Universidad politécnica de puebla
Materia: Biología
Grado: 2° cuatrimestre Grupo: BA
“Extracción de ADN de un kiwi”
Integrantes:
Diana Laura Panzo Soriano
María Alejandra Velez Sanchez
Profesora: Dra. Claudia Montalvo Paquini
INTRODUCCION:
El ácido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado como ADN, es un ácido nucleico que
contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos
vivos conocidos y algunos virus, y es responsable de su transmisión hereditaria. El papel principal
de la molécula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de información. Los segmentos de ADN
que llevan esta información genética son llamados genes, pero las otras secuencias de ADN tienen
propósitos estructurales o toman parte en la regulación del uso de esta información genética. El
ADN está constituido por dos cadenas de nucleótidos unidas entre sí formando una doble hélice.
Los nucleótidos están integrados por un azúcar (desoxirribosa), un grupo fosfato y una base
nitrogenada (adenina, guanina, timina o citosina). La unión de los nucleótidos ocurre entre el grupo
fosfato y el azúcar, mediante enlaces fosfodiéster, dando lugar al esqueleto de la molécula. Las
bases de cadenas opuestas se unen mediante puentes de hidrógeno y mantienen estable la
estructura helicoidal. (Biologia molecular, 2016)
La extracción de ADN se realiza como un paso previo para purificar el material genético o ADN
para realizar posteriormente estudios de análisis molecular (pruebas forenses, diagnóstico de
paternidad, diagnóstico de enfermedades, caracterización molecular, etc).
El ADN de las frutas o verduras que comemos lo utilizamos por ejemplo para identificar
inequívocamente la especie o la variedad de que se trata o incluso los padres del individuo. En la
industria alimentaria el ADN se utiliza para detectar posibles fraudes en el caso de que se trate de
zumos o de mezclas de carnes o pescado. La extracción de ADN se puede realizar de varios
tejidos. (Laura Patricia Alejos Velázquez, 2013)
En este caso se ha utilizado con un kiwi, sin embargo se puede repetir este mismo método para
otras frutas y verduras.
Objetivo:
El objetivo fundamental de esta práctica, es utilizar unas sencillas técnicas para poder extraer el
ADN del Kiwi.
MATERIAL
1. Un kiwi
2. Piceta
3. Sal de mesa
4. Detergente lavavajillas
5. Colador pequeño
6. Alcohol de 96 º muy frío
7. Varilla de agitación
8. 3 Tubo de ensayo con tapa de baquelita de 10 ml.
9. Gradilla
10. Batidora y un cuchillo.
11. Vaso de precipitado de 50 ml
12. Vaso de precipitado 250 ml
13. Probeta de 100 ml
14. Mortero con pistilo
15. Pipeta de 2 ml
16. Pipeta de 5 ml.
PROCEDIMIENTO:
1.- En el vaso de precipitado de 50 ml agregar 3 cucharaditas de detergente lavavajillas.
2.- Añadir una cucharada de sal.
3.- Añadir 25 mililitros de agua destilada. Es necesario utilizar la pipeta para extraer la cantidad
de agua adecuada
4.- Colocar en un baño de hielo esta disolución.
5.- Corta el kiwi a la mitad y extraer la pulpa
6.- Tritura la pulpa del kiwi (en el mortero con ayuda del pistilo) con un poco de agua en la
batidora (la mezcla de células y agua debe ser opaca), accionando 2 veces las cuchillas a
impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células.
7.- Mezcla en el vaso precipitado de 250 ml el triturado celular con la disolución inicial del vaso.
8.- Agita vigorosamente la mezcla durante al menos 5 minutos, sin formar espuma.
9.- Haz pasar el líquido obtenido por un colador.
10.- Retira 5 ml. de la mezcla a un tubo de ensayo y añade con la pipeta 5 mililitros de alcohol
enfriado a 0º C. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del tubo de
ensayo, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre la mezcla.
11.- Deja reposar durante 5 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las 2 capas.
(Mientras esperas este tiempo, puedes ir recogiendo y limpiando todos los recipientes
Empleados anteriormente).
12.- Introduce una varilla justo debajo del alcohol (la zona turbia que queda entre las 2 capas).
Remueve la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos
de mayor tamaño de ADN.
13.- Pasado un minuto, retira la varilla atravesando la capa de alcohol, con lo cual el ADN
quedará adherido a su extremo, con el aspecto de un copo de algodón mojado.
Esquemas:
Se extrae la pulpa del Con la ayuda de una
Se hace una solución de kiwi, con la ayuda de un batidora se bate para
detergente, sal y agua mortero y pistilo se obtener una mezcla
destilada homogénea.
machaca.
Se filtra la mezcla del kiwi Se agita las soluciones
por un embudo de filtración Se agrega la primera resultantes durante 5 min sin
con ayuda de papel filtro solución, al filtrado del sacar burbujas, se colocan 5
para que la solución sea kiwi. ml de esta solución en tubos
más pura. de ensaye.
