República Bolivariana de Venezuela

Ministerio del Poder Popular para la Educación Universitaria, Ciencia y Tecnología

Universidad Politécnica Territorial del Oeste de Sucre “Clodosbaldo Russián”

PNF en Procesos Químicos

Cumaná, estado – Sucre

Evaluación de la dosificación óptima de nutriente comercial para el crecimiento

de las microalgas Chaetoceros Gracillis e Isochrysis Galbana requeridas para la
producción de las semillas de mejillón en el proyecto Turpialito UDO, 2024.

Tutor académico: Integrantes:

MSc. Martha Carrasquel Mariangel Guerra C.I.: 30.804.371
Josmarys Rincones C.I: 26.812.054
Tutor(es) externo(s): Bladimir Olivar C.I.: 31.157.035
MSc. Enmary Ramírez José Rivas C.I.:30.636.180
MSc. Paulino Nuñez

Cumaná, Diciembre del 2024

 ÍNDICE GENERAL
INDICE DE FIGURAS I
INDICE DE TABLAS II
INTRODUCCIÓN 5
DIAGNÓSTICO COMUNITARIO 8
Naturaleza de la organización. 8
Localización geográfica. 9
Historia y vida de la comunidad. 10
Organizaciones vinculadas al proyecto. 10
Contexto social. 11
Contexto económico. 11
Contexto educativo. 12
Contexto ambiental. 12
Contexto de salud. 12
Jerarquización e identificación de las necesidades. 13
MATRIZ FODA 14
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 15
OBJETIVOS 20
Objetivo general. 20
Objetivos específicos. 20
JUSTIFICACIÓN 21
ANTECEDENTES 23
METODOLOGÍA 27

2
 Nivel de investigación. 27
Diseño de investigación. 27
Población y muestra. 27
Propósito de la investigación. 28
Técnicas e instrumentos de recolección de información. 28
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL 29
PLAN DE ACCIÓN 32

ÍNDICE DE FIGURAS

Figura 1. Ubicación geográfica de la Estación Hidrobiológica de Turpialito. 10

3
 ÍNDICE DE TABLAS

Tabla 1. Matriz FODA, construida a partir del diagnóstico comunitario. 14

Tabla 2. Plan de acción en función de los objetivos específicos planteados. 32

4
 INTRODUCCIÓN.

El ser humano, ha ido evolucionando a lo largo del tiempo y del mismo modo,
también lo han hecho sus medidas y mecanismo de búsquedas de prontas soluciones
ante sus latentes necesidades. La creciente presión sobre los recursos naturales,
impulsada por el aumento de la población mundial y la acelerada industrialización, han
provocado el cambio climático y un aumento en la demanda de recursos esenciales en
las actividades humanas (Fetanat et al., 2021), por ende, se ha generado una
imperante urgencia de encontrar fuentes sostenibles de nutrientes y energía. En este
contexto, las microalgas emergen como una solución viable, dadas sus múltiples
aplicaciones en la alimentación, la biotecnología y la mitigación del cambio climático
(Wibisono et al., 2019).

Las microalgas son organismos unicelulares o filamentosos que se caracterizan

por ser fotosintéticos y por su capacidad de obtener energía de la luz solar, también
utilizan dióxido de carbono para producir compuestos orgánicos (Becker, 2007). Son un
tipo de alga microscópica que se encuentra en el mar, en el agua dulce y en las aguas
residuales. Están presentes en todos los ecosistemas de la tierra, no sólo acuáticos y
terrestres, lo que representa una gran variedad de especies que viven en diferentes
condiciones ambientales. Se estima más de 50.000 especies de microalgas, de las
cuales, sólo un número limitado, de alrededor de 30.000, se han estudiado y analizado
(Mata, Martins, & Caetano, 2010).

Las microalgas, al igual que tantos otros organismos que resultan invisibles a
nuestros ojos, juegan un papel de suma importancia en el complejo equilibrio
del medioambiente, ya que su potencial para descontaminar el agua y su capacidad

5
para capturar y almacenar dióxido de carbono (CO2) de la atmósfera, evitan que este
siga acelerando el cambio climático.

Estos microorganismos presentan un amplio rango de aplicaciones derivadas de

su uso, desde producción de biomasa para alimentación, su empleo en acuicultura o su
uso como biofertilizante, hasta la obtención de productos de valor terapéutico o
industrial. Son una fuente rica en numerosas moléculas bioactivas, cosméticos y de
interés en alimentación y salud humana (Gómez & et al., 2009).

En este sentido, se pueden encontrar especies productoras de ácidos grasos y

metabolitos primarios adquiridos únicamente por organismos fotosintéticos y
secundarios exclusivos de cada microalga. Es decir, la biomasa de estos
microorganismos presenta una amplia gama de moléculas y productos potenciales
como carbohidratos, proteínas, lípidos, pigmentos, minerales, vitaminas y enzimas
(Barros et al., 2019). Sin embargo, para maximizar el rendimiento y la calidad
nutricional de las microalgas en aplicaciones comerciales, es esencial optimizar sus
condiciones de cultivo. La adición estratégica de nutrientes, como nitrógeno (N), fósforo
(P) y micronutrientes, ha demostrado ser un factor crítico en la mejora del crecimiento
celular y la producción de metabolitos bioactivos. Investigaciones han demostrado que
el balance adecuado de estos nutrientes no solo aumenta la biomasa total producida,
sino también mejora el perfil lipídico y proteico (Mata et al., 2010; Hu et al., 2008). Por
lo que, este perfil nutricional ha llevado a su consideración como un superalimento
potencial tanto para humanos como para animales.

