TECNOLÓGICO NACIONAL DE MÉXICO

INSTITUTO TECNOLÓGICO SUPERIOR DEL SUR DEL

ESTADO DE YUCATÁN
Organismo Descentralizado del Gobierno del Estado de Yucatán

INGENIERÍA EN DESARROLLO COMUNITARIO

(Practica 1: Preparación de los materiales para su
esterilización)

Microbiología (3AMDC)
Alumnos: OSCAR ULISES GAMA NOVELO (231T0158)
CLAUDIO ARTEMIO CABRERA GARDUÑO (211T0345)
ALEJANDRA JOELY MIS FLORES (231T0231)
BRYAN ROBERTO PALOMINO SEGOVIA (231T0136)
MANUEL DE JESÚS CHAY ANCA (231T0144)
SAIDY SARAÍ VERA CANUL (231T0331)
LUIS BENJAMÍN CHI ACEVEDO (231T0145)
Docente: Dr. Cesar Tucuch
OXKUTZCAB, YUCATÁN

SEPTIEMBRE DE 2024
 INDICE

Página
[Link]ón -------------------------------------------------------------------------- 1
1.1 Control del desarrollo de microorganismos -------------------------------- 1
1.2 Métodos de esterilización en microbiología ------------------------------- 1
1.3 Técnicas de esterilización--------------------------- ------------------------- 2
1.3.1 Calor húmedo ---------------------------------------------------------------- 2
1.3.1 Calor seco -------------------------------------------------------------------- 2
II. Objetivos ---------------------------------------------------------------------------- 3
2.1 General-------------------------------------------------------------------------- 3
2.2 Específico ---------------------------------------------------------------------- 3
III. Materiales y Métodos------------------------------------------------------------- 4
3.1 Materiales----------------------------------------------------------------------- 4
3.2 Métodos------------------------------------------------------------------------ 4
VI. Resultados y discusión------------------------------------------------------------ 8
VII. Conclusión------------------------------------------------------------------------- 10
VIII. Bibliografía----------------------------------------------------------------------- 12

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 I. INTRODUCCIÓN
1.1 Control del desarrollo de microorganismo
El control de microorganismos es un aspecto crítico en diversas áreas, desde la medicina hasta la
industria alimentaria. Comprende la eliminación o inhibición del crecimiento microbiano para
prevenir infecciones y contaminaciones, este control se puede lograr mediante:

Esterilización : La esterilización es definida por la Organización Mundial de la Salud (OMS,

2008) como el “Proceso de saneamiento más alto de letalidad y seguridad cuya finalidad es la
aniquilación de cualquier microorganismo presente en un objeto, sea patógeno o no patógeno
incluidas formas esporuladas, hongos, virus y priones, este término es absoluto ya que se
considera al objeto estéril o no estéril sin rangos intermedios”.
Desinfección: Se eliminan los agentes patógenos reconocidos, pero no necesariamente todas las
formas de vida microbianas. Es un término relativo, donde existen diversos niveles de
desinfección, desde una esterilización química, a una mínima reducción del número de
microorganismos contaminantes.
Asepsia: Es un término que agrupa todos los procesos y las conductas necesarias para llevar a
cabo la manipulación médica libre de agentes patógenos. La asepsia produce la ausencia de todo
germen y de cualquiera de sus formas de resistencia, suprimiendo el aporte de microbios y su
penetración.
1.2 Métodos de esterilización en microbiología
• Físicos: Se clasifican en dos tipos, los de calor y radiaciones. La esterilización por calor es
donde se emplea la temperatura para la obliteración de microoganismos. La esterilización
por calor seco es un proceso utilizado para artículos termoestables de acero inoxidable,
vidrio, cerámica u otros que requieran de sequedad absoluta posterior al procesamiento,
por lo regular se lleva a cabo en intervalos de 160 – 190 °C cuando el objetivo se centra en
esterilizar. El calor implica principalmente la oxidación de todos los componentes vitales
de la célula, incluidas las proteínas, el ácido nucleico y la estructura de la pared celular
(USP, 2019). La esterilización por calor húmedo también se conoce como esterilización
por vapor de agua. Este método utiliza vapor saturado a presión como fuente de calor y
este es responsable de la muerte de los microorganismos vivos debida a la
desnaturalización y coagulación irreparables de importantes moléculas de proteínas, es
decir, enzimas y componentes celulares (Moondra et al., 2018). La esterilización por
radiación es un método eficaz para eliminar microorganismos nocivos mediante el uso de
radiaciones ionizantes. Este proceso se utiliza ampliamente en la industria médica y
alimentaria. Las radiaciones más comunes utilizadas son los rayos gamma, los rayos X y
las radiaciones beta. Este método permite esterilizar productos ya empaquetados, lo que
garantiza la seguridad y fiabilidad de los productos médicos.
• Químicos:

