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Corynebacterium tuberculostearicum: una bacteria potencialmente mal identificada y

Especies de Corynebacterium multirresistentes aisladas de laboratorio
Ejemplares

a b a a
V. Hinic, C. Lang, Señor Weisser, C. Straub,
do
R. Frei, y D. Goldenbergera
División de Microbiología Clínica, Hospital Universitario de Basilea, Basilea, Suizaa ; Viollier AG, Basilea, Suizab ; y División de Enfermedades Infecciosas y Enfermedades Hospitalarias.
Epidemiología, Hospital Universitario de Basilea, Basilea, Suiza

Corynebacterium tuberculostearicum es una corinebacteria lipofílica caracterizada válidamente en 2004. Proporcionamos información clínica sobre 18 pacientes de
quienes se aisló este organismo. La mayoría de los pacientes estaban hospitalizados y tenían antecedentes de
Tratamiento prolongado con antimicrobianos de amplio espectro. En 7 (38,9%) de los 18 casos, se encontró que los aislamientos eran clínicamente
El presente informe también incluye datos detallados sobre la identificación bioquímica y molecular de C. tuberculosteari­cum, así como su identificación mediante
espectrometría de masas de desorción­ionización láser asistida por matriz­tiempo de vuelo (MALDI­TOF).
MS). Nuestros datos demuestran que las pruebas bioquímicas de rutina no proporcionan una identificación confiable de C. tuberculostearicum.
La espectrometría MALDI­TOF MS representa una herramienta útil para la identificación de esta especie, ya que todas las cepas coincidieron con C. tuberculosteari­
cum como primera opción y el 58,3% (7/12) de las cepas procesadas con el protocolo de extracción completo generaron puntajes >2.000.
Sin embargo, la secuenciación parcial del gen ARNr 16S sigue representando el estándar de oro para la identificación de esta especie.
A pesar de la difícil identificación de C. tuberculostearicum, suponemos que este organismo a menudo se identifica erróneamente y se subestima su relevancia
clínica. El perfil de susceptibilidad antimicrobiana de C. tuberculostearicum presentado aquí revela que 14 (87,5%)
De las 16 cepas analizadas, se observó resistencia a múltiples fármacos.

aricum, proveniente del pus de mujeres con mastitis, lo que implica su

Bacilos grampositivos
Nus de crecimiento
Corynebacterium coloniza laaeróbico que
piel y las pertenecen
superficies al grupo ge­
mucosas. posible participación en casos de enfermedad inflamatoria mamaria (14).
de humanos. Con frecuencia se aíslan de muestras clínicas. En este informe, proporcionamos información clínica y microbiológica sobre
La interpretación de su relevancia clínica es a menudo difícil. Las corinebacterias 18 pacientes de quienes se aisló C. tuberculostearicum y profundizamos en su
lipofílicas son un subgrupo particularmente relevante de importancia clínica y su participación en
corinebacterias, ya que pueden estar implicadas en infecciones de pacientes El proceso infeccioso. Además, presentamos datos detallados sobre

hospitalizados y a menudo muestran multirresistencia a los antimicrobianos (9). su identificación microbiológica, incluida la bioquímica, 16S
Secuenciación de genes de ARNr y análisis por espectrometría de masas con
La caracterización taxonómica de C. tuberculostearicum es compleja y desorción láser asistida por matriz y tiempo de vuelo (MALDI­TOF MS), así como
los perfiles de susceptibilidad antimicrobiana de 16 cepas.
se describe aquí brevemente. En 1984, Brown et al. estudiaron
En nuestra colección.
16 cepas denominadas corineformes derivadas de la lepra (LDC) y
Los aislados se denominaron “C. tuberculostearicum” porque su contenido de ácidos grasos
MATERIALES Y MÉTODOS
El perfil incluía ácido tuberculoesteárico (3). Riegel et al.
demostró que la cepa “C. tuberculostearicum” LDC8, así como tres Pacientes, aislamientos clínicos y condiciones de cultivo. Quince aislamientos de C.
tuberculostearicum se recuperaron de pacientes internados en tres hospitales en
cepas de “C. pseudogenitalium”, otra especie de Corynebacterium lipofílica no
Basilea, Suiza, de 2007 a 2011, es decir, el Hospital Universitario (13
nombrada válidamente , y la cepa de referencia de Centers
pacientes), el Hospital Bruderholz (2 pacientes) y el Hospital Universitario de Niños (1
para el grupo corineforme para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC) paciente). Dos aislamientos se originaron en pacientes ambulatorios de una práctica
G­2 (CDC G5840) agrupados dentro de un grupo (genomoespecie I) general privada en Zúrich. C. tuberculostearicum fue
Basado en análisis de hibridación ADN­ADN (15). En 2004, la especie C. aislado de 8 muestras de biopsia, 3 aspirados, 3 hisopos de heridas profundas, 2
tuberculostearicum fue caracterizada válidamente. Los autores hisopados de heridas superficiales y 2 muestras de orina (Tabla 1). El antibiótico
Se realizaron pruebas de resistencia y análisis de espectrometría de masas MALDI­TOF de
demostró que la cepa “C. pseudogenitalium” ATCC 33035 también
16 cepas de nuestra colección de manera retrospectiva. Las muestras clínicas se cultivaron en
representa C. tuberculostearicum y demostró que esta especie
Agar Columbia suplementado con 5% de sangre de oveja (BD Diagnostic Systems,
forma un linaje filogenético distinto junto con C. accolens y
Allschwil, Suiza), mientras que las muestras de biopsia ósea se cultivaron
C. macginleyi (8). Desafortunadamente, las cepas del grupo G­2 de CDC fueron
no incluido en este estudio taxonómico, lo que aclararía la
relación filogenética con C. tuberculostearicum (10). En el Recibido el 8 de febrero de 2012 Devuelto para modificación el 9 de marzo de 2012
En la década de 1990, se describieron varios aislamientos clínicamente relevantes del Aceptado el 4 de mayo de 2012

grupo G­2 de los CDC que mostraban resistencia parcial a múltiples antibióticos (16, 23, Publicado antes de la edición impresa el 16 de mayo de 2012

24) Hasta ahora, sólo ha habido una publicación en los últimos Dirigir la correspondencia a D. Goldenberger, [email protected].

