FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE MEDICINA HUMANA

Laboratorio de Biología Celular

Ciclo 2025-0

Informe Nº5

Tema: Extracción de ADN - Fundamentos de la PCR - Fundamentos de

Electroforesis

GRUPO Nº: 3

INTEGRANTES APELLIDOS Y NOMBRES PORCENTAJE DE

PARTICIPACIÓN

1 Ramos Flores Luis Fernando 100%

2 Quispe Torres, Maddy Charito 100%

3 Zevallos Villanueva, Belen Evelyn 100%

SECCIÓN Y HORARIO: 1C2, Viernes [Link], Sábado [Link]

DOCENTES: Juan Jose Prieto Marcos y Liza Trujillo, Veronica Edith

NOTA:

LIMA, PERÚ

2025
1.​ INTRODUCCIÓN:

1.1. MARCO TEÓRICO:

●​ Ácido desoxirribonucleico (ADN): Es una molécula que contiene

información genética de los seres vivos. Se encuentra en el núcleo de

las células y lleva instrucciones necesarias para el desarrollo,

funcionamiento, crecimiento y reproducción de todos los organismos

vivos. En cuanto a su estructura, está compuesto de dos cadenas

largas de nucleótidos que se enrollan entre sí, formando una doble

hélice. Cada nucleótido está conformado por un grupo fosfato, un

azúcar pentosa y una de cuatro bases nitrogenadas: Adenina (A),

Timina (T), Citosina (C), Guanina (G), estas bases tienen una forma

específica de emparejarse (A con T, mediante un doble enlace por

puente de hidrógeno, y C con G, mediante un triple enlace por puente

de hidrógeno). Esto permite la replicación exacta del ADN propuesto

dado que, cada cadena sirve como plantilla para la síntesis de su

cadena complementaria en la división celular. Como mencionan

Vilches y Legarralde (2021), en las células procariotas, el material

genético es una molécula única y circular de ADN desnudo, disperso

en el citoplasma, en una región denominada nucleoide. Además,

mencionan que en las células eucariotas, el material genético (ADN)

está formado por moléculas de cadena lineal y fuertemente asociado a

proteínas, las moléculas de ADN se encuentran en un núcleo definido

por una doble membrana nuclear, que lo separa de los otros

componentes celulares, dispersos en el citoplasma. En síntesis, se

 puede afirmar que el ADN es fundamental para la herencia,

garantizando así la continuidad de la vida y la diversidad biológica.

●​ Extracción del ADN: Proceso que implica la ruptura de células,

eliminación de proteínas y otras sustancias, y la purificación del ADN.

Técnicas como lisis celular, la precipitación con alcohol y el uso de kits

comerciales son comunes en este procedimiento. Según Lugo (2018),

las muestras de saliva y frotis bucal, fueron exitosas; logrando obtener

una buena concentración de ADN en condiciones de pureza, como

para permitir la amplificación del gen por PCR.

●​ Kit de Extracción (ZYMO Research): Isuosuo y otros autores (2024)

mencionan que, el kit de extracción de ADN Zymo Research es fácil de

usar y eficiente para obtener ADN de alta calidad y pureza, eliminando

contaminantes y permitiendo aplicaciones moleculares como PCR.

Aunque no se comparó con otros métodos, se destacó su rapidez,

seguridad y resultados consistentes. Se puede afirmar que este kit

soporta muestras difíciles de lisar, como semillas o tejidos con

metabolitos secundarios. Además, a diferencia de otros kits de

extracción, este no requiere sustancias peligrosas como fenol o

cloroformo.

●​ Dodecil Sulfato de Sodio (SDS): Ramos [Link]. (2020) lo definen

como, “agente modificador de superficie”. Por lo tanto, se trata de un

agente detergente que rompe las membranas celulares y disuelve

proteínas, en cuanto a su uso para la extracción del ADN, se encarga

de romper las membranas celulares y liberar ácidos nucleicos.

●​ Espectrofotometría: Técnica analítica utilizada para medir la cantidad

de luz que absorbe una solución a diferentes longitudes de onda.