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La esterilización por gaseosos es un método eficaz para eliminar microorganismos de productos
sensibles al calor. Uno de los gases más utilizados es el óxido de etileno (ETO). Este gas es capaz
de penetrar materiales porosos y plásticos termosensibles sin dañarlos.
1.3 Técnicas de esterilización
1.3.1 Calor húmedo
• Pasteurización: proceso de tratamiento térmico que se utiliza para eliminar
microorganismos patógenos y prolongar la vida útil de los alimentos y bebidas. Fue
desarrollado por el científico francés Louis Pasteur en el siglo XIX. El proceso
generalmente implica calentar el líquido o alimento a una temperatura específica durante
un tiempo determinado y luego enfriarlo rápidamente.
• Ebullición: es un fenómeno físico que ocurre cuando un líquido se calienta hasta alcanzar
su punto de ebullición, momento en el cual se transforma en vapor. es el proceso mediante
el cual un líquido se convierte en vapor cuando se calienta a una temperatura a la cual su
presión de vapor iguala la presión atmosférica externa. Durante este proceso, el líquido
forma burbujas de vapor en su interior que ascienden a la superficie y se liberan en la
atmósfera.
• Autoclavado: es un proceso de esterilización que utiliza vapor de agua a alta presión y
temperatura para eliminar microorganismos, incluyendo bacterias, virus y esporas. Este
método es ampliamente utilizado en laboratorios, hospitales, y en la industria para asegurar
que los equipos y materiales estén libres de patógenos. El Autoclavado se basa en la
utilización de vapor saturado a alta presión. El equipo, conocido como autoclave, calienta
el agua para producir vapor que, al alcanzar una presión específica, eleva la temperatura
del vapor a niveles que son capaces de destruir microorganismos. La combinación de alta
temperatura y presión asegura una esterilización eficaz.
1.3.2 Calor seco
• Flameado: es un método directo de esterilización de superficies, en el que el material o
el instrumento se expone a una llama abierta. Este método se basa en la combustión
rápida para destruir los microorganismos en la superficie del objeto.
• Incineración: es un método extremo de esterilización y eliminación de materiales
biológicos y residuos peligrosos. En lugar de desinfectar los objetos, los destruye por
completo a través de la combustión, transformando el material en cenizas y gas.
• Horno Pasteur: es una técnica que toma su nombre del científico Louis Pasteur. Es un
método de esterilización por calor seco que funciona a temperaturas más bajas que los
hornos convencionales de calor seco. No debe confundirse con la pasteurización.

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 II. OBJETIVOS
2.1 General

Aprender las técnicas para la preparación y los principios generales de la esterilización del material
de laboratorio usado en microbiología.

2.2 Específicos
• Conocer los materiales de uso más común para la manipulación de microorganismos.
• Aprender las técnicas de envoltura de los materiales para su esterilización.
• Asimilar la correcta operación de la autoclave para una correcta manipulación.

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 III. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. Materiales
• 11 pipetas serológicas de 1ml.
• 2 pipetas serológicas de 10ml.
• 15 tubos de ensayo de 20ml.
• 1 gradilla.
• 15 cajas Petri de cristal.
• 1 mechero Fisher.
• 1 manguera larga de caucho.
• 1 piceta.
• Algodón
• Cinta adhesiva tipo masking.
• Gasa.
• Papel estraza.
• Tijeras.
• Clips.
• Alcohol al 70%.
• 1 olla de presión (o 1 un autoclave).
• 1 par de guantes de asbesto.
3.2. Métodos

PASO 1.-Primero procedimos a lavar perfectamente todos y cada uno de los materiales que se
vayan a utilizar en el desarrollo de la práctica utilizando, detergente y escobillones.

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PASO 2.- Luego procedimos a cortar el papel estraza, mientras los utensilios se secaban, y así
poner las medidas para las cajas Petri.

PASO 3.- Antes de envolverlo procedimos a secar las cajas Petri para que no se moje el papel
estraza, ya luego procedimos a envolver las cajas Petri con papel estraza y así procedemos. Es
necesario envolver las cajas Petri antes de esterilizarlas para evitar que al término de la
esterilización estén expuestas al medio ambiente y se contaminen de nuevo.

✓ Se corta papel estraza, de tamaño adecuado para el número de cajas que se deseen envolver
y se colocan las cajas en el centro del papel.

