Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE BIOANALISIS
REGION VERACRUZ

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS
PARA EL LABORATORIO DE LA E. E.
MICOLOGIA CLINICA
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

INDICE

MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICOLOGÍA

CLÍNICA .......................................................................................................... 3
Práctica 1 ........................................................................................................ 4
Medidas de seguridad en el laboratorio de Micología Clínica ........................ 4
Práctica 2 ........................................................................................................ 5
Identificación de RPBI generados en Micología Clínica ................................. 5
Práctica 3 ........................................................................................................ 6
Observación macroscopica y microscopica de hongos en alimentos ............ 6
Práctica 4 ........................................................ ¡Error! Marcador no definido.
Observación macroscopica y microscopica de hongos en alimentos. ..¡Error!
Marcador no definido.
Práctica 5 ...................................................................................................... 11
Raspado de uña de la mano o pie ................................................................ 11
Práctica 6 ...................................................................................................... 16
Raspado de cuero cabelludo ........................................................................ 16
PRÁCTICA 7 ................................................................................................. 22
Raspado de piel ............................................................................................ 22
PRÁCTICA 8 ................................................................................................. 27
Candiasis faringea ........................................................................................ 27
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MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE

MICOLOGÍA CLÍNICA

En el laboratorio de Micología se manipulan agentes infecciosos dañinos a

la salud por lo que se deben de tomar las siguientes medidas de seguridad

• Tiempo de tolerancia para llegar al laboratorio: 10 minutos

• Usar bata blanca de algodón, limpia y de manga larga. Debe usarse
abotonada.
• Las mochilas serán colocadas en los lockers destinados para ello.
• En la mesa de trabajo tener solamente los elementos para trabajar (cerillos,
maskin tape, guantes, cubrebocas, portaobjetos, cubreobjetos, KOH al 20%
etc.)
• En el caso de accidente informar inmediatamente al profesor y técnico
académico responsable del laboratorio.
• El desecho de RPBI deberá apegarse a la NOM 087-ECOL-SSA1-2002.
• El estudiante debe conocer la metodología de trabajo.
• El estudiante debe conocer el manejo del equipo del laboratorio. (Autoclave,
microscopios, mecheros etc.)
• Conocer las medidas a tomar en caso de emergencia tales como cerrar las
llaves de paso del gas, uso de extinguidores y detecciones de fugas de gas.
• Las superficies de trabajo se limpiarán y desinfectarán antes y después de
cada práctica de laboratorio.
• Las cajas Petri una vez inoculada la muestra deben ser selladas con papel
parafilm o cinta maskintape.
• Uso de guantes, gafas, cubrebocas.
• Nunca se saldrá del laboratorio con los guantes puestos ni con bata.
• Nunca se manipulará el teléfono, maniguetas de las puertas o plumas con los
guantes puestos.
• Antes de retirarse del laboratorio deben lavarse las manos
• El cabello largo de las estudiantes debe llevarlo recogido.
• Prohibido en el área de trabajo del laboratorio: comer, beber, fumar y aplicarse
cosméticos.
• El estudiante debe retirar las preparaciones del microscopio y limpiar los lentes
del microscopio al término de la práctica.
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Práctica 1
Medidas de seguridad en el laboratorio de Micología Clínica

1.-Lectura de medidas de seguridad en el laboratorio de Micología Clínica

2.- Nombramiento de comisiones

a.) Para cerrar la llave de paso del gas en caso de contingencia (Titular y suplente)
en cada mesa de trabajo.

Mesa Titular Suplente

1
2
3

b.) Para que en caso de olor a gas hacer la prueba del jabón en las llaves de gas
de la mesa de trabajo.

Mesa Titular Suplente

1 Todos deben saber
hacer la prueba de gas.
2
3

c.) Para que en caso de contingencia se haga uso de los extintores de fuego.

Mesa Titular Suplente

1
2
3
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Práctica 2

Identificación de RPBI generados en Micología Clínica

Nombre del Alumno:
Fecha:

Identifica los RPBI que se generan en la E.E. de Micología Clínica, así

mismo los contendores donde se desechan.

RPBI Contenedor
Portaobjetos
Cubreobjetos
Cajas Petri con cultivos
Guantes
Hisopos
Cubrebocas
Gasas
Aplicadores
Papel estrasa
Parafilm

Lectura del siguiente material

• NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002 Protección Ambiental - Salud Ambiental
- Residuos Peligrosos Biológico-Infecciosos - Clasificación y
Especificaciones de Manejo.
• GUÍA DE CUMPLIMIENTO DE LA NORMA OFICIAL MEXICANA.

Nota: Cuidar su ortografía.

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Práctica 3

Observación macroscopica y microscopica de hongos en

alimentos
1.- INTRODUCCIÓN

Generalidades de los hongos presentes en alimentos tales como pan,

tortilla,vegetales,quesos, etc.

Indicaciones: Una cuartilla de información parafraseada, de 4 autores ya

sea de libros, revistas electrónicas etc (no más de 5 años) indicando con
superíndices los autores y la bibliografía irá al final de la introducción con la
opción insertar nota al pie. (1 punto por cada autor)

2.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN

El alumno conocerá las características macroscópicas de los hongos
presentes en alimentos, indicando el color, olor, etc. así como las
características microscópicas identificando estructuras como son: levaduras,
hifas, micelios, utilizando diferentes soluciones.