En este marco, las microalgas han ganado notable atención en la acuicultura

debido a su alta productividad y valor nutricional. Estos organismos fotosintéticos son
fundamentales en la cadena trófica acuática, actuando como una fuente primaria de
alimento para diversas especies marinas, incluidos los mejillones (Mytilus spp), que
dependen de ellos como su principal fuente de nutrientes. Sin embargo, para maximizar

6
el rendimiento y los beneficios nutricionales de las microalgas en la alimentación de
mejillones, es crucial optimizar sus condiciones de cultivo mediante la adición
estratégica de nutrientes. Según Hu et al. (2008), "la optimización del suministro de
micronutrientes no solo incrementa la tasa de crecimiento celular, sino que también
mejora el contenido proteico y lipídico de las microalgas". Estos componentes son
esenciales para el desarrollo y crecimiento saludable de los mejillones, ya que su dieta
debe ser rica en ácidos grasos esenciales y proteínas.

La adición adecuada de nutrientes durante el cultivo de microalgas es

fundamental para optimizar su uso como alimento para el mejillón (Perna perna y
Perna viridis). Esta práctica no solo mejora la calidad nutricional del alimento
disponible, sino que también contribuye a una producción acuícola más sostenible y
eficiente. La investigación continua en este campo es esencial para desarrollar
estrategias que maximicen los beneficios nutricionales tanto para los organismos
cultivados como para los ecosistemas acuáticos en general. Es por ello, que la
presente investigación, presenta la determinación de los nutrientes óptimos necesarios
que beneficien el desarrollo favorable de ciertas especies de microalgas, para que
estas puedan ser empleadas a futuro para una eficiente producción acuícola en la
comunidad investigadora: Estación Hidrobiológica de “Turpialito”.

7
 DIAGNÓSTICO COMUNITARIO.

Descripción del contexto de la comunidad investigadora: Estación

Hidrobiológica “Turpialito”.

Razón social:

Es un centro de investigaciones marinas, dedicado al desarrollo de tecnologías

para ser utilizadas en la acuicultura. Esta estación pertenece a la Universidad de
Oriente y se encuentra adscrita al Instituto Oceanográfico de Venezuela.

Naturaleza de la organización:

La Estación Hidrobiológica de Turpialito funciona principalmente como centro de

monitoreo ambiental y productor de semillas de moluscos Bivalvos, además de producir
y evaluar biomasa microalgal bajo diferentes condiciones y proseguir con su aplicación
en la acuicultura, biotecnología y biorremediación ambiental. También estudia la
influencia de factores ambientales en las especies de mejillón Perna perna y Perna
viridis bajo condiciones específicas dentro del Golfo de Cariaco; se evalúa la
transferencia tecnológica del cultivo de la ostra de mangle Crassostrea rhizophorae.
Aunado a esto, la Estación se encarga crear paquetes tecnológicos que conlleven a la
producción controlada de organismos marinos y poner a disposición de las
comunidades aledañas de pescadores, capacitándolos con las medidas y técnicas
requeridas para desarrollar el cultivo comercial de los moluscos de mayor demanda.

8
 Localización geográfica:

Esta estación se encuentra ubicada en el estado Sucre, municipio Bolívar,

parroquia Mariguitar. Específicamente en la parte sur del Golfo de Cariaco, en el
poblado costero de Turpialito, a pocos kilómetros de la ciudad de Cumaná (8Km
aproximadamente).

 Norte: Golfo de Cariaco.

 Sur: Troncal 9 (carretera Cumaná-Mariguitar).

 Este: Playa Turpialito.

 Oeste: Carenero.

9
 Figura
1.

Ubicación geográfica de la Estación Hidrobiológica de Turpialito. (Tomada de Google

Maps).

Historia de vida de la comunidad:

La estación Hidrobiológica “Turpialito”, data del año 1950. Su fundador fue

Aníbal Vélez, quien en principio fue un investigador de la Universidad de Oriente, y,
posteriormente, se dedicó al desarrollo de la estación. Este centro ha sido pionero en
las tecnologías para cultivo de moluscos, incluso uno de los primeros proyectos allí
desarrollados fue el cultivo de Perna Perna (mejillón) y Pintac Imbricata (ostra perla).

Históricamente, ha sido la puerta de muchos investigadores al Golfo de Cariaco

y ha brindado espacios de formación académica para un gran número de estudiantes y
profesionales.

Organizaciones vinculadas al proyecto:

Las principales instituciones y organizaciones que se encuentran vinculadas al

proyecto son la Universidad Politécnica Territorial del Oeste de Sucre “Clodosbaldo

10
Russián”, por ser el centro universitario donde los miembros de este proyecto optaran
por el título de T.S.U. en Procesos Químicos, además de facilitar el empleo de los
laboratorios que sean necesarios para el desarrollo de los análisis químicos
pertinentes.

Por otro lado, el Instituto Nacional de Investigación Agrícola (INIA), es el

encargado cooperar con la coordinación general del proyecto para engendrar
resultados confiables en pos de un buen desarrollo metodológico, así como también
brindar los espacios adecuados para gestar excelentes resultados desde un punto de
vista experimental que permita a los proyectos avanzar.