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 ✓ Los bordes de los costados se unen al centro cubriendo las cajas que se envuelven.

✓ En la parte superior se unen los bordes de ambos lados y esta unión se dobla a la mitad.

✓ Se hace un segundo doblez, quedando recargado éste sobre las cajas.

✓ Al papel se le presiona a los costados quedando al relieve el volumen de las cajas envueltas
en el papel.

✓ Se doblan las puntas del papel de cada una de las esquinas al centro.

✓ Se le da vuelta al material, quedando el doblez hacia abajo.

✓ Las puntas salientes del papel en los lados de las cajas se doblan hacia arriba y al centro de
las cajas y se les asegura con cinta adhesiva.

PASO 5.- Una vez cortado el algodón y enrollarlo con la gasa procedimos a l la preparación de las
pipetas para su esterilización es sencilla; una vez limpias y secas. Con un clip se le introduce en la
boquilla de succión un filtro de algodón, de forma de que el algodón entre suavemente y sin
romperse con la presión del clip. Este tapón tiene una doble función, una es para evitar que, en un
descuido de succión forzada, por obstrucción de la pipeta.

✓ Se corta una tira de papel de estraza de aproximadamente 3 cm de ancho y 30 cm de largo.

✓ Se dobla el extremo inferior aproximadamente 2 cm.
✓ Se coloca la pipeta con la punta a la mitad del doblez anterior y con un ángulo de
aproximadamente 25 – 30 grados de inclinación con respecto a la posición del papel de
estraza.

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 ✓ Se le hace un segundo doblez, tapando la punta de la pipeta con la porción de papel que
sobresale a la punta de la pipeta.
✓ Se le hace un tercer doblez a la punta de la pipeta que queda en el ángulo de inclinación,
de manera que cubra completamente la punta de la pipeta.
✓ Se da vuelta a la pipeta procurando que el papel vaya envolviéndola en forma de espiral.
✓ Verificar que el enrollado no quede flojo, en caso de estarlo, reafirmar el papel con respecto
a la forma de la pipeta.
✓ En la parte superior, doblar hacia abajo el papel sobresaliente.
✓ Cubrir con cinta adhesiva dicho doblez.

PASO 6.- Cuando terminamos de envolver las cajas Petri, pipetas etc., procedimos a ponerlo en
la autoclave esterilización, ya que es para hervir el agua bajo presión. Es un cilindro de metal,
horizontal o vertical con una tapa también de metal que puede ser cerrada mediante pestillos o
cerrojos sobre una arandela de goma.

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 IV. RESULTADO Y DISCUSIÓN
1. ¿Cuáles son los métodos de esterilización más usados en microbiología? ¿En qué tipo de
materiales se aplica cada uno?

La elección del método de esterilización depende de la naturaleza del objeto a esterilizar, la

sensibilidad del material al agente esterilizante, la penetrabilidad del agente en el material a
esterilizar y el uso posterior del material. Los métodos de esterilización más utilizados en la
microbiología son tres los físicos, los químicos y los mecánicos, se pueden utilizar en distintos
materiales para su esterilización.

• Materiales que se pueden esterilizar por métodos físicos: Vidrio, acero inoxidable,
algunos plásticos resistentes al calor, porcelana, aluminio, Plásticos termolábiles, equipos
médicos.
• Materiales que se pueden esterilizar por métodos químicos: Plásticos, equipos médicos
sensibles al calor, dispositivos electrónicos.
• Materiales que se pueden esterilizar por métodos mecánicos: Líquidos sensibles al
calor, soluciones farmacéuticas, medios de cultivo.
2. Explica cuáles son las diferencias entre los procesos de esterilización, desinfección y
asepsia.

• Esterilización: Proceso que elimina todos los microorganismos, incluidas esporas y

formas resistentes. Puede realizarse mediante calor seco, vapor, radiación o productos
químicos específicos.
• Desinfección: Proceso que elimina la mayoría de microorganismos patógenos, pero no
necesariamente todas las esporas. En sus métodos incluye el uso de químicos como cloro,
alcohol y métodos físicos como la luz ultravioleta. Se aplica en superficies, equipos y
objetos que no requieren una esterilización completa, como mesas, pisos y algunos equipos
médicos.
• Asepsia: Conjunto de practicas que previenen la contaminación por microorganismos. No
es un proceso de eliminación, sino de prevención. Incluye técnicas como lavado de manos,
uso de guantes, mascarillas y batas estériles. Se aplica en procedimientos quirúrgicos,
preparación de medicamentos y cualquier entorno donde se necesite minimizar la presencia
de microorganismos.

