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Clase 3

El documento aborda la fisiología bacteriana, centrándose en el metabolismo, crecimiento y cultivo microbiológico de las bacterias. Se discuten conceptos clave como aerobios, anaerobios, anabolismo y catabolismo, así como las fases del crecimiento bacteriano y su importancia en el diagnóstico microbiológico. También se presentan ejemplos de medios de cultivo y se plantea un caso práctico sobre la proliferación de Escherichia coli.

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Clase 3

El documento aborda la fisiología bacteriana, centrándose en el metabolismo, crecimiento y cultivo microbiológico de las bacterias. Se discuten conceptos clave como aerobios, anaerobios, anabolismo y catabolismo, así como las fases del crecimiento bacteriano y su importancia en el diagnóstico microbiológico. También se presentan ejemplos de medios de cultivo y se plantea un caso práctico sobre la proliferación de Escherichia coli.

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UNIDAD I

SEMANA N° 3

Fisiología bacteriana

Luis Castañeda Peláez


Interés

“En algunos estudios, cuando las bacterias intestinales


fueron eliminadas con antibióticos, los pacientes con
hipertensión vieron una disminución de la presión arterial.”

Pregunta N°1: ¿A nivel de microbiota


intestinal, qué diferencia demostró el estudio
entre hipertensos y sanos?
Pregunta N°2: ¿Por qué cree que las
poblaciones indígenas tienen a tener valores
normales de presión arterial?
Clostridium scindens

video https://www.youtube.com/watch?v=BIULD-Mn4Ss
AGENDA

1. Metabolismo bacteriano
2. Crecimiento bacteriano
3. Métodos e importancia del
cultivo microbiológico
4. Actividad aplicativa
LOGRO DE LA SESIÓN

Al finalizar la sesión, los estudiantes


comparan las fases del crecimiento
bacteriano a través de la curva de
proliferación bacteriana; de forma
lógica, analítica y ordenada.
Descubrimiento

CONCEPTOS CLAVE
• AEROBIO: Un microorganismo capaz de usar oxígeno en
la respiración Ejemplo: Mycobacterium tuberculosis y
Neisseria.

• ANAEROBIO: Un microorganismo que crece en ausencia


de oxígeno. Ejemplo Clostridium

Anaerobios facultativos: pueden crecer en presencia o


tomar
ausencia de oxígeno. Ejemplo: Escherichia coli.

Microaerofilos: sólo pueden crecer con bajas


tensiones de oxígeno porque las altas tensiones son
tóxicas para este tipo de microorganismos (1 a 12% de
O2 en la fase gaseosa). Incluyen especies de
Campylobacter, que ocasionan diarrea y sepsis.
Descubrimiento

CONCEPTOS CLAVE
• ANABOLISMO: La suma total de todas las
reacciones biosintéticas de la célula
• CATABOLISMO: Conjunto de reacciones
bioquímicas que conducen a la producción
de energía utilizable por la célula

• ENZIMA: Una proteína que tiene tomarla


capacidad de acelerar (catalizar) una
reacción química específica
¿Cómo las bacterias tienen la capacidad de alterar tejidos
en una infección?
El metabolismo soporta el crecimiento bacteriano

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METABOLISMO BACTERIANO

Las bacterias toman recursos (nutrientes) del medio


REACCIONES ENERGÉTICAS: Proveen moléculas energéticas. Ejem.: ATP
REACCIONES DE BIOSÍNTESIS: Se generan moléculas precursoras
REACCIONES DE POLIMERIZACIÓN: Se generan moléculas complejas (macromoléculas)
REACCIONES DE ENSAMBLAJE: Se generan estructuras celulares
REACCIONES ENERGÉTICAS
REACCIONES DE BIOSÍNTESIS
Toxinas

Proteína humana
FUNCIONAL

Corynebacterium diphtheriae
Proteína humana
DISFUNCIONAL

Vibrio cholerae
REACCIONES DE POLIMERIZACIÓN
Replicación del ADN

Las QUINOLONAS, inhiben la ADN girasa, una enzima


involucrada en la replicación del ADN. Ej.: Ciprofloxacina
REACCIONES DE ENSAMBLAJE
Síntesis de la pared celular

G M

La PENICILINA evita la formación de enlaces entre moléculas de peptidoglicano


REPRODUCCIÓN Y
CRECIMIENTO BACTERIANO

Blgo-Mblgo. Luis Castañeda Peláez, Mag. en Salud Pública


Cuando el
crecimiento es
seguido de división
de células hay un
Crecimiento bacteriano aumento del número
de células
bacterianas

