UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA

DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA

EFECTO ANTIMICROBIANO DE CUATRO PLANTAS

MEDICINALES DE TONATICO, ESTADO DE
MÉXICO.

TESIS

QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE:

B I Ó L O G O

P R E S E N T A:

MIGUEL ÁNGEL RIVERA RESÉNDIZ

DIRECTORA DE TESIS:
DRA. ANA MARÍA GARCÍA BORES

LOS REYES IZTACALA, TLALNEPANTLA, EDO.

DE MÉXICO 2022.
UNAM – Dirección General de Bibliotecas
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respectivo titular de los Derechos de Autor.
 “Aquellos que no son capaces de reconocerse a sí mismos están destinados a
fallar”.
Itachi Uchiha personaje de Masashi Kishimoto autor de Naruto.

Agradecimientos
El presente estudio fue financiado por el Programa de Apoyo a Proyectos de
Investigación e Innovación Tecnológica (PAPIIT), proyecto:

DGAPA PAPIIT IN220920

“Estudio farmacognóstico de algunas plantas empleadas para tratar padecimientos

cutáneos en Tonatico, Estado de México”.

Dedicatorias

Antes de empezar estas dedicatorias me gustaría dejar como antecedente en este

documento que a finales de 2019 y principios de 2020 comenzó una pandemia que
nos afectó a todos. Algunos familiares y amigos desafortunadamente ya no se
encuentran con nosotros. Pese a todo este infortunio, quisiera agradecer a Dios por
darnos una oportunidad de estar aquí.

A mis padres Placi Reséndiz y Miguel Rivera por todo su cariño, apoyo y enseñanzas.
Enseñanzas que me han ayudado a lo largo de todo este tiempo.

A mi hermana Diana que comenzara una nueva etapa académica en la Universidad.

A mis queridos amigos Pedro, Max, Brandon, Aranza, Luis y Víctor ya que la
Universidad no hubiera sido lo mismo sin ustedes.

A mis estimados compañeros y amigos de laboratorio Rebeca e Isaac, los últimos

años de la Universidad no hubieran sido lo mismo sin ustedes.

A mi tutora, la Doctora Anita. Por su amistad, paciencia y confianza. Por aceptarme en

un proyecto de investigación y guiarme desde el inicio hasta su conclusión.

Al personal docente e investigación del Laboratorio de Fitoquímica de la UBIPRO.

A mi querida y estimada Denisse Vega a quien conozco desde nuestros años en

Prepa 9 y con quien compartí el laboratorio de biología entre bromas y risas.
Índice
1. Introducción ........................................................................................................................1
1.1 La piel como órgano protector.......................................................................................1
1.2 Microorganismos patógenos .........................................................................................1
1.2.1 Procariontes: Bacterias ...........................................................................................1
1.2.2 Género Staphylococcus ..........................................................................................2
1.2.3 Eucariontes: Hongos ...............................................................................................3
1.2.4 Dermatofitos: Trichophyton mentagrophytes .......................................................4
1.2.5 Efectos de los microorganismos en la piel ...........................................................4
1.2.6 Infecciones microbianas en México ......................................................................4
1.3 Fármacos: antimicrobianos............................................................................................4
1.3.1 Problema de los antimicrobianos ..........................................................................5
1.4 Plantas medicinales en México .....................................................................................6
1.4.1 Metabolitos secundarios de plantas medicinales ................................................6
1.4.2 Tipos de metabolitos secundarios .........................................................................6
1.5 Recurso vegetal ..............................................................................................................7
1.6 Acacia farnesiana (L.) Wild. ...........................................................................................7
1.6.1 Características .........................................................................................................7
1.6.2 Antecedentes fitoquímicos de A. farnesiana ........................................................7
1.7 Allium cepa L. ..................................................................................................................8
1.7.1 Características .........................................................................................................8
1.7.2 Antecedentes fitoquímicos de A. cepa..................................................................8
1.8 Asclepias glaucescens Kunth......................................................................................10
1.8.1 Características .......................................................................................................10
1.8.2 Antecedentes fitoquímicos de A. glaucescens ..................................................11
1.9 Tournefortia hirsutissima L. .........................................................................................12
1.9.1 Características .......................................................................................................12
1.9.2 Antecedentes fitoquímicos de T. hirsutissima....................................................12
2. Justificación ......................................................................................................................14
3. Pregunta científica ...........................................................................................................14
4. Hipótesis ...........................................................................................................................14
5. Objetivos ...........................................................................................................................15
Objetivo general...................................................................................................................15
Objetivos particulares .........................................................................................................15
6. Metodología ......................................................................................................................15
6.1 Colecta del material vegetal ........................................................................................15
6.2 Obtención de los extractos ..........................................................................................16
6.3 Pruebas coloridas .........................................................................................................16
6.4 Actividad antimicrobiana ..............................................................................................17
6.5 Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) y Concentración Mínima Bactericida
(CMB) ....................................................................................................................................17
6.6 Actividad antifúngica .....................................................................................................18
6.7 Actividad antioxidante ..................................................................................................18
7. Resultados y discusión ...................................................................................................18
8. Conclusiones ....................................................................................................................28
9. Bibliografía ........................................................................................................................28
Resumen
Las plantas son fábricas vivientes para la biosíntesis de una enorme variedad de
productos químicos que comúnmente llamamos metabolitos secundarios, siendo estos
los compuestos que utilizan para su supervivencia frente a diversos factores de estrés
gracias a sus funciones ecológicas, estructurales y defensivas.

Es debido a su gran variedad de funciones y actividades biológicas que van desde los
antimicrobianos, antioxidantes, antiinflamatorios, fotoprotectores e insecticidas que los
metabolitos secundarios han llamado el interés de la industria farmacéutica en la
investigación y elaboración de fármacos, que puedan ser una nueva alternativa
terapéutica frente a los fármacos convencionales cuyo efecto puede no ser el ideal
ante las enfermedades e infecciones emergentes.

Actualmente, algunos trabajos etnobotánicos realizados en el municipio de Tonatico,

Estado de México, han recopilado información sobre el uso de plantas medicinales
para tratar afecciones dermatológicas. Entre estas especies de interés se encuentran
(Acacia farnesiana, Allium cepa, Asclepias glaucescens y Tournefortia hirsutissima).
Por lo que el objetivo de este proyecto fue conocer la actividad antimicrobiana de estas
cuatro especies vegetales en tres cepas microbianas de importancia médica.

Las cuatro especies vegetales se recolectaron en Tonatico, Estado de México.

Posteriormente, fueron secadas y trituradas para ser maceradas con tres solventes de
menor a mayor polaridad (hexano, acetona y metanol). Una vez macerados los
extractos se filtraron y se destilaron a presión reducida con ayuda de un rotavapor.
Para la caracterización química de los extractos, se hicieron las pruebas coloridas
mediante el uso de diferentes reactivos (cloruro férrico para fenoles, Dragendorff y
Mayer para alcaloides, Molish para glucósidos). La actividad antimicrobiana se evaluó
usando dos cepas bacterianas de interés médico -Staphylococcus aureus y
Staphylococcus epidermidis- y una cepa de un hongo dermatofito -Trichophyton
mentagrophytes-.

De acuerdo con los resultados, las cuatro especies vegetales tienen fenoles,
alcaloides glucósidos y saponinas. T. hirsutissima fue la única especie sin actividad
antimicrobiana, mientras que las demás especies la presentaron frente a S. aureus. A.
cepa fue la planta más activa. Las cuatro especies vegetales mostraron tener
diferentes actividades biológicas.
 1. Introducción
1.1 La piel como órgano protector
La piel es el órgano más grande el cuerpo, es de vital importancia ya que actúa como
una barrera física que delimita el medio interno de los seres vivos del medio externo
(Dorado & Fraile, 2021). Su estructura es compleja, está formada por capas, siendo la
primera de ellas derivada del ectodermo formada por células epiteliales, llamada
epidermis y una capa de origen mesodérmico más gruesa e interna denominada
dermis. La epidermis es una capa delgada de epitelio estratificado, tiene un grosor de
0.1 mm y da lugar a estructuras derivadas como el pelo y uñas, está conectada a la
dermis que es más gruesa de aproximadamente 0.6 mm de grosor y de tejido
conjuntivo formada por otras células como los macrófagos, mastocitos y linfocitos que
constituyen la primera línea de defensa cuando la piel sufre alguna lesión (Hickman et
al., 2009).

Cuando ocurre una infección algunas sustancias llamadas péptidos antimicrobianos

(AMPs) -como las defensinas y catelicidinas- son producidas por células dendríticas o
macrófagos y los lípidos tales como esfingomielina y glucosiceramidas actúan como
barrera alterando las membranas bacterianas. Mientras que las células de Langerhans
pueden viajar hacia la periferia para procesar y presentar antígenos activando así el
resto del sistema inmune (Krutmann & Merk, 2018).