Por último, la Estación Hidrobiológica de Turpialito, proporcionará sus

instalaciones para la llevar a cabo análisis, monitorear cultivo de microalgas y
mejillones.

Descripción del contexto.

Contexto social.

HAY QUE AVERIGUAR DE LA COMUNIDAD QUE SE UBICA AQUÍ

Esta estación se encuentra a cargo de 6 personas aproximadamente,

incluyendo directivos, investigadores y personal de limpieza que se encarga de
mantener en orden y resguardar las áreas del lugar.

11
 La estación cuenta con servicios básicos como: electricidad, internet, agua
potable. Aunque cuenta con un sistema propio para conseguir esta última, tomándola
del mar.

Contexto económico.

No es productor directo de recursos económicos, sin embargo, recibió

financiamientos de parte del FONACIT con el propósito de recuperar y adecuar los
espacios para el uso de la comunidad investigadora. Además tienen propuestas en
marcha con el fin de garantizar a las comunidades aledañas un banco de semillas de
mejillones para que estos puedan cultivar, cosechar y vender para obtener un sustento
o también para asegurar el alimento en tiempos de veda de otras especies comunes.

Contexto educativo.

Todas las actividades que se realizan dentro de la estación son meramente

educativas y destinadas a la investigación específicamente en la parte de acuicultura.
Está directamente relacionada al Instituto Oceanográfico de Venezuela y pertenece a la
Universidad de Oriente (UDO). Incluso otros centros educativos hacen uso de la
estación para investigaciones propias.

Contexto ambiental.

Por su ubicación en la zona costera del estado, cuenta con acceso directo al
mar, por lo tanto, son muchas los corales y especies marinas que allí habitan. Es usual
encontrar caracoles, erizos y otros animales marinos a las orillas de la playa.

En cuanto a vegetación se refiere, abundan las palmas y otras plantas

originarias de la costa montaña.
12
 Contexto de salud.

No cuentan con ningún centro de salud, lo que significa un factor de riesgo para
los que laboran en la estación. Ya que para recibir atención médica el lugar más
cercano es el ambulatorio de El Peñón, ubicado en la ciudad de Cumaná.

Jerarquización e identificación de las necesidades.

Los principales inconvenientes que afectan directamente a la estación se

encuentran encabezados por:

1. El transporte público hacia las proximidades del instituto investigador es

inconstante, ya que, debido a la localización de este, se dificulta el traslado para
las personas que allí laboran.
2. Muelle en mal estado, lo que dificulta el acceso marítimo a la estación.
3. El instituto, al ser un espacio natural protegido, no se puede permitir el realizar
estudios químicos.
4. Costos elevados en la producción y consumo del alimento para el cultivo de
moluscos.

13
Fortalezas Debilidades

 Uso de microalgas como alimento  Factores como la temperatura, pH,

altamente nutritivo y eficiente para los salinidad y luz pueden afectar
mejillones. significativamente el crecimiento y la
producción de biomasa.
 Impacto positivo en la sostenibilidad
de la acuicultura y la reducción de  La implementación de infraestructura
costos de producción. específica para cultivos de
microalgas y mejillones puede ser
 Posibilidad de producción constante y costosa, especialmente en áreas
controlada, asegurando el suministro rurales.
de alimento durante todo el año.
 Los experimentos para determinar
niveles óptimos de nutrientes pueden
requerir plazos largos antes de
generar resultados aplicables.
Oportunidades Amenazas

 Posibilidad de diversificar la  Las alteraciones en las condiciones

economía de comunidades costeras, climáticas, como aumento de
promoviendo la creación de empleo. temperaturas, acidificación de los
océanos y eventos extremos, podrían
 Oportunidad de desarrollar nuevas afectar la calidad del agua y el
tecnologías para optimizar el cultivo crecimiento de las microalgas y
de microalgas y mejillones. mejillones.

 Implementación de técnicas  Presencia de desechos industriales,

avanzadas para medir con mayor agrícolas o domésticos en cuerpos
precisión los niveles de nutrientes en de agua puede alterar el ecosistema
las microalgas. y dificultar el cultivo.

 Escasez o aumento en los precios de

fertilizantes, nutrientes o materiales
necesarios para los cultivos podría
aumentar los costos operativos.
Matriz FODA

Tabla 1. Matriz FODA, construida a partir del diagnóstico comunitario.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.

14
 El imperioso impulso de explorar opciones para la nutrición global ha provocado
que la creatividad humana se dirija hacia la identificación de fuentes proteicas que sean
económicamente accesibles y posean una elevada capacidad de producción,
condiciones esenciales para el sustento cotidiano y el adecuado funcionamiento,
incluso, en el ámbito laboral. La acuicultura responde a esta urgencia. El cultivo
intencional de organismos acuáticos en ambientes controlados para producir bienes y
servicios, satisfacen, favorablemente, este tipo de necesidades humanas (David H.
Whitaker, 2000).

La acuicultura comprende el cultivo de un sinfín de especies (peces, moluscos,

crustáceos y plantas), y del mismo modo, múltiples métodos para la alimentación de
estas. Las microalgas son organismos fotosintéticos unicelulares que pueden ser
cultivados para la producción de biomasa y compuestos bioactivos; son fuentes
sostenibles de lípidos, proteínas y carbohidratos, y con un gran potencial en la industria
alimentaria (Gouveia, 2005). En esencia, en el cultivo de ciertos organismos, las
microalgas se utilizan frecuentemente como alimento para larvas. Por ejemplo, en la
acuicultura de camarones y mejillones, se alimentan con microalgas para asegurar un
crecimiento saludable.

