UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERÍA Y CIENCIAS APLICADAS
CARRERA DE INGENIERÍA CIVIL
QUÍMICA DEL AGUA (H)
Tema: Microorganismos Patógenos; Práctica N.º.: 6
Desinfección del agua
Grupo Integrantes:
No.:
2 1. Paredes Diaz Kamilla Juliana.
2. Pinos Jimenez Rommel Fernando.
3. Ramírez Lojano Geovanny Vladimir
Semestre: 8 Paralelo: Cuarto
Docente: Ing. Susana Guzmán Rodríguez Fecha de 15/07/2024
MSc. Entrega:
Resumen
Los microorganismos patógenos son bacterias que pueden provocar
diferentes patologías a personas o animales que los ingieran. Este tipo
de contaminación microbiológica es la causa más común de los brotes
alimentarios, ya sea por intoxicación o por toxiinfección. El uso de
microorganismos bioindicadores de calidad del agua disminuye los
costos y facilita la implementación de medidas eficientes de
tratamiento, control del agua y de enfermedades asociadas a su
transmisión. El objetivo de la revisión fue describir los principales
indicadores microbiológicos empleados para la evaluación del agua
potable. Los resultados permiten considerar como bioindicadores,
además de las bacterias y protozoos establecidos en la norma, algunos
agentes microbianos como virus u otras bacterias y parásitos. Por otro
lado, indican la necesidad de establecer valores de referencia y definir
los microorganismos a emplear con base en evaluaciones específicas de
la situación microbiana del agua en monitoreos de validación, operación
y verificación.
Palabras claves
Microorganismos, toxiinfección, contaminantes, protozoos.
1. Introducción Teórica
El agua potable, definida como “adecuada para el consumo humano
y para todo uso doméstico habitual, incluida la higiene personal”, es
libre de microorganismos causantes de enfermedades. Las posibles
consecuencias de la contaminación microbiana para la salud son
tales que su control debe ser objetivo primordial y nunca debe
comprometerse [1].
La presencia o aumento de bacterias, parásitos, virus y hongos en el
agua surge usualmente por efecto directo o indirecto de cambios en
el medio ambiente y en la población tales como urbanización no
controlada, crecimiento industrial, pobreza, ocupación de regiones
antes deshabitadas, y la disposición inadecuada de excretas
humanas y animales. Los cambios relacionados con las actividades
antropogénicas se reflejan directamente en el entorno y en el
recurso hídrico [2].
Es importante conocer los agentes microbianos patógenos y no
patógenos presentes en el agua para definir indicadores
microbiológicos de calidad, cuyo uso simplifica las actividades de
campo y laboratorio y son un principio de aceptación universal en la
evaluación de la seguridad microbiana de los sistemas de
abastecimiento de agua [3].
2. Objetivos
2.1. Identificar las condiciones para mejorar la calidad y
tratamiento del agua.
2.2. Identificación y cuantificación de los microorganismos
patógenos que crecen en un determinado medio de cultivo.
2.3. Evaluar los resultados que obtenemos después de 24 y 48
horas de haber dejado nuestras muestras en la incubadora a
34,5 °C.
3. Datos de la Muestra
Lugar de muestreo Quito, Sector Chillogallo
Tipo de fuente Fuente superficial, Quebrada Río Grande
Temperatura del agua al
11°C
realizar el muestreo
Temperatura de ambiente 13°C
Fecha y hora del muestreo Domingo, 7 de Julio del 2024, 7:30 pm
Condiciones del transporte de
Recipiente de muestra de orina y gel refrigerante
la muestra
Nombre del muestreador Pinos Jimenez Rommel Fernando
Tab. 1. Equipos
4. Equipos y Materiales
4.1. Equipos
Equipos Capacidad Apreciación
Autoclave 121°C – 30lb NTA
Incubadora con circulación de aire caliente 70 °C A: ± 0.2 °C
Contador de colonias con lente de aumento NTC NTA
Termómetro de mercurio 50°C A: ± 1 °C
Estufa 300°C A: ± 1 °C
Tab. 2. Equipos
4.2. Materiales
Cantidad Nombre Capacidad Apreciación
3 Cajas Petri NTC NTA
3 Tubos de ensayo NTC NTA
1 Pipeta 1 ml A ± 0.01 ml
1 Pipeta 5 ml A ± 0.05 ml
1 Pipeta 2 ml A ± 0.02 ml
Tab. 3. Materiales de vidrio
Cantidad Nombre Capacidad Apreciación
3 Mecheros NTC NTA
3 Cajas metálicas NTC NTA
Tab. 4. Materiales de metal
Cantidad Nombre Capacidad Apreciación
1 Recipiente de muestra 120 ml NTA
Tab. 5. Materiales de plástico
Cantidad Nombre Capacidad Apreciación
1 Rollo de papel toalla NTC NTA
1 Par de guantes de NTC NTA
manejo
1 Mascarilla KN95 NTC NTA
1 Lápiz de cera NTC NTA
Tab. 6. Materiales adicionales
5. Reactivos
No Nombre del reactivo Fórmula química Cantidad Concentración
.
