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El documento detalla diversas pruebas bioquímicas utilizadas para identificar características metabólicas de bacterias, incluyendo la importancia de cultivos puros y condiciones de asepsia. Se explican pruebas específicas como la oxidación-fermentación, ONPG, y la utilización de citrato, así como la función de indicadores de pH en estas pruebas. Además, se abordan conceptos de serotipos, pruebas serológicas, y la resistencia a antibióticos en bacterias, enfatizando la relevancia de la automedicación y métodos de evaluación de sensibilidad bacteriana.

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El documento detalla diversas pruebas bioquímicas utilizadas para identificar características metabólicas de bacterias, incluyendo la importancia de cultivos puros y condiciones de asepsia. Se explican pruebas específicas como la oxidación-fermentación, ONPG, y la utilización de citrato, así como la función de indicadores de pH en estas pruebas. Además, se abordan conceptos de serotipos, pruebas serológicas, y la resistencia a antibióticos en bacterias, enfatizando la relevancia de la automedicación y métodos de evaluación de sensibilidad bacteriana.

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Micro tema 5 ejercicios

pág 110.
[Link] en que se basan las pruebas bioquímicas y di qué características principales deben
cumplir un cultivo al que se van a practicar este tipo de pruebas.
Las pruebas bioquímicas permiten determinar características metabólicas de la bacteria.
Para llevar a cabo pruebas bioquímicas es necesario:
• Utilizar un cultivo puro y fresco.
• Utilizar los medios de cultivo indicados para la prueba que se va a hacer.
• Como en cualquier operación que se realice en el laboratorio de microbiología: hacer todas
las pruebas en condiciones de asepsia para evitar contaminaciones que podrían falsear los
resultados.
• Aplicar métodos reconocidos y reproducibles para que los resultados se puedan considerar
válidos.

3. Di qué información aportan las siguientes pruebas sobre el metabolismo bacteriano.


a) Prueba de oxidación-fermentación: Mediante esta prueba se valora si la bacteria tiene un
metabolismo oxidativo o fermentativo.
Prueba Voges Proskauer:esta prueba se realiza para determinar la capacidad de una bacteria
de fermentar la glucosa por vía butanodiólica.
b) Prueba de la ONPG:Esta prueba permite saber si la bacteria es capaz de fermentar la
lactosa. Se valora si la bacteria sintetiza la enzima beta-galactosidasa, que hidroliza
la lactosa para formar galactosa y glucosa
d) Prueba del rojo de metilo:Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de una
bacteria de fermentar la glucosa por la vía ácido-mixta (fermentación ácido-mixta), que provoca
la formación de ácido.

4. ¿Qué función tiene el azul de bromotimol en la prueba OF?


El azul de bromotimol en la prueba OFF sirve como indicador de pH. Cambia a amarillo si el
microorganismo produce ácidos al metabolizar carbohidratos (bajando el pH) y a azul si
degrada proteínas y produce compuestos alcalinos (subiendo el pH). Esto permite distinguir si
el microorganismo realiza oxidación, fermentación o ninguna de las dos.

6¿ Porque en la prueba de fermentación de azúcares el medio se vuelve amarillo en caso de


haber fermentación?
El medio se vuelve amarillo porque la fermentación produce ácidos, bajando el pH y causando
que el indicador de pH cambie a ese color.

8. ¿Para qué prueba se usa el agar citrato de Simmons? ¿Cómo se realiza esta prueba y qué
información proporciona?
El agar citrato de Simmons se usa para la prueba de utilización de citrato, que determina si un
microorganismo puede usar citrato como única fuente de carbono.
Procedimiento
Se inocula el microorganismo en el medio y se incuba.
Interpretación
Color azul: indica uso de citrato, aumentando el pH (positivo).
Sin cambio (verde): indica que no usa citrato (negativo).

11. ¿Por qué la prueba de las descarboxilasas requiere el uso de dos indicadores? ¿Qué
detecta cada uno de ellos?
La prueba de descarboxilasas requiere dos indicadores para asegurar condiciones anaeróbicas
y diferenciar cambios de pH debido a la descarboxilación de aminoácidos.

Función de los indicadores

1. Indicador de anaerobiosis (como aceite mineral): evita la entrada de oxígeno,


favoreciendo las condiciones necesarias para la descarboxilación.
2. Indicador de pH: detecta los cambios en el pH del medio. La descarboxilación de
aminoácidos produce aminas, que son alcalinas, elevando el pH y provocando un cambio de
color (generalmente a púrpura), indicando una prueba positiva.

no corregidos
12.¿Qué permite detectar la prueba de la coagulasa? ¿Cómo se manifiesta el resultado positivo
en esta prueba?
Permite detectar las bacterias aerobias y anaerobias facultativas sintetizan catalasa, aunque
hay dos excepciones: Streptococcus spp. y Enterococcus spp.
La sangre interfiere en el resultado de esta prueba porque forma burbujas en presencia de
peróxido de hidrógeno, lo que provoca falsos positivos. Por tanto, no es recomendable usar
colonias cultivadas en medios que contengan sangre para realizar esta prueba y si se hace,
hay que prestar mucha atención para coger la colonia sin arrastrar nada de medio.

14. Cita dos pruebas de sensibilidad que se suelen aplicar a muestras de hemocultivo en las
que se observan cocos grampositivos.
Optaquina y bacitracina.

15. Di si las siguientes afirmaciones son verdaderas o falsas y explica tus respuestas:

a) Una bacteria anaerobia facultativa puede dar positivo a catalasa.


Verdadero, pueden crecer tanto con oxigeno como sin [Link] encimas que es la catalasa.

b) Las bacterias anaerobias estrictas sintetizan citocromooxidasa.


[Link] bacterias anaerobias estrictas no utilizan oxígeno como aceptor final de electrones
en su cadena de transporte de electrones, por lo que no sintetizan citocromooxidasa, una
enzima característica de bacterias aerobias u organismos que usan respiración aeróbica

c) La prueba OFF permite saber si la bacteria es aerobia o anaerobia.


[Link] prueba OF (Oxidación-Fermentación) determina si una bacteria metaboliza
carbohidratos por oxidación (aerobia) o fermentación (anaerobia facultativa). Sin embargo, no
identifica si una bacteria es estrictamente aerobia o anaerobia

d) La prueba de la ONPG permite saber si la bacteria es capaz de fermentar la glucosa.


[Link] prueba de ONPG (ortho-nitrofenil-β-galactósido) evalúa si la bacteria produce
β-galactosidasa, una enzima que hidroliza lactosa en galactosa y glucosa. No está relacionada
con la fermentación de glucosa.

e) Para probar si la bacteria es capaz de fermentar varios carbohidratos se puede usar la


prueba de la ONPG.
[Link] prueba de ONPG se utiliza exclusivamente para evaluar la capacidad de hidrolizar
lactosa, no para analizar la fermentación de diversos carbohidratos.

f) La prueba del agar hierro de Kligler es úna prueba combinada que se usa para la
diferenciación de enterobacterias. Verdadero.
g) Para identificar el tipo de respiración anaerobia que tienen las bacterias se puede usar la
prueba de reducción de [Link]

pág 115.

17. Di qué es un serotipo o [Link] celular permite identificar esa bacteria.


Un serotipo o serovar es un microorganismo infeccioso que se puede clasificar a partir de los
antígenos que presenta en su superficie celular.

18. Explica brevemente en qué consisten las pruebas serológicas aplicadas a la identificación
de microorganismos.
Las pruebas serológicas consisten en la detección de antígenos específicos de
microorganismos o de anticuerpos producidos por el huésped en respuesta a una infección.
Estas pruebas emplean la interacción antígeno-anticuerpo y se utilizan para identificar
microorganismos como bacterias, virus o parásitos. Ejemplos incluyen aglutinación, ELISA, y
pruebas de inmunofluorescencia.

19. Se produce una infección por una bacteria que no había sido identificada anteriormente.
¿Se podrá hacer un diagnóstico mediante métodos genotípicos? Explica tu respuesta.
Sí, es posible. Los métodos genotípicos, como la PCR o la secuenciación del ADN, pueden
identificar microorganismos desconocidos al analizar su material genético, incluso si no se
dispone de cultivos previos o conocimientos sobre la bacteria. Esto es especialmente útil para
microorganismos nuevos o no cultivables.

Pág 122.
21. ¿Alguno de los mecanismos de acción de los antibióticos es ineficaz frente a los
micoplasmas? ¿Por qué?
Los antibióticos que actúan sobre la pared celular (como los betalactámicos) son ineficaces
frente a los micoplasmas porque estas bacterias carecen de pared celular, teniendo solo una
membrana plasmática.

22. Muchas bacterias son capaces de sintetizar betalactamasas. ¿Sobre qué antibióticos
actúa esta enzima? ¿Qué mecanismo de acción tienen estos antibióticos?
Las betalactamasas actúan sobre los antibióticos betalactámicos (penicilinas, cefalosporinas,
carbapenémicos). Estos antibióticos inhiben la síntesis de la pared celular bacteriana al
bloquear las transpeptidasas que forman los enlaces cruzados del peptidoglucano.

23. Las tres bacterias que la OMS incluye dentro del grupo de prioridad crítica en cuanto
a su resistencia a antibióticos son gramnegativas. ¿Las bacterias gramnegativas tienen
alguna característica que haga que, de forma general, sean menos sensibles a la
actuación de ciertos antibióticos?
Las bacterias gramnegativas tienen una membrana externa que actúa como barrera física,
dificultando la entrada de ciertos antibióticos. Además, poseen bombas de eflujo y enzimas
como betalactamasas, que las hacen menos sensibles.

24. Si una persona se automedica con un antiinflamatorio o con un somnífero puede


sufrir, de forma individual, efectos negativos. Si se automedica con un antibiótico está
agravando un problema colectivo, Explica estas afirmaciones.
La automedicación con antibióticos fomenta la resistencia bacteriana, un problema global,
porque el uso inadecuado selecciona cepas resistentes, que pueden propagarse a otras
personas y reducir la eficacia de los tratamientos.

25. Explica en qué consiste el método de difusión en disco y di cómo se expresan los
resultados.
Es una prueba para evaluar la sensibilidad bacteriana colocando discos impregnados con
antibióticos sobre un cultivo. Los resultados se expresan midiendo el diámetro de inhibición
alrededor del disco, clasificando la bacteria como sensible, intermedia o resistente.

26. Di qué es la concentración mínima inhibidora y cita los métodos por los cuales se
puede obtener este parámetro.

La CMI es la menor concentración de un antibiótico que inhibe el crecimiento bacteriano. Se


obtiene mediante métodos como dilución en caldo, dilución en agar o sistemas automatizados.

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