1.2 Microorganismos patógenos

Una de las principales amenazas biológicas a las que está expuesta la piel son las
infecciones por microorganismos, los cuales podemos dividir en procariontes
(bacterias), eucariontes (hongos y parásitos animales) y virus (Flores et al., 2021).

1.2.1 Procariontes: Bacterias

Las bacterias son uno de los dominios de los procariontes. Constituyen un grupo
importante de microorganismos que pueden agruparse considerando su morfología, en
las que encontramos cuatro grupos: 1) los cocos, de forma esférica, 2) bacilos, en
forma de pequeños bastones, 3) espirilos, en forma de espiral y 4) vibrios, ligeramente
curvados y de gran movilidad (Stearns et al., 2019). Estos a su vez pueden agruparse
formando otros grupos: 1) los cocos pueden agruparse y formar cadenas conocidas
como estreptococos, diplococos en pares, estafilococos en racimos y las tétradas, 2)
los bacilos se agrupan en diplobacilos, en pares, estreptobacilos, en cadenas (Romero
Cabello et al., 2018).

1
Otro criterio de diferenciación es observando al microscopio el color que adquiere la
pared celular en la técnica de tinción de Gram. La pared celular es una estructura
formada por unidades alternadas de glucanos N-acetilglucosamina (NAG) y ácido N-
acetilmurámico (NAM), estos están unidos por puentes peptídicos, de ahí que a esta
estructura se le conozca con el nombre de peptidoglucano, sello distintivo de las
bacterias (Stearns et al.,2019). Esta se encarga de proteger a la célula de diferentes
factores físicos y químicos (Ryan & Ray, 2017). Las bacterias se pueden dividir en dos
grandes grupos dependiendo de la estructura de su pared celular. Aquellas que
adquieren un color violeta conocidas como grampositivas y las gramnegativas que
toman una coloración rosada (Stearns et al., 2019). La diferencia radica en los
componentes de la pared celular. Las grampositivas se caracterizan por el ya antes
mencionado peptidoglucano como elemento principal, y el ácido teicoico, molécula
formada por glicerol o ribitol que atraviesa de manera perpendicular las capas del
peptidoglucano (Ryan & Ray, 2017). Las gramnegativas también tienen
peptidoglucano, aunque en menor cantidad y una membrana adicional única en este
grupo llamada membrana externa. La parte interna de esta membrana contiene
proteínas que se adhieren al peptidoglucano y la cara externa está conformada por
lipopolisacáridos (LPS) de tres tipos. El lípido A, formado por cadenas de ácidos
grasos unidas a un par de moléculas de glucosamina, en lugar de glicerol, y que actúa
como endotoxina activando al sistema inmune y causando muchos síntomas típicos de
infecciones por gramnegativas. Un núcleo formado por una cadena de cinco azucares
unida a una molécula de glucosamina en el lípido A. Y el antígeno O formado por
distintos azucares que varían entre diferentes bacterias (Stearns et al., 2019).

1.2.2 Género Staphylococcus

Las bacterias que conforman el género Staphylococcus se caracterizan por ser cocos
grampositivos que tienden a agruparse en racimos, carecen de flagelos y no forman
esporas (Ryan & Ray, 2017). Son catalasa positivos, característica que se usa para
diferenciarlos de los géneros Streptococcus y Enterococcus (Cervantes-García et al.,
2014). La catalasa es una enzima que producen las bacterias del género
Staphylococcus, esta rompe el peróxido de hidrogeno en agua y oxígeno, por lo que
es usada como prueba bioquímica para su identificación (Stearns et al., 2019). Son
microorganismos que pueden estar presentes en la mucosa y piel de los humanos, así
como de otros mamíferos y aves, incluye cerca de 40 especies y 25 subespecies entre
ellas varias especies de importancia médica entre las que destacan Staphylococcus
aureus y Staphylococcus epidermidids (Romero Cabello et al., 2018).

2
S. aureus es considerada la bacteria más importante del género. Esto se debe a que
es la única especie del género que produce coagulasa, enzima que reacciona con la
protrombina en la sangre permitiendo la conversión del fibrinógeno en fibrina formando
un coagulo e incrementando su virulencia (Romero Cabello et al., 2018). Esta especie
también se caracteriza por producción de diferentes toxinas citolíticas (α, β, δ, γ). La
toxina α de acción hemolítica, sobre eritrocitos es la más importante; toxina β actúa
sobre la esfingomielina de los eritrocitos catalizando su destrucción; hemolisina δ
actúa en linfocitos, plaquetas y neutrófilos; toxina γ de acción lítica en eritrocitos
(Romero Cabello et al., 2018). También destaca su resistencia a los antibióticos
betalactámicos como la penicilina o meticilina conferida por el gen mecA que codifica a
la proteína de unión a la penicilina PBP2a (Cervantes-García et al., 2014).

S. epidermidis, se caracteriza por ser un comensal normal de la piel de los humanos

(Brown & Horswill, 2020). Esta especie produce toxinas conocidas como modulinas
solubles en fenol (PSMs) y se clasifican en tres grupos (PSMα, PSMβ, y PSMγ). Las
PSMs tienen actividad proinflamatoria, también se sabe que la PSMβ está relacionada
en la formación de biofilms. Anteriormente S. epidermidis no era considerada como un
organismo de importancia médica, sin embargo, esto ha cambiado en los últimos años
considerándola como un agente etiológico común de las infecciones hospitalarias en el
mundo (Cabrera-Contreras et al., 2013). Esto se debe principalmente a su capacidad
para formar biopelículas lo que le permite adherirse y contaminar equipo médico como
catéteres o dispositivos protésicos (Ryan & Ray, 2017). Las biopelículas están
formadas por material extracelular principalmente de polisacáridos (Stearns et al.,
2019). Estos polisacáridos facilitan la fijación al plástico de los dispositivos médicos y
conforme la comunidad bacteriana vaya creciendo proporcionara mayor adhesión a las
superficies, así como protección contra el sistema inmune del hospedador y los
fármacos antimicrobianos siendo un factor de virulencia (Ryan & Ray, 2017).

1.2.3 Eucariontes: Hongos

Los hongos a diferencia de las bacterias son organismos eucariontes. Estos también
tienen una pared celular rígida muy diferente a la de las bacterias, formada por
polisacáridos de tres tipos: 1) manano, forma uniones con proteínas de la pared celular
2) glucano, forman fibrillas le confiere fuerza y rigidez a la pared celular 3) quitina, el
principal componente de la pared celular de los hongos, compuesta por cadenas de
poli-N-acetilglucosamina (Ryan & Ray, 2017). En los hongos microscópicos la hifa es
la unidad anatómica formada por filamentos, pueden ser septadas (forman tabiques) o
aseptadas (no forman tabiques). Un grupo de hifas forman el micelio del hongo
(Romero Cabello et al., 2018).

3
1.2.4 Dermatofitos: Trichophyton mentagrophytes
Aquellos hongos patógenos que se encuentran en las capas externas de la piel son
conocidos como dermatofitos (Ryan & Ray, 2017). Son queratinofílicos, es decir
requieren de queratina y se integran en tres géneros Trichophyton, Microsporum y
Epidermophyton (Romero Cabello et al., 2018). Estos se pueden diferenciar en la
morfología de sus macroconidios y la presencia de microconidios, los tres presentan
hifas septadas (Ryan & Ray, 2017). Dentro de este grupo, Trichophyton
mentagrophytes destaca por su complejidad, en la que encontramos cinco variedades
(T. mentagrophytes, T. mentagrophtes var. interdigitale, T. mentagrophytes var.
erinacei, T. mentagrophytes var. quinckeanum y T. mentagrophytes var. benhamie)
todas ellas similares morfológicamente, pero diferentes en cuanto a la susceptibilidad
a antifúngicos (Frías-De-León et al., 2020).

Estos hongos causan un tipo de micosis conocidas como tiñas y estas se pueden
clasificar de acuerdo con su localización, recibiendo así sus diferentes nombres como
tiña de cabeza, pies, uñas, cuerpo y manos (Romero Cabello et al., 2018).

1.2.5 Efectos de los microorganismos en la piel

A pesar de ser una excelente barrera física, la piel no es inmune a las lesiones o
heridas que puedan permitir el paso de patógenos (Romero Cabello et al., 2018).
Además, la piel es el medio natural de una abundante microbiota, como es el caso de
S. aureus y S. epidermidis (Castañeda-Méndez et al., 2018; Ryan & Ray, 2017). El
problema surge cuando hay un desbalance entre las defensas de la piel y la virulencia
o patogenicidad de los microorganismos que la afectan (Flores et al., 2021).