Desde una perspectiva económica, el cultivo de mejillones ha emergido como

una actividad rentable que potencia las economías locales. Las técnicas modernas de
acuicultura han permitido optimizar el rendimiento y la calidad del producto final,
generando empleo y fomentando la innovación en las comunidades pesqueras. La
creciente demanda global por productos del mar sostenibles y saludables ha impulsado
a países como España, Italia, Francia y Chile a consolidar su posición como líderes en
este sector. Las iniciativas para promover prácticas sostenibles no solo garantizan la
viabilidad económica del cultivo de mejillones, sino que también contribuyen al
bienestar ecológico del entorno marino. Así, el cultivo de mejillones se convierte no solo

15
en una fuente de ingresos económicos para las comunidades costeras, del mismo
modo se convierte en un modelo ejemplar de desarrollo sostenible que combina
economía y ecología.

Con una extensa costa que se extiende a lo largo del Caribe, Venezuela posee
un ecosistema marino rico y variado, donde las condiciones ambientales, como la
temperatura, la salinidad y la disponibilidad de nutrientes, crean un hábitat propicio para
el desarrollo de mejillones. Sin embargo, a pesar del potencial significativo de este
cultivo en el país, existen desafíos que requieren atención. En las últimas décadas, el
calentamiento global ha emergido como uno de los desafíos más significativos que
enfrenta la acuicultura a nivel nacional y mundial; este fenómeno ha provocado
cambios drásticos en las condiciones ambientales de los ecosistemas acuáticos del
país, afectando la calidad del agua, la temperatura y la disponibilidad de nutrientes.
Como consecuencia, el desarrollo óptimo de las especies cultivadas, incluidas las
microalgas, se ve comprometido. Según el Panel Intergubernamental sobre Cambio
Climático (IPCC, 2021), “el aumento de la temperatura del océano afecta a los
ecosistemas marinos y costeros, alterando su productividad y biodiversidad”. Las
microalgas son esenciales no solo como fuente de alimento en acuicultura, sino
también por su capacidad para contribuir a la sostenibilidad ambiental. Sin embargo, en
un contexto donde las condiciones ambientales son cada vez más inciertas, se vuelve
crucial entender cómo optimizar su cultivo a través de una adecuada dosificación de
sus nutrientes.

Uno de los problemas más apremiantes es que las fuentes nutricionales para el
cultivo de microalgas no están siendo sistematizadas correctamente. La variabilidad en
los factores ambientales (como la temperatura del agua, el pH y la concentración de
nutrientes) genera fluctuaciones significativas en el crecimiento y productividad
microalgal. Por ejemplo, un aumento en la temperatura puede acelerar el metabolismo
celular, pero también puede inducir estrés térmico que afecta negativamente su
desarrollo. Investigaciones han demostrado que “la temperatura influye en la tasa de

16
crecimiento y en la composición química de las microalgas” (Khan et al., 2020). Esta
falta de sistematización no solo limita la producción eficiente de microalgas, sino que
también introduce incertidumbres en la calidad del producto final utilizado como
alimento para especies acuáticas como los mejillones.

Además, la dosificación inadecuada de nutrientes puede resultar en el

crecimiento desigual de estos organismos e incluso en la proliferación de algas nocivas
que pueden comprometer la salud del ecosistema acuático. Según un estudio realizado
por Anderson et al. (2019), “las prácticas inadecuadas en la fertilización pueden llevar a
desequilibrios ecológicos que afectan negativamente a las comunidades acuáticas”.
Esto se traduce en pérdidas económicas para los acuicultores y pone en riesgo la
sostenibilidad a largo plazo del sector. La necesidad urgente es desarrollar protocolos
claros y adaptativos para la administración de nutrientes que consideren estos factores
ambientales variables y permitan ajustar las prácticas agrícolas a las condiciones
cambiantes. Del mismo modo, este país, con su rica biodiversidad y abundantes
sedimentos, presenta una oportunidad única para el cultivo de microalgas que pueden
ser utilizadas para alimentar mejillones y otros organismos marinos. La calidad de los
sedimentos venezolanos favorece el desarrollo óptimo de especies marinas, lo que
resulta en la producción de ácidos grasos esenciales y otros compuestos bioactivos
que son altamente valorados en el mercado internacional. Según López y Ramírez
(2021), "los sedimentos en las costas venezolanas contienen una composición mineral
única que potencia el crecimiento de microalgas ricas en nutrientes". Esto proporciona
a Venezuela una ventaja competitiva que muchos otros países no poseen.

No obstante, a pesar de la creciente inversión en la acuicultura y el potencial de

las microalgas, existe una notable falta de incentivos para la investigación y el
desarrollo en este sector venezolano. Esto ha llevado a que muchas iniciativas
relacionadas con el cultivo de microalgas sean desestimadas. Según un informe del
Ministerio del Poder Popular para la Agricultura Productiva y Tierras (2022), “la
inversión en biotecnología acuícola ha sido insuficiente para impulsar investigaciones

17
que optimicen procesos productivos y mejoren la competitividad del país en el mercado
internacional”. Este contexto limita no solo el avance científico en la administración
adecuada de nutrientes, sino también la capacidad de los productores locales para
competir adecuadamente en un mercado global.

