Asignatura: Química Farmacéutica I
Unidad Curricular: Antibioticos betalactamicos, cloranfenicol, tetraciclinas.
Práctica N°7: Identificación y Valoración espectrofotométrica de Cloranfenicol
1. Objetivo General
Identificar y valorar por el método espectrofotométrico de Cloranfenicol.
2. Objetivos Específicos
- Establecer el porcentaje de principio activo de la Cloranfenicol, mediante el
método espectrofotométrico.
- Realizar controles físicos de Cloranfenicol.
- Comparar el método de análisis realizado en el laboratorio con el método
establecido en la USP 41 de los estados unidos.
3. Fundamento teórico
El cloranfenicol se presenta como cristales finos de color blanco o blanco grisáceo de
sabor muy amargo, ligeramente soluble en agua, muy soluble en alcohol, propilenglicol,
acetona y acetato de etilo (USP41, 2018).
El cloranfenicol es una molécula orgánica, cuya estructura corresponde a un derivado del
nitrobenceno, sustituido en la posición 4. En esta ramificación se encuentra presente un
enlace tipo amida, como también la presencia de dos grupos hidroxilo y dos átomos de
cloro. La presencia del anillo del nitrobenceno es relevante debido a que este se
transforma en aminas aromáticas, las cuales pueden ser carcinogénicas (Balizs & Hewitt
2003); la existencia del grupo hidroxilo facilita la formación de esteres que mejoran la
hidrosolubilidad del antibiótico. (Perez, Medina, & Núñez, 2014)
4. Parte experimental
4.1 Equipos, materiales y reactivos
EQUIPOS MATERIALES MEDICAMENTO REACTIVOS
Balanza Balones aforados Cloranfenicol Estándar
(100,50 ml) Cloranfenicol
Espectrofotómetro Pipetas volumétricas Agua
UV
Pipetas graduadas
Embudo
Papel filtro
Vasos de precipitación
Erlenmeyer
Espátulas
4.2 Procedimiento
a. Preparación de reactivos (un grupo de laboratorio horas antes de la hora de
laboratorio)
- N/A
b. Uniformidad de masa
- Pesar el contenido de 20 cápsulas o tabletas.
- Llenar la tabla expuesta en el anexo 1.
c. Preparación del Estándar (duplicado por curso)
- Depositar el equivalente de 50 mg de estándar de cloranfenicol en un balón aforado de
100ml.
- Agregar 15 ml de metanol, agitar durante 15 minutos, agregar agua hasta la línea de
afora, mezclar.
- Tomar 2ml de la solución, llevar a un balón de 100ml, aforar con agua destilada.
- Leer la absorbancia a 278 nm.
d. Preparación de blanco
- Colocar en un tubo 10 mL agua leer a 278nm, encerar el equipo.
e. Valoración (triplicado por grupo de laboratorio)
- Depositar el equivalente de 50 mg de p.a en un balón aforado de 50ml.
- Agregar 15 ml de metanol, agitar durante 15 minutos, agregar agua hasta la línea de aforo,
mezclar.
- Filtrar la solución.
- Del filtrado tomar 2ml de la solución, llevar a un balón de 100ml, aforar con agua
destilada.
- Leer la absorbancia a 278 nm.
- Realizar los cálculos según el Anexo 5
f. Uniformidad de contenido
- Determinar la uniformidad de contenido en la forma farmacéutica adquirida, analizando
el porcentaje de contenido con respecto al contenido neto ver anexo 2.
- Si la dosis ≥25 mg y proporción de Fármaco es ≥25%, se determinara la uniformidad de
contenido por regla de tres con la relación del peso neto medio y el promedio de la
valoración.
- Si la dosis <25 mg o <25% se deberá analizar cada forma farmacéutica.
- Verificar en la monografía para la forma farmacéutica analizada la cantidad declarada de
principio activo, con los rangos determinar el valor T, con el valor T determinar que
formula debemos usar según el caso en el que estemos para determinar el valor de M y
la fórmula de AV a usarse ver anexo 3.
- Elaborar una tabla de resultados como la expuesta en el anexo 4.
g. Controles físicos
Determinar desintegración, friabilidad y dureza cuando corresponda, se seguirá el
procedimiento descrito en el manual de cada equipo.
h. Identificación
- A 5 ml de una solución 0,1% P/V de cloranfenicol se agregan algunas gotas de nitrato de
plata, no se produce precipitado.
- En 2ml de solución alcohólica de hidróxido de potasio se disuelven 50ml de cloranfenicol
y se calienta en baño maría por 15 minutos, se agregan 20mg de carbón activado se agita
y se filtra, la solución satisface el ensayo para cloruros al ser tratada con nitrato de plata.
4.3 Manejo de residuos, Tratamiento y etiquetado
Desechos Farmacéuticos: Son aquellos medicamentos caducados, fuera de
especificaciones y residuos de sustancias que han sido empleadas en cualquier tipo de
procedimiento, dentro de los cuales se incluyen desechos producidos en laboratorios
farmacéuticos que no cumplan los estándares de calidad, incluyendo sus empaques.