3.- LISTA DE REQUERIMIENTOS

3.1 Reactivos

NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACIÓN

Hidróxido de potasio 20-30 %
Azul de lactofenol
Reactivos para tinción de Gram

3.2 EQUIPOS DE LABORATORIO

• Microscopio

3.3 MATERIALES DE LABORATORIOS

DESCRIPCIÓN
Portaobjetos
Cubreobjetos
Cubrebocas
Asa de platino
Recipiente para desecho de punzocortantes
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Papel absorbente
Papel Estrasa
Papel parafilm

4.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

Técnica de Observación macroscópica y microscópica de hongos en alimentos.

Sacar el alimento de la bolsa o contenedor y observar las características

macroscópicas del hongo como es (olor, color, consistencia).

4.1 Se colocan 2 portaobjetos sobre la mesa y se rotulan con las siguientes

iniciales K (Hidróxido de potasio), AL (azul de lactofenol)
4.2 En el portaobjetos marcado como K se coloca una gota de KOH y con un
asa de platino se toma una porción pequeña del hongo del alimento, se
mezcla suavemente y se coloca un portaobjetos y se observa al
microscopio con el objetivo 40 x.
4.3 En el portaobjetos marcado como AL, se coloca una gota de Azul de
Lactofenol y con el asa de platino se toma una porción pequeña del hongo
del alimento, se mezcla suavemente y se le coloca un portaobjetos y se
observa al microscopio con el objetivo 40 x.

5.-MUESTRA

5.1 Alimento con presencia de hongos, el cuál debe transportarser con cuidado al
laboratorio ya sea en un recipiente cerrado o en una bolsa de plástico

6.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA

6.1.-El profesor supervisará que el manejo de la muestras a analizar sea el
adecuado para evitar contaminación personal.
6.2.-El profesor supervisa la realización de las preparaciones con KOH y azul de
lactofenol.
6.3.- El profesor supervisa cada una de las preparaciones del estudiante para
garantizar que están observando las estructuras correctas.

7.-CONTROL DE CALIDAD
7.1. Verificar que los reactivos a utilizar no presenten precipitado o contaminación.
7.2 Verificar que el alimento no se encuentre en estado de putrefacción.
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8.- REPORTE DE RESULTADOS

Fecha:

Muestra de :

Observación Macroscópica del alimento con hongo (Imagen) (1 punto)

DESCRIPCIÓN MACROSCÓPICA (2 puntos)

Aspecto Consistencia
Color y olor
Levaduriforme Micelial Algodonosas Duras Mucoide

Observación: Microscópica del alimento (Imagen) (1 punto)

DESCRIPCIÓN MICROSCÓPICA (2 puntos)

Otros Hifas Tipo de conidios
Septadas Sin septos Macroconidios Microconidios
Tabicadas Cenocítico

Práctica 4

Observación macroscopica y microscopica de hongos en

alimentos
1.- INTRODUCCIÓN

Generalidades de los hongos presentes en alimentos tales como pan,

tortilla,vegetales,quesos, etc.

Indicaciones: Una cuartilla de información parafraseada, de 4 autores ya

sea de libros, revistas electrónicas etc (no más de 5 años) indicando con
superíndices los autores y la bibliografía irá al final de la introducción con la
opción insertar nota al pie. (1 punto por cada autor)

2.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN

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El alumno conocerá las características macroscópicas de los hongos

presentes en alimentos, indicando el color, olor, etc. así como las
características microscópicas identificando estructuras como son: levaduras,
hifas, micelios, utilizando diferentes soluciones.

3.- LISTA DE REQUERIMIENTOS

3.1 Reactivos

NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACIÓN

Hidróxido de potasio 20-30 %
Azul de lactofenol
Reactivos para tinción de Gram

3.2 EQUIPOS DE LABORATORIO

• Microscopio

3.3 MATERIALES DE LABORATORIOS

DESCRIPCIÓN
Portaobjetos
Cubreobjetos
Cubrebocas
Asa de platino
Recipiente para desecho de punzocortantes
Papel absorbente
Papel Estrasa
Papel parafilm

4.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

Técnica de Observación macroscópica y microscópica de hongos en alimentos.

Sacar el alimento de la bolsa o contenedor y observar las características

macroscópicas del hongo como es (olor, color, consistencia).

4.4 Se colocan 2 portaobjetos sobre la mesa y se rotulan con las siguientes

iniciales K (Hidróxido de potasio), AL (azul de lactofenol)
4.5 En el portaobjetos marcado como K se coloca una gota de KOH y con un
asa de platino se toma una porción pequeña del hongo del alimento, se
mezcla suavemente y se coloca un portaobjetos y se observa al
microscopio con el objetivo 40 x.
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4.6 En el portaobjetos marcado como AL, se coloca una gota de Azul de

Lactofenol y con el asa de platino se toma una porción pequeña del hongo
del alimento, se mezcla suavemente y se le coloca un portaobjetos y se
observa al microscopio con el objetivo 40 x.

5.-MUESTRA

5.1 Alimento con presencia de hongos, el cuál debe transportarser con cuidado al
laboratorio ya sea en un recipiente cerrado o en una bolsa de plástico

6.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA

6.1.-El profesor supervisará que el manejo de la muestras a analizar sea el
adecuado para evitar contaminación personal.
6.2.-El profesor supervisa la realización de las preparaciones con KOH y azul de
lactofenol.
6.3.- El profesor supervisa cada una de las preparaciones del estudiante para
garantizar que están observando las estructuras correctas.

7.-CONTROL DE CALIDAD
7.1. Verificar que los reactivos a utilizar no presenten precipitado o contaminación.
7.2 Verificar que el alimento no se encuentre en estado de putrefacción.