El crecimiento de una población es el


aumento del número de células como
consecuencia de un crecimiento
individual y posterior división, esto
ocurre de una manera exponencial

La velocidad de crecimiento
exponencial se expresa como el
tiempo degeneración y este se define
como el tiempo que tarda una
población en duplicarse. Los tiempos
de generación varían ampliamente
entre los distintos microorganismos .
CRECIMIENTO BACTERIANO

▪Crecimiento exponencial: Crecimiento de un microorganismo


en que el número de células se duplica en un tiempo determinado
REPRODUCCIÓN Y CRECIMIENTO BACTERIANO

Las formas de reproducción en las bacterias son:

a) Gemación

b) Fragmentación

c) Esporulación

d) Fisión binaria transversal

De todas estas formas de reproducción, la forma más común de


reproducción de las bacterias es la fisión binaria transversal

Blgo-Mblgo. Luis Castañeda Peláez, Mag. en Salud Pública


REPRODUCCIÓN Y CRECIMIENTO BACTERIAN

Fisión binaria transversal:

Es la forma más de
reproducción más importante y
común en las bacterias,
mediante esta reproducción
una bacteria da origen a dos
nuevas bacterias. Este
proceso se inicia con el
alargamiento de la célula se
invagina y se forma el septum
transversum y finalmente la
bacteria se divide en dos
células bacterianas hijas.

Blgo-Mblgo. Luis Castañeda Peláez, Mag. en Salud Pública


Mesosoma

Mesosoma
Blgo-Mblgo. Luis Castañeda Peláez, Mag. en Salud Pública
CRECIMIENTO BACTERIANO

• Incremento en el número de
células bacterianas.

• Cuando una célula se ha


dividido en dos, se dice que
se originado una generación.

• El tiempo que toma la


duplicación celular se
denomina: TIEMPO DE
GENERACIÓN.
𝒈=𝒕 𝒏
Donde: t= tiempo y n= número de
generaciones
CRECIMIENTO BACTERIANO

El crecimiento de una población bacteriana es EXPONENCIAL


Se expresa en la siguiente ecuación:

N = N0 x 2n
Donde N es el número total de células en una población; N0, es el número
inicial de células en una población; y n, es el número de divisiones o
generaciones durante un tiempo.
Ejemplos:
Si N0 = 1, después de 1 división habrán N0 x 2n = 1 x 21 = 2 = N
Si N0 = 1, después de 2 divisiones habrán N0 x 2n = 1 x 22 = 4 = N
Si N0 = 1, después de 3 divisiones habrán N0 x 2n = 1 x 23 = 8 = N
CRECIMIENTO BACTERIANO
CRECIMIENTO BACTERIANO

Caso:

Si en un plato de comida hay 25 células de E.


coli enteropatógenas, ¿cuál será la población
después de 4 horas a temperatura ambiente en
un día de verano?
Tg = 20 minutos
CRECIMIENTO BACTERIANO
Curva de crecimiento

¿Cuál cree Ud. Es el


momento ideal para la
administración de un
antibiótico?
Curva de proliferación bacteriana
a) Fase Lag:

- También llamado fase de adaptación, fase


inicial o fase de retardo.

- En esta fase las células bacterianas están


muy activas sintetizando sus enzimas
necesarias para degradar sustrato y
sintetizando protoplasma propio.

- En esta fase la célula se está adaptando a


las condiciones ambientales (pH,
Temperatura, sustrato y otros).

- En esta fase no hay división de la célula.

Blgo-Mblgo. Luis Castañeda Peláez, Mag. en Salud Pública


Curva de proliferación bacteriana

b) Fase Log:

- También llamada fase logarítmica. En esta


fase las células bacterianas se multiplican
en ritmo constante en forma de progresión
geométrica.

- En condiciones ideales la mortalidad es


nula y la concentración celular total es
igual a la concentración total de células
viables.

- Todas las bacterias son uniformes en


tamaño y en actividad enzimática.

- Depende básicamente de la concentración de


sustrato, pues a mayor concentración de
sustrato mayor fase logarítmica. Al finalizar
esta fase hay carencia de sustrato, acumulación
de productos tóxicos.
Curva de proliferación bacteriana
c. Fase estacionaria o de
equilibrio:

- Los microorganismos no
paralizan sus funciones, sino
que la concentración de células
vivas es igual a la concentración
de células muertas o el índice de
muerte es igual al índice de
reproducción.