literatura que describe el aislamiento de C. tuberculostearicum de Copyright © 2012, Sociedad Estadounidense de Microbiología. Reservados todos los derechos.
doi:10.1128/JCM.00386­12
infecciones humanas. En 2002, Paviour y sus colegas informaron sobre
el aislamiento de especies de corinebacterias, incluida C. tuberculoste­

Agosto 2012 Volumen 50 Número 8 Revista de microbiología clínica, pág. 2561­2567 jcm.asm.org 2561
 tuberculostearicum
C.
aisló
se
quienes
de
pacientes
en
yclínicos
microbiológicos
Hallazgos
1
CUADRO

Paciente Preexistente C.
de
clínica
Relevancia

No. Tuberculostearicum
Hinic´ y col.

espécimen
de
Tipo
sexo
Edad/ (AMT)b
Gram
de
Tinción (amt)b
Cultura (amt)b
materiales
Otros subyacente
enfermedad
y
clínica
Presentación antimicrobiana
terapia

1 M
52/ biopsia
de
Muestra (),
celulares
Restos (),
tuberculostearicum
C. dos
otros
en
tuberculostearicum
C. después
costillas
ylas
torácica
pared
la
de
Osteomielitis Cefepima relevante
Relevante/

2562 jcm.asm.org
torácica)
(pared positivo
Gram­ ()
CNSC
Enfermera y
()
biopsia
de
muestras y
costales
fracturas
múltiples
con
Politraumatismo

(),
diplococos ()
aspiración
una cloacae
Enterobacter
por
Empiema

negativo
Gram­
()
varillas

M
81/ hecho
No tuberculostearicum
C. en
detectado
tuberculostearicum
C. Ninguno relevante
Relevante/
ósea
Biopsia osteomielitis
con
esternal
herida
la
de
profunda
Infección

muestra detectado hueso

un
en
y
VACd
Esponja aortocoronario
bypass
operación
la
de
después
semanas
3

(esternón) la
biopsia
de
muestra
esternón
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M
63/ de
Orina hecho
No 105
tuberculostearicum
C. materiales
otros
analizaron
se
No semanas
3
durante
clínico
foco
sin
persistente
Fiebre considera
se
No
ceftriaxona
Meropenem,
prolongada
permanencia
de
catéter ml
UFC/ relevante
relevante/
Streptococcus
por
meningoencefalitis
una
de
Después

neumonía

M
64/ biopsia
de
Muestra (),
Eritrocitos (),
tuberculostearicum
C. dos
otros
en
tuberculostearicum
C. esternoclavicular
y
esternón
del
Superinfección relevante
Relevante/
penicilina
Flucloxacilina,
(herida) no
(),
celulares
restos ()
CNSC
Enfermera (y)
biopsia
de
muestras con
aureus
Staphylococcus
por
sepsis
de
después
articulación
bacterias (y
CNSc
con
junto y
mitral
válvula
la
de
infecciosa
Endocarditis

, séptica
esternoclavicular
Artritis

F
43/ biopsia
de
Muestra (),
Eritrocitos tuberculostearicum
C. dos
otros
en
tuberculostearicum
C. después
torácica
pared
empiema
de
Sobreinfección tazobactam,
Piperacilina­ relevante
Relevante/

(pericostal) (),
celulares
restos () pleura
(),
biopsia
de
muestras recurrente.
y
neumocócica
Neumonía voriconazol

bacterias
Sin hueso
y
(),
aspirar Aspergillus
de
detección
con
Empiema

(detectada)
biopsia
de
muestra fumigato

M
75/ profunda
Herida tuberculostearicum
C. paciente
el
en
esternal
herida
la
de
persistente
Secreción Ninguno considerado
No
célula
(),
Leucocitos materiales
otros
analizaron
se
No
torunda grampositivos
cocos
(),
desechos () relevante
relevante/
profunda
esternal
herida
por
poco
hace
hasta
Tratado
(esternón) negativa
coagulasa
por
Infección

positivo
Gram­ y
aortocoronaria
derivación
una
de
después
Estafilococos

corineformes
bastones mitral
válvula
la
de
Reemplazo
()

F
61/ Aspirar sabe
se
No (de
tuberculostearicum
C. sabe
se
No polimicrobiana
con
perforada
gástrica
Úlcera sabe
se
No relevante/
considera
se
No

(abdomen) enriquecimiento),
de
caldo albicans
Candida
por
sepsis
y
Peritonitis considerado
No

albicans
Candida importante

desconocida)
(cantidad

M
72/ Hematoma sabe
se
No de
tuberculostearicum
C. sabe
se
No heridas
cicatrización
de
ytrastorno
infectado
Hematoma sabe
se
No relevante/
considera
se
No

aspirar enriquecimiento,
de
caldo rodilla
total
prótesis
la
de
después considerado
No

(rodilla) Estafilococo importante

no
(cantidad
epidermidis
conocido)

F
18/ biopsia
de
Muestra (),
celulares
Restos con
materiales
otros
hay
No
()
tuberculostearicum
C. sabe
se
No sabe
se
No sabe
se
No

pie)
dedo
del
(tejido (),
epiteliales
células Tuberculostearicum

positivo
Gram­
()
cocos

10 F
50/ no
(),
celulares
Restos (),
tuberculostearicum
C. C.
con
materiales
otros
hay
No fractura
una
de
meses
7
los
a
Pseudoartrosis Ninguno
biopsia
de
Muestra Probablemente

(falange) bacterias ()
CNSC
Enfermera Tuberculostearicum con
izquierdo
pie
del
IV
proximal
falange posiblemente
relevante/

pie
del
postraumática
plejia importante

11 F
47/ profunda
Herida (),
Leucocitos (),
tuberculostearicum
C. materiales
otros
analizaron
se
No por
séptico
shock
tras
terciaria
Peritonitis amoxicilina­
Imipenem, relevante/
considera
se
No

torunda clavulánico
ácido
eritrocitos pneumoniae
Klebsiella con
peritonitis
y
abdominal
Perforación relevante
Posiblemente

(abdomen) bacterias
sin
(), enriquecimiento)
de
caldo
(del Klebsiella
perfringens,
Clostridium

después
coli
Escherichia
y
pneumoniae

sigma
cáncer
de
resección
12 M
32/ herida
de
Hisopado (),
epiteliales
Células (),
tuberculostearicum
C. materiales
otros
analizaron
se
No recurrentes
genitales
Úlceras sabe
se
No sabe
se
No

