TERCER TALLER DE

CAPACITACIÓN TÉCNICA

Nov 2008 July 2011 August 2012 Nov 2016

Plant Physiology Plant Physiology Nature Molecular Plant Microbe Intreractions
Biotecnología en la agricultura
Aplicaciones con agentes microbiales
Dra. Rocío Velázquez Robledo
[email protected]
Miércoles 22 de Febrero de 2017
 Problemática de la distribución de
los alimentos

Población mundial estimada en éste año La Revolución Verde de finales del siglo
es de 7 000 millones de habitantes XX contribuyó al agotamiento de los
2040  9 000 millones (9 billones) recursos no renovables (suelo y agua)
 Se logró entre los 40´s- 80´s aumentar la producción
de alimentos, pero hoy en día tiene sus problemas

…..limitan la productividad
 Cada año el suelo se Tomarían muchos años (1000) producir
33 % de degrada. 2-3 cm de suelo
nuestro suelo Sí seguimos con las
global esta mismas prácticas en
degradado 60 años se perderán
las capas del suelo
superior

16 % del
continente
africano ha
sido
afectado por
degradación
del suelo
Los principales retos mundiales se centran:

 Producir alimentos en mayor cantidad

 Inocuos
 Asegurando la productividad en sig.
generaciones
 Con insumos de menor costo

 Respetando las nuevas legislaciones

ecológicas
Los avances científicos han dirigido el
conocimiento hacia actuales retos
 La herramienta clave es la Biotecnología

Biotecnología.
Es una especialidad multidisciplinaria cuyo conocimiento
generado permite la modificación y la utilización de seres
vivos del planeta. Busca hacer un uso responsable y
sustentable de la biodiversidad, mediante el desarrollo de
la tecnología, de forma eficaz, limpia y competitiva.
Áreas de la Biotecnología
Otros

Los colores de la
biotecnología

Ambiental
Segmentación del mercado biotecnológico mundial en el 2012

7%
8%
11%

60%
14%

Salud humana Agricultura y Alimentos

Proveedor de Servicios Tecnologia de servicios
Ambiental e Indistrial Analyst Research Report Written by Osman Ghani,
Chartered Financial Analyst
Proud Member of the CFA Institute January, 13th
2014
 Los retos para la agricultura son:

1. Erosión 7. Saturación con

fertilizantes y
plaguicidas
2. Escasa o nula 6. Poca retención de
microbiota agua

3. Variedades vegetales con 5. Incremento de

genética de bajos plagas y
rendimientos enfermedades
4. Baja fertilidad de los
suelos
 Los 7 principios del éxito de la
producción agrícola

1. Agricultura sustentable 7. Reguladores de crecimiento

(labranza) Biorregulación

2. Uso de microorganismos 6. Uso adecuado de recursos

asociados a plantas como el del agua
Biofertilización/Biocontrol de plagas

3. Materiales vegetales 5. Conocimiento de la microbiota

(patógenos y benéficos)
mejorados Cultivo anterior
Bioingeniería genética

4. Mejor aprovechamiento de los fertilizantes

(Agricultura de precisión)
 1. Agricultura sustentable (labranza)

Tratamiento del rastrojo, factor clave para enriquecimiento del suelo:

1. Protege al suelo de la erosión hídrica.
2. Reduce las pérdidas de agua por evaporación.
3. Mejora la disponibilidad de nutrientes, aumentando la actividad biológica.
4. Forma un acolchado orgánico, que disminuye el surgimiento de malezas.
2. Uso de microorganismos asociados a plantas
(protección)
Captadoras de energía

O2
CO2
Promotores de
Fijadores de Formadores Detoxificadores Mineralizadores crecimiento
nitrógeno de humus PGPR
Constructores Solubilizadores Activadores de Formadores de
Celulíticos
de estructura de fósforo sist. defensivo micorrizas

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3. Materiales vegetales mejorados con Biotecnología

Ingeniería genética Nueva era de la Ingeniería genética

Edición de genomas
4. Mejor aprovechamiento de los fertilizantes (Agricultura de precisión)

Materia orgánica Crecimiento de raíces

(nutrientes para
microbios)

Solubilizacion
nutrientes

La materia orgánica del suelo es el almacén de energía y nutrientes utilizados por las plantas y otros
organismos. Bacterias, hongos y otros organismos “excavadores”, transforman y liberan nutrientes de la
materia orgánica
 5. Conocimiento de la microbiota (patógenos y benéficos; Cultivo anterior)

La microbiología del suelo

Ciliados

Bacterias Nematodos Hongos

Raiz

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6. Uso adecuado de recursos como el del agua
Son muchos los m3 de agua que se
usan para suministrar los nutrientes a
La planta.
Sin embargo es un recurso cada vez
más escaso y hay que aprender a
suministrarlo, para aprovecharlo al
máximo.