Hernández y otros autores (2009) sostienen que, “evalúa la integridad

de la macromolécula, así como el grado de pureza de la misma

respectivamente”. Esto quiere decir, que permite cuantificar y evaluar

la calidad del ADN extraído, lo cual es esencial para asegurarse de

que el material genético sea adecuado para análisis posteriores, como

PCR.

●​ Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR): Es una técnica de

laboratorio utilizada para la amplificación de fragmentos específicos de

ADN, mediante la producción de múltiples copias de una secuencia

específica. De esta manera se puede analizar pequeñas cantidades de

ADN de manera eficiente. Gonzales y Rueda (2023) añaden que, “ la

PCR consiste en una serie de 20 a 35 cambios repetidos de

temperatura llamados ciclos, comúnmente estos tienen tres pasos a

diferentes temperaturas: el primero es la desnaturalización, donde se

separan las dos cadenas del ADN para amplificar a 95°C; el segundo

es el alineamiento, donde el cebador se une a su secuencia

complementaria en el ADN molde a 40−55°C, y el tercero es la

extensión donde actúa la polimerasa tomando el ADN molde para

sintetizar la cadena complementaria, partiendo del cebador como

soporte inicial a una temperatura de 75−80°C. Esta técnica tiene

aplicaciones muy importantes en el campo médico, científico y forense,

se aplica en el diagnóstico de enfermedades genéticas e infecciosas,

pruebas de paternidad, clonación y manipulación genética, entre otros.

●​ DNasas: Pueden ser definidas como enzimas que se encargan de la

degradación del ADN al romper sus enlaces fosfodiéster. Arana y otros

autores (2024) mencionan que, el ADN se fragmenta por acción de las

DNasas, por lo tanto será necesario la utilización del detergente en la

práctica para ayudar en la disolución de las membranas y la inhibición

de las DNasas.

●​ ADN polimerasa: Es una enzima esencial para la replicación y

reparación del ADN, se encarga de sintetizar nuevas cadenas de ADN

complementarias a partir de una cadena molde, agregando los

nucleótidos complementarios a ella, de manera continua. Ojeda (2022)

explica que, “Al agregar nucleótidos se forman enlaces fosfodiéster y,

las bases nitrogenadas se unen por puentes de hidrógeno. La enzima

sintetiza en un sentido 5’-3’ ”. Es importante recalcar la importancia de

esta enzima en técnicas de laboratorio como la PCR, que amplifica

secuencias de ADN para su análisis, ya que corrige errores y daños en

el ADN para mantener la integridad genética y estabilidad genómica.

●​ TAQ Polimerasa: Es una enzima perteneciente al ADN polimerasa,

termoestable y derivada de la bacteria termófila Thermus aquaticus

que vive en fuentes termales y ambientes extremos. Según Coronado

y Gonzales (2021), “Esta proteína, es considerada como la enzima que

comúnmente se utiliza en la reacción de cadena polimerizada (PCR),

debido a que es resistente al calor, con una vida media de 40 minutos

a 95°C”. La taq polimerasa facilita la amplificación del ADN de manera

eficiente y rápida.
●​ Termociclador: Hurtado y Carmona (2023) lo definen como el equipo

donde cíclicamente se repiten las 3 etapas con variación de

temperatura, de PCR: desnaturalización, alineamiento, extensión. El

termociclador controla electrónicamente la amplificación de ADN de

muestras, mediante el empleo de procesos de fabricación y materiales

de bajo costo.

●​ Citocromo B (CYTB): Son proteínas que contienen un grupo hemo

como cofactor funcional (hemoproteínas), esenciales para la

transferencia de electrones en la cadena respiratoria mitocondrial.

Hernández (2023) añade que, “son principalmente responsables de

generar energía de ATP por la vía de transporte de electrones, se

encuentran ya sea como proteínas monoméricas o como subunidades

de grandes complejos enzimáticos que catalizan reacciones redox. Los

citocromos son capaces de realizar la oxidación y la reducción”. Por

otro lado, es importante mencionar que el gen citocromo b es una

secuencia de ADN que codifica a esta proteína, el gen se encuentra en

el ADN mitocondrial de la mayoría de organismos eucariotas.

