Centro de Bachillerato tecnológico industrial y de servicio #15
PRACTICA DE LABORATORIO #1
AISLAMIENTO POR VERTIDO DE PLACA
Semestre: tercero Grupo: G
Especialidad: Laboratorista Químico
Materia: Emplea técnicas de identificación de microorganismos
Maestra: Segura Rodríguez Clarita
Alumna: Jazmín Abigail Soto Neira
Fecha: 01/ Nov/ 2024
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OBJETIVO:
El objetivo de esta práctica es desarrollar lo aprendo en clase para poder desarrollar habilidades que nos
sirvan para realizar una practica adecuada y de manera segura. Esta practica nos ayudar a localizar la técnica
adecuada de aislamiento para poder realizar una practica en la que se podrán localizar diversos tipos de
microorganismos.
INDICE:
INTRODUCCION……………………………………………………………………………………………………………………3
¿Qué ES UNA TECNICA DE AISLAMIENTO?...............................................................................4
CONCEPTOS CLAVE…………………………………………………………………………………………………………….5
CARACTERISTICAS DE LA PLACA Y LOS MEDIOS DE CULTIVO……………………………………………….5
TIPOS DE AGAR USADOS EN EL VERTIDO EN PLACA…………………………………………………………….7
PASOS PARA REALIZAR UN VERTIDO EN PLACA…………………………………………………………………….9
IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS
EVIDENCIAS
RESULTADOS
MATERIALES Y EQUIPO
CONCLUSIONES
BIBLIOFRAFIA
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INTRODUCCION:
El vertido en placa es una técnica esencial en microbiología utilizada para cultivar y aislar microorganismos en
medios sólidos. Esta metodología permite el crecimiento de colonias bacterianas u hongos en placas de Petri,
brindando una manera eficiente de observar, cuantificar y analizar diversos organismos en un laboratorio. A
través del vertido en placa, los científicos pueden estudiar características fenotípicas y genotípicas de
microorganismos, evaluar su resistencia a antibióticos, analizar la producción de metabolitos y desarrollar
estudios de patogenicidad, entre otros.
El proceso de vertido en placa comienza con la preparación del medio de cultivo, que suele consistir en una
mezcla de nutrientes como peptonas, extractos de levadura, sales y un agente gelificante como el agar. Este
medio se esteriliza mediante autoclave para eliminar cualquier organismo no deseado y evitar la
contaminación cruzada en el experimento.
Tras la esterilización, el agar se enfría a aproximadamente 45-50 °C para poder manipularlo sin que se
solidifique prematuramente. Esta temperatura es clave, ya que permite que el medio se mantenga líquido sin
afectar la viabilidad de los microorganismos al momento de ser vertido.
El siguiente paso en la técnica de vertido en placa consiste en inocular una muestra diluida del
microorganismo que se desea cultivar. La muestra se mezcla con el medio de agar derretido, lo cual permite
que los microorganismos queden distribuidos de manera uniforme en toda la placa al solidificarse el agar.
Luego, esta mezcla se vierte cuidadosamente en una placa de Petri estéril.
Una de las principales ventajas de la técnica de vertido en placa es la capacidad de cuantificar células viables
en una muestra original, ya que permite contar colonias formadas después de la incubación. Este recuento es
fundamental para estudios microbiológicos y pruebas de control de calidad, especialmente en la industria
alimentaria, farmacéutica y en laboratorios de investigación. Al contar el número de colonias, se puede
estimar la concentración de microorganismos viables en una muestra original. Esta técnica también es valiosa
para la observación de características coloniales, como tamaño, forma, textura y color, las cuales pueden
proporcionar pistas sobre la identidad de los microorganismos presentes.
Además, al verter el agar, es posible que se produzcan burbujas de aire o que la distribución de las colonias no
sea completamente homogénea, lo que puede complicar el conteo de colonias en algunos casos. Asimismo, la
técnica de vertido en placa puede no ser adecuada para todos los microorganismos, especialmente aquellos
que requieren condiciones muy específicas o que tienen una movilidad alta en medios semisólidos.
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¿Qué ES UNA TECNICA DE AISLAMIENTO?