(genital (),
celulares
restos Estafilococo
úlcera) positivo
Gram­ ()
epidermidis
()
cocos

13 M
24/ uretral
Hisopado célula
(),
Leucocitos (),
tuberculostearicum
C. materiales
otros
analizaron
se
No trachomatis
Chlamydia
por
causada
Uretritis sabe
se
No relevante/
considera
se
No

()
grampositivos
cocos
(),
restos Corinebacteria considerado
No

(),
glucuronolítico importante

urealyticum
Ureaplasma
()

Revista de microbiología clínica

Machine Translated by Google

C. tuberculostearicum aislado de muestras clínicas

Se evaluó mediante la colocación directa en un medio de tioglicolato líquido (BD Diagnostic

Systems). Las placas se incubaron aeróbicamente a 37 °C y se examinaron para detectar
Crecimiento en el primer y segundo día. Las muestras de biopsia ósea en caldo de
enriquecimiento se cultivaron aeróbicamente a 37 °C durante 6 días con observación visual diaria.
considerado

relevante/

seguimiento del crecimiento.

importante

relevante
considerado

Relevante/
relevante/
considera

relevante
Criterios para la estimación de la significación clínica de la corineforme
No
No

No

Las infecciones por C. tuberculostearicum se definieron según

se

los criterios de los CDC (11). La importancia clínica de los aislamientos de C. tuberculostearicum
también se estimó sobre la base de los criterios definidos por
Funke y Bernard (10).
Identificación fenotípica. Identificación primaria de corineformes
sulfametoxazol,
trimetoprima­

La determinación de las bacterias se realizó mediante morfología de colonias, tinción de Gram y

vancomicina
amoxicilina­
amoxicilina

clavulánico
Ciprofloxacino,

Piperacilina­

Piperacilina­

Piperacilina­

Piperacilina­
tazobactam,

tazobactam,

reacción de catalasa. Además, se realizó una prueba CAMP con Staphylococcus aureus
tazobactam

tazobactam
Relevante/

Relevante/
ácido

relevante

relevante ATCC 25923. Se analizó la lipofilia mediante subcultivo

los aislamientos en placas de sangre con y sin Tween 80 al 1%. Rutina
Se realizó la identificación bioquímica de cepas de corinebacterias.
con el sistema API Coryne (bioMérieux, Ginebra, Suiza) de acuerdo con las instrucciones del
fabricante.
Secuenciación del gen ARNr 16S y comparación de secuencias. ARNr 16S
La amplificación y secuenciación de genes se realizó utilizando el kit de secuenciación de
identificación bacteriana del gen Fast Micro­Seq 500 16S rRNA (Applied
Biosystems, Rotkreuz, Suiza). Las secuencias de ADN resultantes fueron
en comparación con las secuencias de referencia del software MicroSeqID 500
(versión 2.1.), así como las secuencias depositadas en la base de datos GenBank en
El Centro Nacional de Información Biotecnológica utiliza el algoritmo BLAST. Análisis
Staphylococcus
polimicrobiana

Pseudomonas

extracorpórea
postestenótica
Enterococcus

comparativo de las secuencias parciales del gen ARNr 16S de

quimioterapia
Enterobacter

estreptococo

desconocido
yosteomielitis

operaciones

oxigenación
aeruginosa,

neumonectomía
prolongada
yantibióticos
agalactiae,

membrana
revisiones,
reemplazo
Superinfección
Achromobacter

Neumonía

Empiema
Streptococcus

patógeno
pequeñas

neumonía
operación

múltiples
duración

corazón­
semanas

máquina
cloacae,

xylosoxidans
faecalis,

después

Osteomielitis
cáncer

pulmón,

cáncer
deformación

aureus,

Se realizó un análisis de 18 cepas de C. tuberculostearicum con MegAlign 6.1

crónica

pulmón
tratado

pequeñas
células

Después
Bacterias

complicado

pulmón
inicial

células
cáncer
empiema
género

para

mes
Diabetes

Episodio
paciente
con

con
con

después
con
Charcot

costillas
por

después

torácica
mellitus

una
de
de

por
de

no
de
del

clínico

válvula

Software de análisis de secuencias (Lasergene; DNAStar, Madison, WI) de ClustalW

aórtica
la

1
pared
2

Curso
febril
foco
con

una
por
pie
del

sin

ylas
en

de
de

de
de

la

Análisis. El árbol filogenético se construyó utilizando parámetros predeterminados.

con la ayuda de la herramienta de software en línea ClustalW2 (http://www.ebi.ac.uk
/Tools/msa/clustalw2/) del Instituto Europeo de Bioinformática de la
Laboratorio Europeo de Biología Molecular.
Análisis de espectrometría de masas MALDI­TOF. Colonias de 12 C. tuberculostearicum
Las cepas cultivadas durante la noche en placas de agar sangre con 1% de Tween 80 fueron
se extendió sobre una placa de acero MSP 96 (Bruker Daltonics GmbH, Bremen, Alemania) y
Tuberculostearicum

tuberculostearicum

se cubrió con 1 l de una matriz que consiste en una solución saturada de ácido ­ciano­4­
muestras

muestras
profunda
esternón

esternón
aspirado
levadura

hidroxicinámico en acetonitrilo al 50%.

muestra
muestra

biopsia

biopsia

biopsia
hisopo
pleura

pleura

herida
pleura
materiales

juntos

UFC/
orina

tórax
(y)
una
103
con

del
de

de

de
de
en

de

de
ml

Ácido trifluoroacético al 2,5 % (protocolo normal). La extracción corta

ml

la

yel
()

()
()

()
y
a
UFC/
otros

104
con
hay
No

C.
C.

El protocolo se realizó mediante la adición de 1 l de ácido fórmico al 70% al

Frotis bacteriano antes de la aplicación de la matriz. Se realizó una extracción completa.
por el protocolo de etanol­ácido fórmico recomendado por el fabricante. Las mediciones se
realizaron con un Microflex LT MALDI­TOF
Sistema MS y analizado con el software BioTyper 3.0 SR. Los grados de
concordancia espectral entre los aislamientos probados y las cepas depositadas en
tuberculostearicum

tuberculostearicum

tuberculostearicum

tuberculostearicum

tuberculostearicum

Los datos de la base de datos se expresaron como puntuaciones de identificación logarítmicas

Micrococos
detectado,

detectado
grupo

y se interpretaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Las puntuaciones de 2,300
UFC/
ml

cinco
otras

otras

indicó una identificación altamente probable a nivel de especie, puntuaciones de 2.000

104

una

dos
en

en

en
C.