●​ Electroforesis en gel: Es una técnica utilizada en el laboratorio para

separar moléculas (como ADN, ARN o proteínas) en función de su

tamaño, carga eléctrica o forma. Dicha separación ocurre cuando las

moléculas migran a través de un gel (mayormente de agarosa o

poliacrilamida) sometido a un campo eléctrico. Las moléculas con

carga migran a través del gel hacia el electrodo de carga opuesta, las

moléculas más pequeñas migran más rápido y a mayor distancia que

las grandes. Quintero (2020) detalla que, “La electroforesis en geles de

 agarosa es el método estándar utilizado para la separación,

identificación y purificación de fragmentos de ADN.” Se puede localizar

el ADN dentro del gel mediante tinciones con colorantes fluorescentes

intercalantes como Bromuro de Etidio, SYBR Green, entre otros.

●​ Buffer de corrida (TAE): Un material indispensable en el

procedimiento de electroforesis en gel de agarosa. Buffer TAE

(Tris-Acetate-EDTA) es un tampón que se usa cuando se requiere una

alta resolución y separación de ADN bicatenario de alto peso

molecular. La composición del buffer TAE es Tris-acetato de 0,04

M,EDTA 1mM, pH 8,0. Ideal para la recuperación de DNA y

manipulaciones en gel agarosa, con una baja fuerza iónica además de

una mejor resolución de grandes fragmentos de ADN.

●​ Proteinasa K: La extracción de ADN, requiere procesos que

naturalmente suceden en nuestro cuerpo, pero gracias a la proteinasa

K, dichos procesos pueden ser evaluados in vitro. Los métodos que

utilizan la hidrólisis con proteínasas tienen como principio básico al uso

de la proteinasa K la cual se usa para degradar proteínas

contaminantes en muestras biológicas, permitiendo la liberación pura

de ácidos nucleicos, proceso crucial para análisis posteriores como la

PCR y la Electroforesis. Además de que la adición de la proteinasa K

inactiva rápidamente las nucleasas que degradan el ADN o el ácido

ribonucleico.
1.2 OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:

●​ Analizar la técnica de extracción de ADN a partir de muestras

biológicas sacadas en clase.

●​ Comprender los fundamentos de la técnica de PCR.

●​ Conocer la importancia del uso de PCR en la identificación de

enfermedades principalmente de transmisión genética en los seres

vivos.

●​ Comentar sobre la fragmentación del ADN genómico mediante la

técnica de PCR.

●​ Lograr la técnica de electroforesis en gel de agarosa.

●​ Comprender los conceptos básicos de la separación de ácidos

nucléicos en una corrida electroforética

●​ Estudiar y analizar la muestra de ADN aislada de todas las muestras

extraídas
2.​ PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

2.1. MATERIALES:

MATERIALES DEL LABORATORIO UTILIZADOS EN EL

DESARROLLO DE EXPERIENCIAS:

2.1.1. EXTRACCIÓN DE ADN:

●​ 4 hisopos estériles ●​ Microcentrífuga 16000

●​ Caja de rpm
punzocortantes ●​ Vortex
●​ 1 kit de extracción de ●​ Espectrofotómetro
ADN (ZYMO Lambda
Research) (cuantificación de
●​ Frasco de 100 mL. de ADN)
alcohol de 96-100% ●​ Caja de puntas de 0.5
●​ Micropipetas de - 10 μL (estériles)
10-100, 100-1000 μL ●​ 4 tubos de PCR (250
●​ 4 microtubos de 1.5 μL)
mL
2.1.2. FUNDAMENTOS DE LA PCR:

●​ Micropipetas de ●​ 1 termociclador
10-100 μL ●​ 4 muestras de ADN
●​ 50 puntas de 10-100 ●​ 1 kit - Mix de PCR (taq
μLy de 100-1000 μL polimerasa, dNTPs,
●​ 4 microtubos de 0,5 primer, Mg, agua)
mL. (esterilizados) ●​ 1 kit de primers
●​ 1 microcentrífuga
16000 rpm
2.1.3. FUNDAMENTOS DE ELECTROFORESIS:

