de las lentes se dirigen al objeto.
Tanto el microscopio simple como el compuesto pueden ser
binoculares; estos dan mejor calidad a la imagen y más cómoda
visión. El tubo se bifurca, con los correspondientes prismas de
reflexión total, y termina en dos oculares iguales.

SISTEMA DE ILUMINACION: Se encuentra situado bajo la platina y


tiene la misión de iluminar los objetivos por medio de luz transmitida,
a causa de que la mayoría de las observaciones se realizan por
transparencia. Consta de un espejo y de un diafragma. El espejo,
redondo y adaptable a las más variadas posiciones, tiene una
superficie plana y otra cóncava, que pueden intercambiarse a
voluntad. Es espejo plano, para objetivos de escaso aumento, y el
cóncavo, para grandes aumentos. La fuente luminosa puede ser
natural o artificial. Esta última es idónea cuando proviene de una
lámpara especial para estos aparatos. El diafragma va montado bajo
la platina. Es de sistema iris, y permite, por medio de una palanca,
obtener a voluntad conos luminosos de distinto tamaño y, mediante
condensadores, conos luminosos muy grandes. Los condensadores
constan de un sistema de lentes de gran abertura sujetos a una
montura y colocados entre la platina y el espejo, pueden subirse y
bajarse a voluntad y tienen un diafragma unido al conjunto.

5
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

REGLAS GENERALES DE OBSERVACIÓN

ILUMINACION:. Puede utilizarse luz natural o artificial eléctrica. En


general basta cualquier lámpara potente, de filamento y esmerilada.
Si no se dispone de lámpara esmerilada, se intercalará en el sitio
correspondiente un vidrio deslustrado o azul, o un sencillo matraz
lleno de agua con sulfato de cobre y unas gotas de amoníaco que
filtre los rayos amarillos. Si se utiliza luz natural, no debe ser nunca la
directa del sol, sin luz difusa; una excesiva iluminación en la mesa de
trabajo perturba la observación.

ENFOQUE: Es regla general enfocar la preparación de abajo arriba:


se aproxima el objetivo a la preparación de modo que la distancia
entre ambos sea menor que la distancia focal. Se mira por el ocular y
se hace retroceder el tubo lentamente mediante el tornillo rápido,
hasta conseguir ver la preparación más o menos enfocada.
Seguidamente, lograse el enfoque exacto con el tornillo
micrométrico. Es conveniente efectuar la observación monocular
con los dos ojos abiertos, pero mirando sólo con uno. Es fácil de
conseguir cuanto menor iluminada esté la mesa. El objetivo de
inmersión requiere más cuidado: depositada ya la gota de líquido
sobre la preparación, bájese el objetivo hasta que la toque. Para
enfocar se utiliza el tornillo micrométrico, pero sin perder contacto
con la gota y sin tocar la preparación.
LIMPIEZA: Una vez terminada la observación debe limpiarse el
objetivo con papel limpia lentes, empapado de xilol o de tolueno. Se
guarda el aparato en una caja de madera o se tapa con una campana
de cristal o de plástico.

CUIDADO DEL MICROSCOPIO: El microscopio es un instrumento


costoso. Debemos darle el mejor cuidado posible. Siga siempre estas
instrucciones generales cuando lo utilice:
 Transporte el microscopio sujetándolo con las dos manos: una
por debajo de la base y la otra en el brazo.
 Colóquelo alejado del borde de la mesa. Si hay una lámpara
unida al microscopio, tenga cuidado con los cables. Cuando

6
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

trabaje con el microscopio quite de la mesa de laboratorio


aquellas cosas que no sean absolutamente necesarias.
 Las lentes del microscopio cuestan casi tanto como todas las
demás partes juntas. NUNCA LAS LIMPIE CON OTRA COSA QUE
NO SEA PAPEL LIMPIALENTES).
 Cuando termine su trabajo guarde el microscopio,
DESMONTANDO LAS PREPARACIONES MICROSCOPICAS QUE
HA OBSERVADO Y COLOQUE EL OBJETIVO DE MENOR
AUMENTO EN LA POSICION DE ENFOQUE, CON LA PLATINA EN
SU POSICIÓN MAS BAJA.

