Instituto Politécnico Nacional Unidad Profesional Interdisciplinaria de
E1
Biotecnología Ingeniería
Ciencias Básicas Academia de Microbiología Semestre 25-2 Biotecnológica
Unidad de aprendizaje: MICROBIOLOGÍA
Integrantes: Aldana Cruz Deisy Camila Fecha: 26/02/25 Grupo: 2BM2
Sámano Osnaya Deny Alexandra
Tarea No. 1. Tinciones
Objetivo: Identificar semejanzas y diferencias que se presentan en las tinciones microbianas, analizando el uso
de colorantes, solventes y mordentes en cada uno de los pasos durante la tinción, reconociendo las
características estructurales de la pared celular bacteriana y de la espora, así como la utilidad que presentan los
diferentes tipos de tinciones.
Instrucciones:
a.- En equipo de dos personas realicen la siguiente tarea.
b.- Consulta referencias bibliográficas sobre el tema de tinciones microbianas y elabora un cuadro comparativo entre las
semejanzas y diferencias que observes en las tinciones microbianas, en relación a los pasos de la tinción, el uso de
colorantes, solventes, mordentes, etc; el fundamento de cada tinción con base a las características estructurales de la
célula bacteriana, utilidad de cada una de las tinciones.
c.- Una vez que hayas detectado las semejanzas y diferencias elabora tus conclusiones.
d.-Realiza tu actividad en un documento Word, usa letra Arial 12, completa la cintilla de identificación anotando el nombre
de los integrantes del equipo, al final de la actividad coloca las referencias bibliográficas consultadas en formato APA.
e.- Guarda tu documento en PDF con la siguiente nomenclatura: Tarea #_Nombre de la tarea_ siglas de tu nombre_
grupo_ periodo; sube tu tarea a la plataforma. Ejemplo: T1_Tinciones_ GVLL_2BM2_25_2
f.- Cada estudiante sube su tarea usando la nomenclatura indicada, aunque sea el mismo archivo.
Tinción Pasos de la Fundamento Utilidad Semejanzas Diferencias
tinción
1. Colocar en el Se debe de El colorante Tanto la tinción Tinción Simple
portaobjetos suspender el utilizado sirve solo simple como la de
Usa un solo
Simple una gota de cultivo para que la para denotar la Gram, son útiles
colorante.
agua con el tinción se pueda morfología celular, para identificar la
asa. aplicar por dicha razón, es morfología y No distingue entre
2. Con el asa uniformemente en útil para observar e agrupación tipos de bacterias.
flameada y fría, toda la muestra. La identificar la forma, bacteriana, así
tomar una suspensión tamaño y como para la Tinción de Gram
porción del bacteriana es agrupación de visualización de
Usa varios
cultivo esencial para microorganismos, endosporas.
reactivos para
bacteriano y asegurar que los así como la
Todas usan diferenciar
suspenderlo microorganismos presencia de
colorantes bacterias según su
homogéneame se encuentren en endosporas
primarios y pared celular.
nte en la gota la misma bacterianas.
de agua. concentración en
3. Extender la toda la muestra, lo enjuagues con
Tincion de
suspensión que permite una agua.
Schaeffer-Fulton
sobre la visualización más
Todas requieren Diseñada
superficie del precisa y una
fijación de la específicamente
portaobjetos. mejor
muestra. para detectar
4. Secar la identificación, es
endosporas
preparación al por la misma razón Se aplican
bacterianas.
aire, o bien que se debe de colorantes para
Pasa por un
calentando extender la visualizar
proceso de emisión
muy suspensión sobre estructuras
de vapores para
suavemente a toda la superficie. bacterianas.
hacer que el
cierta distancia La fijación por calor
colorante penetre
de la llama del coagula las
correctamente.
mechero. proteínas y
Usa dos colorantes
5. Fijar la disuelve los lípidos.
pero no es una
extensión al Preserva la
tinción diferencial,
portaobjetos morfología externa
pues no tiene un
por calor. de los
paso de
6. Cubrir la microorganismos,
diferenciación.
extensión con pero no las
alguno de los estructuras
siguientes internas.
colorantes: Tanto el azul de
Azul de metileno como la
Metileno de Fucsina son
Loeffler durante colorantes
2 minutos catiónicos, por lo
Fucsina diluida que los
(con agua componentes
sobre el celulares y
portaobjetos) microorganismos
durante 30 que tienen cargas
segundos negativas son
atraídos por éstos.
7. Lavar
abundantement
e con agua.
8. Secar la
preparación
suavemente
con papel de
filtro.
1. Colocar en el Como ya se Sirve para conocer
portaobjetos 3 explicó la morfología y
gotas de agua. anteriormente, la agrupación de las
Gram 2. Con el asa fijación por calor bacterias, la
flameada y fría, mata al presencia de
tomar una microorganismo, endosporas y la
porción de coagula sus pureza de un
cada cultivo proteínas y lo cultivo.
bacteriano y adhiere firmemente Clasifica a las
suspenderla al portaobjetos. bacterias en dos
homogéneame Al agregar el cristal grandes grupos,
nte en las violeta, todas las las Gram negativas
gotas de agua bacterias se tiñen, (rosa) y las Gram
de los sin importar su positivas (morado),
extremos y en clasificación, de esta manera,
la del centro debido a que es un también permite la
hacer una colorante catiónico. identificación de
mezcla. El Lugol permite alguna bacteria.
