FACULTAD DE CIENCIAS APLICADAS A LA INDUSTRIA
TEMA: MOHOS: Características- microcultivo
Estructuras Reproductoras.
Clasificación e identificación.
Método para la observación de hongos filamentosos.
Cultivo en bloque de agar sobre portaobjeto.
Hongos Filamentosos:
Caracteres morfológicos:
Hifas y micelio
Estructuras reproductoras; La reproducción se realiza por medio
de esporas asexuales y/o sexuales.
Estructuras sexuales: a los hongos que se reproducen por este tipo de
estructuras se los denomina “perfectos”; se dividen en Oomycetes y
Zygomycetes si no son septados o Ascomycetes y Basidiomycetes si son
septados.
Esporas asexuales:
Conidios crecen hifas (conidióforos) generalmente no incluidos
en ningún receptáculo.
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Artrosporas u oidios: se forman por fragmentación una hifa cuyas
células se convierten en artrospora
Esporangiosporas: se encuentran en receptáculos llamados esporangios
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Clasificación e Identificación
Se realiza según los siguientes criterios;
1. Que las hifas sean septadas o no
2. Color del micelio
3. Clase de esporas sexuales o asexuales
4. Características de las cabezuelas de esporas (tamaño, color, forma y localización).
5. Aspecto de esporangióforos o conidióforos
6. Presencia de estructuras especiales.
MÉTODO DE IDENTIFICACIÓN
Los hongos filamentosos se diferencian por sus características morfológicas y
culturales, de forma que hay que hay que utilizar métodos de cultivo y de
observación que eviten la distorsión de las estructuras llevan las esporas.
Además, la composición del medio sobre el cual se ha el desarrollado el hongo
tiene influencia sobre el aspecto de las colonias y sobre el desarrollo las
estructuras aéreas, por lo tanto, la identificación , es aconsejable hacerlos
crecer sobre gran variedad de medios que puede ser: Agar de malta, Agar
Czapex- Dox, papa-dextrosa, Agar papa- zanahoria dextrosasa, de Davis, Agar
Y.G.C.,
Las características morfológicas, a veces pueden determinarse en
preparaciones frescas hechas con cultivos en del siguiente modo: se coloca
sobre un portaobjeto una gota de Lactofenol azul de algodón o de Lactofenol
ácido pícrico (no se emplea agua ya que muchos mohos la burbujas de aire en
la preparación) y deposita una pequeña porción de tomada con ansa de y se
coloca cubreobjeto evitando que queden burbujas de aire,
Preparacion del Lactofenol (para preparaciones en fresco de mohos)
Ácido Láctico 100 ml
Fenol 100 g
Glicerina 200 ml
Agua 100 ml
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Se disuelve el fenol en el agua, sin calentar, luego se añade la glicerina y el ácido láctico.
Preparacion del Lactofenol -azul de algodón (para preparaciones en fresco y para
tinciones de mohos)
Solución saturada azul de algodón (azul anilina soluble).10 ml
Glicerina.........................................................................10 ml
Agua............................................................................... 80 ml
Se mezclan partes con la solución de Lactofenol.
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Con mucha frecuencia tiene lugar en estas preparaciones enormes distorsiones
de las estructuras esporulantes, desprendiéndose la mayoría de las esporas. Si
esto impide la identificación, deben utilizarse los cultivos sobre portaobjetos.
Cultivo en Bloque de Agar Sobre PORTAOBJETO
Material necesario
Agar extracto de malta (u otro para moho)
Placas de Petri
Varilla de vidrio en "Ü'
Papel de filtro
Glicerina al 20 %
Cuchillo o elemento cortante.1
Hongo problema
Cubreobjeto estéril1 (mayor tamaño que el bloque)
Lactofenol- azul de algodón. Ansa
en punta
TÉCNICA
Se vierte el medio en una placa de Petri estéril, llegar casi al borde de la
misma, y se deja solidificar. Se esteriliza otra de Petri que contenga los
siguientes elementos: un disco de papel de filtro, la varilla en "U" y el
portaobjeto. Después de la esterilización se añade asépticamente sobre el
papel de filtro unos mililitros de solución de Glicerina al 20 % para evitar que se
seque el cultivo durante la incubación. Asépticamente se corta un bloque de 1
cm del medio solidificado y se coloca sobre el portaobjeto. Se inoculan con el
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hongo problema las cuatro superficies laterales del agar y coloca sobre él, el
cubreobjeto estéril, desengrasado con alcohol. Incubar luego a temperatura de
25-28 0
C.