La falta de incentivos se agrava por la escasez de recursos y apoyo técnico, lo

que impide a los investigadores y acuicultores optimizar las prácticas de cultivo. La
administración inadecuada de nutrientes puede resultar en bajos rendimientos y calidad
del producto final, lo que frena su comercialización tanto local como internacional.
Como señala un estudio realizado por García et al. (2021), “la optimización de la
fertilización es crucial para maximizar el rendimiento y la calidad de las microalgas,
pero sin una infraestructura adecuada y financiamiento, estas prácticas quedan
relegadas”. Sin un enfoque sistemático hacia la investigación y desarrollo en este
ámbito, se corre el riesgo de perder oportunidades valiosas en un mercado que
muestra un creciente interés por productos marinos sostenibles.

En este sentido, y a pesar de los avances en la investigación, muchos cultivos

dependen actualmente de fertilizantes costosos que no han demostrado ser efectivos
en el rendimiento esperado. Según Pérez et al. (2023), "el uso de fertilizantes
convencionales en el cultivo de microalgas ha resultado en un incremento significativo
en los costos, sin una correlación proporcional en los resultados productivos". Los altos
costos asociados con estos insumos representan una barrera considerable para los
productores, especialmente en contextos económicos vulnerables, como es en el
estado Sucre. De acuerdo con una revisión reciente, "los costos elevados de los
fertilizantes han llevado a muchos cultivadores a re-evaluar sus estrategias
nutricionales, buscando alternativas más sostenibles y económicas" (Martínez y
Sánchez, 2022). Esta situación se agrava por la falta de investigaciones que respalden
este tipo de proyectos.

18
Hoy en día, y a pesar de este tipo de problemáticas que se presentan, se tiene el vasto
conocimiento de que las microalgas cultivadas adecuadamente pueden utilizarse como
semillas para la producción de productos marinos, creando un ciclo productivo eficiente
que maximiza el uso de recursos. Sin embargo, si las microalgas no son alimentadas
con nutrientes adecuados desde el inicio, su efectividad como semillas se ve
comprometida, así que, considerando los errores investigaciones previas se busca
fomentar un proceso de mejora continua con el fin de alcanzar resultados óptimos en
este cultivo, ya que existe un interés creciente por parte del sector acuícola en
Venezuela por mejorar la producción a través del cultivo eficiente de microalgas para
alimentar mejillones, por ende es esencial abordar los problemas actuales relacionados
con el uso ineficiente y costoso de fertilizantes convencionales.

En consonancia con la problemática expuesta, se plantean las siguientes

preguntas:

¿Cómo mejorar los métodos de cultivos microalgales para hacerlos más eficaces
y productivos para un mejor aprovechamiento?

¿Cuáles son las especies de microalgas más adecuadas a utilizar como fuente
principal de alimento en el cultivo de mejillones?

¿Qué parámetros o lineamientos deben cumplir las especies de microalgas

elegidas para ser consideradas como óptimas?

¿Qué tipos de nutrientes favorecerán el crecimiento adecuado de las distintas

especies de microalgas?

19
 OBJETIVOS.

Objetivo general:

Determinar niveles óptimos de nutrientes que favorezcan el crecimiento eficiente

de Chaetoceros Gracillis e Isochrysis Galbana con el fin de maximizar la producción y
minimizar costos asociados a su cultivo.

Objetivos específicos:

 Establecer niveles de crecimiento para Chaetoceros Gracillis e Isochrysis

Galbana, de acuerdo su densidad celular, en tres diversas concentraciones.

 Evaluar parámetros físicos de desarrollo celular (pH, luminosidad, temperatura)

de Chaetoceros Gracillis e Isochrysis Galbana, en diversas concentraciones.

 Determinar niveles de nitritos, nitratos y fosfatos en cultivos de Chaetoceros

Gracillis e Isochrysis Galbana, bajo diferentes concentraciones, según los
métodos: fósforo COVENIN 1130 y espectrofotometría.

 Cuantificar proteínas y lípidos totales en cultivos de Chaetoceros Gracillis e

Isochrysis Galbana, bajo distintas concentraciones.

20
 JUSTIFICACIÓN.

La limitada disponibilidad de estudios locales sobre parámetros de cultivo

adecuados en Venezuela ha impactado negativamente la capacidad de los acuicultores
para optimizar sus procesos productivos, lo que resalta la necesidad de investigaciones
que aborden este problema. Como afirman Ramírez y Sánchez (2019), “la falta de
información técnica ajustada a las condiciones locales limita el desempeño eficiente de
las actividades acuícolas en el país”. En este contexto, este proyecto tiene el potencial
de generar nuevas oportunidades económicas en comunidades costeras al promover el
desarrollo tecnológico y la investigación sobre el cultivo de microalgas, como
Chaetoceros gracilis e Isochrysis galbana. Estas especies, según Cañizares y
Hernández (2013), “destacan por su alto valor nutricional y su importancia en la
formulación de alimentos acuícolas de alta calidad”. Este enfoque también diversificaría
las actividades económicas en áreas donde la pesca tradicional ha disminuido por
sobreexplotación, como señala la FAO (2021): “La diversificación de actividades es
esencial para garantizar la sostenibilidad económica de las comunidades pesqueras”.