1 Agar nutritivo C14H24O9 10 ml/tubo 1-1.5 %
Tab. 7. Reactivos
No Nombre de la Fórmula química Cantidad Concentración
. sustancia
1 Alcohol antiséptico C2H6O NTC NA
2 Alcohol industrial C2H6O NTC NA
3 Agua (Tesalia) H2O NTC NA
Tab. 8. Sustancias
6. Procedimiento
6.1 Recolección de la muestra para el análisis microbiológico
Tab. 9. Recolección de la muestra de agua de la Quebrada Río
Grande, Sector Chillogallo
Ilustración 1: Muestra Ilustración 2:
recolectada y tapada Determinación del pH de la
dejando un poco de aire. muestra recolectada.
Realizado por: Grupo 2, julio 2024
6.2. Cultivo de los microrganismos
Tab. 10. Sembrado de la muestra.
Ilustración 3: Desinfección del área Ilustración 4: Preparación de los
de trabajo con alcohol. instrumentos mecheros, placas Petri,
muestra y vaso de excesos.
Ilustración 5: Identificación de la Ilustración 6: Retiro del autoclave los
placa, esterilización de la pipeta y tubos con agar, esterilización del
suministro de la muestra en la placa. tubo con ayuda del mechero.
Ilustración 7: Se suministra el agar Ilustración 8: Una vez sembrada la
en la caja Petri y se mezcla con la muestra se deja enfriar para
muestra. transportarla a la incubadora.
Realizado por: Grupo 2, julio 2024
6.3. Conteo microbiológico de cada muestra de siembra a las
24 h.
Tab.11. Resultados de la siembra pasadas las 24 h
Ilustración 9: Limpieza Ilustración 10: Limpieza Ilustración 11. Colocar
del equipo contador de de la base de la placa la placa Petri en el
colonias. Petri. contador de colonias.
Ilustración 12: Vista del Ilustración 13: Vista del Ilustración 14: Vista del
cultivo de 0.1 ml. 24 h cultivo de 1 ml. 24 h con cultivo de 10 ml. 24 h
con luz natural luz natural con luz natural
Con luz eléctrica Con luz eléctrica
Con luz eléctrica
Realizado por: Grupo 2, julio 2024
6.4. Conteo microbiológico de cada muestra de siembra a las
48 h.
Tab.12. Resultados de la siembra pasadas las 48 h
Al igual que para la medición de colonias pasadas las 24 horas se debe
realizar los mismos pasos previos para en conteo de colonias a las 48 horas
como es la limpieza del equipo contador de colonias y de las bases de la
placa Petri mostradas en las ilustraciones anteriores.
Ilustración 15: Vista del Ilustración 16: Vista del Ilustración 17: Vista
cultivo de 0.1 ml. 48 h cultivo de 1 ml. 48 h del cultivo de 10 ml.
48 h
Con luz eléctrica Con luz eléctrica Con luz eléctrica
Realizado por: Grupo 2, julio 2024
7. Resultados
7.1. Muestra de agua (Tesalia)
7.1.1. Martes 8/07/24
Número Número Cantida
de de d
Colonia Moho Levadura Promedio
cuadros cuadros siembra UFC/ml
s s s UFC/ml
pequeño grande
ml
s s
n.c n.c 0.1 2 200
n.c n.c 1.0 3 1 3 4
n.c n.c 10.0 35 4
Tab. 13. Cultivo muestra a las 24 horas
7.1.2. Miércoles 9/07/24
Número Número Cantida Colonia Moho Levadura UFC/ml Promedio
de de d
cuadros cuadros siembra
pequeño grande s s s UFC/ml
ml
s s
n.c n.c 0.1 2 1
n.c n.c 1.0 13 1 8
n.c 57 10.0 285 6
Tab. 14. Cultivo muestra a las 48 horas
7.2. Muestra de agua (Quebrada Río Grande)
7.2.1. Martes 8/07/24
Número Número Cantida
de de d
Colonia Moho Levadura Promedio
cuadros cuadros siembra UFC/ml
s s s UFC/ml
pequeño grande
ml
s s
n.c n.c 0.1 62 NA 1 620
n.c n.c 1.0 178 NA 5 178 108
n.c 52 10.0 364 NA 8 37
Tab. 15. Cultivo muestra a las 24 horas
7.2.2. Miércoles 9/07/24
Número Número Cantida
de de d
Colonia Moho Levadura Promedio
cuadros cuadros siembra UFC/ml
s s s UFC/ml
pequeño grande
ml
s s
n.c n.c 0.1 78 1 1 780
n.c n.c 1.0 213 3 7 213 130
n.c 58 10.0 464 2 3 47
Tab. 16. Cultivo muestra a las 48 horas
7. Cálculos Tipo
Unidades formadoras de colonias
UFC Conteo
=
ml siembra
Donde:
UFC → Unidad formadora de colonias.