C.

C.

C.

C.
()

()

()
a

hasta 2.299 indicaron una probable identificación a nivel de especie, puntuaciones de

1.700 a 1.999 indicaron una probable identificación a nivel de género, y
Las puntuaciones de 1,700 indicaron que no había una identificación fiable.
, numerosos.
formadoras
unidades
colonias.

Prueba de susceptibilidad a los agentes antimicrobianos. Se determinaron las concentraciones mínimas inhibitorias (CMI)
UFC,
de

con tiras Etest (bioMérieux, Ginebra, Suiza) en Mueller­Hinton

eritrocitos

eritrocitos

eritrocitos
bacterias

bacterias
bacterias

Leucocitos

Leucocitos

agar con sangre (Heipha, Heidelberg, Alemania) utilizando inóculos de 1 unidad Mc­Farland
Sin
No

sin
(),

(),

(),
hecho

incubados en una atmósfera de 5% CO2 a 37°C durante 48 h.

No

(),

(),

Se utilizaron (4) puntos de corte del Instituto de Normas Clínicas y de Laboratorio para
la interpretación de las CMI de penicilina, ceftriaxona, cefepima, imipenem,
eritromicina, clindamicina, tetraciclina, gentamicina, ciprofloxacino, vancomicina, rifampicina,
(pericardio)

,
muestra
(fíbula)

linezolid y daptomicina. Además, amoxicilina­ácido clavulánico, piperacilina­tazobactam,

(cartílago
torunda
Leucocitos

costilla)
profunda
Aspirado

Muestra
(pleura)
Biopsia

camino

biopsia

de
Herida

la
hecho

cefuroxima, moxifloxacino y
mitad
Orina
ósea

No

de
de

(),
a

Los resultados de la interpretación de la tigeciclina se basaron en los puntos de corte no relacionados

con las especies del Comité Europeo de Pruebas de Susceptibilidad a los Antimicrobianos (6) .
,
72/

75/
54/

51/
67/
M

M
F
F

estafilococos
Cantidades:

RESULTADOS
moderado;
coagulasa
negativos.
masculino;
separado;
femenino.

yBernard.
Criterios
criterios
asistido

Hallazgos clínicos y microbiológicos. Características microbiológicas

Funke
SNC,

vacío.
cierre

CDC/
VAC,
por
M,

de
F,
14

15

16

17

18

y clínicas de 18 pacientes a los que se les detectó C. tuberculostearicum

b

mi
do

Agosto 2012 Volumen 50 Número 8 jcm.asm.org 2563

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Hinic´ y col.

CUADRO 2 Identificación de 18 cepas de C. tuberculostearicum mediante secuenciación del gen ARNr 16S, 18 cepas mediante el sistema API Coryne, y 12 cepas mediante
EM MALDI­TOF
API Coryne Puntuación media de MS MALDI­TOFb DE

No. de Gen ARNr 16S Numérico Primera opción listada (% IDd Extracción corta Extracción completa
presiones secuenciación código probabilidad, valor T) Interpretación de ID Protocolo normal protocolo protocolo

5 C. tuberculostearicum 4100305 C. macginleyi (85,6, 0,79) Buena identificación en 1.644 0.31 1.917 0.08 2.045 0.07

nivel de género
2 C. tuberculostearicum 4100304 C. jeikeium (59,2, 0,64) Identificación aceptable en NDc DAKOTA DEL NORTE DAKOTA DEL NORTE

nivel de género
2 C. tuberculostearicum 5100304 C. C. macginleyi (97,5, 0,79) Buena identificación Muy 1,486 0,05 1.863 0.14 1.82 2.076 0.10
2 tuberculostearicum 7100305 Grupo G de los CDC (83, 0,86) buena identificación en 1,715 0,37 0.24 2.007 0.11

nivel de género
2 C. tuberculostearicum 7100304 Grupo CDC G (43,5, 0,69) Buena identificación en 1.633 0.12 1.894 0.04 1.955 0.02

nivel de género
1 C. tuberculostearicum 6100305 CDC grupo G (96,7, 0,98) Buena identificación C. tuberculostearicum 2100305 1.893 1.802 1,85
1 CDC grupo G (86,9, 1) Excelente identificación en ND ND DAKOTA DEL NORTE

nivel de género
1 C. tuberculostearicum 0100305 C. macginleyi (84,3, 0,82) Muy buena identificación en DAKOTA DEL NORTE DAKOTA DEL NORTE DAKOTA DEL NORTE

nivel de género
1 C. tuberculostearicum 4000304 C. C. accolens (90,5, 0,64) Perfil dudoso ND DAKOTA DEL NORTE DAKOTA DEL NORTE

1 tuberculostearicum 6100304 C. jeikeium (60, 0,79) ND de baja selectividad DAKOTA DEL NORTE DAKOTA DEL NORTE

a
C. tuberculostearicum no está incluido en la base de datos API Coryne.
b
Interpretación de los valores de la puntuación: 2,300, identificación altamente probable a nivel de especie; 2,000 a 2,299; identificación probable a nivel de especie; 1,700 a 1,999; identificación probable a nivel de especie.
identificación a nivel de género; 1.700, sin identificación confiable.
do
ND, no terminado.
d
Identificación, identificación.