●​ Muestra de ADN ●​ 5 μL de marcador de

obtenida en la práctica peso molecular (100
anterior pb)
 ●​ 1 cámara de
electroforesis y ●​ 1 L de Buffer
accesorios (peines, Tris-acetato-EDTA 1X
soporte, tabla (TAE) pH 8-8.3
niveladora, etc.) ●​ 1.5 mL de Buffer carga
●​ 1 fuente de poder para ADN
●​ Micropipetas para ●​ 40 μL de colorante
volúmenes de 0.5-10 Sybr green
μL ●​ 1 transiluminador de
●​ 100 mL de agarosa al luz UV
2% (fotodocumentador)
●​ 1 lámina de parafilm
2.2. MÉTODOS USADOS EN EL DESARROLLO DE EXPERIENCIAS:

2.2.1 EXTRACCIÓN DE ADN:

Extracción de ADN de epitelio bucal: Comenzamos con un raspado

fuerte en la parte interna de las mejillas (3 minutos aproximadamente)

de 4 alumnos con un hisopo estéril, luego colocamos el hisopo en un

tubo eppendorf (1.5 mL), mantenemos el algodón dentro del tubo y

cortamos el exceso de la varilla. A continuación, utilizamos las

soluciones del Kit de extracción de ADN (en este caso, ZYMO

Research). Primero, agregamos 100 μL de Buffer BioFluid ＆ Cell (rojo)

y 100 μL de Buffer DNA Elution, además de 10 μL de proteinasa K,

homogenizamos usando el vórtex por 20 segundos. Seguidamente,

incubamos a 55°C durante 10 minutos. Pasado el tiempo, añadimos 210

μL de Buffer Genomic Binding a la muestra y mezclamos en el vórtex

por 15 segundos. Finalmente, quitamos los hisopos de los tubos de

eppendorf, haciendo presión en las paredes de este, para favorecer que

se queden las células y tratar de no contaminar la muestra de ADN.

Purificación de la muestra de ADN: Continuando con la práctica,

transferimos el sobrenadante a una columna de extracción (Zymo-Spin),

que está colocada en un tubo colector. Procedemos con la

centrifugación de la columna a 12000 gravedades por 1 minuto,

descartamos el tubo colector y colocamos la columna en un nuevo tubo

colector. Seguimos con la práctica, adicionando 400 μL de buffer DNA

Pre-Wash a la columna de extracción, procedemos con la centrifugación

a 12000 gravedades por 1 minuto y eliminamos el filtrado del tubo

colector. A continuación, en el mismo tubo colector adicionamos 700 μL

de buffer g-DNA Wash a la columna de extracción, continuamos con la

centrifugación a 12000 gravedades por 1 minuto, eliminamos el tubo

colector. Con este paso finalizamos el primer lavado, realizamos un

segundo lavado añadiendo 200 μL de buffer g-DNA Wash a la columna

de extracción, llevamos la muestra a centrifugación por 12000

gravedades durante 1 minuto, desechamos el tubo colector. Finalmente,

colocamos la columna de extracción en un tubo de eppendorf nuevo

(1.5 mL), le añadimos 50 μL de Buffer DNA Elution, incubamos a

temperatura ambiente durante 5 minutos y por último, centrifugamos a

máxima velocidad durante 1 minuto.

Cuantificación de ADN bicatenario: En primer lugar, limpiamos el sensor

del espectrofotómetro con un blanco (agua destilada). Luego,

colocamos 2 μL de cada muestra de ADN extraída de cada grupo, en el

sensor del espectrofotómetro. Como paso final, obtenemos nuestros

resultados y anotamos.
2.2.2. FUNDAMENTOS DE LA PCR:

Técnica de PCR: Primero se preparó 17 μL del Master mix (todos los

ingredientes de la PCR) para colocarlo en el termociclador, luego

agregamos 4 μL de cada muestra de ADN al tubo con el master mix, así

teniendo 21 μL en cada tubo de eppendorf. Luego, lo colocamos en el

termociclador configurándolo para amplificar el gen citocromo B.