Una técnica de aislamiento es un conjunto de métodos empleados en microbiología para separar y cultivar
microorganismos específicos a partir de una muestra que puede contener múltiples tipos de organismos. El
objetivo es obtener colonias puras de un microorganismo particular, es decir, células que provengan de una
misma célula inicial y, por tanto, sean genéticamente idénticas. Este aislamiento es crucial para la
identificación, estudio y manipulación de microorganismos en diferentes áreas de investigación y aplicación
práctica, como en la industria alimentaria, la biotecnología, la salud pública y la medicina.
La técnica de aislamiento se refiere a un conjunto de procedimientos diseñados para separar a individuos
infectados por enfermedades transmisibles del resto de la población, con el objetivo de prevenir la
propagación de infecciones. Este enfoque es crucial en entornos sanitarios, donde la transmisión de
patógenos puede tener consecuencias graves.
Objetivos del Aislamiento
1. Cortar la cadena de transmisión: Al separar a los pacientes infectados, se busca evitar que los
microorganismos se diseminen a otros individuos.
2. Proteger a pacientes vulnerables: Especialmente aquellos con sistemas inmunológicos comprometidos, que
son más susceptibles a infecciones.
3. Reducir la incidencia de infecciones nosocomiales: Estas son infecciones adquiridas dentro del entorno
hospitalario, que pueden ser prevenidas mediante prácticas adecuadas de aislamiento.
Tipos de Aislamiento
Existen varios tipos de aislamiento, cada uno adaptado a diferentes mecanismos de transmisión:
Aislamiento por contacto: Se utiliza cuando hay riesgo de transmisión directa o indirecta a través del contacto
físico. Se requiere el uso de guantes y batas, y se debe desinfectar el ambiente.
Aislamiento respiratorio: Indicado para enfermedades que se transmiten por gotas grandes (más de 5 micras)
que se generan al toser o estornudar. Se necesita una mascarilla y, en algunos casos, habitaciones con presión
negativa
Aislamiento por aire: Para patógenos que permanecen en el aire en partículas más pequeñas (menos de 5
micras) durante períodos prolongados. Este tipo requiere habitaciones especiales con filtros HEPA y acceso
restringido.
Medidas Básicas en la Técnica de Aislamiento
1. Lavado de manos: Fundamental antes y después del contacto con pacientes o superficies contaminadas.
2. Uso de equipo de protección personal (EPP): Incluye guantes, mascarillas y batas según el tipo de
aislamiento requerido.
3. Restricción de visitas: Limitar el acceso a pacientes en aislamiento para proteger tanto al paciente como a
los visitantes.
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CONCEPTOS CLAVE:
Medio de cultivo: Es la mezcla de nutrientes que se prepara para favorecer el crecimiento de
microorganismos en el laboratorio.
Agar: Es un agente gelificante derivado de algas marinas que se usa en microbiología como base sólida para el
crecimiento de microorganismos.
Inoculación: Es el proceso de introducir microorganismos en el medio de cultivo para promover su
crecimiento.
Colonias: Son grupos de células que crecen juntas y derivan de una célula inicial. En el vertido en placa, las
colonias se desarrollan en diferentes posiciones en la placa, permitiendo su observación y conteo.
Incubación: Proceso en el cual las placas inoculadas se colocan en condiciones controladas de temperatura,
generalmente entre 25 y 37 °C, para permitir el crecimiento de los microorganismos.
CARACTEISTICAS DE LA PLACA Y LOS MEDIOS DE CULTIVO
Características de la Placa y los Medios de Cultivo
Las placas de cultivo y los medios de cultivo son elementos fundamentales en microbiología y biotecnología,
utilizados para el crecimiento y estudio de microorganismos y células. A continuación, se describen sus
características principales.
Placas de Cultivo
1. Material: Generalmente fabricadas de poliestireno (PS) o vidrio, las placas de cultivo son diseñadas para ser
estériles y no pirogénicas. Esto asegura un entorno libre de contaminantes que podría afectar el crecimiento
celular.
2.Tipos:
Placas de Petri: Utilizadas comúnmente en microbiología, contienen medios sólidos como el agar, que permite
el crecimiento de microorganismos en colonias individuales.
Placas para cultivo celular: Estas pueden tener múltiples pocillos (por ejemplo, 24, 96) y están diseñadas para
el cultivo de células en suspensión o adherentes. Su superficie puede ser tratada para mejorar la adhesión
celular.
3.Esterilización: Las placas suelen ser esterilizadas mediante radiación gamma o métodos similares,
garantizando la eliminación de contaminantes microbianos.
4.Volumen y Área: Cada pocillo en las placas tiene un volumen de trabajo específico (por ejemplo, 0.1 a 0.2
ml) y un área adecuada para el crecimiento celular (0.35 cm² por pocillo).
5.Empaque: Vienen empaquetadas individualmente o en grupos, lo que facilita su almacenamiento y uso en
laboratorios.
Medios de Cultivo
1.Composición:
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Los medios pueden ser definidos (con composición química conocida) o indefinidos (basados en extractos
naturales con composición variable).
Pueden contener nutrientes como carbohidratos, nitrógeno, vitaminas y sales minerales, esenciales para el
crecimiento microbiano.
2. Tipos:
Medios selectivos: Diseñados para favorecer el crecimiento de ciertos microorganismos mientras inhiben a
otros mediante la adición de antibióticos o nutrientes específicos.
Medios diferenciales: Permiten la identificación de microorganismos a través de cambios visibles, como
cambios de color en las colonias debido a reacciones metabólicas.
3.Funcionalidad: Los medios son cruciales para cultivar microorganismos en condiciones controladas,
permitiendo estudios sobre su morfología, fisiología y genética.
4.Indicadores: Algunos medios incluyen indicadores que cambian de color en respuesta a la actividad
metabólica del microorganismo, facilitando la identificación visual durante el cultivo.
Características de la Placa y los Medios de Cultivo
Las placas de cultivo y los medios de cultivo son elementos fundamentales en microbiología y biotecnología,
utilizados para el crecimiento y estudio de microorganismos y células. A continuación, se describen sus
características principales.
Placas de Cultivo
1.Material: Generalmente fabricadas de poliestireno (PS) o vidrio, las placas de cultivo son diseñadas para ser
estériles y no pirogénicas. Esto asegura un entorno libre de contaminantes que podría afectar el crecimiento
celular.
2.Tipos:
Placas de Petri: Utilizadas comúnmente en microbiología, contienen medios sólidos como el agar, que
permite el crecimiento de microorganismos en colonias individuales.
Placas para cultivo celular: Estas pueden tener múltiples pocillos (por ejemplo, 24, 96) y están diseñadas para
el cultivo de células en suspensión o adherentes. Su superficie puede ser tratada para mejorar la adhesión
celular.
3.Esterilización: Las placas suelen ser esterilizadas mediante radiación gamma o métodos similares,
garantizando la eliminación de contaminantes microbianos.
4.Volumen y Área: Cada pocillo en las placas tiene un volumen de trabajo específico (por ejemplo, 0.1 a 0.2
ml) y un área adecuada para el crecimiento celular (0.35 cm² por pocillo).
5. Empaque: Vienen empaquetadas individualmente o en grupos, lo que facilita su almacenamiento y uso en
laboratorios.
Medios de Cultivo
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1. Composición:
Los medios pueden ser definidos (con composición química conocida) o indefinidos (basados en extractos
naturales con composición variable).
Pueden contener nutrientes como carbohidratos, nitrógeno, vitaminas y sales minerales, esenciales para el
crecimiento microbiano.
2.Tipos:
Medios selectivos*: Diseñados para favorecer el crecimiento de ciertos microorganismos mientras inhiben a
otros mediante la adición de antibióticos o nutrientes específicos.
Medios diferenciales: Permiten la identificación de microorganismos a través de cambios visibles, como
cambios de color en las colonias debido a reacciones metabólicas.
3. Funcionalidad: Los medios son cruciales para cultivar microorganismos en condiciones controladas,
permitiendo estudios sobre su morfología, fisiología y genética.
4. Indicadores: Algunos medios incluyen indicadores que cambian de color en respuesta a la actividad
metabólica del microorganismo, facilitando la identificación visual durante el cultivo.
TIPOS DE AGAR USADOS EN EL VERTIDO EN PLACA
• Agar Nutritivo: Es un medio de cultivo general ampliamente usado para el
aislamiento de microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requisitos
nutricionales.
• Agar MacConkey: Este es un medio selectivo que permite diferenciar bacterias que
fermentan lactosa (L+) de las no fermentadoras (L-) en muestras clínicas, de agua
y alimentos.
• Agar Sangre: Es un medio de cultivo enriquecido y selectivo que contiene sangre
de mamíferos a una concentración de 5 a 10%. Permite el crecimiento de
microorganismos más exigentes nutrimentalmente.
• Agar de Papa y Dextrosa: Es un medio de crecimiento para hongos, siendo el
medio más utilizado para el crecimiento de hongos y levaduras que atacan a las
plantas vivas o materia vegetal muerta en descomposición.
PROPIEDADES DEL VERTIDO EN PLACA
La técnica de vertido en placa es un método ampliamente utilizado en microbiología para el
cultivo y recuento de microorganismos. Esta técnica permite la obtención de colonias
aisladas y es fundamental para la cuantificación de células viables en muestras. Entre las
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propiedades y características de esta técnica están:
Propiedades y Ventajas:
• Colonias Aisladas: Esta técnica permite el crecimiento de colonias tanto en la
superficie como dentro del medio de cultivo, facilitando el aislamiento de cepas
específicas.
• Variabilidad en Tamaño: Las colonias que crecen en la superficie tienden a ser
más grandes y visibles, mientras que las que se desarrollan dentro del agar pueden
ser más pequeñas y menos accesibles.
• Recuento de Unidades Formadoras de Colonias (UFC): El vertido en placa es
eficaz para determinar el número de células viables en una muestra, ya que cada
colonia se presume que proviene de una sola célula.
• Diluciones Seriadas: Permite realizar diluciones seriadas para obtener un rango
adecuado de concentraciones, facilitando un conteo más preciso.
• Aplicaciones Diversas: Es aplicable a diferentes tipos de microorganismos,
incluyendo bacterias y hongos, lo que la convierte en una técnica versátil para varios
estudios microbiológicos.
• Modificaciones Metodológicas: Se han desarrollado variaciones como el goteo en
placa, que permite manejar un mayor número de muestras con menos tiempo y
recursos.
Desventajas
• Tiempo Consumo: El proceso puede ser laborioso y consumir mucho tiempo,
especialmente cuando se requieren múltiples diluciones y repeticiones.
• Sensibilidad al Calor: La técnica implica el uso de agar fundido que debe enfriarse
a temperaturas específicas (44-46 °C). Los microorganismos sensibles al calor
pueden ser dañados si no se manejan adecuadamente las temperaturas, lo que
puede llevar a resultados inexactos.
• Subestimación o Sobreestimación: La técnica depende del crecimiento visible de
colonias, lo que puede llevar a una subestimación o sobreestimación del número
real de microorganismos presentes en la muestra.
• Inconsistencias: La variabilidad en el tamaño y la forma de las colonias puede
dificultar el conteo preciso y reproducible entre diferentes experimentos o entre
diferentes operadores.
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PASOS PARA REALIZAR UN VERTIDO EN PLACA
Preparación De Un Espacio Seguro y Estéril:
1. Cumple con las normas y reglas del laboratorio.
2. Esteriliza todos los instrumentos, soluciones y medios antes de usarlos.
3. Limpia tu zona de trabajo de cualquier material que dificulte la tarea a realizar.
4. Desinfecta la zona de trabajo para minimizar en lo posible la contaminación.
5. Monta y enciende el mechero de Bunsen para crear tu zona de trabajo estéril.
6. Lava correctamente tus manos con soluciones asépticas.
Preparación Del Agar:
1. Medir la cantidad de agua destilada que se desea preparar de medio de cultivo. En
este caso 400ml.
2. Medir la cantidad de agar nutritivo necesario en una balanza (con vidrio de reloj)
según indique el envase. En este caso indica 40gr/L así que necesitamos 12gr de
agar.
3. Colocar el agar en el matraz con el agua destilada con ayuda de una piseta para no
dejar ningún residuo. Mezclar con ayuda de una varilla de vidrio.
4. Tapar el frasco con un tapón de algodón sin sellarlo totalmente y etiquetarlo con los
datos del medio (Nombre, Fecha, Cantidad, Etc.).
5. Calentar con un manto o parilla durante 2 minutos aproximadamente, cerca de hervir
pero sin llegar a hacerlo.
6. Sacar del calentamiento y agitar bien hasta que quede bien homogeneizado.
7. Introducir en la autoclave para esterilizar a 121°C a 1 ATM por 15 minutos.
8. Sacar de la autoclave e introducir a un baño maría para no dejar solidificar.
Procedimiento De Vertido En Placa:
1. Antes de tomar la muestra liquida, se debe homogeneizar con ayuda del Vórtex
durante 30 segundos.
2. En condiciones asépticas, se toma con la pipeta una alícuota de la muestra diluida
(aproximadamente 4 ml).
3. Se abre la caja Petri con una mano y se deposita la muestra en el centro de esta.
4. Se coloca la caja Petri en la mesa, sin dejar que la muestra se desplace a la periferia
de la caja.
5. Tomamos el matraz con el medio de cultivo del baño maría, secando el agua que
pudo quedar en su exterior.
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6. Se flamea la boca del recipiente para esterilizar y se vierte una parte del contenido
en la caja, procurando no tocar la base o la tapa de la placa.
7. Se tapa la caja y se coloca con cuidado en la mesa.
8. Se homogeneiza el inoculo con el agar, dando seis giros a la caja en el sentido de
las manecillas del reloj, seis veces en el sentido contrario, seis veces de arriba hacia
abajo y seis veces hacia los lados. Todo ello procurando que el agar no se salga de
la caja.
9. Se deja reposar para que el agar solidifique.
10. Dejar el tiempo necesario para incubar y que los microorganismos crezcan.
IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
La identificación de microorganismos en cultivos es un proceso crucial en microbiología,
que permite determinar la especie y características de los microorganismos presentes en
una muestra. Los procesos se pueden clasificar en:
Métodos Fenotípicos
Los métodos fenotípicos se basan en la observación de características físicas y bioquímicas
de los microorganismos. Estos incluyen:
• Morfología: Se analiza el tamaño, forma y características de las colonias.
• Propiedades Bioquímicas: Incluyen pruebas como la catalasa, oxidasa,
fermentación de azúcares, y otros metabolitos que indican la actividad metabólica
del microorganismo.
• Condiciones de Cultivo: Se evalúan factores como temperatura, pH y tipo de
medio de cultivo para observar el crecimiento óptimo del microorganismo.
Métodos Genotípicos
Los métodos genotípicos utilizan técnicas moleculares para identificar microorganismos a
nivel del ADN. Esto incluye:
• Secuenciación de ADN: Se analizan fragmentos específicos del ADN, como el 16S
rRNA, para identificar especies con alta precisión.
• PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa): Esta técnica permite amplificar
segmentos específicos del ADN para su análisis posterior.
Proceso De Identificación
Aislamiento: Se realiza a partir de muestras que pueden incluir exudados clínicos,
alimentos o suelos. Es crucial obtener cultivos puros, lo que significa que cada colonia debe
derivar de una sola célula microbiana.
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Observación Morfológica: Se examinan las colonias en la placa para evaluar
características como tamaño, forma, color y textura, lo que proporciona información
preliminar sobre el tipo de microorganismo.
Pruebas Bioquímicas: Se llevan a cabo pruebas específicas para determinar las
capacidades metabólicas del microorganismo, como la fermentación de azúcares o la
producción de enzimas. Esto puede incluir el uso de tiras API® que permiten realizar
múltiples pruebas bioquímicas simultáneamente.
Identificación Molecular: En algunos casos, se utilizan técnicas como la PCR (Reacción
en Cadena de la Polimerasa) para identificar microorganismos a nivel genético. Esto es
especialmente útil para especies difíciles de distinguir mediante métodos fenotípicos.
USOS EN DIVERSOS ÁMBITOS
La técnica de vertido en placa es un método ampliamente utilizado en microbiología para
cultivar y cuantificar microorganismos. Su versatilidad permite su aplicación en diversos
ámbitos, entre los cuales están:
Microbiología y Biotecnología:
• Cultivo de Microorganismos: El vertido en placa se utiliza para obtener colonias
aisladas de bacterias y hongos, facilitando la obtención de cultivos puros. Esta
técnica es esencial para estudios de caracterización y clasificación microbiana.