8.- REPORTE DE RESULTADOS

Fecha:

Muestra de :

Observación Macroscópica del alimento con hongo (Imagen) (1 punto)

DESCRIPCIÓN MACROSCÓPICA (2 puntos)

Aspecto Consistencia
Color y olor
Levaduriforme Micelial Algodonosas Duras Mucoide

Observación: Microscópica del alimento (Imagen) (1 punto)

DESCRIPCIÓN MICROSCÓPICA (2 puntos)

Otros Hifas Tipo de conidios
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Septadas Sin septos Macroconidios Microconidios

Tabicadas Cenocítico

Práctica 5

Raspado de uña de la mano o pie

1.- INTRODUCCIÓN

Información relevante sobre las onicomicosis en los humanos

Indicaciones: Una cuartilla de información parafraseada, de 2 autores ya

sea de libros, revistas electrónicas etc. (no más de 5 años) indicando con
superíndices los autores y la bibliografía irá al final con la opción insertar
nota al pie.(2 puntos)

2.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN.

El raspado de uñas nos permitirá observar formas fúngicas de manera

microscópica y el cultivo nos permitirá conocer la taxonomía del hongo.

Metodología para la identificación de hongos

1.- El estudiante deberá tomar la muestra de acuerdo al lugar y tipo de

lesión que presente el paciente. Ejemplo

Micosis Muestra de:

Piel del cuerpo Escamas
(Pitiriasis versicolor)
Piel de la cara Escamas
Piel de las orejas Exudado
Cejas Escamas
Cabeza
(Dermatitis seborreica)
Foliculitis en piel Exudado (muestra intrafolicular)
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Uñas Detritos subungueal

Fragmento de uña
Raspado de lámina ungueal.
Otomicosis Escama, detrito,secreción.

2.-El estudiante deberá tomar la imagen de la parte lesionada del paciente

de cerca y lejos a manera que se visualice el sitio donde se tomó la
muestra.
3.- El estudiante deberá realizar una observación microscópica directa o en
fresco de la muestra obtenida.
4.- El estudiante deberá proceder a sembrar la muestra obtenida en los
medios de cultivo, así mismo deberá incubarlos a la temperatura y tiempo
adecuados.
5. El estudiante deberá realizar la observación macroscópica de los cultivos
y como evidencia deberá tener una imagen, así mismo describirá el tipo de
colonias (consistencia y tipo).
6.-El estudiante deberá realizar la observación microscópica de los cultivos
indicando el tipo de conidios (macroconidios, micoroconidios) y tipos de
hifas (septadas,no septadas).
Nota: en caso de haber dos o más colonias hay que tomar de las distintas
colonias- y hacer su descripción respectiva.
7.- El estudiante realizará pruebas selectivas en caso de ser necesario.
8.- El estudiante mediante investigación bibliográfica determinará cuáles son
los agentes micóticos causales más frecuentes de las micosis del sitio
donde se tomó la muestra en base a Información estadística, de 2 autores
ya sea de libros, revistas electrónicas etc. (no más de 5 años) indicando con
superíndices los autores y la bibliografía se colocará con la opción insertar
nota al pie. (2 puntos).
9.- El estudiante realizará la Identificación taxonómica (Género y especie)
del agente micológico en base a lo anterior y apoyándose en el banco de
imágenes proporcionado por el profesor, así mismo en el caso de hongos
filamentosos podrá hacer uso de un software en línea llamado Mycelium
Touch. el cuál es una herramienta científica cuya función está diseñada
para la caracterización macroscópica y microscópica de hongos
filamentosos de tal forma que relaciona las características del hongo en
estudio con los que se encuentran en su base de datos para identificarlos.
por lo anterior el estudiante debe tomar fotografías tanto micro como
macroscópicas con alta resolución de esta manera el estudiante utiliza la
tecnología y la innovación en este campo disciplinar.
[Link]
HHQSU5OghuVZD1MulMTdPaa_hcSzvzpfg8
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3.- LISTA DE REQUERIMIENTOS

3.1 Reactivos

NOMBRE DEL REACTIVO CONC.

Hidroxido de potasio 20 %
NaCl 0.9 %
Sol. de azul de metileno 1%
Sol. Azul de lactofenol
Agar Dextrosa Sabouraud
Agar Dextrosa y papa
Chromoagar
Agua destilada

3.2 EQUIPOS DE LABORATORIO

Estufa de cultivo
Autoclave
Balanza analítica
Microscopio

3.3 MATERIALES DE LABORATORIOS

DESCRIPCIÓN
Caja de petri estéril
Portaobjetos estéril
Torunda impregnada de alcohol etílico al 70 %
Portaobjetos
Cubreobjetos
Guantes desechables
Cubrebocas
Maskintape
Papel parafilm

4.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

Técnica de raspado de uña.

• Pedir al paciente sentarse cómodamente e indicarle que se quite los

zapatos, observar su pie y elegir la uña a la que le hará el raspado.
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• Limpiar la uña con una gasa estéril impregnada con alcohol al 70%, la
limpieza se hará en un solo sentido, y esperar que se seque.
• Colocar el pie en un banco de tal forma que el paciente este cómodo.
• Colocar la caja Petri estéril destapada a un lado de la uña y proceder
a hacer el raspado con el portaobjetos estéril o algún dispositivo del
equipo de pedicure estéril.
• Una vez que se tenga material suficiente se retira la caja de petri y se
tapa.
Una vez obtenida la muestra se procede a lo siguiente:
• Se coloca una gota de solución salina o una gota de hidróxido de
potasio al 20% o una gota de azul de lactofenol, en un portaobjetos y
humedeciendo la punta de un aplicador y con esa punta se toma una
porción de la muestra de la caja Petri, se mezcla suavemente y se le
coloca un portaobjetos y se observa al microscopio con el objetivo 40
x.
El resto de la muestra se coloca en una placa de agar Sabouraud o
Agar dextrosa y Papa, y se incuba a temperatura y tiempo adecuado
El medio de cultivo se prepara de acuerdo a las especificaciones del
fabricante.
• Se observa la morfología macroscópica y microscópica de las
colonias de hongos que desarrollaron los medios de cultivo

5.-MUESTREO Y MUESTRA

5.1. Se selecciona la uña del paciente en donde se observe características

propias de onicomicosis.