Uso de cintas de riego

7. Reguladores de crecimiento
 Cuidemos al suelo, porque de él
depende el éxito de la agricultura
 SinQuímica especializado en microbiales
Antagonistas Entomopatógenos Nematicidas
•Bs •EN DESARROLLO •Nemaquin
•Funqui

B. subtilis Trichoderma viride

B. thuringiensis
Paecilomyces variotii

M. anisopliae B. bassiana

Colletotrichum R. solani Cordyceps

 Mecanismos de acción de los microbiales antagónicos
o Competencia por nutrientes. o Alta taza de crecimiento.

o Capacidad de multiplicarse en o Secreta ácidos orgánicos.

condiciones de poco hierrro. o Libera compuestos que estimulan desarrollo.

o Capacidad de adaptación a o Y estimula la ISR.

amplias condiciones ecológicas.

o Secreción de antibióticos.

Bacillus subtilis Phytophthora capsici

Trichoderma viride
 Elementos que controlan las enfermedades fungosas

Parasitismo: Enzimas líticas:

El agente de biocontrol dirige  Proteasas: rompe proteínas
su crecimiento hacia su presa  Quitinasas: rompe la quitina
blanco para alimentarse y  Glucanasas: rompe los
reproducirse. glucanos de la quitina

Antibióticos que perturban la actividad de la membrana plasmática

 Cómo trabaja Trichoderma viride
Degradador de materia orgánica
Algunas cepas han sido aisladas de ambientes acuáticos
Algunos son colonizadores de raíces en plantas
- Aumenta la altura de las plantas
- Mejora la toma de nutrientes en las plantas
- Previene de enfermedades por hongos fitopatógenos
 Efecto de plantas inoculadas con Trichoderma viride
y patógeno Fusarium oxysporum f. sp. radicis-
lycopersici
T6
T5
T4 T1 T2 T3

T3

T2

T4 T5 T6

T1
1. T. viride
2. T. harzianum/Forl
3. T. viride/Forl
4. Procloraz/Forl
5. Forl
6. Testigo negativo
 Efectos indirectos que ejerce T. viride en el control de FORL
140
Severidad enfermedad BC B Altura
C en las plantas B
120
50 A
A
% DE SEVERIDAD

40 100

30 80

CM
20
AB AB
10
B 60

A AB
0 A 40
1 2 3 4 5 6
20
TRATAMIENTOS
0
T. viride T. T. viride/FORL Procloraz/FORL FORL Testigo negativo
harzianum/FORL

700 1400

Volumen de raíces 1200 Peso fresco en plantas

600
1000
500

GRAMOS
800
400
CM3

600 B
300 B
AB
AB AB A A A
AB AB 400
200
200
A A
100
0
0 T. viride T. T. viride/FORL Procloraz/FORL FORL Testigo negativo
T. viride T. harzianum/Forl T. viride/Forl Procloraz/Forl Forl Control negativo harzianum/FORL

Letras diferentes indican diferencia significativa Tukey≤0.05

Qué hace Bacillus subtilis
Colonizador de raíces
Estimulador de la germinación de semillas
Estimulación de la respuesta sistémica inducida
- Mayor adaptación a situaciones de estrés
- Mejora la toma de nutrientes en las plantas
- Previene de enfermedades por hongos fitopatógenos
 Modo de acción
 Producción de metabolitos secundarios Antibióticos:
lipopéptidos: iturinas, fengincinas, inhiben la formación
del tubo germinativo, evitando su colonización y previenen
la germinación de esporas, evitando su proliferación.

 Producción de sideróforos. Compuestos extracelulares

de bajo peso molecular con una elevada afinidad por el ión
hierro con lo que previene la germinación de las esporas
de los hongos patógenos.

 Promotor de crecimiento. Protege y estimula la absorción

de nutrientes, además de producir ácido indol acético.

 Inducción de resistencia sistémica inducida. Produce

Control de enfermedades del fitoalexinas contra el ataque de hongos, bacterias y
follaje (Roya, Cenicilla, nematodos patógenos.
Antracnosis)
29
Biocontrol de Podosphaera xanthii (cenicilla) en Calabaza zucchini
80

% de área foliar afectada

70

60

50

40

30

20

10

T1 dosis baja 3L/Ha T2 dosis media 5L/Ha T3 dosis alta 9 L/Ha

T4 Serenade 5 Kg/Ha T5 Testigo sin aplicación

Supervivencia de B. subtilis en follaje a los 7 dpi (4 monitoreos semanales)

2, 476 UFC/gr
Actividad biológica vs fitopatógenos

Fitopatógeno
Control Sobrenadante Características intrínsecas de B. subtilis Q11
(+) (lipopéptidos)

 Lipopéptidos tipo iturinas A6 y A7, potentes antifúngicos.

