Lípidos
Son biomoléculas orgánicas formadas principalmente por carbono,
hidrógeno y oxígeno, son insolubles en agua pero solubles en solventes
orgánicos como el éter y el benceno. Según su clasificación,
encontraremos que sus atomos se disponen de distintas formas, sin
embargo, todos comparten la característica de pertenecer a una cadena
hidrocarbonada.
CLASIFICACIÓN DE LOS LÍPIDOS
Grasas: Una molécula de grasa consta de dos partes: un esqueleto de
glicerol y tres colas de ácidos grasos. El glicerol es una pequeña molécula
orgánica con tres grupos hidroxilo (OH), mientras que un ácido graso
consta de una larga cadena de carbohidratos unida a un grupo
carboxilo.
Ácidos grasos: son cadenas hidrocarbonadas de longitud variable, con
un grupo carboxilo en su extremo; se dividen en saturados e insaturados.
Son constituyentes tanto de los triglicéridos, lípidos complejos y pueden
hallarse en forma libre. Este tipo lípidos son una importante fuente de
energía para las células, ya que pueden oxidarse hasta obtener ATP.
• Ácidos grasos saturados: Si solamente hay enlaces sencillos entre
carbonos vecinos en la cadena de carbohidrato, se dice que un
ácido graso está saturado.
• Ácidos grasos insaturados: Cuando la cadena contiene un enlace
doble, se dice que el ácido graso está insaturado, ya que ahora
tiene menos hidrógenos. Si solo hay un enlace doble en un ácido
graso, está monoinsaturado, mientras que si hay varios enlaces
dobles, está poliinsaturado.
Debido a que las colas de ácidos grasos saturados son rectas, las
moléculas de grasa saturada se pueden empaquetar de manera
compacta, lo que produce grasas sólidas a temperatura ambiente
(tienen un punto de fusión relativamente alto).
En los ácidos grasos cis- insaturados, las colas están dobladas
debido a la presencia de un enlace doble cis. Esto dificulta la
compactación de moléculas de grasa con una o más colas de ácido
graso cis- insaturado, por lo que tienden a estar en estado líquido
a temperatura ambiente (tienen un punto de fusión relativamente
bajo).
Lípidos de membrana: Se debe tomar en cuenta que aunque no tengan
tanta importancia nutricional estos compuestos tales como los
glicerofosfolípidos, los esfingolípidos y el colesterol determinan las
propiedades físicas de las biomembranas, como la fluidez, el transporte
y la señalización.
Ceras: Las ceras conforman otra categoría importante de lípidos a nivel
biológico. La cera cubre las plumas de algunas aves acuáticas y la
superficie de las hojas de algunas plantas: sus propiedades hidrofóbicas
(repelentes de agua) impiden que el agua se adhiera o penetre en la
superficie. Desde el punto de vista de su estructura, las ceras
normalmente contienen largas cadenas de ácidos grasos unidas a
alcoholes mediante enlaces éster, aunque las ceras producidas por
plantas a menudo también tienen carbohidratos sencillos en su
composición.
Esteroides: Los esteroides son otra clase de moléculas lipídicas, se
identifican por su estructura de cuatro anillos fusionados. Aunque a nivel
estructural no se asemejan a otros lípidos, los esteroides se incluyen en
esta categoría porque también son hidrofóbicos e insolubles en agua.
FUNCIONES DE LOS LÍPIDOS
• Reserva energética: Los lípidos, especialmente los triglicéridos,
almacenan energía. Cada gramo de grasa proporciona
aproximadamente 9 kcal, más del doble que los carbohidratos y las
proteínas. Esta energía se utiliza cuando el cuerpo necesita reservas,
como durante el ayuno prolongado.
• Aislante térmico: La grasa subcutánea actúa como un aislante que
mantiene la temperatura corporal constante, protegiendo a los
órganos internos de variaciones extremas de temperatura.
• Protección de órganos: Los lípidos amortiguan y protegen órganos
vitales como el corazón, los riñones y el hígado, actuando como una
especie de colchón que absorbe golpes o traumas físicos.
• Componente estructural: Los lípidos, particularmente los
fosfolípidos, forman parte de la estructura básica de las membranas
celulares, ayudando a mantener su integridad y regulando el paso de
sustancias dentro y fuera de la célula.
• Precursores de moléculas biológicas: Algunos lípidos sirven como
precursores de hormonas y otras moléculas importantes, como los
esteroides (ejemplo: colesterol) y las prostaglandinas, que participan
en la regulación del metabolismo, la respuesta inflamatoria y otros
procesos fisiológicos.