6.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA

6.1.-El profesor supervisa que la toma de la muestra sea la adecuada.

6.2.-El profesor supervisa la realización de las preparaciones con las
diferentes soluciones.
6.3.- El profesor supervisa cada una de las preparaciones para garantizar
que están observando las estructuras correctas.

7.-CONTROL DE CALIDAD

7.1. Verificar que los reactivos a utilizar en la tinción no estén precipitados o

contaminados.
7.2 Contar con un control negativo y positivo para los medios de cultivo utilizados.
7.3 Para control negativo se coloca una placa de agar sin inocular y se incuba
junto con los demás cultivos. (No debe haber desarrollo colonial)
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7.4 Para control positivo se deja una placa de Sabouraud abierta durante todo el
proceso al termino de este se cierra y se incuba junto con las demás placas.

8.- REPORTE DE RESULTADO

El reporte debe de tener las siguientes características

1.- Foto del paciente del lugar donde se tomó la muestra (parte lesionada)
(1/2punto)
2.- Descripción del lugar donde se tomó la muestra (Ejemplo: uña del dedo gordo
del pie izquierdo el cuál presenta coloración negra y uña gruesa etc.) (1/2 punto)
3.- Cuestionario aplicado al paciente (1 punto)
Fecha:
Nombre del paciente:
Género:
Edad:
Ocupación:
Muestra de:
Lugar de la muestra:
¿Presenta picazón?
Tiempo de presentar este problema:
¿Ha llevado tratamiento o si está llevando tratamiento?
¿El tratamiento le fue recetado por algún medico?
¿Se está aplicando algún remedio?
¿Tiene algún familiar con un padecimiento igual o similar?
¿Es Diabético/a ?
¿Está llevando algún tratamiento con quimio o radioterapia?
¿Está embarazada?
¿Es hipertenso/a?

Otra información importante:

4.- Imagen (Foto) macroscópica de los cultivos (anverso-reverso) (1/2 punto)
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5.-Descripción macroscópica que incluya los siguientes datos (1/2 punto)

DESCRIPCIÓN MACROSCÓPICA
Color Aspecto Consistencia
Frente Reverso Levaduriforme Micelial Algodonosas Duras Mucoide

6.- Imagen (Foto) microscópica de los cultivos (1/2 punto)

5.-Descripción microscópica que incluya los siguientes datos (1/2 punto)

En caso de haber dos o más colonias hay que tomar de las distintas colonias. En
caso de que la imagen no se vea clara hay que dibujarla a mano y anexar la
imagen.

DESCRIPCIÓN MICROSCÓPICA
Hifas Conidios
Septadas Sin septos Macroconidios Microconidios
Tabicado Cenocítico

8.- Diagnóstico (Identificación taxonómica del hongo) Apoyarse en el banco de

imágenes proporcionado por tu profesor o en el caso de hongos filamentosos
utilizar el software Mycelium touch: (2 puntos)

IMPORTANTE: COLOCAR DEBAJO DE CADA NUMERO LO REQUERIDO

Práctica 6

Raspado de cuero cabelludo

1.- INTRODUCCIÓN

Información relevante sobre las tiñas de la cabeza:

Indicaciones: Una cuartilla de información parafraseada, de 2 autores ya sea de

libros, revistas electrónicas etc. (no más de 5 años) indicando con superíndices los
autores y la bibliografía irá al final con la opción insertar nota al pie.(2 puntos)

2.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN.

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El raspado de cuero cabelludo nos permitirá observar formas fúngicas de manera

microscópica y el cultivo nos permitirá conocer la taxonomía del hongo.

1.- El estudiante deberá tomar la muestra de acuerdo lugar y tipo de lesión

que presente el paciente

Micosis Muestra de:

Piel del cuerpo Escamas
(Pitiriasis versicolor)
Piel de la cara Escamas
Piel de las orejas Exudado
Cejas
Cabeza
(Dermatitis seborreica)
Foliculitis en piel Exudado (muestra intrafolicular)

Uñas Detritos subungueal

Onicomicosis Fragmento de uña
Raspado de lámina ungueal.
Otomicosis Escama, detrito,secreción.

2.-El estudiante deberá tomar la imagen de la parte lesionada del paciente

de cerca y lejos a manera que se visualice el sitio donde se tomó la
muestra.
3.- El estudiante deberá realizar una observación microscópica directa o en
fresco de la muestra obtenida.
4.- El estudiante deberá proceder a sembrar la muestra obtenida en los
medios de cultivo, así mismo deberá incubarlos a la temperatura y tiempo
adecuados.

5. El estudiante deberá realizar la observación macroscópica de los cultivos

(anverso-reverso) y como evidencia deberá tener una imagen, así mismo
describirá el tipo de colonias (colonias, consistencia y tipo).