Esperamos por 1 hr y 51 min, el proceso de amplificación.

2.2.3. FUNDAMENTOS DE ELECTROFORESIS:

Técnica de Electroforesis: se mezcló 50 mL de agarosa al 2% con 20 μL

de colorante de Sybr green, dejando polimerizar la mezcla por 10

minutos. La mezcla líquida se coloca en un molde hasta que se enfríe

formando un gel, mientras tanto se coloca un peine encima para que se

formen los pocillos donde pondremos las cargas de las muestras de

ADN. Posteriormente, se realizan 8 mezclas de 4 μL de ADN extraído

de cada alumno con 2 μL de buffer TAE sobre una lámina parafilm “M”.

Primero, con una micropipeta de 0.5-10μL añadimos el marcador de

peso molecular al sistema, luego el ADN total de nuestros compañeros,

también adicionamos el PCR de nuestros compañeros, y por último un

marcador de peso molecular más. Ya que terminamos de preparar el

sistema, cubrimos el tanque y conectamos los cables de los electrodos

a la fuente de poder. Encendimos la fuente y seleccionamos un voltaje

adecuado de 90 voltios durante 45 minutos. Ya que concluyó el tiempo

de la electroforesis, desconectamos los cables de los electrodos y

retiramos el sistema con cuidado. Llevamos el indicador al

transiluminador para que se revele el resultado de la electroforesis.

3.​ RESULTADOS:

3.1. EXPERIMENTO 01: Extracción de ADN:

Se tienen 4 muestras analizadas correspondientes a las mesas 1, 2, 3 y 4.

La tabla muestra la concentración (expresada en ng/μL) y las relaciones

A260/280 y A260/230 de cada muestra. Los resultados revelaron que la mesa

4 obtuvo la concentración más alta, alcanzando 34,2 ng/μL, mientras que la

mesa 3 presentó la concentración más baja, con un valor de 11,2 ng/μL.

Tabla 01

Resultados de la concentración y solvencias de las muestras de ADN

(Concentración y Absolventes)

MUESTRA Concentración de ADN A260/280 A260/230

Mesa 1 21,6 ng/μL 1,82 0,37

Mesa 2 13,8 ng/μL 1,86 0,90

Mesa 3 11,2 ng/μL 1,88 0,47

Mesa 4 34,2 ng/μL 1,86 1,00

Nota: se cuantificaron 2 μL del ADN extraído de cada estudiante.

3.2. EXPERIMENTO 02: Fundamentos de PCR:

A partir de las mismas 4 muestras obtenidas, se midió la cantidad de ADN

utilizado en la técnica de PCR, tomando en cuenta que la mesa 4 presentó la

mayor cantidad (136,8 ng) y la mesa 3, la menor (44,8 ng).

 Tabla 02

Cantidad de ADN utilizado en la PCR

MUESTRA Cantidad de ADN (ng)

Mesa 1 21,6 ng/μL x 4 μL = 86,4 ng

Mesa 2 13,8 ng/μL x 4 μL = 55,2 ng

Mesa 3 11,2 ng/μL x 4 μL = 44,8 ng

Mesa 4 34,2 ng/μL x 4 μL = 136,8 ng

Nota: se cuantificaron 4 μL del ADN extraído de cada estudiante.

3.3. EXPERIMENTO 03: Fundamentos de electroforesis:

A partir de las 4 muestras, se observa que en algunos casos el ADN total

está degradado o en baja concentración, como en la mesa 3. Sin embargo,

en las Mesas 1, 2 y 4 se observa una amplificación exitosa en el PCR, lo que

indica que el ADN estaba en condiciones adecuadas para ser amplificado en

estas muestras.