El uso de microalgas como alimento para mejillones ofrece ventajas

significativas. Becker (2013) destaca que “las microalgas tienen un ciclo de vida corto y
una productividad elevada, lo que las convierte en una fuente de alimento eficiente y
económica”. Esto permite una producción continua, reduciendo los costos de
alimentación, un aspecto crítico para regiones donde los mejillones representan una
actividad económica esencial. Soto y Ramírez (2018) también subrayan que “la
estabilidad en el suministro de alimentos acuícolas es clave para la competitividad en
los mercados internacionales”. Además, los mejillones alimentados con microalgas
muestran mejoras en calidad, crecimiento y sabor. Según Pacheco et al. (2015), “el uso

21
de microalgas en la dieta de mejillones incrementa su valor comercial al mejorar sus
características organolépticas y su perfil nutricional”.

Finalmente, al investigar los niveles óptimos de nutrientes para el cultivo de

microalgas, este proyecto podría posicionar a Venezuela como un referente en la
producción sostenible de alimentos acuícolas. Como concluyen Soto y Ramírez (2018),
“el avance en tecnologías acuícolas es fundamental para enfrentar los desafíos
económicos y ambientales de la industria global”. Esto no solo impulsará la
competitividad de la acuicultura nacional, sino que también fomentará la innovación
tecnológica y la generación de empleos en el sector.

22
 ANTECEDENTES.

Entre los antecedentes más significativos se destaca la contribución de la

investigación realizada por Carmen E. Carrillo de Cori, Carmen Arvelo de Valle, Magaly
Ruiz,José G. Escalona, Rosa Gutiérrez, Mariela Navas, Luis Castillo, Shyrley
Fernández, Rómulo Noguera, Carmen Silva, Eilen Arteaga, Isabel E. Arrieche Tirso
Díaz, Beatriz Arrieche, Óscar Gamboa, Óscar Rojas y Francisca Sosa titulado: “Análisis
de fósforo soluble en agua en fertilizantes” donde su objetivo principal es establecer un
método estandarizado y confiable para la determinación de fósforo soluble en agua en
fertilizantes, evaluando su precisión y exactitud a través de un análisis interlaboratorial
y aplicando pruebas estadísticas que permitan identificar y reducir variabilidades en los
procedimientos actuales. El análisis de la determinación de fósforo soluble en agua en
fertilizantes, llevado a cabo en ocho laboratorios, se basó en ocho métodos distintos
que incluyen una fase de extracción y una de determinación. Aunque los
procedimientos varían ligeramente, todos implican la extracción con agua destilada y
una determinación espectrofotométrica (color amarillo), volumétrica o gravimétrica,
siendo la espectrofotométrica la más utilizada por su rapidez.

Se analizaron cinco tipos de fertilizantes comerciales (roca fosfórica, roca

fosfórica parcialmente acidulada, NPK nacional e importado, y fosfato monoamónico) y
un estándar reactivo (KH₂PO₄). El objetivo fue establecer un método estándar para
analizar el fósforo soluble en agua y evaluar su precisión y exactitud.

El análisis involucró 120 pruebas en total, repitiendo las extracciones tres veces
para cada muestra. Se aplicaron pruebas estadísticas (Wilk-Shapiro y análisis de

23
varianza) que revelaron diferencias significativas entre los laboratorios. Estas
diferencias se atribuyen a factores como variaciones en operadores, equipos y técnicas
aplicadas.

La precisión se evaluó siguiendo la norma COVENIN 2972-92, enfocándose en

repetibilidad y reproducibilidad. Se emplearon las pruebas de Cochran y Dixon para
identificar laboratorios con problemas en estas métricas, asegurando así la
confiabilidad del método propuesto.

Al final se mostró un amplio rango de resultados que variaron entre 0,01 % y

52,15 %. Tras aplicar la prueba de normalidad de Wilk-Shapiro, se observó que todas
las muestras, excepto la roca fosfórica (RF), presentaron una distribución normal. La
RF no se incluyó en el análisis de varianza ya que no contiene cantidades significativas
de fósforo hidrosoluble, y los resultados obtenidos se consideraron dentro del margen
de error.

Siguiendo esta línea de investigación, el aporte de Laura Hernández-Alpízar,

Ricardo Coy-Herrera (2015) titulado: “Evaluación de técnicas de cuantificación de
nitratos en agua potable para análisis en línea” se usó para la determinación de ion
nitrato en muestras acuosas, se prepararon curvas de calibración utilizando un
estándar certificado de 1000 mg/L con trazabilidad al NIST. Las diluciones se realizaron
con agua ultrapura (18 ohm) y se midieron con una balanza analítica de alta precisión,
generando concentraciones entre 0,200 y 9,952 mg/L. Se aplicaron cuatro técnicas
analíticas: cromatografía iónica con detección de conductividad, espectrofotometría UV,
y dos métodos de inyección en flujo. En la cromatografía iónica, se usó un
cromatógrafo Methrom con una columna específica y un eluyente compuesto por
NaHCO₃ y Na₂CO₃, mostrando alta sensibilidad y linealidad, aunque con mayor señal

24
de ruido en bajos niveles de concentración debido a posibles interferencias del
eluyente.