6.-El estudiante deberá realizar la observación microscópica de los cultivos

indicando el tipo de conidios (macroconidios, micoroconidios) y tipos de
hifas (septadas,no septadas).
Nota: en caso de haber dos o más colonias hay que tomar de las distintas
colonias- y hacer su descripción respectiva.

7.- El estudiante realizará pruebas selectivas en caso de ser necesario.

Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

8.- El estudiante mediante investigación bibliográfica determinará cuáles son

los agentes micóticos causales más frecuentes de las micosis del sitio
donde se tomó la muestra en base a Información estadística, de 2 autores
ya sea de libros,revistas electrónicas etc (no más de 5 años) indicando con
superíndices los autores y la bibliografía se colocará con la opción insertar
nota al pie. (2 puntos).

9.- El estudiante realizará la Identificación taxonómica (Género y especie)

del agente micológico en base a lo anterior y apoyándose en el banco de
imágenes proporcionado por el profesor.

3.- LISTA DE REQUERIMIENTOS

3.1 Reactivos

NOMBRE DEL REACTIVO CONC.

Hidroxido de potasio 20 %
NaCl 0.9 %
Sol. de azul de metileno 1%
Agar Dextrosa Sabouraud
Agar destroxa y Papa
Chromoagar
Agua destilada

3.2 EQUIPOS DE LABORATORIO

Estufa de cultivo
Autoclave
Balanza granataria
Microscopio

3.3 MATERIALES DE LABORATORIOS

DESCRIPCIÓN
Caja de petri estéril
Portaobjetos estéril
Torunda impregnada de alcohol etílico al 70 %
Portaobjetos
Cubreobjetos
Guantes desechables
Cubrebocas
Maskintape
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Papel parafilm

4.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

Técnica de raspado de la cabeza
4.1 Pedir al paciente sentarse cómodamente y que incline la cabeza para
observar zonas con resequedad o alguna otra lesión.
4.2 Una vez seleccionada la zona, limpiar con gasa impregnada con alcohol al
70 %, la limpieza se hará en un solo sentido, y espera que se seque.
4.3 Una vez seca procede a realizar el raspado en caso de que la lesión sea
de tipo seco, sin embargo si es húmeda tomar la muestra con un hisópo
estéril.
4.4 Proceder a colocar la caja petri estéril destapada a un lado de la zona
elegida y realizar el raspado con el instrumento adecuado para ello,
recolectando en la caja el producto.
4.5 En el caso de que haya que obtener cabellos, con una pinza de ceja
previamente desinfectada se arrancan 3 o 4 y se colocan en la caja petri.
En el caso de que la lesión sea húmeda tomar el exudado con un hisópo
estéril y sembrarlo inmediantamente el la caja de cultivo.

Una vez obtenida cada una de las muestras se procede a lo siguiente:

4.6 Se coloca una gota de solución salina en un portaobjetos y se humedece la

punta de un aplicador y con esa punta se toma una porción de la muestra
de la caja petri, se mezcla suavemente y se le coloca un portaobjetos y se
observa con el objetivo 40 x.
4.7 Se coloca una gota de hidróxido de potasio en un portaobjetos y se
humedece la punta de un aplicador y con esa punta se toma una porción de
la muestra de la caja petri, se mezcla suavemente y se le coloca un
portaobjetos y se observa con el objetivo 40 x.
4.8 Se coloca una porción del cabello en solución salina y se observa en 40 X.
4.9 Se coloca un cabello en solución KOH y se observa en 40 X.
4.10 El resto de la muestra se coloca en una placa de agar Sabouraud o
Agar dextrosa y Papa, y se incuba a temperatura y tiempo adecuado . El
medio de cultivo se prepara de acuerdo a las especificaciones del
fabricante.
4.11 Al término de la incubación se observa la morfología macroscópica y
microscópica de las colonias de hongos que desarrollaron en la placa de
cultivo.

5.-MUESTREO Y MUESTRA

5.1. Se selecciona una zona del cuero cabelludo del paciente en donde se
observe características propias de una micosis.

6.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA

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El profesor supervisa que la toma de la muestra sea la adecuada.

6.2.-El profesor supervisa la realización de las preparaciones con las diferentes
soluciones.
6.3.- El profesor supervisa cada una de las preparaciones para garantizar que
están observando las estructuras correctas.

7.-CONTROL DE CALIDAD
7.1. Verificar que los reactivos a utilizar en la tinción no presenten precipitado o
contaminación.
7.2 Contar con un control negativo y positivo para los medios de cultivo utilizados.
7.3 Para control negativo se coloca una placa de agar sin inocular y se incuba
junto con los demás cultivos. (No debe haber desarrollo colonial)
7.4 Para control positivo se deja una placa de Sabouraud abierta durante todo el
proceso al termino de este se cierra y se incuba junto con las demás placas.

8.- REPORTE DE RESULTADO

El reporte debe de tener las siguientes características

1.- Foto del paciente del lugar donde se tomó la muestra (parte lesionada) (1/2
punto)
2.- Descripción del lugar donde se tomó la muestra (Ejemplo: uña del dedo gordo
del pie izquierdo el cuál presenta coloración negra y uña gruesa etc) (1/2 punto)
3.- Cuestionario aplicado al paciente (1 punto)

Fecha:
Nombre del paciente:
Genéro:
Edad:
Ocupación:
Muestra de:
Lugar de la muestra:
Presenta picazón?
Tiempo de presentar este problema:
Ha llevado tratamiento o si está llevando tratamiento?
El tratamiento le fue recetado por algún medico?
Se está aplicando algún remedio?
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Tiene algún familiar con un padecimiento igual o similar?