3. Extender bien que el colorante
las entre en la célula
suspensiones bacteriana, crea un
sobre el complejo insoluble
portaobjetos de yodo y
con el asa. colorante primario
4. Secar Reteniendo y
calentando fijando el colorante
muy del cristal violeta a
suavemente. las bacterias.
5. Fijar las Forma un complejo
extensiones cristal violeta-yodo
con calor. que satura los
6. Cubrir las espacios del
preparaciones peptidoglicano
con la solución presente en la
de Violeta pared bacteriana.
Cristal durante El alcohol-acetona
2 minutos y disuelve la
lavar con agua. membrana externa
7. Cubrir con y la pared delgada
Lugol y dejar 2 de las Gram
minutos negativas, puesto
8. Escurrir el que su grosor es
Lugol y sin mínimo, dejando
lavar decolorar salir de esta
con el manera al
alcohol-aceton colorante.
a durante unos Finalmente, se
segundos y agrega la safranina
enseguida puesto que es un
lavar con colorante de
abundante contraste y tiñe a
agua. las bacterias que,
9. Contrastar con por su
Fucsina composición,
durante 30 dejaron salir el
segundos colorante cristal
10.Lavar violeta.
abundantement
e con agua y
secar con
papel de filtro.
1. Verde La envuelta de la La utilidad de la
malaquita: endospora es más tinción de
Schaeffer-Ful Cubrir el compleja e Schaeffer-Fulton
ton frotis con impermeable que es identificar
verde de la envuelta de las endoesporas
malaquita células vegetativas bacterianas, ya
2. Calor: en las que se que estas son
calentar con forma. Solo se estructuras
una lámpara puede teñir el altamente
de alcohol, contenido de la resistentes y
hasta que espora alterando difíciles de teñir.
emita su envuelta. La Gracias al
vapores, impermeabilidad calentamiento, el
aplicar calor de las cubiertas verde de
periódicame dificulta que las malaquita penetra
nte durante endosporas se en las esporas,
cinco decoloren una vez permitiendo
minutos sin teñidas. El verde diferenciarlas de
que se de malaquita es un las células
seque colorante vegetativas, que se
3. Decoloració débilmente básico contratiñen con
n con agua: (tiene una carga safranina. Esta
lavar con positiva débil) y por técnica es
agua de la tanto, se une especialmente útil
llave débilmente a la para detectar
4. Safranina: bacteria. Penetra bacterias
cubrir el en las células esporuladas como
frotis con vegetativas . Bacillus y
safranina Cuando se calienta Clostridium.
durante 1 la preparación
minuto también penetra
las endosporas,
5. Enjuagar: pues el calor
Dejar secar provoca que se
y observa abran los poros del
con el organismo.
microscopio Durante el lavado
utilizando con agua, el verde
aceite de de malaquita se
inmersión elimina de las
células
vegetativas, pero
no de la
endospora. El
colorante de
contraste (la
safranina) solo
puede teñir a las
células vegetativas
(decoloradas por el
agua)
Conclusiones: Las diferentes tinciones permiten observar e identificar los diferentes microorganismos en
el microscopio. Cada técnica permite destacar características estructurales importantes,
facilitando la clasificación y diferenciación bacteriana. La tinción de Gram resulta clave
para distinguir bacterias según la composición de su pared celular, mientras que la de
Schaeffer-Fulton permite identificar la presencia de esporas en microorganismos.
Referencias: ● Canese A, Canese A. Manual de microbiología y parasitología médica. 7ª ed.
Asunción: Arquímedes Canese; 2012.
● Caycedo Lozano, L. Corrales Ramírez, L. (2021). Principios fisicoquímicos de los
colorantes utilizados en microbiología. Revista científica Scielo.
● Garibaldi, P., Ortega, M. & Santambrosio, E. (2009). Tinción y observación de
microorganismos. UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA NACIONAL. FACULTAD
REGIONAL ROSARIO DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA QUÍMICA.
● López LE, Hernández M, Colín CA, Ortega S, Cerón G, Franco R. Las tinciones
básicas en el laboratorio de microbiología. Investigación en discapacidad
[Internet]. 2014 enero [citado el 23 de febrero del 2025]; 3(1): 10-18. Disponible
en: http://www.medigraphic.com/pdfs/ invdis/ir-2014/ir141b.pdf
Rúbrica de evaluación:
1. Coloca la cintilla de identificación en la tarea................................................................................................................0.0
2. Enumera los pasos de cada una de las tinciones, desde elaboración del frotis, uso de colorantes, tiempos que se dejan
actuar, uso de otros reactivos y enjuague .......................... ..............................................................................................1.0
3. Describe el fundamento de cada una de las tinciones con base a los componentes estructurales de la célula y el uso de
colorantes...........................................................................................................................................................................1.0
4. Explica claramente y de forma resumida lo que ocurre en cada uno de los pasos de la tinción
………………………………..1.0
5. Reconoce las situaciones en la que puede hacer uso de este tipo de tinciones
…..…....................................................1.0
6.Identifica claramente las semejanzas encontradas entre las tinciones revisadas...........................................................2.0
7.Identifica claramente las diferencias encontradas entre las tinciones revisadas............................................................2.0
8. Conclusiones claras y concisas
…....................................................................................................................................1.5
9. Anota referencias bibliográficas en formato APA ….......................................................................................................0.5