aislados se presentan en la Tabla 1. C. tuberculostearicum se aisló de 8 muestras Aparecieron colonias muy pequeñas, convexas, lisas y grisáceas en la sangre.
de biopsia, 3 aspirados, 3 hisopos de heridas profundas, 2 agar. La tinción de Gram reveló bacilos grampositivos corineformes.
hisopados de heridas superficiales y 2 muestras de orina. La edad media de La reacción de la catalasa fue positiva, pero la prueba CAMP fue negativa.
La edad de los pacientes era de 56 años (rango: 24 a 81). Quince de los 18 pacientes La prueba de lipofilia fue positiva ya que el crecimiento del organismo
tenían antecedentes de cirugía extensa con estadías hospitalarias prolongadas. El agar sangre suplementado con Tween 80 al 1% fue mejor que su
y la mayoría había recibido terapia prolongada con antimicrobianos de amplio crecimiento en una placa de sangre ordinaria. Los resultados de la prueba bioquímica
espectro (Tabla 1). Sólo 1 de las 12 infecciones directas por Gram La identificación de las cepas con el sistema API Coryne se presenta en la Tabla 2.
Las tinciones revelaron bacilos corineformes grampositivos. Sin tinción de Gram Las probabilidades de identificación y los valores T correspondieron a una buena
Se realizó a partir de muestras de biopsia ósea y muestras de orina. En 9 de identificación como C. macginleyi para 2 cepas y como
En 18 muestras, C. tuberculostearicum se aisló en cultivo puro (incluidas 2 muestras Grupo G de los CDC para 1 cepa, mientras que 13 aislamientos coincidieron con C. macginleyi
de orina), mientras que en las 9 muestras restantes, (6 aislamientos), C. jeikeium (2 aislamientos) y grupo G de los CDC (5 aislamientos)
Se aislaron como organismos concomitantes estafilococos coagulasa negativos, con puntuaciones de identificación aceptable, buena, muy buena o excelente a nivel
Candida albicans, otras corinebacterias o bacterias del grupo Micrococcus . En 8 de de género. Un aislamiento mostró un perfil dudoso
los 18 casos, se recuperó C. tuberculostearicum de múltiples muestras. En los 10 para su identificación como C. accolens, y uno mostró baja selectividad
casos restantes, C. como C. jeikeium. Las reacciones variables en diferentes cepas conducen a
tuberculostearicum no se aisló de otros materiales, no se examinaron muestras Las diferencias en las puntuaciones fueron la reducción de nitrato, la
adicionales o no había datos disponibles. pirazinamidasa, la pirrolidonil arilamidasa, la fosfatasa alcalina y la fermentación
El hisopado uretral de un paciente con uretritis fue positivo para Chlamydia de la sacarosa.
trachomatis por PCR. Con base en criterios clínicos, Secuenciación del gen ARNr 16S y comparación de secuencias .
Se encontró que C. tuberculostearicum era un agente etiológico de la Comparación de la secuencia del gen ARNr 16S de 18 cepas con la
Infecciones del sitio quirúrgico de 7 pacientes (pacientes 1, 2, 4, 5, 16, 17 y La base de datos GenBank reveló un 100% de identidad con la cepa tipo C.
18 en la Tabla 1), mientras que la relevancia clínica del aislado de tuberculo­stearicum Medalle XT (LDC­20T CIP 107291T CCUG 45418T ATCC
No se pudo excluir al paciente 10 (posiblemente relevante). En 8 casos, 35529T ; número de acceso GenBank.
Se encontró que el aislamiento de C. tuberculostearicum no era clínicamente NR_028975.1 o AJ438050), así como otras 8 cepas depositadas de C. tuber­
relevante, mientras que en los 2 casos restantes no se llegó a ninguna conclusión sobre el estado clínico. culostearicum (número de acceso AJ438042, AJ438043,
La relevancia podría alcanzarse debido a la insuficiencia de la evidencia clínica. AJ438044, AJ438045, AJ438046, AJ438047, AJ438049, y
y datos microbiológicos. Relevancia estimada sobre la base de la (AJ438051) y C. pseudogenitalium ATCC 33035 (número de acceso).
Se encontró que los criterios de Funke y Bernard (10) estaban de acuerdo AJ439348) (8). Comparación con la base de datos MicroSeqID
con lo estimado sobre la base de los criterios clínicos de los CDC (11) en coincidió con C. tuberculostearicum con un 100% de identidad. Además,
todos los casos, excepto los pacientes 3, 6 y 15 (Tabla 1). secuencia de la cepa G­2 del grupo corineforme CDC ATCC 33035
Características fenotípicas. Todas las cepas aisladas mostraron características (número de acceso X84098) era 100% idéntico a nuestras secuencias.
morfológicas idénticas. Después de 24 a 48 h de incubación, Segunda especie de Corynebacterium con mejor coincidencia en GenBank

2564 jcm.asm.org Revista de microbiología clínica

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C. tuberculostearicum aislado de muestras clínicas

FIG 1 Árbol filogenético basado en secuencias parciales del gen ARNr 16S que muestra relaciones entre nuestras 18 secuencias (CTU) y taxones relacionados.