PARA OBSERVAR EN UN MICROSCOPIO: Se debe poner una mano


en los tornillos que mueven la platina y la otra mano en los tornillos
macrométrico y micromètrico. Si el microscopio es binocular se debe
graduar la separación de los oculares a nuestros ojos; si es monocular
la observación se debe hacer con los dos ojos abiertos.

ENFOQUE DEL MICROSCOPIO


1. Baje completamente la platina del microscopio, usando el
tornillo macro métrico
2. Haciendo uso del mecanismo del revolver, coloque frente a la
preparación el lente objetivo de menor aumento (llamado
seco débil 10 X).
3. Coloque la preparación microscópica sobre la platina
sujetándola con las pinzas del carro y centre la preparación
haciendo uso de los tornillos del carro.
4. Regule la luz mediante el uso del mecanismo del diafragma.
5. Haciendo uso del tornillo macro métrico suba al máximo la
preparación hasta que encuentre tope sin observar por los
oculares.
6. Observando a través del ocular, accione el tornillo macro
métrico hasta que visualice la imagen en el campo
microscópico.
7. Una vez enfocada la imagen, afine el enfoque microscópico,
haciendo uso del tornillo micrométrico.
8. Si desea mayor detalle ó aumento de la imagen, cambie de
aumento rotando el mecanismo del revolver a un lente

7
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

objetivo que le proporcione el aumento deseado, corrigiendo


el enfoque de imagen moviendo el tornillo micrométrico, y
graduando la intensidad de luz con el diafragma.
9. Después de haber realizado la observación, se limpian las
lentes con papel limpia lentes, se coloca el objetivo de menor
aumento en posición de enfoque, se baja la platina, se
desconecta y se tapa. El microscopio queda listo para la
próxima observación.

V. PROCEDIMIENTO:
Este laboratorio consta de 3 fases:
a) Actividad de repaso
b) Elaboración de preparaciones temporales y observación
microscópica
c) Elaboración del reporte de laboratorio

a) ACTIVIDAD DE REPASO:
 Complete el siguiente cuadro con las funciones de cada parte
del microscopio y el número que identifica a cada una de ellas
en el esquema.
 En el dibujo coloree de rojo las partes ópticas y de verde las
partes mecánicas.

8
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

PARTE FUNCION #
PARTES OPTICAS: Oculares
se llaman así porque:
Objetivos
Condensador
Filtros de Luz
Prismas
PARTES MECANICAS: Pie, base o
se llaman así porque:
soporte
Columna o brazo
Platina
Carro y tornillos
del carro
Tornillo
macrométrico
Mecanismo de
revolver
Tubo de ocular
Diafragma
Tornillo
micrométrico

9
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

b. ELABORACION DE PREPARACIONES MICROSCOPICAS


TEMPORALES Y OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA
El profesor explicará la técnica correcta de hacer las preparaciones
microscópicas temporales, con los materiales que el estudiante
aporte utilizando agua destilada como medio de montaje.

1. LETRA IMPRESA:
 Busque en el periódico la letra más pequeña que encuentre, corte
una letra NO SIMÉTRICA (e, a, etc)
 En un porta objetos coloque una gota de agua destilada y coloque
en él el pedazo de papel con la letra seleccionada, cúbrala con el
cubre objetos procurando que no lo quede burbujas de aire.
 Obsérvela en el microscopio usando el objetivo seco débil y seco
fuerte
 COMPARE LA DIRECCION DE LA LETRA EN LA LAMINILLA Y EN LA
OBSERVACION MICROSCÓPICA
 Elabore sus esquemas.

2. PREPARACIÓN DE CORCHO:
 Haga varios cortes delgados de corcho utilizando la navaja y
escoja el más delgado. Recuerde que es material para
observación microscópica por lo que puede ser una muestra MUY
pequeña.
 En un porta objetos coloque una gota de agua destilada y coloque
en él el pedazo de corcho seleccionado, y póngale un cubre
objetos, procurando que no lo quede burbujas de aire.
 Proceda a su observación microscópica usando el objetivo seco
débil y seco fuerte
 Haga sus esquemas correspondientes.

c. REPORTE DE LABORATORIO
 Todos sus reportes de laboratorio deberán incluir lo siguiente:
 Datos generales: Nombre de la Universidad, Facultad, unidad
didáctica, número de laboratorio, nombre del estudiante, día
y fecha, número de carné, nombre del profesor.