El análisis por espectrofotometría UV se llevó a cabo con un espectrofotómetro

de doble haz y lámpara de deuterio, demostrando un comportamiento lineal ideal según
la Ley de Beer-Lambert. Para los sistemas de inyección en flujo, uno utilizó reducción
catalizada por cadmio con detección a 540 nm de la absorción visible de un complejo
cromogénico, y otro midió la absorción directa en UV a 220 nm, registrando también en
250 y 300 nm para corregir posibles interferencias orgánicas. Los datos obtenidos
fueron analizados para calcular límites de detección, cuantificación, correlación lineal y
sensibilidad, donde la cromatografía iónica destacó por su mayor pendiente en la curva,
aunque las técnicas espectroscópicas también mostraron alta correlación y menor
sensibilidad a variaciones en bajas concentraciones, manteniendo una alta
relación señal-ruido.

Asimismo, en otro estudio, Erika Cabrera Molina, Lucía Hernández Garciadiego,

Humberto Gómez Ruíz, Ma. del Pilar Cañizares Macías (2003) titulado: “Determinación
de nitratos y nitritos en agua. Comparación de costos entre un método de flujo continuo
y un método estándar” donde el procedimiento experimental consistió en la
determinación de nitratos y nitritos en aguas mediante un sistema de análisis por
inyección en flujo (FIA) usando una columna de cadmio cuperizado. Para preparar los
reactivos, se utilizó sulfato de cobre con EDTA para cuperizar los gránulos de cadmio,
lo que evitó su disolución durante la reacción al reducir el potencial de oxidación del
cobre. Se preparó una disolución amortiguadora de amonio/amoniaco ajustada a pH
8.5 y un reactivo colorimétrico compuesto de sulfanilamida y 1-naftiletilendiamina (NED)
en ácido fosfórico al 10% para la formación de un compuesto azoico que se detecta
espectrofotométricamente a 540 nm. El cadmio se tamizó a un tamaño de 40-60 µm, se
cuperizó siguiendo un procedimiento que incluyó lavados con HCl y tratamientos con la
disolución cuperizante, y luego se empacó en una columna de teflón de 10 cm de
longitud y 0.3 mm de diámetro interno.

25
 El análisis se realizó en un equipo automatizado (OI-Analytical 3000) con dos
canales de flujo para la determinación simultánea de nitritos y nitratos; en un canal, se
determinaban nitritos directamente, mientras que, en el otro, los nitratos se reducían a
nitritos en la columna antes de la reacción colorimétrica. Se inyectaron 100 µL de
muestra en un flujo de agua destilada que se mezcló con la disolución amortiguadora,
optimizando un flujo de 0.4 mL/min. La eficiencia de la columna de cadmio se evaluó
con soluciones estándar de nitritos y nitratos, mostrando una eficiencia de reducción
del 99% para bajas concentraciones y del 80% para concentraciones superiores a 8
µg/mL. Se optimizaron las concentraciones de los reactivos, comprobando que la
sulfanilamida a 0.023 M era suficiente para mantener la respuesta óptima sin pérdida
de señal.

La precisión del método se verificó con mezclas de concentraciones conocidas,

obteniendo una desviación estándar relativa del 1.8%. Se construyeron curvas de
calibración para nitritos y la combinación de nitritos y nitratos, alcanzando un límite de
detección de 0.017 µg/mL y un límite de cuantificación de 0.057 µg/mL. Además, se
elaboraron cartas de control al analizar estándares durante doce días para garantizar la
reproducibilidad, estableciendo límites de confianza basados en la desviación estándar,
lo que asegura la fiabilidad del método para aplicaciones ambientales en la
determinación de contaminantes nitrogenados en agua.

26
 METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN

 Nivel de la investigación

De acuerdo a la complejidad de esta investigación, es considerada de tipo

descriptiva, y según Sampieri (2014) este tipo de investigación “busca especificar
propiedades y características importantes de cualquier fenómeno que se analice”. En
este sentido se pretende comparar los resultados obtenidos mediante la determinación
de nutrientes a varias especies de microalgas, con el fin de ºdeterminar el método de
cultivo más eficiente para así proceder a la alimentación de los moluscos Perna Perna.

 Diseño de la investigación

Esta investigación se considera como una investigación de campo, la cual

Sampieri (2014), señala que ´´se basa en la observación y en el estudio sistemático del
comportamiento que tiene un hecho con el objetivo de obtener datos´´. Cabe resaltar
que fue necesario conocer los distintos tipos de cultivos de microalgas, para así
continuar con el desarrollo del más eficiente de estos. Además de la toma de muestras
de agua de mar para su posterior análisis, en las playas aledañas a la población de
´´Turpialito´´.

Se considera esta investigación como experimental puesto que ´´se lleva a cabo
un experimento para analizar si una o más variables independientes afectan a una o
más variables dependientes y por qué´´ (Kirk, 2012 y Montgomery, 2012).

27
  Población y muestra

Lepkowski (2008) define una población como “el conjunto de todos los casos que
concuerdan con una serie de especificaciones”, en ese sentido, se estudiarán varios de
los casos desarrollados relacionados a microalgas con diferentes dosis de fertilizantes
comercial, tomando como muestra las distintas porciones de microalgas y fertilizantes
comercial en diversas concentraciones.

 Técnicas e instrumentos de recolección de información

Recolectar los datos implica elaborar un plan detallado de procedimientos que

nos conduzcan a reunir datos con un propósito específico (Sampieri, 2014). Es por ello,
que para indagar sobre la comunidad donde se asentó la investigación fue
imprescindible de entrevistas concretas para conocer de su origen, organización y
actividades a lo largo de los años, sin dejar de lado las problemáticas que afectan de
manera directa o indirecta la trayectoria de sus investigaciones.