Residuo Tratamiento Etiquetado
Metanol Colocar en envase de Residuos de metanol
residuos de metanol
Polvos sobrantes Ninguno - Llenar registro de
ingredientes activos
- Colocar en el recipiente
tabletas Moler etiquetado como residuos
sólidos.
Cápsulas Vaciar y colocar el
contenido y la capsula
en desechos sólidos
4.4 Lecturas adicionales sugeridas
Capítulos USP 41
<701> Desintegración
<857> Espectroscopia UV
<905> Uniformidad de unidades de dosificación
5. Cuestionario
a. Buscar un método de identificación discutir sobre su fundamento.
b. Añadir el espectro infrarrojo correspondiente al estándar de cloranfenicol
6. Referencias bibliográficas
ARCSA. (19 de 05 de 2020). Base de datos ARCSA. Obtenido de
https://www.controlsanitario.gob.ec/base-de-datos/
Laurence L. Brunton, PhD. (2007 undécima edición en español). Goodman & Gilman
Las bases farmacológicas de la TERAPÉUTICA. Colombia: McGRAW-HILL
INTERAMERICANA EDITORES, S.A. de C. V.
Rowe, R., Sheskey, P., & Quinn, M. (2009). Handbook of Pharmaceutical Excipients.
USA: Pharmaceutical Press and American Pharmacists Association.
USP41. (2018). FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS DE AMÉRICA
Cuadragésima Primera Revisión. 12601 Twinbrook Parkway, Rockville, MD
20852,Estados Unidos de América: THE UNITED STATES PHARMACOPEIAL
CONVENTION.
7. Anexos
Anexo 1 Determinación de la uniformidad de masa
PESO PESO PESO
BRUTO CAPSULA NETO
(mg) (mg) (mg)
1 476,8 73,4 403,4
2 458,3 74,7 383,6
3 451,9 71,0 380,9
4 455,0 77,1 377,9
5 447,6 71,5 376,1
6 460,4 71,6 388,8
7 454,8 76,4 378,4
8 452,5 75,3 377,2
9 463,5 74,9 388,6
10 461,1 75,3 385,8
11 469,7 75,3 394,4
12 451,8 76,5 375,3
13 456,0 70,8 385,2
14 459,6 74,6 385,0
15 467,6 74,6 393,0
16 467,5 75,0 392,5
17 469,1 75,1 394,0
18 460,0 73,3 386,7
19 468,7 73,5 395,2
20 464,3 76,4 387,9
PROMEDIO
MÍNIMO 447,6 70,8 375,3
MÁXIMO 476,8 77,1 403,4
STD 7,55 1,88 7,52
RSD
Cálculo STD =DESVEST(valor1 al valor 20)
Cálculo RSD (PROMEDIO/STD*100)
PESO NETO Tabletas, tabletas recubiertas = peso de tableta
Cápsulas= peso bruto - peso de cápsula
Anexo 2 Determinación de Uniformidad de contenido
Anexo 3 Cálculo de uniformidad de contenido
Anexo 4 Cálculo del contenido uniforme y determinación de AV
PESO NETO %P.A
(mg)
1 403,4 97,58
2 383,6 92,79
3 380,9 92,14
4 377,9 91,41
5 376,1 90,98
6 388,8 94,05
7 378,4 91,53
8 377,2 91,24
9 388,6 94,00
10 385,8 93,32
X 384,1 92,90
DSt 8,24 1,99
RSD 2,14 2,14
M 98,50
AV = 98.5-
Fórml. AV X+k*DSt
AV 10,38
C/NC C
Anexo 5 Cálculo de la valoración de PA en tabletas
𝐴𝑀 × 𝐶𝑆𝑡 × 𝐹𝐷 × 𝑃𝑃(𝑚𝑔)
𝑚𝑔 𝑝. 𝑎/𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 =
𝐴𝑠𝑡 × 𝑚𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
100% ∗ (𝑚𝑔 𝑝. 𝑎/𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠)
%𝑃𝐴 =
𝐷𝑜𝑠𝑖𝑠𝑚𝑔
𝐴𝑀 × 𝐶𝑆𝑡 × 𝐹𝐷 × 𝑃𝑃(𝑚𝑔)
𝑚𝑔 𝑝. 𝑎/𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑓𝑎𝑟𝑚𝑎𝑐é𝑢𝑡𝑖𝑐𝑎 =
𝐴𝑠𝑡 × 𝑚𝑔 𝑃𝐴
100% ∗ (𝑚𝑔 𝑝. 𝑎/𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑓𝑎𝑟𝑚𝑎𝑐é𝑢𝑡𝑖𝑐𝑎)
%𝑃𝐴 =
𝑃𝑃(𝑚𝑔)
PP= peso promedio
FD= factor de disolución (Aforos/ Alicuotas)