• Cuantificación: Permite la cuantificación de microorganismos a partir de muestras
líquidas o sólidas, siendo útil para determinar la carga microbiana en diferentes
entornos.
Industria Alimentaria:
• Control de Calidad: En la industria alimentaria, el vertido en placa se aplica para el
análisis microbiológico de superficies que están en contacto con alimentos. Esto
incluye utensilios, superficies de trabajo y equipos que deben cumplir con
estándares sanitarios.
• Detección de Patógenos: Se emplea para detectar patógenos específicos en
alimentos y bebidas, asegurando que los productos sean seguros para el consumo
humano. Las placas permiten identificar y contar colonias de microorganismos
patógenos que podrían comprometer la salud pública.
Diagnóstico Clínico
• Identificación de Patógenos: Se utiliza para cultivar y aislar bacterias y hongos
patógenos a partir de muestras clínicas, como exudados, sangre y orina. Esto es
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crucial para el diagnóstico de infecciones y enfermedades.
Industria Farmacéutica
• Desarrollo de Medicamentos: En la investigación y desarrollo de nuevos fármacos,
el vertido en placa es utilizado para evaluar la actividad antimicrobiana de
compuestos químicos, contribuyendo a la identificación de nuevos antibióticos o
antifúngicos.
• Producción de Vacunas: La técnica es fundamental en la producción de vacunas,
donde se cultivan microorganismos atenuados o inactivados que se utilizan como
antígenos en las vacunas
IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS
Microorganismos Identificables en el Vertido en Placa
La técnica de vertido en placa es un método común en microbiología para cultivar y aislar microorganismos a
partir de muestras de diferentes orígenes, incluyendo agua, suelos y alimentos. Esta técnica permite
identificar una variedad de microorganismos, principalmente bacterias, que pueden ser indicadores de
contaminación o patógenos. A continuación, se describen algunos de los microorganismos que se pueden
identificar mediante esta técnica.
Bacterias Comunes
1. Coliformes:
Escherichia coli: Indicador de contaminación fecal, se identifica en medios como el agar VRBL (Violeta rojo
bilis lactosa), donde fermenta la lactosa y produce colonias rojas o púrpuras.
Enterobacter: También presente en aguas contaminadas, se puede identificar por su coloración roja ladrillo o
amarilla con centro naranja en medios específicos.
2.Patógenos Gastrointestinales:
Salmonella y Shigella: Se aíslan en medios como el agar Hektoen, que permite diferenciar estas bacterias a
partir de heces y alimentos.
Staphylococcus aureus: Identificable en el medio Baird-Parker, donde forma colonias negras con bordes
incoloros.
3.Bacterias Heterótrofas:
Pseudomonas: Comúnmente encontrada en ambientes acuáticos y suelos, puede ser aislada en medios ricos
en nutrientes.
Hongos
Levaduras y Mohos: En medios no selectivos, como el agar sabouraud, se pueden cultivar levaduras (como
Saccharomyces cerevisiae) y mohos (como Aspergillus spp.), que son importantes en la industria alimentaria y
farmacéutica.
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EVIDENCIAS:
Conclusión:
En conclusión, el vertido en placa es una técnica fundamental en el estudio y
manipulación de microorganismos en el laboratorio. Pese a sus limitaciones, esta
metodología ha demostrado ser invaluable en la microbiología, permitiendo el
cultivo y cuantificación de diversos organismos de manera eficaz. Su correcta
aplicación requiere una cuidadosa atención a los detalles, desde la preparación
del medio hasta la manipulación de las muestras y el vertido en la placa de Petri,
asegurando así la fiabilidad y validez de los resultados obtenidos.
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BIBLIOGRAFIA:
https://www2.ulpgc.es/hege/almacen/download/35/35550/analisis_de_aguas.pdf
http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S0123-34752012000200016&script=sci_arttext
https://www.elsevier.es/es-revista-anales-pediatria-continuada-51-articulo-precauciones-aislamiento-atencion-
sanitaria-S1696281814702148
https://medlineplus.gov/spanish/ency/patientinstructions/000446.htm
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pacientes-hospitalizados/
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