Es Diabético/a ?
¿Está llevando algún tratamiento con quimio o radioterapia?
¿Está embarazada?
¿Es hipertenso/a?
4.- Imagen (Foto) macroscópica de los cultivos (frente-reverso) (1/2 punto)
5.-Descripción macroscópica que incluya los siguientes datos (1/2 punto)

DESCRIPCIÓN MACROSCÓPICA
Muestra Color Aspecto Consistencia
de:
Frente Reverso Levaduriforme Micelial Algodonosas Duras Mucoide

6.- Imagen (Foto) microscópica de los cultivos (1/2 punto)

5.-Descripción microscópica que incluya los siguientes datos (1/2 punto)
En caso de haber dos o más colonias hay que tomar de las distintas colonias. En
caso de que la imagen no se vea clara hay que dibujarla a mano y anexar la
imagen.
DESCRIPCIÓN MICROSCÓPICA
Muestra Hifas Conidios
de:
Septadas Sin septos Macroconidios Microconidios
Tabicado Cenocítico

8.- Diagnóstico (Identificación taxonómica del hongos) Apoyarse en el banco de

imágenes proporcionado por tu profesor o en el caso de hongos filamentosos
utilizar para su identificación el software en línea Mycelium Tocuh. (2 puntos)

IMPORTANTE: COLOCAR DEBAJO DE CADA NUMERO LO REQUERIDO

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PRÁCTICA 7

Raspado de piel

1.- INTRODUCCIÓN

Información relevante sobre las micosis de la piel:

Indicaciones: Una cuartilla de información parafraseada, de 2 autores ya

sea de libros,revistas electrónicas etc (no más de 5 años) indicando con
superíndices los autores y la bibliografía irá al final con la opción insertar
nota al pie.(2 puntos)

2.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN.

El raspado de piel nos permitirá observar formas fúngicas de manera microscópica

y el cultivo nos permitirá conocer la taxonomía del hongo.

Metodología para la identificación de hongos

1.- El estudiante deberá tomar la muestra de acuerdo lugar y tipo de lesión
que presente el paciente

Micosis Muestra de:

Piel del cuerpo Escamas
(Pitiriasis versicolor)
Piel de la cara Escamas
Piel de las orejas Exudado
Cejas
Cabeza
(Dermatitis seborreica)
Foliculitis en piel Exudado (muestra intrafolicular)

Uñas Detritos subungueal

Onicomicosis Fragmento de uña
Raspado de lámina ungueal.
Otomicosis Escama, detrito,secreción.

2.-El estudiante deberá tomar la imagen de la parte lesionada del paciente

de cerca y lejos a manera que se visualice el sitio donde se tomó la
muestra.
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

3.- El estudiante deberá realizar una observación microscópica directa o en

fresco de la muestra obtenida.
4.- El estudiante deberá proceder a sembrar la muestra obtenida en los
medios de cultivo, así mismo deberá incubarlos a la temperatura y tiempo
adecuados.

5. El estudiante deberá realizar la observación macroscópica de los cultivos

(anverso-reverso) y como evidencia deberá tener una imagen, así mismo
describirá el tipo de colonias (colonias, consistencia y tipo).

6.-El estudiante deberá realizar la observación microscópica de los cultivos

indicando el tipo de conidios (macroconidios, micoroconidios) y tipos de
hifas (septadas,no septadas).
Nota: en caso de haber dos o más colonias hay que tomar de las distintas
colonias- y hacer su descripción respectiva.

7.- El estudiante realizará pruebas selectivas en caso de ser necesario.

8.- El estudiante mediante investigación bibliográfica determinará cuáles son

los agentes micóticos causales más frecuentes de las micosis del sitio
donde se tomó la muestra en base a Información estadística, de 2 autores
ya sea de libros,revistas electrónicas etc (no más de 5 años) indicando con
superíndices los autores y la bibliografía se colocará con la opción insertar
nota al pie. (2 puntos).

9.- El estudiante realizará la Identificación taxonómica (Género y especie)

del agente micológico en base a lo anterior y apoyándose en el banco de
imágenes proporcionado por el profesor.

3.- LISTA DE REQUERIMIENTOS

3.1 Reactivos

NOMBRE DEL REACTIVO CONC.

Hidroxido de potasio 20 %
NaCl 0.9 %
Sol. de azul de metileno 1%
Agar Dextrosa Sabouraud
Agar Destrosa y Papa
Chromoagar
Agua destilada
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

3.2 Equipos de Laboratorio

Estufa de cultivo
Autoclave
Balanza granataria
Microscopio

3.3 Materiales de laboratorios

DESCRIPCIÓN
Caja de petri estéril
Portaobjetos estéril
Gasa estéril
Alcohol etílico al 70 %
Portaobjetos
Cubreobjetos
Guantes desechables
Cubrebocas
Maskintape
Papel parafilm

4.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

Técnica de raspado de piel.