10
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

 Título de la práctica.
 Propósito de la práctica.
 Esquema (s)
 Breve descripción de lo observado de acuerdo a sus
esquemas
 Análisis y conclusiones

Recomendaciones para sus esquemas de observaciones


microscópicas:
 Hacerlos a lápiz
 Colorear según lo observado en el laboratorio
 El tamaño del esquema debe ser proporcional a las
observaciones Indicar aumentos microscópicos del ocular, del
objetivo y aumentos totales
 Hacer una pequeña descripción de lo que representa,
señalando detalles sobresalientes de la observación.
 Letra clara y sencilla
 Al rotular el esquema (señalando detalles en el mismo) se
debe hacer a ambos lados para que quede equilibrado.

11
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

SEMANA 3
OBSERVACION MICROSCOPICA DE CELULA PROCARIONTE Y EUCARIONTE

I. INTRODUCCIÓN
Los seres vivos presentan diversidad en forma, dimensión y estructura;
estas características dependen de las células que los integran, de la
actividad que realizan y del entorno que les rodea.

La célula como unidad morfológica tiene un patrón general de


estructura, pero existen variantes que establecen diferencia entre ellas.

Una de las diferencias más significativas es la ausencia o presencia de


una envoltura alrededor del material genético, que es la base para la
clasificación en dos grandes grupos: células procariontes (sin envoltura
nuclear, por lo que presentan nucleoide) y células eucariontes
(presentan envoltura nuclear y por ello, núcleo verdadero).

Para poder observar las células procariotas se utiliza la tinción de gram


que permite clasificar a las bacterias en Gram positivas y Gram
negativas; la técnica para esta tinción es la siguiente:

TINCIÓN DE GRAM:
1. Aplique una capa delgada del espécimen en el
portaobjetos, déjelo secar o fíjelo con calor utilizando un
quemador.
2. Cúbralo con cristal violeta durante 1 minuto, lávelo con
agua.
3. Aplique solución yodada durante 1 minuto, lávelo con
agua.
4. Cuidadosamente decolore la laminilla con alcohol-acetona
hasta que el color azul se torne en celeste claro.
5. Aplique solución de safranina por un minuto, lávelo con
agua, secando la laminilla con papel filtro.

 Las bacterias Gram positivo se tiñen de color azul violeta.


 Las bacterias Gram negativo se tiñen de color rosado.

12
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

Es importante notar que aún dentro de las células eucariontes existen


diferencias estructurales que permiten dividirlas en célula animal y
vegetal. La célula vegetal presenta pared celular, vacuolas
prominentes, cloroplastos y plastidios y la célula animal carece de ellos,
presentando centriolos y lisosomas.

II. OBJETIVOS.
Que el estudiante:
I. Diferencie por medio de la microscopía de luz las células
procariontes de las eucariontes y las células animales de
las vegetales.
II. Utilice correctamente el microscopio.

III. MATERIALES.

MATERIALES APORTADOS POR EL MATERIALES APORTADOS POR LA


ESTUDIANTE UNIDAD DIDACTICA
1. Porta Objetos y Cubre 1. Microscopio óptico
Objetos Cebolla compuesto.
2. Palillos de dientes de punta 2. Piseta con agua destilada
roma Cuchilla descartable 3. Lugol
4. Frasco gotero con solución de
Papel limpialentes
5. Xilol
6. Frotes bacterianos coloreados
con tinción de Gram
7. Aceite de inmersión

IV. PROCEDIMIENTO

1. OBSERVACION DE CELULAS EUCARIONTES VEGETALES:


 Tome la cebolla y con la cuchilla corte profundamente en el
bulbo de la cebolla un cuadro de aproximadamente 0.5 cm por
lado levantando una de las capas.
 De la parte interna cóncava) desprenda una capa de la
epidermis

13
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

 Ponga una gota de lugol sobre la parte central del


portaobjetos, coloque la epidermis de la cebolla, cuidando que
no se arrugue.
 Cúbrala con el cubre objetos
 Realice su observación microscópica con objetivo seco débil y
fuerte, identifique el núcleo, pared celular y nucléolos.
 Haga es quemas de sus observaciones.

2. OBSERVACION DE CELULA ANIMAL:


 Coloque una gota de lugol en la parte central de un
portaobjetos.
 Con un palillo de dientes de punta roma, raspe
cuidadosamente la parte interna de la mejilla y deposite la
muestra obtenida en la gota de lugol, cubra con un
cubreobjetos.
 Realice su observación microscópica con objetivo seco débil y
seco fuerte.
 Elabore sus esquemas.

3. OBSERVACION DE CELULAS PROCARIONTES (OBSERVACION DE


FROTES BACTERIANOS CON TECNICA DE GRAM).
 El estudiante deberá investigar cual es la utilidad de esta
técnica en la medicina.
 Coloque el frote en la platina del microscopio, enfoque
primero con seco débil y luego con seco fuerte. Observe las
diferencias que ocurren al cambiar de lentes.
 Agregue una gota de aceite de inmersión en el frote y observe
ahora con objetivo de inmersión (100X). El aceite forma un
medio continuo entre el vidrio y el sistema de lentes del
objetivo, lo cual permite un mayor aumento de la imagen del
objeto observado.
 Haga los esquemas correspondientes y complete su reporte
de laboratorio.

14
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

SEMANA 4
BIOMOLÉCULAS

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS, LIPIDOS Y PROTEÍNAS

I. INTRODUCCION.
Los compuestos químicos que constituyen a la célula se clasifican
en dos grandes grupos: substancias inorgánicas y substancias
orgánicas, las primeras se caracterizan por la ausencia de uniones
carbono-carbono en su estructura química; pudiéndose
mencionar entre este grupo: agua, gases y sales disueltas, las
segundas se caracterizan por presentar uniones carbono-
carbono y carbono- hidrógeno y átomos de oxígeno en su
estructura química, además de estos elementos, pueden existir
átomos de nitrógeno, fósforo, azufre y algunos metales.

Las principales substancias orgánicas responsables de las


características estructurales y funcionales del protoplasma son:
carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos, dichas
substancias pueden ser identificadas por una gran variedad de
pruebas químicas y físicas. En esta práctica se efectuarán algunas
de estas pruebas químicas para identificar carbohidratos y
lípidos, en forma cualitativa.

II. OBJETIVOS:
1. Al finalizar la práctica cada estudiante será capaz de:
2. Identificar carbohidratos y lípidos a través de tinciones y
microscopía de luz.
3. Identificar la presencia de proteínas en diferentes
soluciones mediante la prueba de biuret
4. Utilizar correctamente el microscopio óptico compuesto.

15
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

III. EQUIPO Y MATERIALES NECESARIOS.

MATERIALES APORTADOS POR CADA MATERIALES APORTADOS POR LA


GRUPO DE ESTUDIANTES UNIDAD DIDACTICA
1. Porta y cubre-objetos 1. Microscopio compuesto
2. 7 tubos de ensayo 2. Agua destilada frasco gotero
3. Gradilla para tubos de ensayo 3. Solución gotero de lugol en frasco
4. 1 navaja descartable nueva o un 4. Solución de sudan en frasco
bisturí gotero
5. Una papa 5. Solución de hidróxido de sodio al
6. Un trozo de tejido adiposo 10%
7. Marcador permanente para 6. Solución de sulfato de cobre al
identificar tubos de ensayo 10%
(sharpie) 7. Solución de Glucosa al 5% en
8. 10 ml de leche frasco gotero
9. 10 ml de orina 8. Solución de Almidón al 5% en
10.10 ml de aceite frasco gotero
9. Papel limpialentes
10. Xilol
11. 3 pipetas de 5 ml
12. 3 varillas de vidrio

IV. PROCEDIMIENTO.

CARBOHIDRATOS

El almidón se identifica con lugol (solución de I 2/KI, los iones de


yodo de la solución se introducen en la porción helicoidal de la
molécula), tiñéndola de un azul o morado intenso (reacción
positiva). Si una sustancia se tiñe de amarillo con el lugol, se
considera una reacción negativa.

OBSERVACION MACROSCOPICA.
1. Numere 3 tubos de ensayo
2. Al tubo 1 agregue 2 ml de agua
3. Al tubo 2 agregue 2 ml de glucosa

16
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

4. Al tubo 3 agregue 2 ml de almidón


5. Agregue a cada tubo 2 gotas de lugol.
6. Observe y anote los resultados y discuta con su grupo
anotando sus conclusiones

OBSERVACION MICROSCOPICA: Observación de PLASTIDIOS


LLENOS DE ALMIDÓN.
1. Con su cuchilla descartable haga un corte muy fino del
tubérculo de papa y colóquelo sobre un porta objetos,
agregue una gota de solución de lugol como medio de
montaje y obsérvela al microscopio usando el objetivo 10X
y 40X.
2. Elabore los esquemas de lo observado y complete su
reporte de laboratorio.

LIPIDOS

Los lípidos son moléculas orgánicas insolubles en agua pero


solubles en solventes orgánicos como benceno, alcohol, etc. No
forman polímeros y cumplen funciones en la célula tan
importantes como: reserva energética a LARGO PLAZO (grasas),
estructurales en membranas (fosfolípidos, glucolípidos y
colesterol) y como señales químicas para comunicación
intercelular.

Los lípidos son identificados usando algunas tinciones como el


reactivo de Sudán, son coloraciones diluidas en solventes
orgánicos que al mezclarse con lípidos, los tiñen.

OBSERVACION MACROSCOPICA.
a) Coloque en un tubo de ensayo 2 ml. de aceite de cocina,
agregue 2 ml. de agua destilada. Observe y anote sus
observaciones.
b) Agréguele 2 gotas de Sudán; observe inmediatamente y
anote los resultados luego de analizar con sus compañeros
de grupo

17
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

OBSERVACION MICROSCOPICA: Observación de tejido adiposo.


a) Usando la cuchilla descartable haga un corte delgado del
tejido adiposo.
b) Móntela en el portaobjetos y agréguele dos gotas de
Sudán, cúbrala con el cubreobjetos y presione suavemente
con un lápiz o lapicero hasta lograr una muestra muy
delgada, casi transparente
c) Obsérvela al microscopio con el objetivo seco débil (10X),
y luego con el objetivo seco fuerte (40X)
d) Elabore sus esquemas y complete su reporte de laboratorio

PROTEÍNAS

IDENTIFICACION DEL ENLACE PEPTIDICO POR REACCIONES


QUÍMICAS

Las proteínas son compuestos cuaternarios formados por (C, H,


0, N) que tienen como unidades básicas aminoácidos los cuales
se unen por enlaces peptídicos. Ellas cumplen en los seres vivos
gran variedad de funciones, entre las cuales están: ser
catalizadores de reacciones biológicas (enzimas), defender al
organismo (anticuerpos) y formar estructuras.

Las proteínas pueden ser afectadas por cambios en la


temperatura, o concentración de iones H+ (pH) y pueden ser
identificadas por reacciones de color como Xantoproteica, Millón
y Biuret; así como por cromatografía en capa fina o de gases. La
identificación podemos hacerla en forma cualitativa o
cuantitativa.

Reacción de Biuret (Identificación del enlace peptídico)


En un tubo de ensayo ponga 2 ml. de agua,
Agregue 10 gotas de hidróxido de sodio al 10% y agite con la
varilla de vidrio

18
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

Agregue 5 gotas de solución de sulfato de cobre II al 10%, gota a


gota revolviendo
Repita el mismo procedimiento con la leche y la orina.
Anote sus resultados en el cuadro, y explique a qué se deben los
cambios observados. Complete su reporte de laboratorio

CUADRO: RESULTADOS CON REACCIÓN DE BIURET MUESTRA

MUESTRA CAMBIOS OBSERVADOS


AGUA
LECHE
ORINA

CUESTIONARIO:
1. ¿Por qué es diferente el resultado de lugol con la glucosa
y el almidón?
2. ¿Cuál porción del almidón es la que produce el color de la
reacción positiva de lugol?
3. ¿Para que almacenan almidón algunas células vegetales?
4. ¿Al colocar agua sobre el aceite de cocina, se mezclan?
¿Por qué?
5. ¿Cuál de los dos compuestos se va al fondo del tubo
(aceite o agua)? Explique ¿por qué?
6. ¿Por qué el sudán tiñe el aceite y no el agua destilada?
7. ¿Qué es un adipocito?
8. ¿Por qué se tiñen con sudán los adipocitos?
9. ¿Qué tipo de lípidos almacenan los adipocitos?
10. ¿Qué partes de la célula están estructuradas de lípidos?
11. Enumere las funciones de los lípidos en las células:
a.
b.
c.
12. ¿Cómo fue el resultado de la prueba de Biuret con la
orina? Explique este resultado.
13. ¿Cómo fue el resultado de la prueba de Biuret con la
leche?