• Transporte de vitaminas liposolubles: Los lípidos facilitan la
absorción, almacenamiento y transporte de vitaminas liposolubles
(A, D, E y K), que son esenciales para varias funciones metabólicas.
• Señalización celular: Algunos lípidos actúan como moléculas de
señalización en procesos intracelulares y extracelulares, regulando
funciones como la proliferación celular, la inflamación y el
metabolismo.
REFERENCIAS
1.
Khan Academy. Lípidos (artículo) | Macromoléculas [Internet]. Khan Academy.
Available from:
https://es.khanacademy.org/science/biology/macromolecules/lipids/a/lipids
2.
Universidad Nacional Autónoma de México. Funciones/Lípidos [Internet]. Portal
Académico del CCH. 2012. Available from:
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ncioneslipidos
3.
L - Proteopedia, life in 3D [Internet]. proteopedia.org. Available from:
https://proteopedia.org/wiki/index.php/L
4.
Hoyos Serrano M. Lípidos: Caracteristicas principales y su metabolismo. Revista de
Actualización Clínica Investiga [Internet]. 2014 Mar [cited 2024 Sep 10]; Available
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37682014000200004&lng=es
Cbohidratos
Los carbohidratos son moléculas biológicas compuestas de carbono,
hidrógeno y oxígeno en una proporción aproximada de un átomo de
carbono (C) por cada molécula de agua (H2O). Esta composición es la
que da su nombre a los carbohidratos: están compuestos de carbono
(carbo-) más agua (-hidrato). Las cadenas de carbohidratos tienen
diferentes longitudes, y los carbohidratos importantes a nivel biológico
pertenecen a tres categorías: monosacáridos, disacáridos y
polisacáridos.
CLASIFICACIÓN
Monosacáridos: Son azúcares simples, de los cuales el más común es la
glucosa. La mayoría de los átomos de oxígeno en los monosacáridos se
encuentra en grupos hidroxilo (OH), pero uno de ellos es parte de un
grupo carbonilo (C=O). La posición del grupo carbonilo (C=O) puede
servir para clasificar los azúcares:
• Si el azúcar tiene un grupo aldehído, o sea, si el carbonilo es el
último de la cadena, se llama aldosa.
• Si el C carbonilo se encuentra dentro de la cadena, o sea, tiene
otros carbonos a ambos lados, forma un grupo cetona y el azúcar
se denomina cetosa.
• Los azúcares también se nombran de acuerdo con el número de
carbonos: algunos de los tipos más comunes son las triosas (tres
carbonos), pentosas (cinco carbonos) y hexosas (seis carbonos).
PRINCIPALES MONOSACÁRIDOS
• Glucosa: también se denomina dextrosa y es el carbohidrato más
importante para el organismo, ya que es su primordial fuente de
energía, se halla en las frutas y en la miel.
• Galactosa: se encuentra en la leche y se produce por la hidrólisis
de la lactosa, también constituye una fuente energética.
• Fructuosa: su sinónimo es levulosa y es considerada el azúcar de
las frutas.
Disacáridos: se forman cuando dos monosacáridos se unen por medio de
una reacción de deshidratación, también conocida como reacción de
condensación o síntesis por deshidratación. En este proceso, el grupo
hidroxilo de un monosacárido se combina con el hidrógeno de otro, libera
una molécula de agua y forma un enlace covalente conocido como
enlace glucosídico.
PRINCIPALES DISACÁRIDOS
• Lactosa: compuesto de glucosa y galactosa y se encuentra de
manera natural en la leche.
• Maltosa: o azúcar de malta, es un disacárido compuesto de dos
moléculas de glucosa.
• Sacarosa: es el azúcar más común, se compone de glucosa y
fructosa.
Oligosacárido: Es la combinación de tres a nueve moléculas de
monosacáridos, unidos mediante enlaces glucosídicos. No tienen la
capacidad de solubilizarse en agua ni tienen sabor dulce. La fuente que
los proporcionan son de origen animal principalmente, y escasamente de
origen vegetal.
En este grupo se incluyen: las maltodextrinas (que se obtienen mediante
hidrólisis parcial del almidón y son muy empleadas como edulcorantes y
modificadores de texturas de productos alimenticios),la maltotriosa y la
rafinosa (constituida por tres glucosas), la estaquiosa (formada por
cuatro) y la verbascosa (compuesta por cinco).
Polisacáridos: Estos azúcares se absorben de forma lenta, por lo tanto el
tiempo de digestión es más prolongado y se comportan como energía de
reserva.
PRINCIPALES POLISACÁRIDOS
• Almidón: Se conoce como fécula, está compuesto de varias
moléculas de glucosa vinculadas por uniones lineales, es el
carbohidrato más abundante en la nutrición y se halla en los
granos de cereales, leguminosas, tubérculos, etc.
• Glucógeno: Un polisacárido que actúa como reserva de hidratos
de carbono en los animales. Su lugar de almacenamiento es el
hígado (como reserva de glucosa) y el tejido muscular (como
combustible para la actividad muscular).
• Celulosa: Está formado por varias hileras o cadenas lineales de
glucosa, se constituyen en el principal polisacárido de sostén
estructural de las plantas.
PRINCIPALES FUNCIONES
• Fuente de energía: Son la principal fuente de energía para el
cuerpo, durante la digestión, se descomponen en glucosa, que es
utilizada por las células para producir energía a través del proceso
de respiración celular. La glucosa es fundamental para el
funcionamiento de órganos como el cerebro y los músculos.
• Reserva de energía: El exceso de glucosa se almacena en forma
de glucógeno en el hígado y los músculos. Este glucógeno puede ser
utilizado cuando el cuerpo necesita energía adicional, como
durante el ejercicio o el ayuno.
• Regulación del metabolismo de grasas y proteínas : ayudan a
evitar que el cuerpo use proteínas o grasas como fuente primaria
de energía. Si hay suficiente glucosa disponible, el cuerpo puede
preservar las proteínas para funciones más esenciales, como la
reparación de tejidos.
• Soporte estructural: Algunos carbohidratos, como la celulosa,
forman parte de la estructura de las plantas y proporcionan fibra
dietética. Aunque el cuerpo humano no puede digerir la fibra, esta
es fundamental para el buen funcionamiento del sistema digestivo.
• Mantenimiento del equilibrio de azúcar en la sangre: ayudan a
regular los niveles de glucosa en la sangre. El consumo adecuado
de carbohidratos de liberación lenta (como los integrales)
mantiene niveles estables de azúcar en la sangre, mientras que los
carbohidratos simples pueden causar picos y caídas bruscas.
• Funciones en el sistema nervioso: La glucosa es la principal fuente
de energía del cerebro y del sistema nervioso central. La falta de
carbohidratos puede afectar la función cognitiva, provocando
fatiga mental o dificultades para concentrarse.
REFERENCIAS
1.
Khan Academy. Carbohidratos [Internet]. Khan Academy. Available from:
https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/chemistry-of-life/properties-
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2.
Mollinedo Patzi MA, Benavides Calderón GL. Carbohidratos. Revista de Actualización
Clínica Investiga [Internet]. 2014 Mar;2133. Available from:
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37682014000200002&script=sci_arttext&tlng=es
Ácidos nucléicos
Los Ácidos Nucleicos son las biomoléculas portadoras de la información
genética. Desde el punto de vista químico, los ácidos nucleicos son
macromoléculas formadas por polímeros lineales de nucleótidos, unidos
por enlaces éster de fosfato.
COMPOSICIÓN
Un nucleótido es la estructura fundamental básica de los ácidos nucleicos
(ARN y ADN). En este sentido, cada molécula de ácido nucleico se
compone de la repetición de un tipo de nucleótidos, compuestos a su vez
cada uno por:
• Pentosa (azúcar): los nucleótidos de ADN y ARN tienen azúcares
ligeramente distintos. La pentosa del ADN es desoxirribosa,
mientras que en el ARN el azúcar es la ribosa. Estas moléculas son
semejantes en estructura, solo con una diferencia: el segundo
carbono de la ribosa tiene un grupo hidroxilo, mientras que el
carbono equivalente en la desoxirribosa tiene un hidrógeno en su
lugar.
• Base nitrogenada: Cada nucleótido en el ADN contiene una de
cuatro posibles bases nitrogenadas: adenina (A), guanina (G)
citosina (C) y timina (T). La adenina y la guanina son purinas, lo
que significa que sus estructuras contienen dos anillos fusionados
de carbono y nitrógeno. En cambio, la citosina y la timina
son pirimidinas y tienen solo un anillo de carbono y nitrógeno. Los
nucleótidos de ARN también pueden contener bases de adenina,
guanina y citosina, pero tienen otra base tipo pirimidina llamada
uracilo (U) en lugar de la timina
Grupo fosfato: deriva del ácido fosfórico.
CLASIFICACIÓN
ADN: En el ácido desoxirribonucleico, o ADN, las cadenas se encuentran
normalmente en una doble hélice, una estructura en la que dos cadenas
emparejadas (complementarias) se unen entre sí. Las dos cadenas de la
hélice corren en direcciones opuestas, lo que significa que el extremo 5′
de una cadena se une al extremo 3′ de su cadena correspondiente. Esto
se conoce como orientación antiparalela y es importante al copiar ADN.
El apareamiento de las bases es sumamente específico: A solo puede
unirse con T y G solo puede unirse con C.
ARN: A diferencia del ADN, el ácido ribonucleico (ARN) generalmente
tiene una sola cadena. El nucleótido de una cadena de ARN tendrá ribosa
(un azúcar de cinco carbonos), una de las cuatro bases nitrogenadas (A,
U, G y C), y un grupo fosfato. Aquí, veremos los cuatro tipos principales
de ARN: el ARN mensajero (ARNm), el ARN ribosomal (ARNr), el ARN de
transferencia (tRNA) y los ARN regulatorios.
• ARNm: es un intermediario entre un gen que codifica proteína y su
producto proteico. Si una célula necesita hacer una proteína en
particular, el gen que codifica la proteína se "activará", lo que
significa que una enzima ARN polimerizante vendrá y hará una
copia de ARN, o transcrito, de la secuencia de ADN del gen. El
transcrito contiene la misma información que la secuencia de ADN
de su gen. Sin embargo, en la molécula de ARN, la base T se
sustituye por U.
• ARNr: es uno de los principales componentes del ribosoma y ayuda
a que el ARNm se una al sitio adecuado para que se pueda leer la
información de su secuencia. Algunos actúan como enzimas, es
decir, ayudan a acelerar reacciones químicas; en este caso,
ayudan a formar los enlaces que unen los aminoácidos para
formar una proteína. Los ARN que funcionan como enzimas se
conocen como ribozimas.
• ARNt: participan en la síntesis de proteínas, pero su trabajo es
servir como acarreadores: llevan aminoácidos al ribosoma para
asegurar que el aminoácido que se agrega a la cadena es el que
especifica el ARNm. Los ARN de transferencia se componen de una
sola cadena de ARN, pero esta contiene segmentos
complementarios que se unen entre sí para formar regiones de
doble cadena.
REFERENCIAS
1.
Ampligen. Ácidos Nucleicos y Nucleótidos del ADN y ARN [Internet]. Ampligen. 2022.
Available from: https://www.ampligen.es/adn-genetica/acidos-nucleicos/
2.
Ácidos nucleicos (artículo) [Internet]. Khan Academy. Available from:
https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/chemistry-of-life/nucleic-acids-
ap/a/nucleic-acids
Proteínas
Las proteínas son biomoléculas formadas básicamente por carbono,
hidrógeno, oxígeno y nitrógeno. Pueden además contener azufre y en
algunos tipos de proteínas, fósforo, hierro, magnesio y cobre entre otros
elementos.
Pueden considerarse polímeros de unas pequeñas moléculas llamadas
aminoácidos y serían, por tanto, los monómeros unidad. La unión de un
bajo número de aminoácidos da lugar a un péptido; si el número de
aminoácidos que forma la molécula no es mayor de 10, se denomina
oligopéptido, si es superior a 10 se llama polipéptido y si el número es
superior a 50 aminoácidos se habla ya de proteína.
A m i n o ác i d o s
Son las unidades básicas que forman las proteínas. Su denominación
responde a la composición química general que presentan, en la que un
grupo amino (-NH2 ) y otro carboxilo o ácido (COOH) se unen a un
carbono α (-C-). Las otras dos valencias de ese carbono quedan
saturadas con un átomo de hidrógeno (-H) y con un grupo químico
variable al que se denomina radical (-R).
CLASIFICACIÓN
Esenciales: son aquellos que el cuerpo humano no puede generar por sí
solo. Esto implica que la única fuente de estos aminoácidos en esos
organismos es la ingesta directa a través de la dieta.
No Esenciales: esta familia de aminoácidos puede ser sintetizada por
nuestro organismo, por lo que no necesitamos ingerirlos mediante una
fuente externa.
Enlace peptídico: Los aminoácidos se encuentran unidos linealmente por
medio de uniones peptídicas. Estas uniones se forman por la reacción de
síntesis (vía deshidratación) entre el grupo carboxilo del primer
aminoácido con el grupo amino del segundo aminoácido. La formación
del enlace peptídico entre dos aminoácidos es un ejemplo de una
reacción de condensación. Dos moléculas se unen mediante un enlace de
tipo covalente CO-NH con la pérdida de una molécula de agua y el
producto de esta unión es un dipéptido.
ESTRUCTURA DE LAS PROTEÍNAS
Estructura primaria: viene determinada por la secuencia de
aminoácidos en la cadena proteica, es decir, el número de aminoácidos
presentes y el orden en que están enlazados Las posibilidades de
estructuración a nivel primario son prácticamente ilimitadas.
Estructura secundaria: es el plegamiento que la cadena polipeptídica
adopta gracias a la formación de puentes de hidrógeno entre los átomos
que forman el enlace peptídico. Los puentes de hidrógeno se establecen
entre los grupos -CO- y -NH- del enlace peptídico (el primero como
aceptor de H, y el segundo como donador de H. De esta forma, la cadena
polipeptídica es capaz de adoptar conformaciones de menor energía
libre, y por tanto, más estables.
Estructura terciaria: a disposición tridimensional de todos los átomos
que componen la proteína, concepto equiparable al de conformación
absoluta en otras moléculas. La estructura terciaria de una proteína es
la responsable directa de sus propiedades biológicas, ya que la
disposición espacial de los distintos grupos funcionales determina su
interacción con los diversos ligandos. Para las proteínas que constan de
una sola cadena polipeptídica (carecen de estructura cuaternaria), la
estructura terciaria es la máxima información estructural que se puede
obtener.
Estructura cuaternaria: Cuando una proteína consta de más de una
cadena polipeptídica, es decir, cuando se trata de una proteína
oligomérica, decimos que tiene estructura cuaternaria.
La estructura cuaternaria debe considerar:
• El número y la naturaleza de las distintas subunidades o
monómeros que integran el oligómero.
• La forma en que se asocian en el espacio para dar lugar al
oligómero.
Deriva de la conjunción de varias cadenas peptídicas que, asociadas,
conforman un multímero, que posee propiedades distintas a la de sus
monómeros componentes. Dichas subunidades se asocian entre sí
mediante interacciones no covalentes, como pueden ser puentes de
hidrógeno, interacciones hidrofóbicas o puentes salinos.
REFERENCIAS
1.
EUFIC. ¿Qué son las proteínas y cuál es su función en el cuerpo?
[Internet]. www.eufic.org. 2019. Available from:
https://www.eufic.org/es/que-contienen-los-alimentos/articulo/que-
son-las-proteinas-y-cual-es-su-funcion-en-el-cuerpo/
2.
Luque V. ESTRUCTURA Y PROPIEDADES DE LAS PROTEÍNAS [Internet].
2009 May. Available from:
https://www.uv.es/tunon/pdf_doc/proteinas_09.pdf
Microscopía
Un microscopio, ya sea simple (una sola lente) o compuesto (lentes
múltiples), es un instrumento que amplifica una imagen y permite ver
más detalles de lo que es posible a simple vista. La función de un
microscopio es la de ampliar una imagen a un nivel en el que la retina
pueda resolver la información que, de otro modo, estaría por debajo de
su límite de resolución.
Microscopio de campo claro: es el descendiente directo de los microscopios
de uso muy difundido en el siglo XIX e iniciaron la primera gran era de la
investigación histológica. Para que una muestra pueda examinarse con
el microscopio de campo claro, debe ser lo suficientemente fina para que
la luz pase a través de ella. Si bien algo de luz es absorbida al atravesar
la muestra, el sistema óptico del microscopio de campo claro no produce
un grado útil de contraste en la muestra no teñida.
Microscopio de contraste de fases: Se utiliza para examinar las células y tejidos
vivos (como las células de cultivo) y también se usa mucho para
examinar cortes semifinos no teñidos (de alrededor de 0,5 μm ) de
material incluido en plástico. Aprovecha las pequeñas diferencias en el
índice de refracción que hay en diferentes partes de una muestra de
células o tejidos. La luz que atraviesa regiones de índice de refracción
relativamente alto (las zonas más densas) se refracta y queda fuera de
fase con respecto al haz de luz que ha pasado por la muestra; capta las
longitudes de onda que están fuera de fase y las dirige a través de una
serie de anillos ópticos en las lentes condensador y objetivo, con lo que
en esencia se elimina la amplitud de la porción del haz refractado
inicialmente y se produce un contraste en la imagen. Las partes oscuras
de la imagen corresponden a las regiones densas de la muestra; las
claras corresponden a regiones menos densas.
Microscopio de campo oscuro: Solo la luz refractada por las estructuras de la
muestra penetra en el objetivo. El microscopio de campo oscuro está
equipado con un condensador especial que ilumina el preparado con
mucha intensidad y de forma oblicua. Así, el campo de visión aparece
como un fondo oscuro en el que las pequeñas partículas en la muestra
que reflejan parte de la luz en el objetivo aparecen brillantes.
El microscopio de campo oscuro es útil en el examen de
autorradiografías, en la que los gránulos de plata revelados aparecen
blancos en un fondo oscuro. En clínica, la microscopía de campo oscuro
se utiliza para la detección de cris- tales de la orina, como los de ácido
úrico y oxalato y en la identificación de bacterias específicas.
Microscopía de fluorescencia: Una molécula que fluoresce emite luz de
longitudes de onda dentro del espectro visible cuando se expone a una
fuente ultravioleta (UV). El microscopio de fluorescencia se utiliza para la
detección de moléculas con fluorescencia natural (autofluorescencia)
como la vitamina A y algunos neurotransmisores. Sin embargo, debido a
que las moléculas auto-fluorescentes no son muchas, la aplicación
principal de este microscopio consiste en examinar la fluorescencia
secundaria, como en la detección de antígenos o anticuerpos en los pro-
cedimientos de tinción inmunocitoquímica.
Microscopía Ultravioleta: La imagen en el microscopio ultravioleta (UV)
depende de la absorción de luz UV por las moléculas en la muestra. La
microscopía UV es útil en la detección de ácidos nucléicos,
específicamente las bases de purina y pirimidina de los nucleótidos.
También es útil para la detección de proteínas que contienen ciertos
aminoácidos. Utilizando longitudes de onda específicas de iluminación,
las mediciones espectrofotométricas UV se hacen por lo general a través
del microscopio UV para determinar de forma cuantitativa la cantidad
de ADN y ARN en las células individuales.
Microscopio de polarización: Es una simple modificación del microscopio
óptico de campo claro en la cual un filtro de polarización, llamado
polarizador, se coloca entre la fuente de luz y la muestra, y un segundo
filtro, llamado analizador, se instala entre la lente objetivo y el
observador. Tanto el polarizador como el analizador pueden rotarse; la
diferencia entre sus ángulos de rotación se utiliza para determinar el
grado por el cual una estructura afecta el haz de luz polarizada.
Microscopia electrónica de transmisión: La óptica del microscopio electrónico
de transmisión es, en principio, similar a la del microscopio óptico
excepto que el MET utiliza un haz de electrones en lugar de un haz de luz.
El principio del microscopio es el siguiente:
Una fuente de electrones (cátodo, cañón de electrones), como un
filamento de tungsteno calentado, emite electrones.
Los electrones son atraídos hacia un ánodo. Una diferencia eléctrica
entre el cátodo y el ánodo imparte a los electrones un voltaje de
aceleración de entre 20 000 y 200 000 voltios, generando el haz de
electrones.
El haz pasa a través de una serie de lentes electromagnéticas que
cumplen la misma función que las lentes de cristal de un microscopio
óptico. La lente condensador moldea y cambia el diámetro del haz de
electrones que alcanza el plano de la muestra. A continuación, el haz que
ha pasado a través de la muestra es enfocado y aumentado por una
lente objetivo para después volver a ser aumentado por una o más de
una lente proyector. La imagen final se ve en una pantalla fluorescente
recubierta de fósforo o se captura en una placa fotográfica. Las partes
de las muestras que han sido atravesadas por los electrones aparecen
claras; las zonas oscuras de la muestra han absorbido o dispersado los
electrones debido a su densidad inherente o debido a la adición de
metales pesados durante la preparación.
Microscopio electrónico de barrido: Para el examen de la mayoría de los
tejidos, la muestra se fija, se deshidrata por desecación de punto crítico,
se cubre con una película de oro-carbono evaporado, se monta en un
soporte de aluminio y se coloca en la cámara para muestras del MEB.
Para tejidos mineralizados, es posible eliminar todos las partes blandas
con removedor y examinar las características estructurales del mineral.
El barrido se consigue con el mismo tipo de exploración que hace recorrer
el haz de electrones sobre la superficie de un tubo de televisión. Los
electrones reflejados desde la superficie (electrones retrodispersos) y los
electrones que son expulsados de la superficie (electrones secundarios)
son recogidos por uno o más detectores y reprocesados para formar una
imagen de alta resolución tridimensional de la superficie de la muestra.