OBSERVACION
Luego de 48 hs o más, dependiendo del tiempo de crecimiento del hongo,
observar al microscopio con objetivos de aumento (5x, 10x). Cuando se
necesite estudiar, por ej. la morfología de las esporas u otra estructura se
puede emplear un aumento mayor.
Anotar y dibujar todo lo observado, teniendo en cuanta la clave la identificación
de mohos. se puede utilizar la bibliografía disponible para la identificación del
género y la especie.
A continuación, en el siguiente se presentan las características morfológicas
más importantes de los principales mohos que intervienen en la
descomposición de alimentos y en la industria, especialmente alimentaria.
Talo. Es la porción vegetativa de desarrollo activo de un hongo
Hifa: Porción filiforme o filamento individual, varios de los cuales forman el talo.
Micelio: Es una red o masa de hifas ramificadas.
Septa ( sing. septum ) tabiques. Particiones transversas que dividen
una hifa para formar cadenas de células cilíndricas.
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Husos. Estructuras terminales, alargadas, da paredes gruesas, por
lo común tabicadas, de las cuales se desarrollan las clamidosporas
Estolón. Una rama del micelio que se extiende hacia afuera, dando lugar
al cuerpo de una nueva planta donde toma contacto con el substrato.
Rizoides. Ramas a lo largo de los estolones a la manera de las
raices, de las plantas.
Espirales. Arrollamientos terminales en las hifas, encontrados en algunas especies.
Cuerpos pectíneos. Estructuras en forma de peines formadas por algunos hongos.
Esporas. Células diferenciadas para la reproducción. Se separan del talo,
germinan después de un tiempo y producen un nuevo talo.
Esterigma. Un corto tallo que lleva cadenas de conidios y se
encuentra en Aspergillus.
Conidióforo. Una hifa que porta una espora o un grupo de esporas.
Coronio. Grupo de quc se presentan en racimos.
Vesícula. El extremo ensanchado de una hifa sobre el cual hay grupos de esporas.
Esporangio. Un saco situado en el extremo de una hifa. que contiene
un número indefinido de esporas asexuales
Esporangiosforo. Una hifa que tiene un esporangio
Basidio. Un tallo especial en forma de maza que sostiene basidiosporas.
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Breve descripción de los Géneros mencionados
SYNCEPHALASTRUM:
Posee un micelio no septado formado por hifas
de gran diámetro. Los esporangióforos, que
son generalmente ramificados, pero con las
ramificaciones no cortadas por tabiques, están
hinchados en su terminación. Cada
hinchamiento terminal termina en un cierto
número de esporangios cilíndricos, cada uno
de los cuales contiene una cadena de esporas.
Las colonias son al principio blancas, pero
después se toman de color gris hasta negro,
como resultado de la producción de
esporangios que son negros.
RHlZOPUS:
Hifas no septadas de gran diámetro. El
crecimiento en cultivos sólidos es muy rápido
porque se propaga por medio de estolones. Donde
un estolón toca el medio, se desarrollan rizoides
bastantes gruesos que penetran en el medio y a
partir de este nudo enraizado se desarrollan los
esporangióforos. Cada esporangióforo fleva en el
extremo un esporangio esférico negro, los cuales
se pueden a simple vista como pequeñas
cabecitas negras. La especie más común en los
alimentos es el Rhizopus nigricans, especialmente
en los productos panadería
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THAMNIDIUM
Cada esporangióforo largo termina en
un esporangio globoso con numerosas
[Link] esporangióforos cortos
terminan en pequeños esporangióforos
conteniendo cada uno de 14 esporas.
Sobre medios de cultivo sólidos el
micelio es laxo y algodonoso. Al
principio es de color gris claro y se va
oscureciendo luego como resultado de
la producción de esporangios y
esporangioforos. Este hongo es común
en carnes mantenidas en refrigeración.
MUCOR:
Hifas no septadas y de gran diámetro. Los
esporangióforos son erectos, ramificados o
no, con un solo esporangio globoso que
contiene un gran número de esporas
esféricas o elipsoidales. Algunas especies
pueden formar clamidosporas. Crece sobre
medio sólido formando un micelio aéreo,
laxo, algodonoso, blanco al principio y
oscuro cuando se producen los esporangios,
estos son visibles a simple vista como
cabezas de alfiler negras o coloreadas.
A l g u n a s especies no producen, al
principio micelio blanco o gris, sino amarillo,
anaranjado, azulado; los esporangios pueden
ser amarillo o anaranjado. Es un organismo
habitante común del suelo y por ello aparece
con frecuencia como contaminante de una
gran variedad de alimentos, como en la
elaboración de otros: en e! proceso de
sacarificación del almidón, maduración de
ciertos quesos, etc.