Figura 01

Electroforesis en gel de agarosa 2%

Nota: Pocillo 1 y 10: Ladder 100bp. Pocillo 2: ADN extraído de la mesa 1. Pocillo 3: Amplificado
mesa 1. Pocillo 4: ADN extraído de la mesa 2. Pocillo 5: Amplificado mesa 2. Pocillo 6: ADN extraído
de la mesa 3. Pocillo 7: Amplificado mesa 3. Pocillo 8: ADN extraído de la mesa 4. Pocillo 9:
Amplificado mesa 4.
 4.​ ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS:

4. 1. Extracción de ADN

La extracción de ADN es un procedimiento esencial en biología molecular, ya que

permite obtener material genético para diversas aplicaciones científicas y médicas

(Vilches & Legarralde, 2021). Este proceso implica la lisis celular, la eliminación de

proteínas y otras impurezas, y la purificación del ADN, garantizando así la obtención

de muestras de alta calidad. En este experimento, se utilizó la técnica de extracción

de ADN a partir de epitelio bucal, empleando un kit de extracción de ZYMO

Research. Este método ha demostrado ser eficiente para la obtención de ADN en

condiciones adecuadas para su posterior análisis mediante PCR y electroforesis,

asegurando que el material genético no esté contaminado y que su estructura se

mantenga íntegra.

Los resultados obtenidos en la cuantificación de ADN indican que la mesa 4

presentó la mayor concentración (34,2 ng/μL), mientras que la mesa 3 obtuvo la

menor (11,2 ng/μL). Estas diferencias pueden estar relacionadas con la calidad de la

muestra inicial o con variaciones en la eficiencia del procedimiento de extracción.

Además, la relación A260/280 mostró valores cercanos a 1.8 en todas las muestras,

lo que sugiere una adecuada pureza del ADN extraído, con mínimas

contaminaciones proteicas (Hernández et al., 2009). Sin embargo, la relación

A260/230 presentó valores menores a 2.0 en algunas muestras, lo que podría

indicar la presencia de contaminantes como sales o solventes residuales. Es

fundamental que estas impurezas sean minimizadas para garantizar resultados

precisos en los análisis posteriores.

 4. 2. Amplificación mediante PCR

La PCR es una técnica fundamental para la amplificación de fragmentos específicos

de ADN y ha revolucionado la biología molecular por su precisión y eficiencia. En

este experimento, se amplificó el gen Citocromo B mediante el uso de primers

específicos y la enzima Taq polimerasa (Coronado & González, 2021). Este proceso

consiste en la desnaturalización del ADN, la unión de primers y la extensión de la

cadena por la polimerasa, lo que permite obtener millones de copias de la secuencia

de interés en un corto período de tiempo.

Se observaron diferencias en la cantidad de ADN utilizado para la amplificación, con

la mesa 4 presentando la mayor cantidad (136,8 ng) y la mesa 3 la menor (44,8 ng).

Esta variabilidad en las concentraciones iniciales de ADN puede haber afectado la

eficiencia de la amplificación. Los resultados obtenidos en la electroforesis sugieren

que la amplificación fue exitosa en las mesas 1, 2 y 4, mientras que en la mesa 3 se

observó una menor intensidad de la banda amplificada. Esto puede deberse a una

menor concentración de ADN en la muestra inicial o a la presencia de inhibidores

que afectaron la reacción de PCR (González et al., 2023). La calidad del ADN

extraído y la precisión en la preparación de la mezcla de reacción son factores clave

para obtener una amplificación eficiente y reproducible.

4. 3. Electroforesis

La electroforesis en gel de agarosa permitió visualizar los productos de PCR y

evaluar la eficiencia de la amplificación. Esta técnica se basa en la migración de las

moléculas de ADN a través de un gel de agarosa bajo la influencia de un campo

eléctrico, separándolas según su tamaño. Se utilizó un gel de agarosa al 2% junto

con un marcador de peso molecular para estimar el tamaño de los fragmentos

amplificados.

Las bandas obtenidas en las muestras amplificadas de las mesas 1, 2 y 4 fueron

nítidas y bien definidas, indicando una amplificación eficiente y una adecuada

integridad del ADN. En contraste, la muestra de la mesa 3 presentó una banda

tenue, lo que sugiere una baja concentración o posible degradación del ADN.