Microscopio de fuerza atómica: En el MFA, una sonda puntiaguda muy fina
(púa), que en su extremo se acerca al tamaño de un solo átomo, explora
la muestra mientras sigue líneas paralelas a lo largo del eje x, repitiendo
la exploración en breves intervalos a lo largo del eje y. La púa fina está
montada en el extremo de un soporte (voladizo) altamente flexible, de
modo que ella desvía el soporte conforme encuentra la “fuerza atómica”
en la superficie de la muestra. La superficie superior del soporte es
reflectora y un haz láser se dirige desde allí hacia a un diodo. Esta
distribución actúa como una “palanca óptica” porque muy pequeñas
desviaciones del soporte se magnifican mucho en el diodo. El MFA puede
funcionar con la punta del soporte tocando la muestra (modo de
contacto) o la púa puede dar golpecitos a través de la superficie (modo
de percusión) muy similar al bastón de una persona ciega.
Cuando la púa sube o baja en el eje z a medida que atraviesa la muestra,
los movimientos se registran en el diodo como movimientos del haz láser
reflejado. Un dispositivo piezoeléctrico debajo de la muestra se activa en
un circuito de retrocontrol sensible con el diodo para subir y bajar de
modo que el haz láser se centra en el diodo. Como la púa se hunde en
una depresión, el dispositivo piezoeléctrico eleva la muestra para
compensar y cuando la púa se eleva sobre una eminencia, el dispositivo
compensa bajando la muestra. La corriente hacia el dispositivo
piezoeléctrico se interpreta como el eje z, que junto con los ejes x e y
presenta la topografía de la muestra con una resolución molecular y, a
veces, atómica.
REFERENCIAS
• Ross MH, Reith EJ. Histologia: Texto y Atlas. New York ; London:
Harper & Row; 1985.
Técnica histológica
Histología [histos = tejidos; logía = ciencia], también llamada anatomía
microscópica, es el estudio científico de las estructuras microscópicas de
los tejidos y órganos del cuerpo. La histología moderna no es sólo una
ciencia descriptiva sino que también incluye muchos aspectos de la
biología molecular y celular, que ayudan a describir la organización y
función celular.
PREPARACIÓN DEL TEJIDO
Fijación: Se obtiene mediante una sustancia química o una mezcla de
sustancias químicas, conserva de forma permanente la estructura del
tejido para tratamientos posteriores. Las muestras deben sumergirse en
el fijador inmediatamente después de extraerse del organismo. La
fijación se utiliza para:
• abolir el metabolismo celular,
• impedir la degradación enzimática de las células y tejidos por la
autólisis (autodigestión),
• destruir microorganismos patógenos tales como bacterias, hongos
o virus
• endurecer el tejido como resultado de la formación de enlaces
cruzados o de la desnaturalización de moléculas proteicas.
El fijador de uso más común es la formalina, una solución acuosa de
formaldehído al 37 %, en diluciones variadas y en combinación con otras
sustancias químicas y amortiguadores (buffers). El formaldehído
conserva la estructura general de la célula y de los componentes
extracelulares al reaccionar con los grupos amino de las proteínas (con
frecuencia los enlaces cruzados de residuos de lisina). Debido a que el
formaldehído no altera su estructura tridimensional de forma
significativa, las proteínas mantienen su capacidad de reaccionar con
anticuerpos específicos.
Para conservar los lípidos neutros, como los de las células adiposas, se
deben utilizar cortes por congelación de tejido fijado en formalina y
colorantes que se disuelvan en grasa; para conservar las estructuras de
la membrana, se utilizan fijadores especiales con metales pesados, como
permanganato y osmio, que se unan a los fosfolípidos. El empleo de
rutina de tetróxido de osmio como fijador en la microscopia electrónica
es la razón principal del excelente estado de conservación de las
membranas en las fotomicrografías electrónicas.
Deshidratación: Después de la fijación la muestra se lava y se deshidrata
en una serie de soluciones alcohólicas de concentración creciente hasta
alcanzar alcohol al 100 %. En el paso siguiente, el aclarado, se utilizan
solventes orgánicos tales como el xileno o tolueno que son miscibles tanto
en alcohol como en parafinas, para extraer el alcohol antes de la infiltra-
ción de la muestra con la parafina fundida.
Inclusión: Para examinar una muestra se requiere de su infiltración con
un medio de inclusión que permita realizar corte muy delgados, por lo
general en el rango de 5 µm a 15 µm (1 micrón [µm] equivale a una
milésima parte de un milímetro [mm]. La muestra se incluye en parafina,
la cual, al enfriarse y endurecerse se empareja para formar un bloque de
tamaño adecuado. Este bloque se coloca en una máquina cortadora
especial, el micrótomo que lo corta en rebanadas finas con una cuchilla
de acero. Los cortes obtenidos se montan sobre portaobjetos de vidrio
utilizando un medio de montaje (pineno o resinas de acrílico) como
adhesivo.