4.1 Tomar la muestra al paciente de la zona de su cuerpo ya sea espalda,
tronco, brazo,pierna etc con características propias de micosis.
4.2 Una vez localizada la zona, se tomará la muestra de acuerdo a las
condiciones de la lesión de la piel, si es descamativa se le efectuará un
raspado, y en caso de que no haya manera de realizar este raspado, se
le realizará una impronta con cinta diurex pegandola en un portaobjetos
y se coloca al microscopio observandose en objetivo 40 x.
4.3 Si se realiza el raspado debe hacerse con el instrumento adecuado y el
se coloca en una caja de petri.
4.4 Para el material recolectado se coloca una gota de solución
salina,hidróxico de postasio, azul de lactofenol etc en un portaobjetos y
se humedece la punta de un aplicador y con esa punta se toma una
porción de la muestra de la caja petri, se mezcla suavemente y se le
coloca un cubreobjetos y se observa con el objetivo 40 x.
4.5 El resto de la muestra se coloca en una placa de agar Sabouraud o Agar
Dextrosa y Papa, y se incuba a temperatura y tiempo adecuado . El
medio de cultivo se prepara de acuerdo a las especificaciones del
fabricante.
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

4.6 Al término de la incubación se observa la morfología macroscópica y

microscópica de las colonias de hongos que desarrollaron en la placa de
cultivo.
4.7 En el caso de sospecha de una pitiriasis versicolor no se realiza cultivo
en Sabouraud ya que es difícil su desarrollo.

5.-MUESTREO Y MUESTRA

5.1. Se selecciona la lesión del paciente en donde se observe características

propias de micosis en piel.

6.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA

El profesor supervisa que la toma de la muestra sea la adecuada.

6.2.-El profesor supervisa la realización de las preparaciones con las diferentes
soluciones.
6.3.- El profesor supervisa cada una de las preparaciones para garantizar que
están observando las estructuras correctas.

7.-CONTROL DE CALIDAD

7.1. Verificar que los reactivos a utilizar en la tinción no presenten precipitado o

contaminación.
7.2 Contar con un control negativo y positivo para los medios de cultivo utilizados.
7.3 Para control negativo se coloca una placa de agar sin inocular y se incuba
junto con los demás cultivos. (No debe haber desarrollo colonial)
7.4 Para control positivo se deja una placa de Sabouraud abierta durante todo el
proceso al termino de este se cierra y se incuba junto con las demás placas.

8.- REPORTE DE RESULTADO

El reporte debe de tener las siguientes características

1.- Foto del paciente del lugar donde se tomó la muestra (parte lesionada) (1/2
punto)
2.- Descripción del lugar donde se tomó la muestra (Ejemplo: uña del dedo gordo
del pie izquierdo el cuál presenta coloración negra y uña gruesa etc) (1/2 punto)
3.- Cuestionario aplicado al paciente (1 punto)

Fecha:
Nombre del paciente:
Genéro:
Edad:
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

Ocupación:
Muestra de:
Lugar de la muestra:
Presenta picazón?
Tiempo de presentar este problema:
Ha llevado tratamiento o si está llevando tratamiento?
El tratamiento le fue recetado por algún medico?
Se está aplicando algún remedio?
Tiene algún familiar con un padecimiento igual o similar?
Es Diabético/a ?
¿Está llevando algún tratamiento con quimio o radioterapia?
¿Está embarazada?
¿Es hipertenso/a?
4.- Imagen (Foto) macroscópica de los cultivos (frente-reverso) (1/2 punto)
5.-Descripción macroscópica que incluya los siguientes datos (1/2 punto)

DESCRIPCIÓN MACROSCÓPICA
Muestra Color Aspecto Consistencia
de:
Frente Reverso Levaduriforme Micelial Algodonosas Duras Mucoide

5.- Imagen (Foto) microscópica de los cultivos (1/2 punto)

6.-Descripción microscópica que incluya los siguientes datos (1/2 punto)
En caso de haber dos o más colonias hay que tomar de las distintas colonias. En
caso de que la imagen no se vea clara hay que dibujarla a mano y anexar la
imagen.
DESCRIPCIÓN MICROSCÓPICA1
Muestra Hifas Conidios
de:
Septadas Sin septos Macroconidios Microconidios
Tabicado Cenocítico

1
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

8.- Diagnóstico (Identificación taxonómica del hongos) Apoyarse en el banco de

imágenes proporcionado por tu profesor o en el caso de hongos filamentosos
utilizar para su identificación el software en línea Mycelium Tocuh. (2 puntos)
IMPORTANTE: COLOCAR DEBAJO DE CADA NUMERO LO REQUERIDO

PRÁCTICA 8
Candiasis faringea

1.- INTRODUCCIÓN

Información relevante sobre Candidiasis en faringe.

Indicaciones: Una cuartilla de información parafraseada, de 2 autores ya

sea de libros,revistas electrónicas etc (no más de 5 años) indicando con
superíndices los autores y la bibliografía irá al final con la opción insertar
nota al pie.(2 puntos)

2.- PRINCIPIO Y METODOLOGÍA DE LA DETERMINACIÓN.

Metodología para la identificación de hongos

1.- El estudiante deberá tomar la muestra de la faringe

2.-El estudiante deberá tomar la imagen de la faringe del paciente.

3.- El estudiante deberá realizar una observación microscópica directa o en

fresco de la muestra obtenida.

4.- El estudiante deberá proceder a sembrar la muestra obtenida en los

medios de cultivo, así mismo deberá incubarlos a la temperatura y tiempo
adecuados.

5. El estudiante deberá realizar la observación macroscópica de los cultivos

y como evidencia deberá tener una imagen, así mismo describirá el tipo de
colonias (colonias, consistencia y tipo).

6.-El estudiante deberá realizar la observación microscópica de los cultivos

indicando el tipo de conidios (macroconidios, micoroconidios) y tipos de
hifas (septadas,no septadas).
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

Nota: en caso de haber dos o más colonias hay que tomar de las distintas
colonias- y hacer su descripción respectiva.

7.- El estudiante realizará pruebas selectivas en caso de ser necesario.