1.2.6 Infecciones microbianas en México

En México durante 2015 se reportaron 61, 969 infecciones asociadas a la salud (IAAS)
de las cuales 15, 211 corresponden a infecciones de piel y tejidos blandos ocuparon el
cuarto lugar (Salgado, 2018). Mientras que en el 2006 el IMSS reportó que las
dermatofitosis son más comunes en adultos registrando un total de 507, 879 consultas
en medicina familiar (Secretaría de Salud, 2009). Un estudio realizado por el IMSS en
el año 2013 identifica a Escherichia coli, Staphylococcus coagulasa-negativos y a
Pseudomonas aeruginosa como los principales organismos aislados en las infecciones
nosocomiales de las unidades médicas del Instituto Mexicano del Seguro Social (Arias
et al., 2016)

1.3 Fármacos: antimicrobianos

Para evitar que un patógeno dañe los tejidos y pueda generar problemas de salud a
futuro e incluso lleven a la muerte es necesario que un médico administre

4
antimicrobianos (Stearns et al., 2019). Los antibióticos son un tipo de antimicrobianos
que actúan sobre las bacterias matándolas o inhibiendo su crecimiento. Lo mismo
sucede con aquellas sustancias denominadas antifúngicas que actúan de igual
manera eliminando o evitando la proliferación de un hongo patógeno (Romero Cabello
et al., 2018).

Los antimicrobianos se pueden dividir en dos grupos. Aquellos de origen biológico

llamados antibióticos como el caso de la penicilina aislada del hongo Penicillum
notatum y descubierta por Alexander Fleming en 1928 para tratar infecciones
bacterianas (Romero Cabello et al., 2018). O de origen sintético llamados
quimioterápicos, estos son producidos en laboratorios por ejemplo las sulfonamidas
(Mondal & Malakar, 2020). Los antibióticos actúan en dianas muy específicas por
ejemplo interviniendo en la biosíntesis de peptidoglucano, evitando su formación de la
pared celular perdiendo rigidez y causando la muerte (Stearns et al., 2019). Mientras
que otros pueden actuar en la membrana plasmática, inhibiendo la síntesis de
proteínas, ácidos nucleicos y en rutas metabólicas (Romero Cabello et al., 2018).

En el pasado existía una alta tasa de morbilidad y mortalidad en individuos de todas

las edades que presentaban infecciones bacterianas y al no existir un tratamiento
eficaz aunado a las condiciones higiénicas de la época estos terminaban falleciendo
(Stearns et al., 2019). Actualmente, la mayoría de los centros médicos como
hospitales y veterinarias aplican antibióticos en su día a día (Ruiz et al., 2021). Sin
embargo, la resistencia a los antimicrobianos es una problemática mundial (Peinado
Rodríguez, 2021).

1.3.1 Problema de los antimicrobianos

Desde su descubrimiento por Alexander Fleming en 1928 y su uso en masa en 1940
gracias a los trabajos clínicos de Chain y Florey, la penicilina fue el antibiótico que
marcó un antes y un después en la historia salvando la vida de muchos soldados
durante la segunda guerra mundial (Stearns et al., 2019). No paso mucho tiempo
desde que la penicilina comenzó a usarse y comercializarse a gran escala cuando se
detectaron las primeras cepas de Staphylococcus resistentes a este antibiótico en los
años 60. Esta resistencia a los antimicrobianos se debe principalmente al abuso e
inadecuado uso en la medicina humana, veterinaria, agricultura y acuicultura (Yu et al.,
2021). En 2014 la Organización Mundial de la Salud declaro a la resistencia a los
antimicrobianos como una de las tres mayores amenazas para la salud pública
mundial (Peinado Rodríguez, 2021).

5
1.4 Plantas medicinales en México
Las plantas medicinales son aquellas especies cuyo valor radica en su uso médico
para el mejoramiento de la calidad de vida de la población. Estas pueden representar
un recurso importante de atención sanitaria en muchas zonas rurales (García et al.,
2020). Esto se debe a la riqueza cultural que hay en el país y al conocimiento
tradicional que se tienen sobre el uso de los recursos naturales por diferentes pueblos
(Biodiversidad, 2018). Conocimiento de gran valor que puede estar en riesgo de
pérdida en gran parte por el rápido desarrollo urbano y la falta de interés en las nuevas
generaciones (Orozco et al., 2020).

1.4.1 Metabolitos secundarios de plantas medicinales

Las propiedades medicinales que pueden tener una o varias especies vegetales de
nuestro interés se pueden atribuir en gran parte a los metabolitos secundarios (MS) (Li
et al., 2020). Los MS también llamados metabolitos especializados o productos
naturales son todos aquellos compuestos orgánicos que derivan del metabolismo
principal, cuya función radica en mediar las interacciones de la planta con el ambiente
(Erb & Kliebenstein, 2020). Los MS se pueden dividir en tres grandes grupos según su
origen biosintético: fenoles, terpenos y alcaloides (Li et al., 2020).

1.4.2 Tipos de metabolitos secundarios

Los compuestos fenólicos se caracterizan por poseer un anillo aromático con uno o
más grupos hidroxilo. Son derivados de la fenilalanina y son una de las clases más
importantes de MS en las especies vegetales. Se conocen más de 8,000 compuestos
fenólicos identificados y se han reportado que pueden tener diferentes actividades
biológicas entre las que destacan sus propiedades antioxidantes, antimicrobianas y
fotoprotectoras (Porras & López, 2009).

Los terpenos, conforman el grupo más numeroso de MS con más de 40,000

compuestos diferentes. Este grupo de metabolitos derivan del ácido mevalónico y se
pueden clasificar por su número de unidades de isopreno siendo los hemiterpenos los
más pequeños con cinco carbonos (C5), los monoterpenos contienen dos unidades
C5, los sesquiterpenos contienen tres unidades, los diterpenos contienen cuatro
unidades C5. Algunas plantas producen lo que se conoce como aceites esenciales,
estos son los responsables del olor y sabor característico de algunas plantas. De ahí
su uso industrial como aromas o fragancias y su uso medicinal por sus propiedades
anticarcinogénicas y antimicrobianas (Avalos & Pérez, 2009).

Los alcaloides son un grupo que se caracteriza por tener dentro de su estructura
química uno o varios átomos de nitrógeno. Se conocen cerca de 5,500 alcaloides.

6
Químicamente son un grupo muy heterogéneo, ya que puede haber alcaloides simples
hasta alcaloides cuya estructura es más compleja. La mayoría de los compuestos de
este grupo son tóxicos, sus efectos pueden ser mortales e incluso provocar la muerte.
Las plantas con flor (angiospermas). Son ricas en esta clase de metabolitos, sin
embargo, se debe de tener en cuenta que no todas las plantas tendrán la presencia de
alcaloides en su fitoquímica e incluso algunas familias botánicas carecerán de ellos
(Makkar et al., 2007).

1.5 Recurso vegetal

A continuación, se mencionan las especies vegetales usadas en este trabajo y
obtenidas de Tonatico, Edo de México con una pequeña descripción botánica y sus
respectivos antecedentes fitoquímicos.

1.6 Acacia farnesiana (L.) Wild.

1.6.1 Características
Arbusto o arbolito de 2 a 5 m de altura; hojas de 2 a 6 cm de largo; flores sésiles,
reunidas en cabezuelas de ± 1 cm de diámetro, solitarias o fasciculadas; corola
tubular, de 2 a 2.5 mm de largo, amarilla; legumbre cilíndrica, verde al principio y negra
después, glabra, de 4 a 8 cm de largo por ± 1 cm de diámetro, con el ápice agudo
(Rzedowski & Rzedowski, 2005).

1.6.2 Antecedentes fitoquímicos de A. farnesiana

Tabla 1. Perfil fitoquímico y antecedentes biológicos de A. farnesiana

Perfil fitoquímico Actividad biológica Autor

Se aisló y caracterizó al Los extractos mostraron
ácido lignocérico y actividad antimicrobiana
estigmasta-5,22-dien-3-O- frente Mycobacterium
β-D glucopiranósido del tuberculosis; mientras el
extracto hexánico y galato de metilo y la
Hernández et al., 2019
clorofórmico de los frutos. naringenina fueron activos
Y galato de metilo, ácido frente a M. tuberculosis y
gálico, naringenina y pinitol Campylobacter jejuni.
del extracto de metanólico
del fruto.
El análisis fitoquímico Se detecto la presencia de
Hernández García, 2017
mostró la presencia de antioxidantes. Y los

7
triterpenos, esteroides, extractos etanólicos de los
quinonas y fenoles. frutos afectaron a siete
cepas bacterianas
inhibiendo su crecimiento.
Del extracto metanólico se El ácido betulínico mostró
aislaron cuatro nuevos actividad citotóxica
diterpenos: acaseno A, moderada en cinco líneas
acaseno B, farneseno A y celulares cancerígenas.
farneseno B. También se Además, el ácido
detectaron flavonoides y betulínico, diosmetina y
triterpenos. 3′,4′,5-trihidroxi-7- Lin et al., 2009
metoxiflavon inhibieron la
generación de aniones
superóxido y la liberación
de elastasa por neutrófilo
mostrando propiedades
antiinflamatorias.
Metabolitos del género
Acacia: aminas y
alcaloides, glucósidos, - Seigler, 2003
ácidos grasos, terpenos,
taninos y flavonoides
- no reportado

1.7 Allium cepa L.

1.7.1 Características
Herbácea bulbosa, hasta 122 cm de alto, con olor fuerte, hojas agrupadas en roseta
basal, filiformes lanceoladas, inflorescencia en forma de umbela, de flores, blancas a
azules, purpureas o incluso amarillas (Bailey & Bailey, 1976).

1.7.2 Antecedentes fitoquímicos de A. cepa

Tabla 2. Perfil fitoquímico y antecedentes biológicos de A. cepa

Perfil fitoquímico Actividad biológica Autor

8
Tiosulfinato de propil Ambas moléculas
propano y tiosulfonato de mostraron actividad
propil propano. antimicrobiana en cepas
bacterianas de Escherichia
coli, Klebsiella
pneumoniae,
Enterococcus faecalis y S. Sorlozano et al., 2021
aureus y dos cepas
fungicas Candida albicans
y Candida krusei, sin
embargo, el efecto
antifúngico fue mayor al
antimicrobiano.
La mejor extracción de El tiempo de extracción
compuestos fenólicos, afectó al resultado en la
flavonoides y antocianinas actividad antioxidante. A
fue con etanol al 80%. tiempos de extracción de
30 minutos los
compuestos mostraron
actividad antioxidante en la
prueba de DPPH. Mientras
Viera et al., 2017
que a tiempos de
extracción de 120 y 240
minutos los compuestos
tuvieron actividad en los
métodos de FRAP (poder
de reducción antioxidante
del ión férrico) y el ensayo
de β-carotenos.
El extracto acuoso del
bulbo mostró halos de
inhibición de un radio de
- 15 mm en E. coli. También Rico & Arias, 2007
inhibió el crecimiento de
Bacillus cereus,
Salmonella spp,

9
 Pseudomonas auruginosa
y S. aureus.
Aislaron e identificaron El compuesto no. 4
cuatro nuevos productos derivado de la oxidación
derivados de la oxidación de la quercetina tuvo
de quercetina y un actividad frente a una cepa Ramos et al., 2006
derivado de glucósido del resistente de S. aureus y
estilbeno del extracto Helicobacter pylori.
acuoso.
Del bulbo se han aislado
compuestos azufrados:
alicina, bisulfuro de
alilpropilo, bisulfuro de
- Osuna Torres et al., 2005
dialilo. Flavonoides: como
el camferol. En las hojas
se han detectado fenoles y
flavonoides.
Los compuestos azufrados
como la aliína y péptidos
γ-glutámicos son
dependientes de la etapa
de desarrollo de la planta, Durenkamp & De Kok,
-
así como de los factores 2004
ambientales a la que este
expuesta y niveles de
nutrición de nitrógeno y
azufre.
- no reportado

1.8 Asclepias glaucescens Kunth

1.8.1 Características
Herbácea, hasta 70 cm de alto, puberulenta a glabra; hojas opuestas, lámina ovado-
lanceolada a elíptica, de 8.5 a 14.5 cm de largo, de 0.9 a 4.4 cm de ancho, cimas
terminales o laterales generalmente con 12 a 27 flores, corola refleja, verde pálida,
blanca o de color crema, matizada de morado en el exterior, papilosa en el interior, con
ginostegio de 2.2 a 4.4 mm de largo; folículos erectos, de 8.8 cm de largo y 1.4 cm de
ancho. (Rzedowski & Rzedowski, 2005).

10
1.8.2 Antecedentes fitoquímicos de A. glaucescens
Tabla 3. Perfil fitoquímico y actividad biológica de A. glaucescens

Perfil fitoquímico Actividad biológica Autor

Las pruebas coloridas del El extracto hidroalcohólico
extracto hidroalcohólico de mostró actividad diurética
Asclepias curassavica en ratas albinas, sin
Sovero & Apaestegui,
mostraron la presencia de embargo, su efecto fue
2021
flavonoides, alcaloides, menor al del control
compuestos fenólicos y positivo, la furosemida.
glicósidos.
Algunos componentes Se menciona que el
químicos de A. extracto de alcohol mostró
curassavica que destacan actividad citotóxica en
son flavonoles, glucósidos células de carcinoma de
de flavonol y triterpenos. nasofaringe humana.
En las hojas reportan la Siendo responsable de
presencia de flavonoides, este efecto la calotropina.
fenoles, taninos, La asclepina mostró efecto
terpenoides y saponinas. Y cardiovascular, mostrando Al-Snafi, 2015
finalmente la presencia de ser más segura que otros
cardenólidos, entre los que glicósidos cardiacos.
destacan la calactina, Se encontró que el
calotropina y asclepina. extracto metanólico inhibió
el crecimiento de cuatro
cepas bacterianas,
incluyendo a S. aureus.

Reportaron la fitoquímica Proponen el uso de los

de algunas plantas de alcaloides encontrados en
familia Apocynaceae. En los extractos de éter de
los extractos acuosos petróleo, ya que estos
mostraron la presencia de podrían tener cierto Joselin et al., 2012
fenoles, flavonoides, potencial en el tratamiento
saponinas, terpenoides, de enfermedades
cumarinas. Los extractos infecciosas.
de éter de petróleo

11
mostraron la presencia de
alcaloides, fenoles,
flavonoides, saponinas,
terpenoides. Los extractos
de cloroformo mostraron la
presencia de flavonoides,
glicósidos y cumarinas.
Los extractos de etanol y
acetona mostraron la
presencia de fenoles,
flavonoides, terpenoides,
quinonas y cumarinas.

1.9 Tournefortia hirsutissima L.

1.9.1 Características
T. hirsutissima es un arbusto leñoso, originaria de los estados de Puebla y Oaxaca,
aunque su distribución pude ir desde Florida hasta Colombia (Hernández et al., 2016).
Sus hojas son láminas ovaladas a elípticas. Presentan inflorescencia en la cima su
forma es corimbiforme, muy ramificada. Sus flores son fragantes, sésiles en las ramas,
con cinco sépalos en la base de forma ovalada y lanceolada. Su fruto es una drupa
globosa, de 5-6 mm de diámetro de color verde y blanquecina cuando madura
(Tournefortia hirsutissima s.f).

1.9.2 Antecedentes fitoquímicos de T. hirsutissima

Tabla 4. Perfil fitoquímico y actividad biológica de T. hirsutissima

Perfil fitoquímico Actividad biológica Autor

Se aislaron tres alcoholes El extracto de hexano
poliisoprenoides el 16- mostró el mejor efecto
hidroxi-licoperseno, anti-edema en un modelo
(Z8,E3,ω)-dodecaprenol y murino, con una inhibición
(Z9,E3,ω)-tridecaprenol de de 78.0 ± 1.5%, resultado Hurtado et al., 2019
las hojas de T. similar al del control
hirsutissima. positivo indometacina,
cuya inhibición fue de 87.6
± 0.4% mg/oreja.
Se extrajo los siguientes Se elaboró una crema Rivera et al., 2017

12
compuestos Ƴ-sitosterol y utilizando los compuestos
ácido palmítico mediante extraídos de T.
arrastre de vapor usando hirsutissima. La crema
acetato de etilo. También mostró actividad
se usó la extracción antimicrobiana en S.
asistida por microondas aureus, cuyo halo de
usando etanol. Esta última inhibición fue de 1.9 cm.
resulto ser más eficiente al Los extractos también
extraer dichos tuvieron actividad
compuestos. antimicrobiana, aunque
sus halos fueron menores.
En las hojas de Borago
officinalis, especie de la
familia Boraginaceae
misma a la que pertenece
T. hirsutissima se
- Asadi-Samani et al., 2014
detectaron pequeñas
cantidades de alcaloides y
en las semillas
encontraron compuestos
fenólicos.
El estudio del aceite Tanto el aceite esencial
esencial de Cordia como los extractos de
curassavica especie hexano presentaron
vegetal que pertenece a la actividad antimicrobiana
misma familia de T. en cepas de S. epidermidis
hirsutissima indica que y S. aureus. La
está conformado por concentración mínima
sesquiterpenos, β- inhibitoria (CMI) del aceite Hernández et al., 2007
eudesmol, espatulenol y esencial en S. epidermidis
cadina. y S. aureus fue de 250
μg/mL, de 500 μg/mL; para
el extracto hexánico y
metanólico de 500 μg/mL;
para el extracto
clorofórmico fue de 2000

13
 μg/mL en S. epidermidis y
de 1500 μg/mL para S.
aureus.
- no reportado

2. Justificación
A lo largo de su historia evolutiva, las plantas han desarrollado distintos mecanismos
de defensa contra las condiciones de estrés biótico y abiótico. Entre los que destacan
los MS cuya función puede ir desde los factores ecológicos como atraer polinizadores,
comunicación química con otras especies o defensivas protegiéndolas de la herbívora
y de agentes patógenos (García & Carril, 2011). En la actualidad se conocen
aproximadamente 20,000 estructuras de metabolitos secundarios provenientes de
plantas con potencial farmacológico (Sepúlveda et al., 2003). La industria farmacéutica
ha aprovechado estos metabolitos producidos por las plantas como potenciales
fármacos (antioxidantes, antimicrobianos, antitumorales, inmunosupresores) de ahí la
importancia de seguir investigando a las especies vegetales por su capacidad de
producir compuestos bioactivos para su defensa que puedan ser útiles para el
humano.

Tal es el caso de las especies empleadas por los habitantes de Tonatico, Estado de
México, para tratar padecimientos cutáneos, siendo esta investigación la primera en
conocer el efecto antimicrobiano de las cuatro especies mencionadas (Acacia
farnesiana (L.) Wild., Allium cepa L., Asclepias glaucescens Kunth, Tournefortia
hirsutissima L.).

3. Pregunta científica
¿Tendrán estas cuatro especies vegetales (A. farnesiana, A. cepa, A. glaucescens y T.
hirsutissima) de San José de los Amates, Tonatico, Estado de México actividad
antimicrobiana?

4. Hipótesis
Los pobladores de la localidad de San José de los Amates, Tonatico, mencionan el
uso de las siguientes especies vegetales A. cepa, A. farnesiana, A. glaucescens y T.
hirsutissima como recurso herbolario, a las cuales le otorgan efectos curativos sobre
algunas infecciones cutáneas. Se sabe que los extractos de plantas pueden mostrar
actividad antibacteriana inhibiendo el crecimiento o afectando a la formación de los
biofilms, permitiendo que los antibióticos lleguen a los blancos de los

14
microorganismos. Además, se ha reportado que estas especies poseen metabolitos
secundarios a los cuales se les atribuyen propiedades terapéuticas. De acuerdo con
esta información, se espera que las plantas presenten actividad antimicrobiana.

5. Objetivos
Objetivo general
1. Evaluar la actividad antimicrobiana de las especies vegetales: A. cepa (flor y
bulbo), A. farnesiana (frutos y hojas), A. glaucescens (hojas) y T. hirsutissima
(hojas).

Objetivos particulares
1. Caracterizar los extractos de hexano, acetona y metanol de las cuatro especies
vegetales realizando pruebas coloridas para la detección de los principales MS
(fenoles, alcaloides, glucósidos y terpenos) y obtener su rendimiento.
2. Evaluar cualitativamente la actividad antibacteriana de los extractos en dos
cepas de bacterias: S. aureus y S. epidermidis.
3. Evaluar cualitativamente la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) y la
Concentración Mínima Bactericida (CMB) de los extractos que mostraron
inhibición en la prueba anterior.
4. Evaluar cualitativamente la actividad antifúngica de los extractos en T.
mentagrophytes.
5. Determinar cualitativamente la actividad antioxidante de los extractos.

6. Metodología
El proyecto se está desarrollando en conjunto con el Laboratorio de Fitoquímica, el
Herbario (IZTA) y el Laboratorio de botánica de la UMF de la Facultad de Estudios
Superiores Iztacala.

6.1 Colecta del material vegetal

Las especies utilizadas para llevar a cabo la investigación fueron recolectadas en los
años 2017 y 2018 en la localidad de San José de los Amates, Tonatico, Estado de
México, cuyas coordenadas son 18°47'06.09" latitud norte y 99°41'13.98" latitud oeste
a una altitud de 1677 msnm; al norte colinda con los municipios de Ixtapan de la Sal y
Villa Guerrero, al este con Zumpahuacán y al sur con el estado de Guerrero, la región
forma parte de la cuenca del rio balsas y su vegetación dominante corresponde a un
bosque tropical caducifolio (Gómez Roa, 2013; Luna Cespedes, 2014). Acacia
farnesiana, Allium cepa, Asclepias glaucescens y Tournefortia hirsutissima son

15
empleadas por los habitantes mestizos de la localidad en estudio para tratar
afecciones dérmicas. Las especies fueron ingresadas a la colección etnobotánica del
Herbario IZTA, con los siguientes números de registro (Tabla 5).

Tabla 5. Número de registro Izta de las plantas colectadas en Tonatico

Planta No. de registro Izta

A. farnesiana 3314
A. glaucescens 3302
A. cepa 3300
T. hirsutissima 3309

6.2 Obtención de los extractos

La obtención de los extractos se llevó a cabo utilizando las partes aéreas de las
especies vegetales, las cuales se secaron y se pesaron 5 g. Además, en el caso de A.
cepa se empleó el bulbo respectivamente.

El método de maceración en frío se usó para la obtención los extractos (Lafont &
Portacio, 2011). Para el cual se usaron 3 disolventes con diferente polaridad (hexano,
acetona y metanol). El extracto se filtró y se destiló a presión reducida por un
rotavapor. Se obtuvieron un total de 24 extractos. Posteriormente se obtuvo su
rendimiento en porcentaje por diferencia de peso tomando en cuenta el peso seco de
la planta.

6.3 Pruebas coloridas

Los principales grupos de metabolitos secundarios se identificaron a partir de pruebas
cualitativas coloridas.
La disolución de cada extracto se preparó a una concentración de 1 mg/mL y para las
pruebas se usaron tubos de ensayo. Para realizar las reacciones, en los tubos de
ensayo se colocaron 100 μL de cada extracto más el reactivo correspondiente; se
agregó cloruro férrico (FeCl ) para fenoles, reactivo de Dragendorff (yoduro de bismuto
3

y potasio) y Mayer (yoduro de mercurio y potasio) para alcaloides y reactivo de Molish

para glucósidos (Robles et al., 2016).
Para la identificación de fenoles se utilizó la “prueba del cloruro férrico”, en la que se
usa el cloruro férrico (FeCl ) como catalizador de reacciones. El extracto se disuelve en
3

agua, metanol o etanol y posteriormente se añade la solución de (FeCl ), en esta se

3

puede observar tres tipos de coloración: roja (compuestos fenólicos en general), verde

16
(compuestos derivados del catecol) y azul (compuestos derivados del pirogalol)
(Barrera et al., 2014).
En el caso de los alcaloides se usaron dos reactivos “Dragendorff” y “Mayer”. El
reactivo de Dragendorff nos da la formación de un precipitado naranja al detectar
alcaloides en una solución. Mientras que el reactivo de Mayer forma un precipitado
blanco indicando la presencia de alcaloides (Barrera et al., 2014).
Para la identificación de glucósidos se usó el reactivo de Molish (alfa-naftol al 1% en
metanol), este se añadió a cada tubo de ensayo, posteriormente se le agregó 1 mL de
ácido sulfúrico por las paredes. La prueba es positiva cuando se forma un anillo de
color púrpura (Garza et al., 2010).

6.4 Actividad antimicrobiana

Para la determinación de la actividad antimicrobiana se usaron dos cepas bacterianas:
S. aureus ATCC 29213 y S. epidermidis ATCC 12228, las cepas se obtuvieron del
laboratorio de Farmacognosia de la Facultad de Estudios Superiores Iztacala.
S. aureus ATCC 29213 es una cepa aislada clínicamente, es usada como cepa de
control de calidad estándar en las pruebas de laboratorio, ya que es sensible a varios
antimicrobianos, incluidos la meticilina (Soni et al., 2015).
S. epidermidis ATCC 12228 esta cepa no infecciosa se caracteriza por no formar
biofilms (MacLea & Trachtenberg, 2017).
La evaluación cualitativa de la actividad antimicrobiana se realizó por el método de
difusión en agar en disco (Prat, 2002). El inóculo se sembró en agar Müller-Hilton
posteriormente se colocaron los sensidiscos con un diámetro de 5 mm previamente
impregnados con 2 mg de cada extracto y 25 μg de cloranfenicol para el control
positivo; para el control negativo se impregnaron con los solventes de cada extracto.
Se realizaron 3 repeticiones por ensayo. La actividad antimicrobiana fue interpretada
como la inhibición de crecimiento bacteriano visible para lo que fue necesario
comparar los tratamientos con sus respectivos controles positivos y negativos. Se
midió el diámetro del halo de inhibición en mm de cada tratamiento con ayuda de un
vernier. Una lectura igual o menor a 6 mm indica que no hay zona de inhibición.

6.5 Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) y Concentración Mínima

Bactericida (CMB)
Para evaluar la concentración mínima inhibitoria (CMI) se usó la metodología de
evaluación in vitro de la actividad antibacteriana (Ramírez & Castaño, 2009). En el que
se realizaron microdiluciones, para lo cual se usaron placas de ELISA de 96 pocillos.
Cada una se dividió para tener una mejor organización; el primero de A1 a D1 será
(medio+bacterias como control de crecimiento); el segundo de A2 a D2 para

17
(medio+bacterias+DMSO como control de crecimiento) y vehículo; el tercero de E1 a
H1 únicamente medio de cultivo como control de esterilidad; el cuarto de E2 a H2 para
(medio+DMSO+bacterias+cloranfenicol como control positivo de inhibición), los pozos
restantes fueron para los extractos a diferentes concentraciones. A todos se les añadió
150 μL de medio Müller-Hilton y se aplicarón 150 μL de los tratamientos con DMSO y
se utilizaron las siguientes concentraciones: 2; 1; 0.5; 0.250; 0.150 mg/mL. Por último,
se añadieron 50 μL de medio+bacteria a todos los cuadrantes menos al tercero. La
CMI se interpreta como la concentración de antimicrobiano, contenida en el tubo de la
serie que inhibió el crecimiento visible de la bacteria revelado con una solución de TTC
al 0.8%, para lo cual fue necesario comparar cada uno de los tubos con los controles
positivo y negativo.

6.6 Actividad antifúngica

Para evaluar la actividad antifúngica se empleó el método de inhibición de crecimiento
radial (Wang et al., 2007). Se usaron sensidiscos de 5 mm de diámetro impregnados
con 2 mg de cada extracto a evaluar, como control positivo se impregnaron
sensidiscos con 100 µg de ketoconazol y al control negativo con 10 µg de los
disolventes utilizados. Se hicieron 3 repeticiones por tratamiento. La actividad
antifúngica se interpretó como la inhibición de crecimiento micelial visible para lo que
fue necesario comparar los tratamientos con sus respectivos controles positivos y
negativos.

6.7 Actividad antioxidante

Para evaluar la actividad antioxidante se utilizó el radical libre 2,2-difenil-1-
picrilhidracilo (DPPH), éste es de color morado cuando está oxidado, es susceptible a
reaccionar con compuestos antioxidantes y ser reducido, decolorándose a un color
amarillento (Guija et al., 2015).
Para la determinación de la actividad antioxidante se tomaron 25 μL de cada extracto
metanólico se le adicionaron a cada uno 150 μL de DPPH. Se hicieron 3 repeticiones
de cada extracto a temperatura ambiente.
Los extractos hexánicos y acetónicos se aplicaron con ayuda de un capilar sobre placa
una placa fina. Posteriormente con ayuda de un hisopo se tomó DPPH y se untó sobre
la muestra. Se midió el cambio de color morado a amarillo de manera cuantitativa.

7. Resultados y discusión
En la tabla 6 se observan los rendimientos en porcentaje de los extractos con respecto
a 5 g de planta seca y *respecto a 600 g para el caso de A. cepa (bulbo y tallo 2018),
donde se aprecia que el mayor rendimiento corresponde a los extractos metanólicos.

18
Tabla 6. Rendimiento de los extractos de diferente polaridad de las plantas
medicinales de Tonatico Estado de México, a partir de 5 y 600 g de material vegetal
seco.

Rendimiento %
Extracto
Hexano Acetona Metanol
A. farnesiana
4.4 3 10.2
(hojas)
A. farnesiana
0.6 8 14.8
(frutos)
A. glaucescens
1 1.2 6.8
(hojas)
A. cepa (flor)
2.57 3.21 37.94
2017
A. cepa (bulbo)
1.2 3.8 55.4
2017
A. cepa (bulbo)
- - 0.44*
2018*
A. cepa (tallo)
1.69* 1.37* 4.99*
2018*
T. hirsutissima
4.2 2 6.6
(hojas)
Con respecto a 5 g de planta seca; *respecto a 600 g de planta; - no determinado

En la tabla 7 se pueden observar los resultados preliminares de las pruebas coloridas

realizadas con los diferentes extractos de las cuatro especies vegetales. Para la
prueba de fenoles, los extractos de hexano no mostraron un cambio en su coloración,
excepto A. cepa (tallo) que mostró ser positivo. Para la determinación de alcaloides se
hicieron dos pruebas: Dragendorff y Mayer, esto se realizó para evitar falsos positivos.
Los extractos que mostraron la presencia de alcaloides fueron T. hirsutissima
(acetona), A. glaucescens (acetona), hojas de A. farnesiana (hexano y acetona), flor
de A. cepa (acetona), bulbo de A. cepa (acetona y metanol) y tallo de A. cepa (hexano
y acetona). Para glucósidos se hizo la prueba de Molish donde la mayoría de los
extractos fueron positivos mostrando un fuerte cambio de coloración a excepción del
bulbo de A. cepa (hexánicos). Finalmente, las hojas y frutos de A. farnesiana, las hojas
de A. glaucescens y la flor y bulbo de A. cepa mostraron la presencia de saponinas.

19
Tabla 7. Pruebas coloridas de los extractos de diferente polaridad de las plantas
medicinales de Tonatico, Estado de México

Pruebas coloridas
Tipo de
Planta Alcaloides Alcaloides Glucósidos
extracto Fenoles Saponinas
(Dragendorff) (Mayer) (Molish)
A. Hexano + ++ ++ +++ -
farnesiana Acetona +++ ++ + +++ +
(hojas) Metanol +++ - + +++ +
A. Hexano - ++ - +++ +
farnesiana Acetona +++ ++ - +++ -
(frutos) Metanol +++ - ++ +++ +
A. Hexano - ++ - +++ -
glaucescens Acetona ++ ++ + +++ +
(hojas) Metanol +++ - - +++ -
A. cepa Hexano - ++ - +++ +
(flor) Acetona ++ + ++ +++ +
2017 Metanol ++ - - +++ -
A. cepa Hexano - ++ - - -
(bulbo) Acetona - ++ + +++ -
2017 Metanol + - ++ +++ -
A. cepa Hexano - +++ - - -
(bulbo) Acetona + ++ + +++ -
2018* Metanol - + +++ + +++
A. cepa Hexano + +++ +++ +++ -
(tallo) 2018* Acetona - +++ ++ +++ -
Metanol ++ +++ - +++ -
T. Hexano - ++ - +++ -
hirsutissima Acetona ++ ++ ++ +++ -
(hojas) Metanol +++ - ++ +++ -
+ Positivo (poca); ++ Positivo (media); +++ Positivo (fuerte); - Negativo

Los diversos metabolitos secundarios detectados en las plantas pueden tener una
importancia beneficiosa en las ciencias médicas. Las especies vegetales estudiadas
pertenecen a diferentes familias botánicas con antecedentes químicos en los
principales grupos de MS como fenoles, terpenos y alcaloides.

En las pruebas coloridas de A. farnesiana se detectaron fenoles en los tres extractos

de hojas y frutos, los alcaloides sólo se detectaron en los extractos de hexano y

20
acetona de las hojas, lo que coincide con el reporte fitoquímico de Seigler, 2003 quien
menciona la presencia de flavonoides y alcaloides simples en la familia Fabaceae. En
el estudio antimicrobiano hecho por Rojas Hernández et al., 2009 le atribuyen dicha
actividad a la presencia de fenoles y taninos contenidos en los extractos de A.
farnesiana. Los glucósidos estuvieron presentes tanto en los extractos de hojas como
en frutos y se observó la presencia de saponinas en los extractos de acetona y
metanol de las hojas y de hexano y metanol de los frutos, esto coincide con el listado
de Seigler, 2003, donde menciona la presencia de prunasina y sambunigrina, ambos
glucósidos cianogénicos. Según Rojas Hernández et al., 2009 la presencia de
saponinas en esta familia puede tener actividad antiinflamatoria, diurética y
antimicrobiana.

En la planta A. glaucescens se detectaron fenoles en los extractos de acetona y

metanol. El reporte de Al-Snafi, 2015, menciona la presencia de fenoles en las hojas y
raíz de Asclepia curassavica. También Joselin et al., 2012, reportan la presencia de
fenoles en la familia Apocynaceae. En nuestro trabajo reportamos alcaloides en el
extracto acetónico, sin embargo, aún no se tiene registro de la presencia de este tipo
de metabolitos en esta familia. También encontramos en todos los extractos
glucósidos mientras que las saponinas solo se detectaron en el extracto de acetona, la
presencia de ambos metabolitos coincide con el listado de Joselín et al., 2012, donde
cita que es común encontrar glucósidos y saponinas en las especies de la familia
Apocynaceae.

En los extractos de A. cepa se detectaron fenoles en las pruebas coloridas de los

extractos acetónicos y metanólicos de la flor y bulbo y hexánico del tallo, esto
corresponde con el listado de compuestos químicos de Osuna Torres et al., 2005
quienes reportan la presencia de flavonoides en el bulbo y fenoles y flavonoides en el
tallo. Los alcaloides estuvieron presentes en el extracto de acetona (flor y bulbo),
metanol (bulbo), hexano y acetona (tallo) coincidiendo con el trabajo de Martín, 1987
quien menciona los alcaloides representativos en la familia Amaryllidaceae como la
licorina, licorerina, narciclasina, galantamina crinina, pretazetina, latisodina y
montanina; se le atribuye su actividad biológica antimicrobiana a la presencia de estos
alcaloides. Todos los extractos de flor y tallo fueron positivos para la reacción de
glucósidos, mientras que en el bulbo solo se presentan en los de acetona y metanol;
coincidiendo con el listado fitoquímico de Martín, 1987. La presencia de saponinas fue
más variada solamente exhibiendo actividad en el extracto de hexano y acetona de flor
y de metanol del bulbo.

21
En la especie T. hirsutissima encontramos compuestos fenólicos en los extractos de
acetona y metanol de las hojas lo que coincide con el estudio realizado por Asadi-
Samani et al., 2014, donde una de las plantas analizadas fue Borago officinalis
perteneciente a la familia Boraginaceae cuyas semillas son conocidas por sus
compuestos fenólicos como el ácido rosmarínico con propiedades antioxidantes. Esto
también coincide con el estudio de Hernández et al., 2007, quien menciona algunos
fenoles complejos en todos los extractos de Cordia curassavica (familia
Boraginaceae). Los alcaloides solamente se detectaron en el extracto acetónico lo que
coincide con lo reportado por Asadi-Samani et al., 2014, donde hallaron que las hojas
de B. officinalis contienen pequeñas cantidades de alcaloides como pirrolizidina.
Finalmente encontramos glucósidos en todos los extractos, pero las saponinas fueron
negativas en todos los extractos de T. hirsutissima.

Los resultados de la actividad antibacteriana de las cuatro especies vegetales se

pueden observar en la tabla 8. En total fueron trece extractos los que mostraron
actividad inhibitoria y cinco los que fueron bacteriostáticos. Destacando A. farnesiana,
A. glaucescens y A. cepa quienes mostraron actividad inhibitoria frente a S. aureus.

Tabla 8. Actividad antibacteriana de los extractos de diferente polaridad de las plantas

de Tonatico, Estado de México

S. aureus S. epidermidis
Planta/Extracto
Hexano Acetona Metanol Hexano Acetona Metanol
A. farnesiana
10.3±0.49 - 9.03±0.53 - - -
(hojas)
A. farnesiana
12.0±00 9.0±0.82 9.56±1.01 * - -
(frutos)
A. glaucescens
12.0±0.58 9.8±0.24 9.96±0.95 * - -
(hojas)
A. cepa (flor) 19.2±0.4
7.4±0.26 13.0±0.28 9.4±0.53 - -
2017 *
A. cepa (bulbo)
8.7±0.22 10.7±0.043* - 7.46±0.13* 16.1±0.8 -
2017
A. cepa (bulbo)
- - - - - -
2018*
A. cepa (tallo)
- - - - - -
2018*
T. hirsutissima
- - - - - -
(hojas)
- Negativo; * Bacteriostático

22
Los extractos de hexano y metanol de A. farnesiana (hojas) mostraron actividad frente
a S. aureus mientras que todos los extractos del fruto inhibieron el crecimiento de S.
aureus y el de hexano mostró actividad bacteriostática sobre S. epidermidis. Estos
resultados coinciden con lo reportado por Hernández et al, 2019 quienes mencionan
que los extractos de hexano, cloroformo y metanol inhibieron el crecimiento de M.
tuberculosis, mientras que el galato de metilo (fenol) y la naringenina, compuestos
aislados del extracto de metanol, presentaron actividad frente a M. tuberculosis y a C.
jejuni. Los resultados de Hernández García, 2017 mencionan que los extractos de
etanol, disolvente que se encuentra en nivel de polaridad entre la acetona y el
metanol, afectaron el crecimiento de siete cepas bacterianas entre las que se
encuentran M. tuberculosis, Escherichia coli, Campylobacter jejuni, Salmonella
enteriditis y Shigella flexneri.

Todos los extractos de A. glaucescens (hojas) inhibieron el crecimiento de S. aureus,

únicamente el extracto de hexánico mostró actividad bacteriostática en S. epidermidis.
Los resultados obtenidos en este trabajo pueden ser de interés ya que no hay
literatura que hable sobre el efecto antimicrobiano de esta especie, solamente el
reporte de Al-Snafi, 2015 menciona que el extracto de metanol de A. curassavica
inhibió el crecimiento de S. aureus. Joselin et al., 2012 propone el uso de los
alcaloides encontrados en los extractos de éter de petróleo de las plantas de la familia
Apocynaceae para el tratamiento de enfermedades infecciosas.

Los extractos de A. cepa (flor) 2017 exhibieron actividad en ambas cepas bacterianas.
El extracto de hexánico, acetónico y metanólico inhibieron el crecimiento de S. aureus
y el acetónico en S. epidermidis, además este último presentó un efecto bacteriostático
en S. aureus. Nuestros resultados coinciden con otros estudios, por ejemplo, el
realizado por Sorlozano et al., 2021 quien evaluó la actividad de dos compuestos en
fase gaseosa de la cebolla el tiosulfinato de propil propano y tiosulfonato de propil
propano y cuyos resultados inhibieron 4 cepas bacterianas, incluyendo a S. aureus. El
trabajo de García & Herrera demostró que el extracto acuoso de A. cepa inhibió a E.
coli formando un halo de inhibición de 15 mm, el mismo extracto también inhibió el
crecimiento de S. aureus. Finalmente, el trabajo de Ramos et al., 2006 evaluó la
actividad de un compuesto derivado de la oxidación de la quercetina (flavonoide)
mostrando actividad frente a H. pylori y una cepa resistente de S. aureus.

Los extractos de A. cepa (bulbo y tallo) 2018 no presentaron actividad inhibitoria o

bacteriostática en ninguna cepa. Este resultado es interesante ya que al ser de la
misma especie y localidad uno podría esperar una relación con los resultados de A.

23
cepa 2017. Durenkamp & De Kok, 2004 mencionan que la etapa de desarrollo de la
planta, así como los factores ambientales y disponibilidad de nutrientes juegan un
papel importante en la cantidad de compuestos azufrados de A. cepa. Literatura más
reciente como la expuesta por Li et al., 2020 menciona que la síntesis y acumulación
de MS puede ser compleja ya que se ve afectada por factores externos como la
incidencia de luz, temperatura, disponibilidad de agua y sales y factores internos que
incluyen regulación de genes y enzimas. Esto podría explicar de cierta forma esta
diferencia de resultados, ya que a pesar de ser especies vegetales de la misma
localidad ambas se recolectaron en tiempos diferentes por lo que puede haber una
ligera variación en cuanto a su actividad biológica.

T. hirsutissima fue la única especie vegetal en este estudio que no mostró actividad
antimicrobiana. Aunque en la literatura hay algunos trabajos como el de Rivera et al.,
2017 quienes con los compuestos extraídos de T. hirsutissima elaboraron una crema
que presentó actividad antimicrobiana en S. aureus, formando un halo de inhibición de
1.9 cm y cuyos extractos también tuvieron actividad antimicrobiana, aunque sus halos
de inhibición fueron menores. Y el trabajo de Hernández et al., 2007 que evaluaron la
actividad antimicrobiana de los aceites esenciales y de los extractos de hexano
mostrando actividad frente a S. aureus y S. epidermidis.

Finalmente, pocos extractos mostraron actividad frente S. epidermidis esto se puede

deber a que esta bacteria tiene la capacidad de formar biopelículas que la pueden
proteger de los antibióticos (Stearns et al., 2019). Por lo tanto, estos biofilms también
pueden ofrecer protección contra los MS de las especies vegetales previamente
evaluadas.

Los resultados de la CMI se presentan en la tabla 9. Para ello se evaluaron los 13

extractos que presentaron actividad antimicrobiana en S. aureus. La concentración
máxima de los extractos fue de 2 mg/mL se observó un efecto bacteriostático por lo
que su CMI es > 2 mg/mL. Únicamente los extractos hexánicos de A. glaucescens y
acetónico de A. farnesiana (frutos) obtuvieron un CMI = 2 mg/mL frente a S. aureus.
No se realizó prueba CMI de los extractos contra S. epidermidis ya que el efecto que
mostraron las plantas fue bacteriostático o nulo.

Tabla 9. Concentración mínima inhibitoria (CMI) de los extractos de las plantas que
mostraron actividad antimicrobiana

CMI
Extracto
Hexano Acetona Metanol

24
A. farnesiana (hojas) > 2 mg/mL - > 2mg/mL

A. farnesiana (frutos) > 2 mg/mL = 2mg/mL > 2mg/mL

A. glaucescens
(hojas)
= 2 mg/mL > 2 mg/mL > 2mg/mL
A. cepa (flor)
> 2 mg/mL >2 mg/mL > 2mg/mL
2017

A. cepa (bulbo) 2017 > 2 mg/mL > 2 mg/mL -

- la CMI no se determinó

Cabe mencionar que en la concentración mínima bactericida (CMB) el extracto de

hexano de A. glaucescens y el de acetona de A. farnesiana (frutos) a las
concentraciones evaluadas mostraron actividad bacteriostática.

Los resultados sobre la actividad antifúngica se pueden observar en la tabla 10. El

extracto de acetona de la flor y el bulbo de A. cepa presentaron un efecto fungistático
retrasando el crecimiento micelial del hongo T. mentagrophytes. Los demás extractos
no tuvieron actividad antifúngica.

Tabla 10. Actividad antifúngica de los extractos de diferente polaridad de las plantas
de Tonatico, Estado de México

Inhibición del crecimiento radial

Extracto T. mentagrophytes
Hexano Acetona Metanol
A. farnesiana
- - -
(hojas)
A. farnesiana
- - -
(frutos)
A. glaucescens
- - -
(hojas)
A. cepa (flor)
- * -
2017
A. cepa (bulbo)
2017 - * -
A. cepa (bulbo)
- - -
2018*
A. cepa (tallo)
- - -
2018*

25
T. hirsutissima
- - -
(hojas)
* Actividad fungistática - Sin actividad

La única especie vegetal que mostró inhibir el crecimiento radial de T. mentagrophytes

fueron los extractos de acetona de A. cepa (flor y bulbo) 2017. En nuestro trabajo se
observó que el perímetro radial del hongo mostraba medias lunas en contacto con los
sensidiscos impregnados por los extractos acetónicos de A. cepa por lo que este
efecto se consideró como fungistático, este se puede definir como aquel producto que
inhibe el crecimiento de un hongo pero que no lo mata (Romero Cabello et al., 2018).
En la literatura Solórzano et al., 2021 evaluó la actividad de dos compuestos en fase
gaseosa de la cebolla el tiosulfinato de propil propano y tiosulfonato de propil propano
y cuyos resultados mostraron un efecto antifúngico en C. albicans y C. krusei. En el
trabajo de Frías de León et al., 2020 sobre T. mentagrophytes se menciona que este
hongo tiene diferentes variantes que, aunque son muy similares morfológicamente su
susceptibilidad a los antifúngicos puede variar.

Finalmente, los resultados sobre la actividad antioxidante se presentan en la tabla 11.

La mayoría de los extractos presentaron efecto antioxidante, con excepción de los
extractos de hexano de A. cepa (flor y bulbo). En T. hirsutissima (hojas) el efecto
antioxidante disminuye conforme va aumentando la polaridad, caso contrario a los
frutos de A. farnesiana la cual va aumentando con la polaridad.

Tabla 11. Actividad antioxidante de los extractos de diferente polaridad de las cuatro
plantas medicinales de Tonatico, Estado de México

DPPH
Extracto
Hexano Acetona Metanol
A. farnesiana
++ ++ ++
(hojas)
A. farnesiana
+ ++ +++
(frutos)
A. glaucescens
++ ++ +++
(hojas)
A. cepa (flor)
2017 - +++ +++

A. cepa (bulbo)
- ++ ++
2017

26
A. cepa (bulbo)
+ ++ +++
2018*
A. cepa (tallo)
++ ++ +++
2018*
T. hirsutissima
+++ ++ +
(hojas)
+ Antioxidante débil (cambio lento en la coloración); ++ Antioxidante medio (cambio
medio de coloración); +++ Antioxidante fuerte (cambio rápido de coloración); - No hubo
reacción

En cuanto a la actividad antioxidante de A. farnesiana (hojas y frutos) los resultados de

este estudio coinciden con lo reportado en la bibliografía. Hernández García, 2017
menciona en su estudio la presencia de antioxidantes, estos pueden estar
relacionados a los fenoles presentes en el perfil fitoquímico de A. farnesiana. Por otra
parte, Lin et al, 2009 menciona que el ácido betulínico, diosmetina y 3′,4′,5-trihidroxi-7-
metoxiflavon inhibieron la generación de aniones superóxido.

Los resultados obtenidos sobre la actividad antioxidante de A. glaucescens (hojas) son

reveladores ya que no hay reportes sobre la actividad antioxidante de esta especie. No
obstante, se buscó literatura en la que hayan trabajado con alguna especie
relacionada con el género Asclepia. Se encontró que los resultados de este trabajo
coinciden con lo reportado por varios autores. Sovero & Anaestegui, 2021 mencionan
la presencia de flavonoides y compuestos fenólicos en el extracto hidroalcohólico de A.
curassavica. Al-Snafi, 2015 reporta la presencia de fenoles y flavonoides en A.
curassavica. Jiménez et al, 2009 menciona que los flavonoides poseen propiedades
quelantes de hierro además de inhibir la formación de especies reactivas de oxígeno
inhibiendo oxidasas. De ahí que esta especie vegetal posea buena actividad
antioxidante.

A. cepa mostró unos resultados interesantes. La que se recolectó en 2017 presentó

actividad antioxidante en los extractos de acetona y metanol al igual que la colectada
en 2018 no obstante esta última también presentó actividad antioxidante en el extracto
de hexano. Esto posiblemente se puede explicar con el trabajo de Viera et al., 2017
quienes mencionan en sus conclusiones que el tiempo de extracción puede inferir en
los resultados sobre la actividad antioxidante, concluyendo que a menores tiempo de
extracción (30 minutos) los extractos mostraban mejor actividad en la prueba de DPPH
que a mayores tiempos de extracción (120-240 minutos).

Por último, T. hirsutissima presentó actividad antioxidante en todos los extractos. El

trabajo de Rivera et al., 2017 se enfocó en el estudio del efecto cicatrizante de T.

27
hirsutissima, para ello determinaron algunos de los compuestos responsables de este
efecto mediante cromatografía de gases acoplada a espectroscopia de masas. Su
trabajo determinó que el ácido palmítico regeneraba los queratinocitos, además el Ƴ-
sitosterol acelerada la migración de estas células eliminando las especies reactivas de
oxígeno, concluyendo que esta planta posee propiedades cicatrizantes y
antioxidantes.

8. Conclusiones
• Los extractos metanólicos de las cuatro especies vegetales -Acacia farnesiana,
Allium cepa, Asclepias glaucescens y Tournefortia hirsutissima- presentaron los
mayores rendimientos debido a un gran contenido de compuestos polares en
comparación a los otros tipos de extractos, hexánico y acetónico.
• En cuanto a las pruebas coloridas, la mayoría de las especies vegetales
mostraron ser buena fuente de metabolitos secundarios que potencialmente
pueden tener actividad antimicrobianas y antiinflamatorias, importantes en
cualquier padecimiento o trastorno inflamatorio de la piel.
• La prueba cualitativa de la actividad antibacteriana mostró que 13 extractos
poseen actividad, siendo tres bacteriostáticos específicamente en las cepas de
S. aureus ATCC29213 y S. epidermidis ATCC12228.
• La CMI fue mayor a 2 mg/mL en los extractos hexánico y metanólico de A.
farnesiana (hojas); hexánico y metanólico de A. farnesiana (frutos); acetónico y
metanólico de A. glaucescens; hexánico, acetónico y metanólico de A. cepa
(flor) y hexánico y acetónico de A cepa (bulbo). E igual a 2 mg/mL en el
extracto acetónico de A. farnesiana (frutos) y A. glaucescens (hojas).
• Los extractos acetónicos de A. cepa presentaron actividad fungistática para el
hongo T. mentagrophytes.
• La mayoría de los extractos mostraron actividad antioxidante con el radical
DPPH, excepto los extractos de acetona de A. cepa (bulbo y flor).

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