Tinción: Debido a que los cortes en parafina son incoloros, la muestra
todavía no está lista para su examen bajo el microscopio óptico. Para
colorear o teñir los cortes histológicos, la parafina debe disolverse y
extraerse, con xileno o tolueno y los tejidos deben rehidratarse mediante
el uso de una serie de soluciones de alcohol de concentración
decreciente. Después, el tejido sobre el portaobjetos se tiñe con
hematoxilina en agua. Debido a que el colorante de contraste, la eosina,
es más soluble en alcohol que en agua, se vuelve a deshidratar la
muestra a través de una serie de soluciones alcohólicas de concentración
creciente y después se tiñe con eosina en alcohol. Después de la tinción,
la muestra se pasa por xileno o tolueno y se le coloca un medio de
montaje no acuoso antes de cubrirla con un cubreobjetos para obtener
un preparado permanente.
TINCIONES
Tinción vital: es un tipo de técnica de coloración utilizada para teñir
células o tejidos vivos sin dañarlos o matarlos. A diferencia de las
tinciones convencionales que suelen utilizarse en células muertas o
fijadas, las tinciones vitales permiten observar procesos biológicos en
organismos vivos.
Tinción acidófila: se refiere a la capacidad de ciertos componentes
celulares o tisulares de teñirse con colorantes ácidos. En este contexto, el
término "acidófila" proviene de "ácido" (debido a los colorantes
utilizados) y "filia" (afinidad). Las estructuras acidófilas tienen una
afinidad por los colorantes ácidos debido a su carga positiva, lo que
significa que tienden a ser proteínas o estructuras ricas en proteínas.
Estructuras acidófilas comunes:
• Citoplasma: Muchas proteínas del citoplasma tienen afinidad por
colorantes ácidos.
• Músculo: Las fibras musculares tienden a teñirse con eosina debido
a su contenido proteico.
• Colágeno: Las fibras de colágeno también tienden a teñirse
rosadas con la eosina.
Tinción basófila: se refiere a la afinidad de ciertas estructuras celulares por
los colorantes básicos, es decir, sustancias con carga positiva que tiñen
componentes celulares con carga negativa. Las estructuras basófilas
suelen ser aquellas que contienen ácidos nucleicos (como el ADN y el
ARN) o glucosaminoglicanos, que tienen carga negativa.
Estructuras basófilas comunes:
• Núcleo celular: Los núcleos contienen ADN, que es una molécula
ácida, por lo que se tiñen fácilmente con colorantes básicos como
la hematoxilina.
• Retículo endoplasmático rugoso: Contiene una gran cantidad de
ARN en los ribosomas, lo que le da afinidad por los colorantes
básicos.
• Cartílago: Contiene glucosaminoglicanos, que también son
basófilos.
Tinciones especiales: son técnicas de coloración específicas utilizadas para
resaltar componentes celulares o tisulares que no se visualizan
claramente con tinciones estándar, como la hematoxilina-eosina (H&E).
Estas tinciones permiten identificar estructuras específicas, como fibras,
mucinas, lípidos, bacterias, hongos, entre otros, con mayor precisión.
Tinción de PAS (Ácido Periódico de Schiff):
• Resalta: Glucógeno, mucinas, y otras sustancias con
carbohidratos.
• Uso: Identificación de glucógeno en células hepáticas o
mucopolisacáridos en tejidos conectivos.
• Resultado: Colorea de un magenta o rosado intenso las sustancias
que contienen carbohidratos.
Tinción de Tricrómico de Masson:
• Resalta: Fibras de colágeno (azul/verde), músculos (rojo), y
citoplasma.
• Uso: Para diferenciar entre fibras de colágeno y músculo en cortes
de tejido.
• Resultado: El colágeno aparece azul o verde, mientras que el
músculo y el citoplasma aparecen rojos.
Tinción de Gram:
• Resalta: Bacterias Gram-positivas (morado) y Gram-negativas
(rojo).
• Uso: Diferenciar bacterias según la composición de su pared
celular.
• Resultado: Bacterias Gram-positivas se tiñen de morado y las
Gram-negativas de rojo.
Tinción de Azul de Toluidina:
• Resalta: Células y tejidos ricos en ácido nucleico (por
metacromasia).
• Uso: Estudio de mastocitos, cartílago, y tejidos mucosos.
• Resultado: Las estructuras como los mastocitos se tiñen de un azul
violáceo intenso.
REFERENCIAS
• Ross MH, Reith EJ. Histologia: Texto y Atlas. New York; London:
Harper & Row; 1985.