8.- El estudiante mediante investigación bibliográfica determinará cuáles son

los agentes micóticos causales más frecuentes de las micosis del sitio
donde se tomó la muestra en base a Información estadística, de 2 autores
ya sea de libros,revistas electrónicas etc (no más de 5 años) indicando con
superíndices los autores y la bibliografía se colocará con la opción insertar
nota al pie. (2 puntos).

9.- El estudiante realizará la Identificación taxonómica (Género y especie)

del agente micológico en base a lo anterior y apoyándose en el banco de
imágenes proporcionado por el profesor.

3.- LISTA DE REQUERIMIENTOS

3.1 Reactivos

NOMBRE DEL REACTIVO CONC.

Hidroxido de potasio 20 %
NaCl 0.9 %
Sol. de azul de metileno 1%
Agar Dextrosa Sabouraud
Agar Destrosa y Papa
Chromoagar
Agua destilada

3.2 Equipos de Laboratorio

Estufa de cultivo
Autoclave
Balanza granataria
Microscopio

3.3 Materiales de laboratorios

DESCRIPCIÓN
Caja de petri estéril
Portaobjetos estéril
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

Hisópos estériles
Alcohol etílico al 70 %
Portaobjetos
Cubreobjetos
Guantes desechables
Cubrebocas
Maskintape
Papel parafilm

4.- TÉCNICA O PROCEDIMIENTO

Técnica de exudado faríngeo

4.1 Pedirle al paciente que se presente en ayuno, sin haber tomado agua,
se le toma el exudado faríngeo con un hisopo de algodón estéril.
4.2 Una vez tomada la muestra se inocula en el medio de cultivo Agar
dextrosa y Papa, incubándose de 24-48 horas a 37 grados centígrados.
4.3 Al término de este tiempo se observa la morfología colonial.
4.4 Si se observa levaduras verificarlo al microscopio y posteriormente
realizar la prueba de tubo germinativo para determinar presencia de
Cándida álbicans/dublinensis de cándida no albicans.
4.5 Para la prueba de tubo germinativo se depositan 0.5 ml. de suero
humano reciente y se inocula una colonia de Cándida incubándose de 2
a 3 horas a 37 oC. Al término de este tiempo se coloca con una pipeta
Pasteur una gota en un portaobjetos y se cubre con un cubreobjetos y
se observa al microscopio con 40 x.
4.6 Por otro lado para determinar la especie de Cándida realizar un cultivo
en Chromoagar incubando la muestra de 24-48 horas.

5.-MUESTREO Y MUESTRA

5.1. Se selecciona una zona de la faringe del paciente en donde se observe

alguna lesión blanquesina.

6.- CONFIABILIDAD ANALÍTICA

El profesor supervisa que la toma de la muestra sea la adecuada.

6.2.-El profesor supervisa la realización de las preparaciones con las diferentes
soluciones.
6.3.- El profesor supervisa cada una de las preparaciones para garantizar que
están observando las estructuras correctas.
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

7.-CONTROL DE CALIDAD

7.1. Verificar que los reactivos a utilizar en la tinción no presenten precipitado o

contaminación.
7.2 Contar con un control negativo y positivo para los medios de cultivo utilizados.
7.3 Para control negativo se coloca una placa de agar sin inocular y se incuba
junto con los demás cultivos. (No debe haber desarrollo colonial)
7.4 Para control positivo se deja una placa de Sabouraud abierta durante todo el
proceso al termino de este se cierra y se incuba junto con las demás placas.

8.- REPORTE DE RESULTADO

El reporte debe de tener las siguientes características

1.- Foto del paciente del lugar donde se tomó la muestra (parte lesionada) (1/2
punto)
2.- Descripción del lugar donde se tomó la muestra (estado de la faringe) (1/2
punto)
3.- Cuestionario aplicado al paciente (1 punto)

Fecha:
Nombre del paciente:
Genéro:
Edad:
Ocupación:
Muestra de:
Lugar de la muestra:
Presenta picazón?
Tiempo de presentar este problema:
Ha llevado tratamiento o si está llevando tratamiento?
El tratamiento le fue recetado por algún medico?
Se está aplicando algún remedio?
Tiene algún familiar con un padecimiento igual o similar?
Es Diabético/a ?
¿Está llevando algún tratamiento con quimio o radioterapia?
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis

¿Está embarazada?
¿Es hipertenso/a?

4.- Imagen (Foto) macroscópica de los cultivos (frente-reverso) (1/2 punto)

5.-Descripción macroscópica que incluya los siguientes datos (1/2 punto)

DESCRIPCIÓN MACROSCÓPICA
Muestra Color Aspecto Consistencia
de:
Frente Reverso Levaduriforme Micelial Algodonosas Duras Mucoide

6.- Imagen (Foto) microscópica de los cultivos (1/2 punto)

5.-Descripción microscópica que incluya los siguientes datos (1/2 punto)
En caso de haber dos o más colonias hay que tomar de las distintas colonias. En
caso de que la imagen no se vea clara hay que dibujarla a mano y anexar la
imagen.

DESCRIPCIÓN MICROSCÓPICA
Muestra Hifas Conidios
de:
Septadas Sin septos Macroconidios Microconidios
Tabicado Cenocítico

8.- Diagnóstico (Identificación taxonómica del hongos) Apoyarse en el banco de imágenes

proporcionado por tu profesor

PRUEBAS ESPECÍFICAS

Tubo germinativo (Foto) Chromoagar (Foto)

(1 punto) (1 punto)
Positivo Negativo Género Especie
Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis