Microscopía aplicada
a la criminalística
Crim. Luis Enrique Recoba Ayala
• Historia
• Conceptos y tipos
• Estructura
Contenido • Tipos de microscopio
• Uso del microscopio
• Aplicaciones forenses
• Crim. Luis Enrique Recoba Ayala
Generalidades
• La utilidad de la microscopía en la criminalística va
más allá del mero estudio preliminar de las
muestras, aunque actualmente ya no se recurre
tanto a ella por la aparición de otros métodos
instrumentales, durante mucho tiempo fue la prueba
reina en el laboratorio forense.
“Los restos microscópicos que cubren nuestra ropa y nuestros
cuerpos son testigos mudos, seguros y fieles, de nuestros
movimientos y de nuestros encuentros”
• Crim. Luis Enrique Recoba Ayala
• La microscopía es la técnica que emplea como
instrumento el microscopio en sus distintos
tipos.
• La palabra microscopio proviene de los
términos griegos “micro” pequeño, y “scopio”,
observar, de lo que se deduce que se trata de
un aparato que permite observar objetos muy
pequeños, tanto que a simple vista no podrían
ser vistos por el ojo humano. Una lente de
aumento o lupa ya constituiría un
microscopio.
• La creación del microscópio se le atribuye a
Zacharias Janseen.
• Crim. Luis Enrique Recoba Ayala
• La fabricación de un microscopio de dos lentes o microscopio compuesto se le
debe al Holandes Anton Van Leeuwenhoek, quien introdujo notables mejoras
al fabricar microscopios que constaban de lentes convexas, de muy buena
calidad y pequeño tamaño, montadas sobre una plancha, con un mecanismo
para sujetar el material que se iba a examinar
• Crim. Luis Enrique Recoba Ayala
• Leeuwenhoek logró describir los glóbulos rojos
de la sangre y los capilares con más detalle que
Malpighi. Descubrió organismos invisibles a
simple vista, al estudiar aguas estancadas con su
microscopio, lo que más tarde llamarían
bacterias y “animalículos”, como los denominó
entonces, conocidos hoy como protozoarios que
en griego significa pequeños animales.
• Crim. Luis Enrique Recoba Ayala
• Robert Hooke (inglés) en 1665 publicó un libro llamado
Micrographia en el cual pueden encontrarse algunos de
los mejores dibujos que se hallan hecho de
observaciones microscópicas. La observación simple
más importante fue la de un delgado trozo de corcho
sobre el cual no se sabía porque flotaba en agua y era
tan liviano y firme. Hooke observó que está constituido
por una fina trama de pequeñas celdillas rectangulares
en las cuales se encontraba aire.
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• Hacia 1700 se construyeron microscopios de mayor
precisión y que permitían conseguir un gran aumento
del objeto observado, colocando una lente inferior,
próxima al objeto, que es el objetivo, y otra lente
superior, muy cercana al ojo del observador, que es el
ocular.
• Este tipo de aparatos supuso un gran avance en esta
técnica y constituye el fundamento de la mayoría de
los microscopios utilizados desde entonces, por lo
que se le considera como el modelo del microscopio
óptico común.
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• En 1820 Joseph Jackson Lister, diseñó un
microscopio acromático capaz de eliminar
los anillos de color que limitaban la claridad
de la imagen. Descubrió que los glóbulos
rojos eran en realidad discos bicóncavos. El
microscopio acromático constituyó un gran
avance, iniciando una serie de
perfeccionamientos que dieron como
resultado el moderno microscopio óptico.
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• En la década de los 30´s el mundo
submicroscópico se amplió con la
aparición del microscopio electrónico cuya
ventaja principal con respecto al
microscopio óptico es un aumento de
1000 veces en la magnificación del
material observado acompañado de una
mayor capacidad de resolución generando
una mejor definición y una ampliación del
mundo microscópico. ADN, virus y
pequeños organelos fueron observados
por primera vez con este microscopio.
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Ante las mejoras realizadas y hasta la actualidad el microscopio óptico consta básicamente
de estos tres sistemas:
-Un sistema óptico, que comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de
los objetos que se pretenden observar.
-Un sistema de iluminación que comprende un conjunto de instrumentos dispuestos de tal
manera que producen ranuras de luz.
-Un sistema mecánico, constituido por una palanca que sirve para sostener y elevar la
muestra.