Factores como el tiempo de corrida, la calidad del ADN y la correcta preparación del

gel pueden influir en la nitidez y resolución de las bandas obtenidas. La utilización

de un marcador de peso molecular permitió una adecuada comparación de los

fragmentos amplificados, proporcionando información valiosa sobre la eficacia de la

amplificación y la posible presencia de contaminantes o degradación en algunas

muestras.

5.​ CONCLUSIONES

●​ Se logró obtener ADN de buena calidad en la mayoría de las

muestras, con valores A260/280 cercanos a 1.8, lo que indica una

pureza adecuada. Sin embargo, algunas muestras presentaron valores

bajos en A260/230, sugiriendo la presencia de contaminantes como

sales o solventes residuales, los cuales podrían afectar análisis

posteriores.

●​ Hubo diferencias significativas en las concentraciones de ADN

extraído entre las mesas, con la mesa 4 presentando la mayor

cantidad (34.2 ng/μL) y la mesa 3 la menor (11.2 ng/μL). Estas

variaciones pueden atribuirse a la calidad de las muestras iniciales o a

diferencias en la eficiencia del procedimiento de extracción.

 ●​ La amplificación del gen Citocromo B fue exitosa en la mayoría de las

muestras, pero la mesa 3 mostró menor intensidad en la banda

amplificada. Esto puede deberse a la baja concentración de ADN en la

muestra inicial o a la presencia de inhibidores que afectaron la

reacción de PCR.

●​ La electroforesis en gel de agarosa confirmó la eficiencia de la

amplificación en las mesas 1, 2 y 4, mientras que en la mesa 3 se

observó una banda tenue, lo que sugiere menor cantidad o posible

degradación del ADN. Factores como la calidad del ADN y la correcta

preparación del gel influyeron en la claridad de las bandas obtenidas.

●​ Los resultados indican que para garantizar una amplificación eficiente

y reproducible es fundamental obtener ADN libre de contaminantes y

con una concentración adecuada. La optimización del procedimiento

de extracción y la preparación precisa de la mezcla de reacción son

claves para mejorar la eficiencia en futuros experimentos.

6.​ REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

●​ Lugo, D. (2018). Desarrollo de métodos de extracción de ADN en saliva: frotis bucal y sangre
fijada en papel filtro utilizando detergente comercial.
[Link]
[Link]
●​ Ramos, G., Corona, S., Ramírez, M., y Palomar, M. (2020). Determinación de los parámetros
electroquímicos de la hidrocortisona en electrodos de pasta de carbono en presencia de
dodecil sulfato de sodio. Cd. Juárez, Chihuahua.
[Link]
-.pdf?sequence=1&isAllowed=y#page=23
●​ Hernández, O., Debesa, A., y Quesada, L. (2009). Purificación de ADN genómico humano
para el diagnóstico del lupus eritematoso sistémico. Revista Archivo Médico de Camagüey,
13(1), 0-0. [Link]
●​ Vilches, A.​ y Legarralde, T.​(2021).​ Aspectos biológicos de la complejidad humana. La
Plata: Universidad Nacional de La Plata ; EDULP. (Libros de​ Cátedra. Sociales). En
Memoria Académica. [Link]
●​ González, D., Rueda, A., y de la Vega, A. (2023). Problema Bioquímico introducción al diseño
de oligonucleótidos para la PCR en tiempo real. Revista de Educación Bioquímica, 42(1),
44-45. [Link]
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of eight six accessions of Treculia species using Zymo Research mini-prep DNA extraction
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●​ Arana, A., Curto, M., Rodríguez, E., y Ransanz, E. (2024). Extracción de ADN como
estrategia didáctica para aprender sobre la célula en Educación Primaria y Secundaria.
[Link]
estrategia_did%c3%a1ctica_para_aprender_sobre_la_c%c3%[Link]?sequence=1&isAllo
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●​ Ojeda, C. (2022). ADN Polimerasa.
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●​ Coronado, L., y González, V. (2021). Evaluación de la producción de la Taq polimerasa en un
biorreactor de 1 L en la Corporación Corpogen.
[Link]
●​ Hurtado, Y., Arreola, A., y Carmona, C. (2023). Técnica de PCR para diagnóstico molecular.
Abanico Boletín Mexicano, 2,
e2023-8.[Link]
 7.​ RÚBRICA:

COMPETENCIAS:
●​ Pensamiento crítico y científico: Identifica la información proporcionada
analizando críticamente y categorizando ésta para el correcto entendimiento y
planteamiento de conclusiones.
●​ Aprendizaje autorregulado de bases científicas y médicas: Interioriza los
conocimientos, experiencias y vivencias que le permiten construir las bases del
conocimiento, utilizando estrategias de aprendizaje.