Colletotrichum sp

 El extracto crudo posee estabilidad a altas temperaturas y a

condiciones de fuerzas iónicas generadas por soluciones salinas de 2, 4

Diplocarpon rosae
y 6 % de cloruro de sodio.

 La cepa Q11 pertenece al género Bacillus y posee los genes para la

síntesis de otro tipo de antibióticos con potencial biocontrol vs hongos.

Rhizoctonia
solani Además muestras capacidad para la solubilización de fosfatos,

producción de sideróforos, actividad ACC desaminasa y tolerancia a

Alternaria 2M de NaCl.
solani
 Mecanismos directos e indirectos del biocontrol con
antagonistas

Sí la enfermedad esta presente

Inhiben o eliminan propágulos de fitopatógenos (antagonismo).
Si solo interacciona con la planta
• Coloniza las raíces
• Resistencia sistémica inducida
• Incremento en el crecimiento del sistema radicular y en general de la planta
• Facilita la toma de nutrientes en la planta
• Control del crecimiento de microorganismos en suelo (bacterias y hongos)
• Ganancia de peso de frutos
 El éxito del biocontrol
•Tipo de cepa a usar
•Hongo a antagonizar
•Tipo de cultivo
•Ambiente
•Disponibilidad de nutrientes
•Temperatura
 El control de las enfermedades por nemátodos

Lesiones en las raíces por nodulaciones

Debilitamiento de la planta, aparente deficiencia en nutrientes, marchitez Susceptibilidad a infecciones fungosas y/o bacterianas
 Daños principales de fitonematodos
• Reduce el volumen y peso de raíces
• Reduce el follaje
• Reduce la absorción de agua y nutrientes
• Reduce la fotosíntesis
• Favorecen la entrada de hongos y bacterias
del suelo y pueden transmitir virus
Principales nematodos fitópatógenos “TOP TEN”
1987 a 2008
Género Puntuación Distribución
1. Meloidogyne 1375 Mundial
2. Pratylenchus 782 Mundial
3. Heterodera 606 Mundial
4. Ditylenchus 251 Mundial
5. Globodera 244 Mundial
6. Tylenchulus 233 Regional
7. Xiphinema 204 Mundial
8. Radopholus 170 Regional
9. Rotylenchulus 142 Mundial
10. Helicotylenchus 122 Mundial
Nacobbus aberrans
Todos presentes en México
 Forma de reproducción de los nematodos
Dimorfismo sexual: el macho es más pequeño que la hembra y en su cola presenta un gancho.
Meloidogyne, Heterorodera, Nacobbus, etc.

Bisexuada. No hay diferencia entre los sexos.

Intersexos. Favorece el reverso sexual en adultos, es decir cambios de sexos bajo condiciones
adversas (de macho a hembra).

Hermafroditismo. Un mismo organismo presenta los dos sexos.

Partenogénesis. Cuando las hembras producen óvulos fértiles.

Huevo Juvenil1 Juvenil2 Juvenil3 Juvenil 4 Adulto

 Factores que influyen en la población de nematodos en el
suelo
Temperatura. Directamente relacionado a la temperatura óptima de la
planta y cuando hay división celular en raíces.
Humedad. Cantidad de agua suficiente que le permita desplazarse al
nematodo.
Estructura del suelo:. Suelos livianos (arenosos pueden albergar más
nematodos que suelos pesados, debido a los poros más grandes entre las
partículas del suelo, que le facilitan el movimiento.

pH. Directamente relacionado al óptimo de desarrollo en la planta.

 Nemátodo hembra sano
Nemátodo infectado
Por Nemaquim

Produce enzimas como quitinasas, proteasas y lipasas las

cuales causan deformaciones, destrucción de ovarios,
vacuolizaciones y pérdida de movimiento
 Estudio comparativo de la efectividad biológica de diversos
productos para el control del nematodo agallador: Meloidogyne
incognita en pepino
 Porcentaje de daños en los periodo del 2013 y 2014
Periodo 2013 Periodo 2014

Tratamientos % Inicial % Final Tratamientos % Inicial % Final

Nemaquim 61.6% 28.5% Nemaquim 22% 17%

Ditera 35.24% 49.5% Ditera 22% 47%

Vydate 60% 30.5% Vydate 17% 25%

Testigo 46.6% 30% Testigo 26% 20%

La heterogeneidad del terreno donde se estableció la prueba, hizo compleja el análisis de

datos estadísticos, para el periodo del 2014, pero es evidente que se sugiere hacer un
manejo integrado de plagas, donde el nematicida biológico controlará las poblaciones de
hembras y huevecillos, y el químico al de juveniles
EL CONTROL DE PLAGAS EN LOS
CULTIVOS
 El control de las plagas de follaje y suelo
por insectos.
Microbiales entomopatógenos más usados