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Conceptos y
tipos de
microscopios
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• Etimologicamente, el concepto de
microscopio viene del griego, mikro
“pequeño” y Scopeo “mirar, ver”. Así
tenemos que, un microscopio es un
instrumento que amplifica una
imagen y permite la observación de
mayores detalles de los posibles a
simple vista.
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Tipos
• En general existen dos tipos:
Óptico Electrónico Digital
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En cuanto a los microscopios ópticos, tenemos que
utilizan lentes para ampliar las imágenes de los objetos
observados. Pueden ser monoculares o binoculares.
Existen varios tipos, entre ellos:
• De campo claro
• Estereoscópico
• De campo oscuro
• De contraste de fases
• De fluorescencia
• De luz polarizada
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• El objeto se coloca entre la lente y el foco a una
Estereoscópico distancia mínima de 25 cm.
• Utilizado para exámenes superficiales.
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Microscopio que funciona a partir de una
cámara conectada a un monitor para
Microscopio digital mostrar las imágenes en tiempo real, a
través de softwares que realiza tareas
avanzadas.
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En los microscopios electrónicos, la
luz es un haz de electrones que
son propagados a través de un
tubo, inciden sobre el objeto y son
refractados y recogidos en una
pantalla.
Existen dos:
• De transmisión (llamado MET)
• De barrido (conocido como MEB)
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• El microscopio explora la superficie de la imagen punto
MEB por punto, los electrones pueden dispersarse en la
muestra y luego son recogidos y contados por un
dispositivo electrónico situado a los lados del espécimen.
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Muestras en balística
• Disco de carbono adhesivo para MEB
• Determinar la presencia de residuos de
disparo por arma de fuego
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Principios de microscopía
1. Características ópticas
Luz.
La luz es una radiación electromagnética, fluctuaciones de
campos eléctricos y magnéticos en la naturaleza.
Concretamente, la luz es energía y el fenómeno de color es
un producto de la interacción de la energía y la materia.
Esta es irradiada a partir de una fuente (sol, lampara, flash,
etc). Puede desplazarse en el vacío a casi 300.000 km/s y
atravesar sustancias transparentes, descendiendo su
velocidad en función de la densidad del medio.
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Contraste
• Es la diferencia en la absorción de luz entre el objeto
estudiado y el medio que lo rodea.
• El "contraste" es el grado de diferencia entre las partes
más oscuras y más claras de la imagen. Al aumentar el
contraste se aumentará la diferencia, por lo que la
imagen será más nítida. Al reducir el contraste se
reducirá la diferencia, por lo que la imagen se
suavizará.
El contraste puede aumentarse mediante procedimientos
de tinción.
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Iluminación
Para iluminar el objeto se pueden emplear dos mecanismos:
Trans-iluminación:
• El rayo electromagnético debe atravesar el objeto. Los preparados deben ser muy delgados y
transparentes. Deben ser rebanados con instrumentos especializados (micrótomos) que permiten
obtener cortes cuyo espesor debe estar en el orden de las micras.
• La transparencia es otra cualidad que debe tener el objeto. Ser transparente facilita en gran
medida el paso del rayo de luz.
• La trans-iluminación permite resaltar la estructura observada sobre un fondo muy iluminado. El
microscopio compuesto clásico emplea este tipo de iluminación y por ello también se denomina
de campo claro.
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• Con esta técnica de iluminación el rayo
de luz incide de manera oblicua sobre la
muestra. Las muestras pueden
observarse sin necesidad de realizar
Epi- cortes finos y en muchos casos tampoco
se emplean colorantes. La transparencia
iluminación del objeto no es imprescindible. Como
efecto de la epi-iluminación es posible
obtener imágenes tridimensionales,
complementando de esta manera lo
observado con la microscopía por trans-
iluminación.
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Aumento
Se refiere a la relación entre el tamaño a simple vista y el tamaño observado con
el microscopio.
Los lentes convergentes son los que magnifican el tamaño aparente del objeto
observado.
El poder de aumento de una lente está determinado por el grado de curvatura de
su superficie y la distancia focal. En las lentes convexas mientras mayo sea la
curvatura, menor será la distancia focal y mayor será el aumento.
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Los objetivos tienen el número del aumento
inscrito en su parte lateral. La distancia focal de
los objetivos de 10, 40 y 100 X es de
aproximadamente 16mm , 4mm y 1.8 mm
respectivamente.
Esta es la distancia entre la lente frontal
del objetivo y la parte superior de la
muestra cuando la muestra está enfocada.