y las bases de datos MicroSeqID fueron C. accolens, con un 98% de nucleótidos a ­lactamas. La sensibilidad a la gentamicina fue variable (6 cepas resistentes, 1
Identidad. La alineación del primer tercio del gen ARNr 16S intermedia y 9 sensibles).
La secuencia (posiciones 48 a 446) reveló una identidad del 100% para los 18
Cepas, con excepción de una cepa originaria del paciente DISCUSIÓN
número 7 (Tabla 1) que muestra un polimorfismo de un solo nucleótido en C. tuberculostearicum es una especie lipofílica (8) sobre la que se tiene muy en cuenta
posición 84 (G en lugar de A) en comparación con la secuencia de tipos En la literatura actual hay poca información disponible, por lo que
NR_028975.1. En la Fig. 1, nuestras 18 secuencias parciales comparadas con las Nos propusimos proporcionar información clínica y microbiológica,
secuencias de la cepa tipo C. tuberculostearicum , cepa “C. pseudogen­talium” ATCC Incluye perfiles ampliados de susceptibilidad a los antimicrobianos que se
33035, cepa del grupo corineforme G­2 de los CDC presentan aquí por primera vez.
CDC G5840 y otros taxones relacionados se presentan en forma de El análisis bioquímico de cepas de C. tuberculostearicum con
árbol filogenético. El sistema Coryne de API produjo puntuaciones consistentes con la identificación de
Análisis de espectrometría de masas MALDI­TOF. Análisis de espectrometría de masas MALDI­TOF de los 12 otras corinebacterias lipofílicas con probabilidades y valores T variables (Tabla 2).
de las cepas analizadas coincidieron con C. tuberculostearicum como la primera Esto se debe al hecho de que C. tuberculostearicum no está incluido en la base de
Elección. Las puntuaciones más altas se obtuvieron utilizando el protocolo de datos Coryne de API.
extracción completo. Con un 58,3% (7/12) de las cepas, las puntuaciones superiores a 2.000
(rango de identificación probable a nivel de especie) fueron
logrado. El valor medio de las puntuaciones obtenidas con la prueba completa
TABLA 3 CMI para 16 cepas de C. tuberculostearicum
El protocolo de extracción fue de 2,013 ± 0,09. El protocolo de extracción corto arrojó
N° (%) de
una puntuación media de 1,878 ± 0,11, mientras que 1 de los 12
sensible
Se identificaron cepas a nivel de especie, 10 de las 12 cepas fueron Antimicrobiano a a
presiones
Gama MICa MIC50 MIC90
identificados a nivel de género, y para 1 de las 12 cepas, las puntuaciones
Penicilina 0,125–32 32 32 3 (18,7)
no eran compatibles con ninguna identificación fiable. Por otra parte,
Amoxicilina­clavulánico 0,125–256 256 256 6 (37,5)
el valor medio de las puntuaciones obtenidas con el protocolo normal ácido
fue de 1,648 ± 0,25 y ninguna de las 12 cepas fue identificada
Piperacilina­tazobactam 0,125–256 Cefuroxima 256 256 3 (18,7)
nivel de especie. Seis de las 12 cepas fueron identificadas a nivel de género, Ceftriaxona 0,25–256 256 256 3 (18,7)
y para 6 de las 12 cepas, las puntuaciones fueron consistentes con ninguna Cefepima 1–256 256 256 2 (12,5)
identificación confiable (Tabla 2). Imipenem 0,5–256 256 256 3 (18,7)
Susceptibilidad a los agentes antimicrobianos. Las CMI para 16 de los Eritromicina 0,03–32 32 32 6 (37,5)
Clindamicina 0,125–256 256 256 3 (18,7)
Las cepas investigadas se presentan en la Tabla 3. Todas las cepas fueron
Tetraciclina 0,5–256 256 256 1 (6.2)
sensible a la vancomicina, linezolid y daptomicina. Once
Tigeciclina 0,05–32 1 16 13 (81,2)
(68,7%) de las 16 cepas fueron sensibles a la rifampicina y 13
Gentamicina 0,5–2 0,5 2 0 (0)
(81,2%) de las 16 cepas fueron sensibles a la tetraciclina. Para todas las
Ciprofloxacino 0,06–64 2 32 9 (56.2)
En las cepas analizadas, las CMI de tigeciclina fueron de 0,5 mg/litro o superiores. 0,125–32 32 32
Moxifloxacino 2 (12,5)
correspondientes a fenotipos intermedios y resistentes. Catorce (87,5%) de las 16 Vancomicina 0,06–32 4 32 2 (12,5)
cepas fueron resistentes a las quinolonas (ciprofloxacino y moxifloxacino). Las CMI50 Rifampicina 0,5–2 1 1 16 (100)
de todos los antibióticos β­lactámicos fueron 32 o 256 mg/litro, respectivamente. Diez Linezolid 0,06–32 0,125 32 11 (68,7)
(62,5%) de las 16 Daptomicina 0,5–1 1 1 16 (100)
Las cepas presentaron resistencia cruzada a todos los antibióticos β­lactámicos analizados. 0,06–1 0,25 0,5 16 (100)
a
Por otra parte, 2 de las 16 cepas analizadas fueron completamente susceptibles. Los MIC se expresan en miligramos por litro.

Agosto 2012 Volumen 50 Número 8 jcm.asm.org 2565

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Hinic´ y col.