Se agregan 5 ml del Con ayuda de un agitador
alcohol a 0° y dejar mover la capa de la
reposar por 5 min. primera mezcla (de abajo
hacia arriba del tubo)
Resultados:
Pudimos observar el ADN del kiwi en la parte
superior donde se encontraba el alcohol.
Se muestra en el primer tuvo solo la extracción de
la pulpa del kiwi y en el segundo observamos el
ADN en el Alcohol.
Discusión de resultados:
El procedimiento utilizado en esta actividad tiene los mismos principios básicos de métodos más
complejos de extracción de ADN. En este experimento, las paredes celulares del kiwi se rompen
por la acción mecánica de aplastamiento del tejido y luego por medio del calentamiento; el
detergente disuelve los lípidos presentes y la membrana del núcleo (de forma equivalente a cómo
actúa con la grasa de los platos sucios). Al ya no estar confinado en el núcleo, el ADN cargado
negativamente y muy soluble en agua debido a los grupos fosfato de cada nucleótido, pasa a la
disolución. Sin embargo, los iones sodio cargados positivamente que provienen del cloruro de
sodio de la mezcla extractora se unen a las cargas negativas del ADN y lo neutralizan, formando la
sal sódica. Esta neutralización de carga eléctrica permite que las moléculas de ADN se junten unas
con otras, formando un agregado que con la adición del alcohol frío hace que este se precipite y
de esta forma pudimos obtener resultados positivos al poder observar el ADN. (Catalá, 2017)
Conclusión:
Como conclusión los resultados cumplieron su objetivo al haber observado el ADN extraído por la
muestra frutal del Kiwi.
Cuestionario:
1. El ADN obtenido no se encuentra puro, ¿Qué otras sustancias podrían haberse extraído
mezcladas con el ácido desoxirribonucleico?
En el precipitado contiene millones de cadenas de ADN pegadas unas a otras, junto con
parte de las proteínas asociadas al ADN dentro del núcleo. Es por eso que el ADN
obtenido en este experimento se encuentra ligeramente contaminado. (Catalá, 2017)
2. ¿Qué finalidad tiene el exponer las Células a un detergente fuerte? realiza un dibujo de la
acción del detergente sobre las células
El detergente disuelve los lípidos presentes y la membrana del núcleo (de forma
equivalente a cómo actúa con la grasa de los platos sucios) (Catalá, 2017)
3. Describe el objetivo de cada una de las sustancias que utilizaste en la extracción de ADN
y menciona para cada caso otros ejemplos de sustancias que podrían haber utilizado
Las sustancia del detergente: Como ya se había dicho disolvía los lípidos que se
encuentran en la membrana del núcleo, esto hace que ya no este confinado en el núcleo y
el ADN cargado negativamente y muy soluble en agua debido a los grupos fosfato (PO4
3-) de cada nucleótido pasa a la disolución.
Posteriormente los iones de sodio obtenidos del cloruro de sodio de la primer sustancia
neutraliza la caga eléctrica que permite que las moléculas de ADN se precipiten.
Alcohol congelado: El DNA es una molécula polar, pero la reacción con el etanol a muy
baja temperatura hace que se vuelva apolar e insoluble en el etanol formándose un
precipitado justo entre la capa con etanol líquido y la capa con el extracto. El DNA es el
único componente de la solución que no es soluble en el etanol, y se hace visible porque
las diferentes cadenas se van aglutinando entre sí al precipitar debido a la acción de
fuerzas físicas. El alcohol es menos denso que el agua del extracto y por eso flota sobre la
capa del extracto.
4. A algunas personas les preocupa que el ADN pueda ser alterado en los laboratorios y que
los humanos cambiemos por algo que no éramos originalmente ¿puedes dar ejemplos de
algunos tipos de genes humanos que pudieran alterarse artificialmente? ¿Crees que los
científicos deberías proseguir con este tipo de investigaciones? ¿Por qué si o por qué no?
El ADN de los embriones humanos es el que más común en ser editado para evitar
enfermedades genéticas hereditarias Aunque los embriones modificados sólo pudieron
desarrollarse durante un par de días, y nunca hubo intención de implantarlos en un
útero, los experimentos son un acontecimiento puntual y significativo que marca un
momento importante en el desarrollo de este proceso en lo que podría convertirse en un
viaje inevitable hacia el nacimiento de los primeros humanos modificados genéticamente.
Nuestra opinión hacia este tipo de procesos es que tiene ciertas ventajas por hecho de
que se ha demostrado que a través de ellos pueden curarse ciertas enfermedades sin
embargo el número de embriones que se han utilizado en este proceso es muy elevado.
(Connor, 2017)
Bibliografía
Biologia molecular. (2016). ADN. Biologia molecular.
Catalá, R. M. (2017). Extracción del ADN. guía de lmaestro, 37.
Connor, S. (2017). Nuevos embriones humanos modificados genéticamente baten todos los
récords. MIT TECHNOLOGY REVIEW .
Laura Patricia Alejos Velázquez, M. d. (2013). DESCUBRE EL ADN DE LAS FRUTAS QUE COMEMOS .
CSIC digital , 3-4.