En la mayoría de los casos, la distancia de
trabajo de un objetivo disminuye a medida
que aumenta la ampliación
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Área de
campo:
• Diámetro de la parte de la preparación que se está
viendo (círculo visible).
• Inversamente proporcional al aumento: será mayor
cuando menor sea el aumento.
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Poder de resolución
• Capacidad de mostrar
distintos y separados dos
puntos muy cercanos.
• Cuanto mayor sea el poder de
resolución, mayor será la
definición del objeto.
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Profundidad de
campo:
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Poder de definición
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Estructura del microscopio
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Sistema mecánico de
Pie: base rectangular del
soporte: sostiene a la
microscopio, da Brazo: columna
parte óptica y de
estabilidad, aquí se perpendicular al pie,
iluminación y permite los
encuentra la fuente uniéndolo con el tubo.
desplazamientos para el
luminosa.
enfoque :
Platina: plataforma donde
se coloca la muestra.
Tubo: tiene al revolver y Presenta un orificio
Revólver: tiene y mueve
los oculares. Ennegrecido central donde pasan los
los objetivos.
internamente. rayos de luz, dos pinzas y
un tornillo de
desplazamiento.
Carro: permite deslizar la
preparación con
movimiento de adelante
hacia atrás y de derecha a
izquierda. El sistema mecánico se divide en dos,
el de soporte y el de ajuste.
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Sistema mecánico de
ajuste:
Se refiere a los Tornillo
tornillos de enfoque Macrométrico:
que mueven la permite el enfoque
platina arriba y abajo, rápido de la
fijándola a una preparación.
determinada altura:
Tornillo
micrométrico:
Movimiento casi
imperceptible, logra
el enfoque exacto y
nitido de la
preparación. Crim. Luis Enrique Recoba Ayala
Sistema de iluminación
Dirige la luz hacia la preparación que se va a
observar.
• Fuente de iluminación: lampara de
intensidad variable, puede tener anillo
para filtro de luz.
• Condensador: sistema de lentes bajo la
platina que concentran la luz hacia la
preparación.
• Diafragma o iris: en el interior del
condensador, elimina los rayos demasiado
desviados (regula la cantidad de luz).
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Sistema óptico:
Reproduce y aumenta las imágenes mediante un
conjunto de lentes.
• Lentes objetivos (2, 6, 10, 20, 40 y 100x): insertados
en el revolver, que los cambia fácilmente. General
una imagen real y aumentada. Llevan marcadas sus
características principales.
• Tipos: secos y de inmersión.
• Lentes oculares: (8, 10, 12 y 15x): captan y amplían la
imagen generada en los objetivos. Constituidos
generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un
tubo corto.
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Uso del
microscopio
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1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente.
2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.
3. Comenzar la observación con el objetivo de menor aumento.
4. Para realizar el enfoque:
a) Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Esto
debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular.
b) Mirando a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con el
macrométrico y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un
enfoque fino.
5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen ya debería estar casi enfocada y suele ser suficiente con mover un
poco el micrométrico para lograr el enfoque fino.
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Aplicaciones forenses
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Rastros materiales
• Para reconstruir un suceso
mediante rastros materiales se
requiere un análisis por
microscopio, para minimizar el
daño ocasionado a la muestra.
Ya sea para examinar fibras,
cabello, pintura, huellas
dactilares, residuos y otros
rastros materiales.
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Armas de fuego y marcas en
herramientas
El examen de armas de fuego y
marcas en herramientas requiere
la combinación adecuada de
ópticas de microscopio de calidad
superior, una iluminación precisa y
soluciones de software
inteligentes para determinar
características superficiales
únicas.
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Microscopía de
comparación
• El microscopio de comparación
consiste en la unión de dos
microscopios ópticos, con platinas,
tornillos y objetivos
independientes, pero con el
mismo par de oculares, a los
cuales les llega la información de
dos muestras diferentes, por
medio de un puente óptico que a
su vez está conformado por lentes
internas y manipulables que nos
permiten observar las imágenes
de ambas muestras al mismo
tiempo para su comparación.
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La balística es el área forense que más
se familiariza con este instrumento,
apoyándose en la comparación de
proyectiles dubitados con los
indubitados, a través de las marcas
estriadas dejadas por las armas de
fuego
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También puede ser ocupado en Documentoscopía y cualquier otra
prueba de comparación microscópica.
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Muestras susceptibles
de análisis
Semen Saliva Sangre
Cabello Uñas Documentos
Tierra Pinturas Cristales
Tejidos
Fibras Insectos
biológicos
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Gracias