19
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

14. ¿Cuál es la función del Hidróxido de sodio en la prueba de


Biuret?
15. ¿Qué tienen en común los 3 tipos de moléculas
identificadas en este laboratorio?

20
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

SEMANA 5

ELABORACIÓN DE UN MODELO TRIDIMENSIONAL DE LA


MEMBRANA PLASMÁTICA

I. INTRODUCCION.
La membrana citoplasmática es una estructura común a todas las
células, recubre el contenido interno manteniendo así las
diferencias esenciales entre el contenido de la célula y su
entorno. Dentro de la célula eucarionte, existen estructuras
como retículo endoplásmico, complejo de Golgi, mitocondrias y
otros delimitados por membrana que mantienen dentro de cada
compartimiento específico los contenidos moleculares propios
de cada uno de ellos, separándolos así del citoplasma
circundante y permitiéndoles realizar sus funciones.

Todas las membranas biológicas tienen una estructura básica


común: doble capa continua de moléculas lipídicas y proteínas
inmersas dentro de la doble capa lipídica que pueden ser de
ubicación intrínseca o periférica, la unión entre ambas moléculas
se debe a interacciones no covalentes, y la presencia de fuerzas
hidrofílicas e hidrofóbicas, secundarias a las características
anfipáticas de las moléculas. Las membranas pueden
interrelacionarse hacia los espacios acuoso extracelular y
también al acuoso intracelular y permiten que se realicen las
diferentes funciones a su cargo.

II. OBJETIVOS:
Que el estudiante comprenda la estructura de la membrana
plasmática, mediante la elaboración de un modelo
tridimensional.
III. MATERIALES SUGERIDOS.
Se sugiere emplear plasticina, duroport, alambre, clips, etc.
IV. PROCEDIMIENTO.

21
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

ELABORACION DEL MODELO DE MEMBRANA PLASMÁTICA.


Sobre una plancha de duroport de más o menos 22 x 20 cms.,
para representar los planos de las monocapas, proceda así:
A. Elaborar las moléculas de fosfolípidos con variados
colores, para diferenciar la cabeza hidrofílica de las colas
hidrocarbonadas e hidrofóbicas.
B. Utilizando colores diferentes en el material elegido,
construya y coloque las proteínas de ubicación intrínseca
y periférica.
C. No olvide colocar además las moléculas de colesterol y
carbohidratos en donde corresponda, de acuerdo al
modelo de su libro de texto.
D. El modelo puede elaborarse individualmente o en grupo
no mayor de 5 estudiantes, según las indicaciones del
profesor.
V. BIBLIOGRAFIA.
BRUCE ALBERTS. Biología Molecular de la Célula. España, Edit.
FELICIA. 1998.

CUESTIONARIO
Después de elaborar su modelo de membrana plasmática responda las
siguientes preguntas:
1. ¿Cuál es el concepto de Modelo de Mosaico Fluido de la membrana
celular?
2. ¿Qué características estructurales y de solubilidad poseen las
moléculas que conforman las membranas celulares?
3. ¿Cuál es la localización de las moléculas en la estructura de la
membrana celular y sus implicaciones funcionales?
4. ¿Cuál es el concepto del Sistema Intermembranas de la célula
eucarionte?
5. ¿Qué importancia tienen las interacciones hidrofóbicas en la
organización molecular de la membrana celular?
6. ¿Puede Ud. A través del modelo explicar la función de la estructura?

22
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

SEMANA 6
TRANSPORTE A TRAVÉS DE LA MEMBRANA

EFECTO DE LA OSMOSIS EN ERITROCITOS

I. INTRODUCCIÓN.
Las membranas que rodean a las células y organelos, poseen
permeabilidad diferencial, favoreciendo el paso selectivo de las
substancias.

Se conoce como diálisis el movimiento del soluto a través de la


membrana y ósmosis al movimiento del solvente. Las soluciones
de cloruro de sodio se pueden clasificar de acuerdo a su
concentración en: isoosmolar ó isotónica, hiperosmolar ó
hipertónica e hipoosmolar ó hipotónica. Sin embargo, los
términos no son sinónimos cuando se aplica a solutos como la
urea.
Las células responden de manera distinta, dependiendo la
concentración de soluto que tenga el medio donde se encuentran.