Conteo → Conteo de las colonias de la muestra.
Siembra → Volumen de la siembra (ml) .
UFC 2
=
ml 0.1
UFC UFC
=20
ml ml
Unidades formadoras de colonias
UFC Conteo∗¿ C
=
ml siembra
Donde:
UFC → Unidad formadora de colonias.
Conteo → Conteo de las colonias de la muestra.
Siembra → Volumen de la siembra (ml) .
¿ C → Numero de cuadros.
UFC 28∗58
=
ml 0.1
UFC UFC
=464
ml ml
Reporte final de UFC
C 1+C 2+Cn
n
Donde:
C → Unidades formadoras de colonias más cercanas entre sí.
C 1+C 2+Cn
n
213+47 UFC
=130
2 ml
8. Análisis de Resultados
Paredes Diaz Kamilla Juliana
Pudimos observar que los resultados variaron bastante con los
demás grupos el tener diferentes muestras. En nuestra muestra
obtuvimos varios restos de colonias de baterías, levaduras, moho
y hasta restos de coliformes fecales.
Con respecto a la muestra del laboratorio pudimos observas que
por más de ser agua para el consumo humano constaba con
bacterias, ya sea que estén dentro del botellón por una mala
limpieza o debidas a la manipulación de tal muestra.
La cantidad de oxígeno gaseoso disuelto en el agua es de 9.7
mg/l, indicador del grado de contaminación orgánica, de la tasa
de degradación de sustancias orgánicas e inorgánicas
susceptibles de oxidarse.
Pinos Jimenez Rommel Fernando
Al analizar los resultados de la tabla 12 de la muestra de la
Quebrada Rio grande se obtiene un valor promedio de 130
UFC/ml, lo que indica una contaminación bacteriana significativa y
que el agua no es apta para el consumo humano.
En la tabla 13 de resultados se evidencian levaduras
pertenecientes a los siembres 0.1,1.0 y 10 con valores de 2, 3 y
35 respectivamente, indicando que la presencia de levaduras en
el agua potable puede indicar contaminación por hongos o mohos
en el suministro de agua, lo que puede ser una señal de
problemas ambientales o de tratamiento de aguas residuales en
la fuente. En cualquier caso, la presencia de levaduras en el agua
potable requiere una evaluación cuidadosa y una posible
corrección, para garantizar la seguridad del suministro de agua
potable para las personas que la consumen.
Ramírez Lojano Geovanny Vladimir
Realizando una comparación entre los resultados de colonias
obtenidos de la muestra de la quebrada Río grande y la muestra
de agua (tesalia) a las 48 horas de control, se puede evidenciar
una gran diferencia ya que en la primera muestra de agua se
tiene un promedio de 130 [UFC/ml] mientras que en la segunda
arroja un valor de 8 [UFC/ml]. La OMS (Organización Mundial de la
Salud) recomienda valores inferiores a 100 [UFC/ml] para
establecer que el agua potable es segura, por lo que la muestra
de agua de la quebrada Río Grande estudiada a las 48 horas de
control está por encima del rango recomendado.
En la tabla 16 de resultados se evidencian levaduras
pertenecientes a las siembras 0.1,1.0 y 10 con valores de 1,7 y 3
respectivamente, evidencian la presencia de levaduras en dicha
muestra y se infiere que existe una considerable cantidad de
mohos y hongos, lo cual no es recomendable para el riego y peor
aún para el consumo humano.
9. Conclusiones
Paredes Diaz Kamilla Juliana
El monitoreo de los organismos presentes en el agua para
consumo humano es irreal por la diversidad de patógenos que se
sabe que hay en las fuentes de abastecimiento.
Nos pudimos dar cuenta de que muchos patógenos son difíciles y
costosos de cultivar e identificar y tienen una distribución
irregular o bajas concentraciones en el medio ambiente.
Logramos identificar y cuantificar los microorganismos que fueron
creciendo durante las 24 y 48 horas de estudio.
Pinos Jimenez Rommel Fernando
La presencia de levaduras y obtener un valor de unidades
formadoras de colonia UFC, en la muestra de agua (tesalia), no
indica que esta no es totalmente segura para el consumo humano
y que existe una fuente de posible contaminación.
La variación de la muestra de la quebrada Río grande muestra
una gran variación en el transcurso de 24 horas a 48 horas, este
incremento en el recuento de UFC/ml sugiere la presencia de
microorganismo que puede tener un tiempo de generación más
largo.