Además, ya se ha informado de que la identificación Aunque no se ha estudiado ampliamente la ria, en general se piensa que la resistencia
de corinebacterias lipofílicas podría ser todo un desafío porque se debe a una menor permeabilidad de la membrana externa o afinidad por estos
La mayoría de las especies muestran características fenotípicas idénticas cuando se antibióticos (17). Hasta la fecha, las β­lactamasas han sido
las investiga con métodos microbiológicos de rutina (15, 22). Se encuentra únicamente en bacterias corineformes del género Brevibacterium.
La identificación bioquímica con el sistema API Coryne sigue representando la (17) Para las 16 cepas analizadas, las CMI de tigeciclina variaron
herramienta de identificación más utilizada en los laboratorios de microbiología clínica, de 0,5 a 2 mg/litro, compatible con intermedio o resistente
suponemos que C. tuberculostearicum es fenotipos. Esto contrasta con los datos presentados por Fernández­Roblas y colegas,
Con frecuencia se identifican erróneamente como otras especies lipofílicas de quienes recomendaron la tigeciclina como
Corynebacterium . Seis de las 18 cepas analizadas en nuestro estudio arrojaron Buena alternativa para infecciones causadas por co­rinobacterias distintas de C.
códigos numéricos compatibles con el grupo G de los CDC, lo que demuestra nuevamente la
diphtheriae (7). Sobre la base de los resultados presentados en este estudio,
Estrecha relación con C. tuberculostearicum (10). Por lo tanto, el aislamiento de Consideramos que la tigeciclina no representa un buen tratamiento.
especies corinebacterianas lipofílicas, catalasa­positivas y CAMP­negativas con Opción terapéutica para el tratamiento de infecciones por C. tuberculostearicum .
puntuaciones API idénticas a las que se muestran en la Tabla Teniendo en cuenta estos patrones de susceptibilidad variables, se deben realizar
2 debe hacer sospechar la presencia de C. tuberculostearicum. pruebas de susceptibilidad antimicrobiana de cada cepa aislada.
El organismo que mejor coincide con todas las cepas analizadas con debe realizarse.
El método MALDI­TOF MS fue C. tuberculostearicum, pero las puntuaciones obtenidas Ya se ha informado en la literatura que una prolongada
mostraron una gran variación cuando se aplicaron diferentes protocolos (Tabla 2). La La estancia hospitalaria, el tratamiento con antibióticos de amplio espectro y la
dificultad para obtener puntuaciones confiables para el integridad cutánea deteriorada son factores de riesgo para el desarrollo de la infección
La identificación de bacterias Gram­positivas se debe a la estructura por la especie lipofílica y multirresistente C. jeikeium (5, 13).
propiedades de su pared celular (1, 18). Este problema puede ser parcialmente Asimismo, las cepas multirresistentes investigadas en nuestro estudio procedían de
Resuelto mediante el uso del protocolo de extracción completo MALDI­TOF MS pacientes con estancias hospitalarias prolongadas, sometidos a intervenciones
Identificación del 58,3% (7/12) de las cepas analizadas en este estudio quirúrgicas invasivas o con comorbilidades subyacentes graves. La mayoría de estos
arrojó puntuaciones de 2.000, consistentes con la identificación a nivel de especie pacientes fueron tratados con diferentes
mediante el uso del protocolo de extracción completo en comparación con Antimicrobianos de amplio espectro (Tabla 1). De acuerdo con los criterios clínicos
Sólo una cepa con extracción corta y ninguna con la normal. definidos por los CDC, nuestros hallazgos muestran una clara asociación de C.
protocolo. Por lo tanto, recomendamos el uso de la extracción completa tuberculostearicum con el proceso infeccioso en 7 de
Protocolo para la prueba de cepas sospechosas aunque se trate de una los 18 casos clínicos presentados en este estudio (pacientes 1, 2, 4, 5, 16,
protocolo más largo y complejo de realizar. Además, nuestros resultados de MS 17 y 18 en la Tabla 1), donde esta bacteria estuvo involucrada en la
MALDI­TOF están de acuerdo con datos muy Infección de un sitio quirúrgico con osteomielitis. C. tuberculosteari­cum aislado en
obtenido recientemente por Alatoom et al. mediante el análisis entre 92 aislamientos cultivo puro de la orina de los pacientes 3 y 15
de especies de Corynebacterium 5 cepas de C. tuberculostearicum con Podría considerarse relevante en base a los criterios descritos por
el mismo protocolo de extracción (2). Otra razón para las dificultades en la identificación Funke y Bernard (10). Como no se observó ninguna manifestación clínica en estos
de esta especie podría ser el hecho de que sólo dos pacientes, los cultivos bacteriológicos fueron positivos.
En la actualidad se encuentran presentes dos cepas de C. tuberculostearicum. Por lo tanto, la presencia de C. tuberculostearicum podría interpretarse como
base de datos proporcionada por Bruker. Es probable que la fiabilidad de la bacteriuria asintomática. El aislamiento del paciente 6 podría interpretarse como
La identificación de EM MALDI­TOF podría mejorarse si se identificaran más cepas significativo según los criterios de Funke y Bernard.
Se agregaron a la base de datos Biotyper en el futuro. Por lo tanto, la identificación debido a la gran cantidad de bacterias C. tuberculostearicum que
mediante la secuenciación del gen ARNr 16S sigue siendo la clave. crecieron en cultivo y su presencia en la tinción de Gram directa.
estándar para la identificación de C. tuberculostearicum desde el 17 de Importancia clínica de los aislamientos de C. tuberculostearicum originarios
Las 18 cepas analizadas revelaron un 100% de identidad con 10 cepas de C. de los pacientes 9 y 12 es cuestionable porque los datos de los pacientes son limitados
tuberculostearicum (incluida la cepa tipo) depositada en el están disponibles y no se cumplió ninguno de los criterios clínicos ni los
Bases de datos MicroSeq y GenBank. criterios descritos por Funke y Bernard (10) . Por lo tanto, es probable que
La mayoría de las cepas investigadas (14/16) exhibieron resistencia a al menos C. tuberculostearicum pueda encontrarse como un colonizador frecuente
un agente antimicrobiano en tres o más categorías antimicrobianas, lo que las en la piel de pacientes hospitalizados, causando o no
convierte en organismos multiresistentes. infección, que ya se ha descrito para otras enfermedades lipofílicas y
(12). Sin embargo, todas las cepas investigadas fueron susceptibles. corinebacterias potencialmente multiresistentes como C. jeikeium y C.
a la vancomicina (Tabla 3). Estos resultados concuerdan con urealyticum (9, 19, 20, 21).
Datos publicados previamente sobre la resistencia a múltiples antimicrobianos Curiosamente, las dos cepas originadas de los pacientes 12 y
de los aislamientos del grupo G­2 de los CDC investigados y, a la inversa, sus 13, que acudieron a un consultorio general privado debido a uretritis y ulceración
100% de susceptibilidad a la vancomicina (23, 24). La vancomicina puede genital, eran sensibles a todos los antimicrobianos.
Por lo tanto, representan la opción terapéutica empírica para enfermedades graves. Se han probado todos los virus, excepto los macrólidos. Por lo tanto, es posible
infección mientras se esperan los resultados de las pruebas de sensibilidad, ya que la que las cepas adquiridas en la comunidad probablemente presenten fenotipos
vancomicina es el tratamiento de elección para otras co­rinebacterias multirresistentes, susceptibles, a diferencia de las cepas adquiridas en el hospital, pero esta
incluida C. jeikeium (13). Además, todos los observación necesita más confirmación.

Las cepas investigadas fueron sensibles a la daptomicina y al linezolid. En resumen, sospechamos firmemente que la tasa de aislamiento de C.
Diez (62,5%) de las 16 cepas mostraron resistencia cruzada a todos La presencia de tuberculosis en muestras clínicas humanas está subnotificada
­lactámicos, 4 de ellos (25%) mostraron sensibilidad variable a los ­lactámanos, y 2 ya que esta especie no está incluida en la base de datos API Coryne y es
de ellos (12,5%), procedentes de pacientes ambulatorios, fueron completamente Por lo tanto, se la ha identificado sistemáticamente de forma errónea como otras
sensibles a todos los ­lactámanos probados. corinebacterias lipofílicas, como C. macginleyi o C. jeikeium. La intrincada taxonomía
Aunque los mecanismos de resistencia a las ­lactamas en corinebacte­ de esta especie, incluido el probable sinónimo CDC corine­

2566 jcm.asm.org Revista de microbiología clínica

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C. tuberculostearicum aislado de muestras clínicas

forman el grupo G­2, pueden contribuir a esta situación. MALDI­TOF terium tuberculostearicum sp. nov. Int. J. Sistema. Evolución. Microbiol. 54:1055–
1061.
La EM resultó ser una herramienta útil para la identificación de C.
9. Funke G, von Graevenitz A, Clarridge JE, Bernard KA. 1997. Clínica
tuberculostearicum utilizando el protocolo de extracción completo. Es probable que la
Microbiología de las bacterias corineformes. Clin. Microbiol. Rev. 10:125–159.
La fiabilidad de la identificación mediante espectrometría de masas MALDI­TOF 10. Funke G, Bernard KA. 2011. Bacilos grampositivos corineformes, págs. 413–442.
podría mejorarse si se añadieran más cepas a la base de datos Biotyper. En Versalovic J, et al (ed), Manual de microbiología clínica 10.ª ed, vol 1.
Actualmente, la identificación más fiable a nivel de especie puede realizarse mediante Prensa ASM, Washington, DC.
Se logró mediante la secuenciación parcial del gen ARNr 16S. La exposición a 11. Garner JS, Jarvis WR, Emori TG, Horan TC, Hughes JM. 1988. CDC
Definiciones de infecciones nosocomiales. Am. J. Infect. Control 16:128 –140.
múltiples antibióticos y las estadías hospitalarias prolongadas son factores de
riesgo para la colonización y la infección con C. tuberculostearicum, ya que la mayoría12. Magiorakos AP, et al. 2012. Bacterias resistentes a múltiples fármacos, extremadamente
resistentes a fármacos y panresistentes a fármacos: una propuesta de expertos internacionales
Las cepas presentan multiresistencia.
para definiciones estándar provisionales de resistencia adquirida. Clin. Microbiol.
Infect. 18:268 –281.
EXPRESIONES DE GRATITUD
13. Meyer DK, Reboli AC. 2005. Otras bacterias corineformes y Rhodococus, págs. 2465–2478.