En el presente laboratorio se utilizará solución salina ó de cloruro


de sodio a diferentes concentraciones para observar el
comportamiento del eritrocito al estar en contacto con ellas.

II. OBJETIVOS.
Al finalizar la práctica, cada estudiante será capaz de:
1. Explicar, los cambios mIcroscópicos que sufre la sangre al
aplicarles soluciones con diferentes osmolaridad.
2. Describir los cambios morfológicos que presentan las
células en solución hipotónica, isotónica e hipertónica.
3. Relacionar los cambios celulares observados con la
permeabilidad selectiva de su membrana citoplasmática.

23
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

III. MATERIALES.
APORTADOS POR GRUPO DE APORTADOS POR LA UNIDAD
ESTUDIANTES DIDACTICA
Portaobjetos y cubreobjetos Microscopio óptico compuesto
3 tubos de ensayo Agua destilada en frasco gotero
Gradilla 1 recipiente para descartar
1 jeringa hipodérmica objetos punzocortantes
descartable de 3 ml con aguja Solución salina isotónica 0.9%
21
Liga para extracción de sangre
3 goteros descartables
Alcohol
Algodón
Guantes descartables para
cada estudiante
1 cucharada de sal
1 bolsa de cloro

IV. CUESTIONARIO PRELABORATORIO Nota: Resuélvalo ANTES de


ingresar al laboratorio
1. Investigue cuáles son los cambios morfológicos que sufre una
célula si se coloca en:
i. Solución isoosmolar:
ii. Solución hipoosmolar:
iii. Solución hiperosmolar:
2. Defina lo siguiente:
i. CITÓLISIS
ii. HEMÓLISIS
iii. CRENACIÓN
3. Explique por qué razón la célula vegetal no sufre lisis en una
solución hipotónica:
4. Investigue y esquematice cuál es la apariencia microscópica de
una plamólisis

24
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

V. PROCEDIMIENTO.
1. Rotule tres tubos de ensayo así: ISOTÓNICA, HIPERTONICA
E HIPOTONICA y agregue en cada uno 3 ml de solución
salina isotónica
2. El tubo rotulado isotónica se queda igual
3. Al tubo rotulado hipertónica se le agrega unos granos de
sal, en cantidad según indicaciones de su docente y se
revuelve para que sea homogénea
4. Al tubo rotulado hipotónica se le agrega agua destilada,
según indicaciones de su docente y se revuelve para que
sea homogénea
5. El docente extrae a un estudiante 1 ml de sangre e
inmediatamente agrega 2 gotas en cada uno de los tubos
de ensayo ya preparados.
6. Utilizando una pipeta diferente para cada tubo de ensayo,
extraiga una gota y elabore una preparación temporal.
7. Observe al microscopio con objetivo seco fuerte y anote
los resultados enfatizando en cual preparación observó:
Hemólisis, Crenación o Células que no se han modificado
en su morfología.
8. Analice en cuál de las preparaciones se han observado los
fenómenos de endósmosis y exósmosis netas.
9. Complete su reporte de laboratorio.

25
Universidad de San Carlos de Guatemala, Centro Universitario de Petén. Unidad
académica de Biología Celular y Molecular, 2025.

VI. REFERENCIAS
1. Audesirk,T., G. Audesirk & B. Byers. (2008). Biología la vida en
la tierra. 8ª. ed.: Pearson Prentice Hall. 924 pp.
2. BSCS. (1965). Investigaciones de Laboratorio de campo.
Adaptación . Student Laboratory Guide.
3. Becker, W., L. Kleinsmith & J. Hardin. (2007). El Mundo de la
Célula. 6ª. ed.: Pearson Educación, Madrid.
4. Cooper, G. (2004). La Célula. 2ª. ed.: Marbán S.L., Madrid.
5. Karp, G. (2004). Biología Celular y Molecular. Mc Graw-Hill
Interamericana, México.
6. Lodish, H., A. Berk, L. Zipursky, P. Matsudaira, D. Baltimore &
J. Darrell. (2002). Biología Celular y Molecular. 4ª ed.:
Médica Panamericana. 1084 pp.
7. Robertis, E. (1970). Biología Celular. Buenos Aires: El Ateneo.
8. Ville, C. A. (1977). Biología. México: interamericana.
26

También podría gustarte