3. ¿Cómo se relacionan los procedimientos anteriores con la pasteurización?

La pasteurización, la esterilización, la desinfección y la asepsia son métodos utilizados para

controlar y eliminar microorganismos ya que son casi similares solo por el hecho de eliminar los
microorganismos por medio de temperaturas altas.

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 4. ¿Cómo afecta el calor a los microorganismos describe el principio?

Las altas temperaturas pueden destruir microorganismos al desnaturalizar sus proteínas y alterar
sus membranas celulares.

5. ¿Cuáles son las condiciones óptimas de esterilización por calor húmedo? ¿se pueden
modificar estos parámetros, sin afectar la eficacia de la esterilización? Explica cómo.

Las condiciones que se tiene al esterilizar por calor húmedo son la temperatura y tiempo,
presión, y la calidad del vapor:

• 121°C durante 15 minutos: Este es el estándar más comúnmente utilizado.

• 134°C durante 3 minutos: Utilizado para ciclos más rápidos y también considerado un
método de sobre muerte.
• La presión debe ser suficiente para alcanzar y mantener las temperaturas
mencionadas. Generalmente, esto implica una presión de aproximadamente 15 psi
(libras por pulgada cuadrada) para 121°C.
• El vapor debe ser saturado y libre de aire para asegurar una transferencia de calor
eficiente. La presencia de aire puede actuar como un aislante y reducir la efectividad
del proceso.

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 V. CONCLUSIONES
En esta práctica se comprende que la esterilización de materiales es un proceso crucial para
garantizar que los objetos o sustancias estén libres de microorganismos patógenos, como bacterias,
virus, hongos y esporas. Este proceso es fundamental en diversos campos, como la medicina, la
microbiología, la industria alimentaria y la investigación científica, para prevenir infecciones y
asegurar la calidad y seguridad de los productos.
-Claudio Artemio Cabrera Garduño.
Pues en la esterilización de materiales en el laboratorio, ya que es un proceso esencial que asegura
la eliminación completa de microorganismos, evitando contaminaciones que podrían comprometer
la calidad de los experimentos y la seguridad del entorno de trabajo. Este procedimiento nos dimos
cuenta que trabajar en equipo ayuda de que nos organicemos, e igual antes de entrar al laboratorio
ya debimos leer el procedimiento, para si poder hacer la esterilización más rápido y seguro.
-Saidy Saraí Vera Canul.
Cómo conclusión personal puedo decir que la esterilización en productos o herramientas de trabajo
en el área de prácticas con base a las investigaciones puedo decir que es esencial ya que elimina
bacterias que no queremos en nuestros experimentos con base a la esterilización vemos que existen
diversos tipos de ello gracias a ellos podemos estar seguros de la elaboración de nuevos productos
químicos hablamos sobre la microbiología y como su nombre lo dice sabemos que son compuestos
pequeños y con más razón es necesario hacer este proceso de esterilización.
-Alejandra Joely Mis Flores.
Puedo concluir que, en la elaboración de la práctica, adquirí nuevos conocimientos, como lo es la
importancia de una buena esterilización, los aspectos que engloban a esta. Sin duda esta práctica
me será de ayuda para mis futuras prácticas de laboratorio, ya que, en su elaboración, participe de
manera activa en los pasos para llevarla a cabo y en el transcurso de esta el maestro igualmente
fue corrigiendo nuestros errores para evitar fallos, tanto en su elaboración de esta y como lo serán
en otras, debido que esta práctica la realizaremos más a menudo, más concretamente siempre que
trabajemos en el laboratorio, porque es importante realizar una correcta esterilización debido a que
estaremos trabajando con microorganismos, y es vital que llevemos un buen manejo de las cosas,
para que nuestra trabajo se haga de una forma correcta.
-Manuel de Jesús Chay Anca.
Para hacer no es la primera práctica de laboratorio en la materia de microbiología salió bastante
bien, incluso un poco mejor de lo que yo esperaba. En esta práctica se aprendió lo que es la
esterilización de materiales de laboratorio para su posterior uso en los medios de cultivo y demás
propósitos afines a la materia.