- Todo esto es el producto del


agotamiento de los nutrientes o
la acumulación de productos
tóxicos hace que cese el
desarrollo bacteriano.

Blgo-Mblgo. Luis Castañeda Peláez, Mag. en Salud Pública


Curva de proliferación bacteriana

d. Fase de declive o muerte:

- La mortalidad en esta fase se


produce en progresión
geométrica.

- La muerte es por autólisis


bacteriana, la célula se rompe y
sale el contenido protoplasmático
(proteínas, ácidos nucleicos y
otros) y ésta son usados por los
sobrevivientes.

- A esta fase también llamado


crecimiento críptico o canibalismo;
descrito por Ryan (1955); él llegó a
determinar que la supervivencia de un
individuo estaba determinado por el
consumo de 50 individuos
NUTRICIÓN BACTERIANA

NUTRICIÓN: Captación del medio de las sustancias (nutrientes) para crecer


OBJETIVOS: Energética, Biosíntesis
MEDIOS DE CULTIVO

Mezcla de nutrientes que, en concentraciones adecuadas y en condiciones


físicas óptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos.
• Medios líquidos: Caldos. Ejem.: Caldo Lauril Sulfato
• Medios sólidos: Agares. Ejem.: Agar Manitol salado

Agar sangre
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO

Toma de muestra

Cultivo primario - Aislamiento

Ejemplo: Urocultivo
video https://www.youtube.com/watch?v=Ihh8b1Uwvw4
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
IDENTIFICACIÓN DE ESPECIES
Pruebas bioquímicas

Existen baterías bioquímicas predeterminadas en la práctica clínica


Actualidad: Automatización por sistemas. Ejem.: Pruebas API
Experiencia
ESTRUCTURA PPT
TRABAJO COLABORATIVO
“SIEMBRA DE BACTERIAS”

1. Accedemos al laboratorio virtual:


http://learn.chm.msu.edu/vibl/content/streakpla
te/streak_plate/streak_plate.html
2. Anotamos los pasos considerando
procedimientos y tiempos
3. ¿Por qué es útil realizar la técnica de
estriado?
4. ¿Por qué luego de sembrar se incuba a
37°C?

EJEMPLO: UROCULTIVO

video https://www.youtube.com/watch?v=Ihh8b1Uwvw4&t=2s
Aprendizaje
ESTRUCTURA PPTevidenciado
TRABAJO APLICATIVO
1. Completar el cuadro comparativo considerando las características de cada medio de
cultivo propuesto y su utilidad clínica.
2. Determinar el crecimiento de los grupos bacterianos en los medios de cultivo.
3. Referencia: http://learn.chm.msu.edu/vibl/content/differential/index.html
Agar eosina y
Agar Agar tres
Agar azul de Agar manitol
tripticasa de azúcares y
MacConkey metileno salado
Soya (TSA) hierro (TSI)
(EMB)
Utilidad

Color de las
colonias de
Escherichia coli
Color de las
colonias de
Staphylococcus
aureus
Aprendizaje
ESTRUCTURA PPTevidenciado
TRABAJO APLICATIVO
1. Resolver el caso propuesto considerando lo aprendido en clase de forma detallada

A una mujer de 23 años de edad se le inoculan 10 Escherichia


coli en la vejiga durante una relación sexual. Estas células
tienen un intervalo de generación de 20 minutos. Después de
un retraso de 30 minutos, la bacteria entra en la fase
exponencial de proliferación.

1. ¿Cuántas células habrán luego de 3 horas cuando alcance la


fase estacionaria?
2. Grafique la curva de crecimiento tomando en cuenta
tiempo y número de células
ESTRUCTURA PPT
Instrumento
de evaluación

EVALUEMOS LO APRENDIDO
Referencias

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

• Brooks, G., Carroll, K., Butel, J., Morse, S. & Mietzner, T. 2011. Microbiología Médica,
25ª Edición. McGraw Hill Editores.

• Madigan, M., Martinko, J., Bender, K., Buckley, D. & Stahl, D. 2015. Brock Biology of
Microorganisms, 14th Edition. Pearson Education

• Madigan, M., Martinko, J. & Parker, J. 2003. Brock Biología de los Microorganismos,
10ma Edición. Pearson Prentice Hall

• University of Illinois College of Agricultural, Consumer and Environmental Sciences.


(2017, October 3). Gut bacteria metabolism may factor into hypertension.
ScienceDaily. Retrieved March 23, 2020 from
www.sciencedaily.com/releases/2017/10/171003144516.htm

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