PRÁCTICA 10
FOTOSÍNTESIS.
A. Objetivos
1. Identificar los factores que intervienen en el proceso de síntesis
de carbohidratos en células vegetales.
2. Identificar los pigmentos presentes en células vegetales
encargados de la fijación de la luz para el proceso de fotosíntesis.
B. Fundamento teórico:
La fotosíntesis es el proceso de síntesis de carbohidratos a partir de
dióxido de carbono y agua utilizando la energía solar captada por
pigmentos fotosintéticos como la clorofila en las células vegetales.
6H2O + 6CO2 Energía solar C6 H12 O6 + 6O2
En la fotosíntesis se presentan dos fases o series de reacciones, una
rápida (reacción dependiente de la luz) y otra lenta integrada por varias
fases, que no es afectada por la luz (reacción independiente de la luz).
Las reacciones en que interviene la luz transforman la energía lumínica
en energía química y los productos que se obtienen son el adenosin
trifosfato (ATP) y el niicotin-adenosin-dinucleótido fosfato (NADPH). Los
organelos celulares encargados de esta actividad fotosintética en las
plantas son los cloroplastos, en ellos se encuentra la clorofila verde,
cada célula contiene de veinte a cien cloroplastos que pueden crecer y
dividirse para formar más cloroplastos; los granas son unidades
funcionales de los cloroplastos que almacenan la clorofila y otros
pigmentos.
Se encuentra la clorofila a y la clorofila b, todas las plantas verdes
tienen clorofila a, pero muchas algas y algunos otros vegetales carecen
de clorofila b, además las plantas poseen muchos pigmentos a los que
debe su gran variedad de colores de flores y frutos, algunos de estos
pigmentos intervienen en la absorción de energía luminosa y su
transferencia a clorofila para que puedan utilizarse en la fotosíntesis. El
caroteno es un pigmento de color anaranjado oscuro, en las plantas y
en animales se puede transformar en vitamina A. La xantofila es un
pigmento de color amarillo. Las algas rojas y verdes-azules contienen
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otros pigmentos como la ficocianina, ficoxantina y la ficoeritrina los
cuales tienen acción fotosintética como las clorofilas.
C. Materiales y reactivos:
Tubos de ensayo; plancha de calentamiento;
Gradilla; rojo de fenol;
beakers de 150 mL; lugol;
mortero con pistilo; cinta de enmascarar;
papel filtro; caja de petri
capilar; *pinzas
éter de petróleo; *ramas de Elodea
acetona; *Hojas de geranio
etanol al 80%; *Hoja de espinaca
alcohol al 70%; *Pitillo
solución de Bicarbonato de sodio al 10% *tijeras pequeñas
agua del grifo;
bombilla con luz brillante;
D. Consulta:
1. ¿Qué es una cromatografía? Cite ejemplos:
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2. Establezca las diferencias en cuanto a la solubilidad de los
pigmentos fotosintéticos: clorofila alfa, clorofila beta, carotenos y
xantofilas, en un proceso de cromatografía:
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3. ¿Qué es un organismo fotosintetizante o fotoautótrofo?. Indique
ejemplos de organismos se consideran fotoautótrofos:
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4. Indique la reacción química de la fotosíntesis realizada por
bacterias:
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5. ¿Qué es un indicador de pH?
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6. ¿Cómo actúa el rojo de fenol?
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E. Procedimiento:
1. Cromatografía en papel para separación de pigmentos:
Tome de dos a tres hojas de espinaca y córtelas en trozos pequeños en
un mortero, agregue 1 mL de etanol y macérelas con el pistilo del
mortero. Obtenga una tira de papel filtro con un extremo en punta que
pueda entrar fácilmente en un tubo de ensayo. Coloque en un tubo de
ensayo 2 ml de la siguiente mezcla: 1.8 mL de éter de petróleo y 0.2
mL de acetona. A 2 cm del extremo en punta de papel filtro coloque una
fina gota del extracto con un capilar, deje secar y realice este
procedimiento mínimo diez veces. Observe la presencia de un
pigmento. Introduzca la tira de papel en el tubo de ensayo que tiene la
mezcla de éter de petróleo-acetona, colóquela de tal modo que solo
quede en contacto 1 cm del extremo del papel filtro. Utilizando cinta de
enmascarar, asegure el extremo superior de la tira en la parte superior
del tubo de ensayo. Cuando termine la cromatografía, en un tiempo
aproximado de treinta minutos, saque el papel filtro y localice los
pigmentos que componen el extracto vegetal obtenido de las espinacas.