Hongos Bacterias Nematodos

Paecilomyces fumosoroseus Bacillus thuringiensis Sterinernema
Beauveria bassiana Bacillus popilliae Heterorabditis
Beauveria brogniartii Bacillus sphaericus
Serratia entomophila
Verticillium dahliae
Verticillum lecani
Metarhizium anisopliae
Phlebiopsis gigantea
Aniquim Metarhizium anisopliae + Beauveria bassiana
Controla a más de 100 diferentes tipos de insectos de las especies de:

Anthonomus grandis (picudo algodonero); A. eugenii (picudo de

chile); Cotinis mutabilis (mayate negro); Scyphophorus acupunctatus
Gyllenhal (Picudo de agave).
 Ciclo de la enfermedad

En condiciones favorables, se La espora germina sobre el

producen estructuras que tegumento, rara vez es ingerida
salen del insecto y se produce vía oral.
la fructificación.

Condiciones favorables:
HR alta, temperatura cálida y
alta densidad del huésped.

Las hifas colonizan todo el hemocele del insecto.

 Control de insectos empleando bacterias
entomopatógenas
La bacteria que más éxito a tenido para el control de insectos es Bacillus
thuringiensis
• Bacteria tipo Gram positiva, habitante natural del suelo.
• Bajo condiciones adversas esporula y produce inclusiones proteínicas
cristalinas con actividad toxíca y especifica a insectos, conocidas como
Proteínas Insecticidas del Cristal (Cry y Cyt), también produce:
• Proteínas insecticidas Vip
• -exotoxina
• Proteasa
• Quitinasas
• Melaninas
• Pectinasas, amilasas, estereasas
Modo de acción de Bt
INGESTIÓN

SOLUBILIZACIÓN

ACTIVACIÓN

UNIÓN

INSERCIÓN EN LA MEMBRANA

FORMACIÓN DE POROS

HINCHAZÓN CELULAR
 Existen 70 serotipos y 92 subespecies con 100 diferentes tipos de 
endotoxinas
Las más comunes a nivel comercial son:

B. thuringiensis subsp. kurstaki (Lepidóptero)

Patotipo I

B. thuringiensis subsp. israelensis (Díptera)

Patotipo II

B. thuringiensis subsp. tenebrionis (Coleóptera)

Patotipo III
 Aspectos a considerar para el control de
plagas, empleando microorganismos
1.- Tipo de cultivo

2. Plaga a controlar
3. Condiciones ambientales

4. Tipo de microorganismos que se va a utilizar

5. Tecnología de aplicación
1. Cultivo
A. Edad
B. Características físicas
Arquitectura del follaje
Tamaño de las hojas
Contenido de cera

C. Valor económico (umbral

del daño)
 2. Plaga a controlar

A. Identificar qué es: plaga o enfermedad.

B. Ciclo de vida de la plaga o estructuras de reproducción

C. Densidad poblacional

D. Hábitos de alimentación

Si la plaga es de follaje (haz o envés), si es del suelo, si es barrenador, chupador.

Definir el objetivo de la aplicación. Sí es preventivo, de regulación o de control
 3. Condiciones ambientales
A. Temperatura
Los microbiales entomopatógenos son muy sensibles
a la radiación UV.
B. Viento
Algunos microbiales antagónicos requieren de
materia orgánica para aumentar sus poblaciones
C. Humedad relativa
De manera general son susceptibles a los plaguicidas
sintéticos
D. Lluvia

E. Radiación ultravioleta
4. Tipo de microorganismo a utilizar
Diferenciar que la aplicación de un plaguicida sintético es distinta a la de un agente microbial

Producto Químico Producto biológico

Modo de acción directo Actúan por contacto o ingestión
Presión de vapor Requieren mejor cobertura para el caso de
follaje.
Para aplicaciones a nivel de suelo considerar
características del suelo (pH, porosidad)
Las condiciones ambientales los afectan poco Las condiciones ambientales los afectan
relativamente drásticamente
5.- Tecnología de aplicación para antagonistas
5.- Tecnología de aplicación para entomopatógenos
 Resumen
La biotecnología se usa en cualquier práctica de la agricultura
Se pueden potenciar los rendimientos con 7 principios fundamentales:
1. Agricultura sustentable
2. Uso de Mo´s benéficos
3. Materiales vegetales mejorados
4. Aprovechamiento de fertilizantes
5. Análisis de microbiota
6. Uso apropiado de agua
7. Reguladores de crecimiento vegetal

Mecanismos de acción de microbiales antagonistas

Directos
Indirectos
Mecanismos de acción de microbiales entomopatógenos
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Ingestión
Gracias por su atención

Dra. Rocío Velázquez Robledo

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