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SPOROTRICHUM:
No se forman conidióforos propiamente
dichos. Los conidios nacen sobre
proyecciones muy cortas que se forman al
final de las hifas. Los conidios pueden ser
esféricos u ovalados, incoloros o vivamente
coloreados y transparentes.
Las colonias pueden ser blancas, grises,
amarillas, verdes, rosas o rojas, dependiendo
de las especies. Cuando los conidios
maduran, pasan de ser aterciopelados a
pulverulentos. El micelio está muy
comprimido contra la superficie del medio. S.
carnis es común en carnes almacenadas en
refrigeración.
BOTRITIS:
Los conidióforos están ramificados de forma
irregular y las células apicales con frecuencia
aumentan de tamaño. Los conidios nacen aislados
sobre cortos esterigmas, pero la posición y número
de esterigmas hacen. que los conidios queden
dispuestos en agrupaciones en forma de racimos.
Botritis cinerea, es un organismo saprófito o parásito
de plantas, produce el moho gris en muchas frutas
y verduras alteradas-
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Microbiología de los
Alimentos
NEUROSPORA (MONILIA)-.
Los conidios aparecen en cadenas sencillas o
ramificadas, siendo la gemación de los conidios, la
causa de la ramificación. La especie más
importante es Neurospora sitophila, conocida
comúnmente como "hongo rojo del pan"; de color
rosa y de escasa consistencia, se desarrolla
también sobre los bagazos de la caña de azúcar y
otros alimentos. La forma perfecta o
ascosporógena rara vez se observa..
ASPERGILLUS:
Los conidios no son tabicados y surgen de células
especializadas de las hifas, las cuales tienen una
gruesa pared celular. Cada conidióforo termina en
un gran abultamiento elipsoidal semiesférico o
esférico que lleva fiálides en el ápice o bien en
toda su superficie. Las colonias pueden ser de una
gran variedad de colores.
Entre los más importantes Aspergilius están los del grupo
A. glaucus, osmófilo, capaz de alterar productos
con elevadas concentraciones de azúcares, como
por ejemplo las mermeladas. El grupo de A. níger
es muy común y como su nombre lo indica las
cabezas son negras o de color marrón oscuro. La
vesícula esférica lleva fiálidos en toda su
superficie dando lugar a una cabeza de conidio en
forma de penacho.
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SCOPULARlOPSlS:
Los conidios son sumamente característicos
siendo esferas truncadas con un anille basal
engrosado en torno a la zona truncada. La pared
del conidio esConidio áspera y espinosa. Los
conidióforos tienen una cierta semejanza con los
de penicillium en lo referente a la disposición de
las estructuras que llevan los conidios, pueden
encontrarse sobre hifas aéreas "fiáiidos" aislados
llevando un solo conidio.
Las colonias pueden ser de color crema,
amarillo, pardo o marrón chocolate, nunca
verdes. Scopulariopsis crece bien sobre medios
que contienen elevadas concentraciones de
proteínas y por ello puede producir alteraciones
en alimentos tales como carne
PENICILLIUM:
El conidióforo es ramificado formando ia cabeza
conidial en forma de pincel. Las colonias son de
color verde-grisáceo, verde-azulado o
verdeamarillento, aunque pueden permanecer
blancos.
P. camemberti y P. caseico/um son de gran
importancia para la producción de queso
Camenbert y otros. P- roquefort; se utiliza en la
producción del queso Roquefort, Gorgonzola y
otros similares..
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CÁTEDRAS: Microbiología y Conservación de los
Alimentos
Microbiología de los 202
Alimentos 3
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FUSARIUM:
Los conidios son pluricelulares y fusiformes.
Pueden formarse dos tipos de conidios, macro y
microconidiosj estos últimos son ovalados,
unicelulares. En ausencia de macroconidios
la identificación es bastante difícil.
Con frecuencia se forman
clamidosporas en el micelio e inclusive en los
conidios.
CLADOSPORIUM:
Los conidios tiene una o dos células y se
producen sobre los conidióforos formando
cadenas ramificadas. Las colonias son de color
verde oscuro, verde aceituna, marrón o negro,
gruesas y de aspecto atercipelado.
Producen alteración en gran variedad de
alimentos; incluida la carne refrigerada.
ALTERNARIA
Los conidios son en forma de pera o porra,
pluricelulares con tabiques trasversales y
longitudinales; producen cadenas. Las colonias
son de verde oscuro, negro-verdoso, pardo o
pardo amarillento.
Fuente: Cátedra Microbiología y Conservación
de los alimentos. Microbiología de los
Alimentos. FCAI. UNCuyo