CRITERIO LOGRO DESTACADO LOGRADO NO LOGRADO

[Link]ÁTULA Se ajusta completamente Se ajusta al formato No incluye todos los

(indicando al formato institucional y establecido, pero datos solicitados y los
porcentaje de posee toda la información omite datos presentados están
participación) Y requerida para la relevantes de la desordenados. No se
PRESENTACIÓN presentación del informe. presentación. ajusta al formato de
presentación.

1 punto 0.5 puntos 0 puntos

[Link]ÓN Las fuentes de La mayoría de los Algunos supuestos

(marco teórico y información están conceptos están están evidenciados y
objetivos de la excelentemente sustentados. justificados. Las citas
práctica) integradas con el material Presentan alguna se integran de modo
práctico, coherente desconexión en la deficiente, pobre o
redacción. Muy buen uso redacción y no débil integración de
de las fuentes están del todo fuentes secundarias.
secundarias. Lo claras respecto a lo Redacción
presentado argumenta desarrollado en el insuficiente de
totalmente el tema. laboratorio. objetivos, se omite
Redacción de los Objetivos del algunos propósitos
objetivos completamente experimento del laboratorio. Uso
ajustada al desarrollo redactados con no adecuado de
experimental de la pequeñas omisiones verbos.
práctica de laboratorio. y errores de
Correcto uso de verbos. redacción.

1 punto 0.5 puntos 0 puntos

[Link] Describe en tiempo Describe en primera No utiliza el tiempo

EXPERIMENTAL pasado y en primera persona los pasado ni redacta en
(materiales y persona los materiales y materiales y primera persona los
métodos usados) metodología utilizadas en metodología materiales y
el desarrollo de sus utilizadas en el metodología utilizada
experiencias. desarrollo de sus en el desarrollo de
experiencias sin sus experiencias, la
utilizar el tiempo información es
pasado. incompleta.
 1 punto 0.5 puntos 0 puntos

[Link] Todas las figuras, Figuras, tablas y La mayor parte de las

gráficos y tablas están gráficos son en figuras, gráficos y
bien diseñadas, general correctos, tablas son correctas,
numeradas y tituladas. aunque presentan pero en varios casos
algún problema presentan
menor que podría limitaciones de
ser mejorado. importancia.

5 puntos 3 puntos 0 puntos

[Link]ÁLISIS Y Todos los resultados Casi todos los Parte de los datos se
DISCUSIÓN DE comparativos y las resultados han sido han interpretado y
LOS RESULTADOS tendencias presentes en interpretados y discutido
los datos han sido discutidos correctamente, pero
interpretados y discutidos correctamente. Se se identifican errores
correctamente. Buena identifican e imprecisiones de
comprensión de lo imprecisiones importancia.
indicado por resultados. menores.

5 puntos 3 puntos 0 puntos

[Link] Se exponen con claridad, Se exponen todas Aunque recojan los

concisión y acierto todas las principales aspectos
las conclusiones conclusiones estudiados, se
importantes. básicas, explican
Excelente comprensión. pero se podría y comentan errónea o
mejorar ambiguamente.
la formulación. Pobre
Algunos comprensión.
aspectos vagos.

5 puntos 3 puntos 0 puntos

[Link] Referencias bibliográfica Referencias Presenta una

BIBLIOGRÁFICAS completa y bien bibliográficas bibliografía
formulada, completa, pero sin incompleta,
con excelentes citas en el utilizar dentro del obviando algunas
informe de laboratorio. marco teórico. referencias
obligatorias
(guías y apuntes
personales, etc.)

2 puntos 1 punto 0 puntos