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Se aprendió el procedimiento de manera correcta y con la suficiente técnica para poder realizarla
en posteriores ocasiones de manera satisfactoria y sin romper ningún material. Fue una práctica
bastante lenta por el mismo proceso de esterilización, pero fue interesante y bastante curiosa el por
qué se deben esterilizar todos los materiales a usar en un medio de cultivo y por qué todo el
procedimiento se tiene que hacer con ciertas técnicas para no contaminar nada.
-Oscar Ulises Gama Novelo.
La microbiología tiene una gran importancia en la vida cotidiana, ya que sus aplicaciones se
extienden a diversos ámbitos, como la salud, la industria, los recursos energéticos y la
administración pública. La microbiología es fundamental para la prevención, tratamiento y control
de enfermedades infecciosas.
En la práctica realizada que es la esterilización de los materiales a utilizar me pareció interesante
ya que se aprendió cosas importantes de igual manera las tácticas o formas de cómo se envuelven
los matarías para su esterilización y de igual manera de cómo realizar los tapones con algodón que
nos sirvió para cada uno de los tubos de ensayo ya terminado la envoltura de cada materia asignado,
pero la práctica me pareció muy interesante ya que el docente nos brindó información de la
maquina en la que esterilizó.
-Luis Benjamín Chi Acevedo.
Las técnicas de esterilización por calor varían en función de las necesidades del material a
esterilizar y el contexto en el que se apliquen. El calor seco es ampliamente utilizado en
laboratorios y en la industria para esterilizar materiales resistentes al calor, como metales y vidrios.
El flameado es una técnica rápida y simple, adecuada para herramientas pequeñas de laboratorio.
La incineración, aunque no es reutilizable, es el método más seguro para la eliminación de
desechos peligrosos. El horno Pasteur ofrece una alternativa de calor seco suave para materiales
más delicados. La elección del método dependerá de la naturaleza del material y el tipo de
microorganismos que se necesiten destruir.
-Bryan Roberto Palomino Segovia.

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 VI. BIBLIOGRAFIA
Arreguín, V. & Macías, J.H. (2012). Asepsia, uno de los grandes logros del pensamiento. Revista
digital universitaria, 13(8).
Brown, T. L., LeMay, H. E., Bursten, B. E., & Murphy, C. J. (2017). Chemistry: The Central
Science (14ª ed.). Pearson.
Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de Métodos Ge nerales
(segunda edición). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela.
Cortizas Rey, J. S., & Grandal Fernández, J. MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN. Guía para la
normalización de los procesos en las centrales de esterilización del Servicio Gallego de Salud, 55.
Díaz González, L. F. (2023). Evaluación del efecto de la distribución de carga de artículos textiles
sobre la tasa de letalidad del bioindicador G. Stearothermophilus en el proceso de esterilización
por calor húmedo en un autoclave farmacéutico (Doctoral dissertation, Universidad de San Carlos
de Guatemala).
Hrdalo, J. Fiorentin, J. Schiaffi, A. Portillo, B. Santos, C. Serrano, M. & Zamora, E. (2020).
Asepsia. Cátedra de Cirugía.
Institutodelaguaes. (2024, 18 febrero). Métodos de Esterilización en Microbiología: Guía
Completa para Profesionales y Estudiantes | Instituto del Agua. Instituto del
Agua. [Link]
microbiologiamicrobiologia/
Kelsey, W. R. J. (2012). Principles and Methods of Sterilization in Health Sciences. Charles C.
Thomas Publisher.
Lorenzo Martín, B. (2015). Importancia de la asepsia dentro del ámbito quirúrgico y de la
actuación de enfermería en su consecución y mantenimiento. Universidad de Valladolid Facultad
de Enfermería.
McCormick, B. (2014). Introduction to Chemistry: General, Organic, and Biological. Pearson.
McQuarrie, D. A., & Simon, J. D. (1997). Physical Chemistry: A Molecular Approach. University
Science Books.
Molina, N. B., & Treviño, N. P. (2022). Conceptos clave: Esterilización por calor.
Serrano, M. & Gutiérrez, L.N. (2014). Esterilización, desinfección, antisépticos y desinfectantes.
Revista de actualización clínica investiga, 49.
Brock, T. D. (1988). Biology of Microorganisms. Prentice Hall.

12
Gest, H. (2004). The discovery of microorganisms by Robert Hooke and Antoni van
Leeuwenhoek, Fellows of the Royal Society. Notes and Records of the Royal Society of London,
58(2), 187-201.
Madigan, M. T., Martinko, J. M., Bender, K. S., Buckley, D. H., & Stahl, D. A. (2015). Brock
Biology of Microorganisms (14th ed.). Pearson.
Prescott, L. M., Harley, J. P., & Klein, D. A. (2002). Microbiology (5th ed.). McGraw-Hill.
Tortora, G. J., Funke, B. R., & Case, C. L. (2018). Microbiology: An Introduction (13th ed.).
Pearson.

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