2. Factores que influyen en la fotosíntesis:
Tome seis tubos de ensayo, enumérelos de 1 a 6, agregue 10 mL de
agua del grifo a cada tubo, añada diez gotas de rojo fenol a cada tubo,
haga burbujear CO2 soplando en el agua con un pitillo en los tubos 3 al
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6, menos en los tubos 1 y 2, suspenda el burbujeo cuando observe un
cambio de color. Sumerja una rama de elodea de 5 cm de largo en cada
uno de los tubos, someta los tubos 1, 3 y 6 a luz intensa empleando la
luz directa del sol o un bombillo con luz brillante. El tubo número 4
colóquelo en un sitio con luz mitigada, es decir donde la luz no sea
directa. Los tubos número 2 y 5 colóquelos en total oscuridad,
manténgalos así durante veinte minutos.
3. Formación de oxígeno en la fotosíntesis:
Tome un tubo de ensayo y agregue 5 mL de agua del grifo. Agregue 5
mL de solución de bicarbonato de sodio al 10% (el bicarbonato de sodio
proveerá el anhídrido carbónico que se usará en la fotosíntesis).
Introduzca 5 cm de una rama de elodea, someta el tubo a luz directa
intensa o luz brillante. Observe y cuente el número de burbujas por
minuto durante diez minutos. Retire la luz del tubo y observe
nuevamente lo que ocurre.
4. Reconocimiento de la presencia de carbohidratos (almidón) en las
hojas de las plantas:
En un beaker de 150 mL agregue 100 mL de agua del grifo y coloque
tres hojas de geranio, caliéntelas durante cinco minutos a una
temperatura de 80 °C, trasládelas luego a un beaker de 150 mL que
contiene 50 mL de alcohol, caliente el beaker a una temperatura de
80°C, uando las hojas se hayan decolorado y el alcohol se torne
verdoso, suspenda el calentamiento, saque las hojas, colóquelas en una
caja de petri, lávelas con agua fría del grifo, déjelas reposar por cinco
minutos. Agréguele 5 mL de lugol para cubrir las hojas, déjelas así
durante quince minutos, saque las hojas y obsérvelas a la luz.
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Número de subgrupo: _____
Nombre y apellido de los integrantes del grupo de trabajo:
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F. Resultados:
1. Cromatografía en papel para la identificación de pigmentos:
a. Dibuje lo observado en la cromatografía realizada, indique los
pigmentos fotosintéticos:
b. ¿Cómo interpreta lo observado en la cromatografía realizada?
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c. Antes de realizar la cromatografía, observó la presencia de algún
pigmento? ¿Cuál(es)?
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2. Factores que intervienen en la fotosíntesis:
a. Dibuje y coloree los resultados obtenidos al final de la prueba:
1 2 3 4 5 6
b. ¿Qué función cumple el rojo de fenol?
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c. ¿Cómo se verifica la formación del oxígeno?
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d. Diligencie la siguiente tabla con el fin de verificar la realización del
proceso de fotosíntesis:
Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6
Luz
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CO2
Producción de
O2
Coloración en
el agua
e. Interpretación de los cambios ocurridos:
Tubo 1:
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Tubo 2:
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Tubo 3:
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Tubo 4:
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Tubo 5:
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Tubo 6:
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3. Formación de oxígeno en la fotosíntesis:
Relacione en la siguiente tabla el número de burbujas formadas durante
cada minuto:
Minuto 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Número
de
Burbujas
Total de
Burbujas
4. Reconocimiento de carbohidratos (almidón) en las hojas de las
plantas:
a. Dibuje las hojas iniciando la prueba, después de someterla con el
alcohol y después de someterla al lugol:
Estado inicial Con alcohol Con lugol
b. ¿Qué función cumplió el alcohol?
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c. ¿Qué función tiene el reactivo lugol en esta prueba?
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d. ¿Evidenció la presencia de almidón? Describa lo observado:
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G. Discusión de los resultados:
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H. Conclusiones:
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I. Bibliografía
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Audersik, G. y Audersik, T. (1996). Biología. (4rta ed.). México: Prentice
Hall Hispanoamericana. S.A.
Barcelo, J., Nicolas, G., Sabater, B. y Sánchez, R. (1987). Fisiología
vegetal. Madrid, España: Ediciones Pirámide S.A.
Rovalo, M. y Rojas, M. (1993). Fisiología vegetal experimental. Prácticas
de laboratorio. México: Limusa.
Uribe, F., Moreno, J., Aldana, D. y Pineda, N. (1998). Manual de
laboratorio de Biología general. Medellín, Colombia: Universidad de
Antioquia.
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