Ramírez Lojano Geovanny Vladimir
El análisis microbiológico de aguas es una práctica importante y
necesaria para asegurar la calidad del agua potable. La técnica de
conteo normal en placa es una de las metodologías más utilizadas
en esta área, ya que permite detectar y cuantificar la presencia
de microorganismos en el agua. Pero hay que considerar que esta
técnica tiene limitaciones y no puede detectar los
microorganismos del agua. Además, es fundamental seguir
estrictamente los protocolos y medidas de seguridad establecidos
para evitar la contaminación cruzada y asegurar la integridad de
los resultados en el transcurso de 24 horas a 48 horas.
El ensayo se basa en contar el número de colonias capaces de
crecer en una placa de medio nutritivo, transcurrido un
determinado tiempo de incubación, el ensayo sólo nos indica la
cantidad de microorganismos heterótrofos que hay en la muestra
de agua analizada. NO IDENTIFICA a un microorganismo concreto,
sin embargo, según el número de colonias encontradas en las
muestras de agua ensayada se puede obtener un valor
cuantitativo y poder determinar la calidad de la muestra que se
está analizando, además con este método se puede determinar
de manera cuantitativa varios tipos de microorganismos
indicadores es decir que permitan conocer sobre la calidad
sanitaria del producto analizado, indicando además las
condiciones higiénicas del agua y la forma como fueron
manipulados durante su ensayo.
10. Recomendaciones
Paredes Diaz Kamilla Juliana
Se debe tener cuidado con las muestras, ya que en cuestión de
tiempo se pueden llenas de bacterias del ambiente y alterar los
resultados.
Es recomendable cuidar la limpieza antes, durante y después de
la práctica de laboratorio ya que estamos tratando con colonias
de bacterias que puedes ser dañinas en nuestra salud.
Es recomendable tomarse el tiempo para contar las colonias,
levadoras y moho para una obtención adecuada de resultados.
Pinos Jimenez Rommel Fernando
La cloración es uno de los métodos de desinfección más antiguos
y ampliamente utilizados para el tratamiento de agua potable.
Consiste en agregar cloro al agua, ya sea en forma de gas,
hipoclorito de sodio o hipoclorito de calcio. El cloro actúa como un
poderoso oxidante, destruyendo una amplia gama de
microorganismos patógenos. Además de su acción desinfectante,
el cloro residual proporciona una barrera protectora contra la
recontaminación en la red de distribución.
La ozonización es un proceso de desinfección avanzado que utiliza
el ozono, un gas altamente oxidante, para eliminar
microorganismos patógenos. El ozono es mucho más eficaz que el
cloro para inactivar virus y bacterias, y no deja subproductos
tóxicos. Además, mejora el sabor, el olor y la claridad del agua.
Ramírez Lojano Geovanny Vladimir
El manejo adecuado de los instrumentos de laboratorio es crucial
para el éxito de la experimentación. Al utilizar una pipeta, es
importante asegurarse de que la punta no se contamine para
mantener la integridad de la muestra. El suministro preciso de la
muestra y el agar a la placa de Petri es esencial para un óptimo
cultivo, pero es importante hacerlo sin abrir completamente la
tapa.
Es recomendable tener en consideración realizar el conteo de
colonias en las placas con cuidado y precisión, para obtener
resultados precisos y confiables.
11.Referencias Bibliográficas
[1] Organización Mundial de la Salud. Guidelines for Drinking-water
Quality [Internet]. Geneva; 2011. 564 p. Disponible en: http://apps.
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[2] Núñez N, Fraile I, Lizarazu J. Microorganismos patógenos del
agua. Estudio de Molinao Erreka. Meridies [Revista en Internet]
2009; (13):69–76. Disponible en: http://www.laanunciataikerketa.
Com/trabajos/microorganismos/in.html.
[3] Marchand EO. Microorganismos indicadores de la calidad de
agua de consumo humano en Lima Metropolitana [Tesis en Internet].
Universidad Nacional Mayor de San Marcos; 2002. [Acceso 9 de
octubre de 2015]. Disponible en: http://sisbib.unmsm.edu.pe/
bibvirtual/tesis/basic/marchand_p_e/anteced.htm.
[4] Abellán, M. (2018). La desinfección en la regeneración de
efluentes depurados. XXVI Curso sobre tratamiento de aguas
residuales y explotación de estaciones depuradoras. CEDEX. Madrid,
19-30 noviembre 2018.
12. Anexos y Material Complementario
ILUSTRACION 18: Norma INEN 1108
Tab 17. Principales microorganismos patógenos. [4]
Tab 18. Controles de validación de las aguas. [4]
Tab 19. Concentraciones promedio de los indicadores en aguas residuales urbanas. [4]