Agradecemos a Moritz Grubenmann y Biljana Savic del laboratorio de diagnóstico En Mandell GL, Bennett JE, Dolin R (ed), Mandell,
Principios y práctica de las enfermedades infecciosas de Douglas y Bennett, 6.º
Laborgemein­schaft 1 en Zúrich por habernos proporcionado amablemente dos
cepas de C. tuberculostearicum . Agradecemos a Michèle Ackermann por su ed, vol. 2. Churchill Livingstone. Filadelfia, Pensilvania.
14. Paviour S, et al. 2002. Especies de Corynebacterium aisladas de pacientes
Ayuda con el análisis de MS MALDI­TOF. También agradecemos a Susanne Graf con mastitis. Clin. Infect. Dis. 35:1434 –1440.
y Sebastian Wirz por proporcionar información clínica sobre dos pacientes
15. Riegel P, et al. 1995. Diversidad genómica y relaciones filogenéticas
Hospitalizado en el Hospital Bruderholz de Basilea.
entre los difteroides que requieren lípidos de humanos y caracterización de
Corynebacterium macginleyi sp. nov. Int. J. Syst. Bacteriol. 45:128 –133.
REFERENCIAS
16. Riegel P, Ruimy R, Christen R, Monteil H. 1996. Identidades de especies y
1. Alatoom AA, Cunningham SA, Ihde SM, Mandrekar J, Patel R. 2011. Susceptibilidad antimicrobiana de corinebacterias aisladas de diversas fuentes clínicas.
Comparación del método de colonias directas frente al método de extracción para la Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 15:657–662.
identificación de cocos grampositivos mediante el uso de la matriz asistida por Bruker Biotyper 17. Riegel P. 2010. Corynebacteria, págs. 379 –388. En Courvalin P, Leclercq R,
Espectrometría de masas por desorción­ionización láser y tiempo de vuelo. J. Clin. Rice LB (ed), Antibiograma. ASM Press, Washington, DC.
Mi­crobiol. 49:2868 –2873.
18. Smole SC, King LA, Leopold PE, Arbeit RD. 2002. Preparación de muestras
2. Alatoom AA, Cazanave CJ, Cunningham SA, Ihde SM, Patel R. 2012.
de bacterias grampositivas para su identificación mediante desorción/ionización láser
Identificación de Corynebacterium no diftérico mediante el uso de espectrometría de masas
asistida por matriz en tiempo de vuelo. J. Microbiol. Methods 48:107–115.
de ionización por desorción láser asistida por matriz­tiempo de vuelo. J.
19. Soriano F, Rodríguez­Tudela JL, Fernández­Roblas R, Aguado JM,
Clin. Microbiología. 50:160 –163.
Santamaría M. 1988. Colonización cutánea por Corynebacterium del grupo D2
3. Brown S, Lanéelle MA, Asselineau J, Barksdale L. 1984. Descripción de
y JK en pacientes hospitalizados. J. Clin. Microbiol. 26:1878 –1880.
Corynebacterium tuberculostearicum sp. nov., una bacteria derivada de la lepra. Ann.
20. Soriano F, Aguado JM, Ponte C, Fernández­Roblas R, Rodríguez­Tudela JL. 1990. Infección
Microbiol. (París) 135B:251–267.
del tracto urinario causada por el grupo Corynebacterium.
4. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2011. Estándares de desempeño para pruebas
D2: reporte de 82 casos y revisión. Rev. Infect. Dis. 12:1019 –1034.
de susceptibilidad a los antimicrobianos, vigésimo primer informe informativo.
21. Telander B, Lerner R, Palmblad J, Ringertz O. 1988. Corynebacterium
Suplemento M100­S21, vol. 31, núm. 1. Normas clínicas y de laboratorio
Grupo JK en una sala de hematología: infecciones, colonización y contaminación ambiental.
Instituto Wayne, PA.
Scand. J. Infect. Dis. 20:55–61.
5. Coyle MB, Lipsky BA. 1990. Bacterias corineformes en enfermedades infecciosas:
Aspectos clínicos y de laboratorio. Clin. Microbiol. Rev. 3:227–246. 22. Watts JL, Lowery DE, Teel JF, Rossbach S. 2000. Identificación de
6. Comité Europeo sobre Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos. 2011. Corynebacterium bovis y otros corineformes aislados de glándulas mamarias bovinas. J.
Tablas de puntos de corte para la interpretación de las concentraciones mínimas inhibitorias y los Dairy Sci. 83:2373–2379.
diámetros de las zonas. Comité Europeo de Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos, Växjö, Suecia. 23. Weiss K, Lavardière M, Rivest R. 1996. Comparación de los antimicrobianos
7. Fernandez­Roblas R, et al. 2009. Actividad in vitro de tigeciclina y 10 susceptibilidades de las especies de Corynebacterium mediante microdilución en caldo y
Otros antimicrobianos contra aislados clínicos del género Corynebacterium. Métodos de difusión en disco. Antimicrobiano. Agentes Chemother. 40:930 –933.
Int. J. Antimicrobiano. Agentes 33:453–455. 24. Williams DY, Selepak ST, Gill VJ. 1993. Identificación de aislamientos clínicos
8. Feurer C, et al. 2004. Caracterización taxonómica de nueve cepas aisladas de especies no diftéricas de Corynebacterium y sus patrones de susceptibilidad a los
a partir de muestras clínicas y ambientales, y propuesta de Corynebac­ antibióticos. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 17:23–28.

Agosto 2012 Volumen 50 Número 8 jcm.asm.org 2567