La observación directa también fue una herramienta fundamental en este

proceso, pues hay una relación directa con lo que ocurre y de esta forma se torna más
sencillo la puesta en marcha de la investigación.

Además, en la parte experimental, se emplean instrumentos como:

espectrofotómetro, phmetro, microscopios, siendo estos primordiales para conocer
datos esenciales lo que a la parte química de este proyecto respecta.

28
 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

 Recolección de muestras

Es necesario recolectar muestras de distintos cultivos, para así comparar la

cantidad de nutrientes que cada una de estas posee, para esta ocasión el muestreo se
realizó en los cultivos correspondientes rotulando correctamente para cada uno de
ellos.

 Filtración

En el laboratorio, se procede con una filtración al vacío de cada una de las muestras
tomadas, para así eliminar impurezas. Luego se lleva a refrigeración para conservar.

 Evaluación de parámetros físicos

.1. PH (Richmond, 1986): Para medir el pH se coloca un poco de la muestra

en un vaso de precipitados y se sumerge el electrodo del phmetro, cabe
destacar que el aparato debe estar calibrado con una sustancia de pH
neutro, en este caso agua.

29
 .2. Luminosidad: Se utiliza luz artificial constante períodos de 24 horas por
medio de lámparas del tipo ´´cool white´´ (2500 lux), estas emanan menos
calor en comparación a otros tipos de luz artificial y son igualmente
eficientes. Normalmente se exponen a luz directa en todos los niveles de
cultivo, desde el cepario hasta los cultivos a gran escala que alcanzan
hasta 400L. Estas lámparas están conectadas por pares a sus respectivos
balastros, estas a su vez se conectan a un interruptor de seguridad que
se encuentra localizado en la pared exterior al espacio de cultivo.

.3. Temperatura: esta se mantiene constante por medio de un aire

acondicionado integral acorde a las dimensiones del cuarto de cultivo. Se
sugiere mantener el área a una temperatura promedio de 22 ºC para
tratar de evitar que al momento de utilizar la microalga como alimento
esta disminuya de calidad es decir que sus paredes celulares comiencen
a reventarse debido al brusco incremento en la temperatura que presenta
el cultivo principal. Se tiene un termómetro de máximos (24ºC) y mínimos
(21ºC) para verificar la temperatura del laboratorio de manera periódica.

 Determinación de nitritos, nitratos y fosfatos

.1. Nitritos (método de reducción de nitratos a nitritos): la determinación se

basa en una reducción de nitratos a nitritos, utilizando columna de
cadmio, los cuales reaccionan con sulfanilamida y N-1-naftilendiamina
para dar un compuesto azoico cuya absorbancia se mide a 540nm. Para
ello, se separan 50mL del cultivo de microalgas, posteriormente se le
agrega 1mL de las sustancias antes mencionadas, luego se pasa esta
muestra por la columna de cadmio y finalmente se llevan al
espectrofotómetro previamente calibrado para realizar las pruebas
correspondientes.

30
.2. Nitratos (método estándar): para los nitratos se realiza un procedimiento
similar al de la determinación de nitritos, pero en este caso, se toma 25mL
de cada una de las muestras a estudiar. Se procede añadir 75ml de una
solución de cloruro de amonio + EDTA, preparada anteriormente, para
luego pasar cada una de las muestras por columna de cadmio. Agregar,
con ayuda de una pipeta 2ml de reactivo de color. Por último, cada una de
las muestras son llevadas al espectrofotómetro para medir absorbancia.

.3. Fosfatos (determinación por UV-VIS): El método propuesto para

determinar fosfatos se basa en la formación de un heteropoliácido con el
reactivo vanado-molíbdico (de color amarillo y soluble en agua) cuya
absorción de luz se mide a 420 nm. En esta identificación interfieren
concentraciones apreciables de hierro, silicato y arseniato, entre otras
especies. Es decir, estas especies absorben luz a la longitud de onda
utilizada. Para eliminar dicha interferencia se preparará un blanco (sin
fosfato) cuya absorbancia se restará de la del resto de las muestras.

31
  Plan de acción

Objetivo específico Actividad Responsable Área Materiales y

reactivos

1. Establecer Estación
niveles de hidrobiológi
crecimiento para ca ´´Aníbal
Chaetoceros Vélez´´
Gracillis e
Isochrysis
Galbana, de
acuerdo su
densidad celular,
en 3 tipos de
concentración
(baja, media y
alta).

2. Evaluar 2.1. Estación 2.1. pHmetro,

parámetros 2.1 Calibrar el Mariangel hidrobiológi agua destilada,
físicos de pHmetro y Guerra. ca ´´Aníbal vasos de
desarrollo celular proceder con Vélez´´ precipitados,
(pH, luminosidad, la medición 2.2. José muestra de
temperatura) de correspondien Rivas y cultivos de
Chaetoceros te. Bladimir microalgas,
Gracillis e 2.2 Elaborar y Olivar papel, lápiz.
Isochrysis construir el
Galbana, en 3 sistema de 2.3. 2.2. Cables,
tipos de iluminación Josmarys interruptor,
concentración necesario Rincones. lámparas tipo

32
(baja, media y para el cultivo ´´cool white´´
alta). de microalgas. de 80W.
2.3 Establecer y
corroborar 2.3
temperaturas Termómetros,
máximas y papel, lápiz.
mínimas
adecuadas
para la
preservación
de cultivos.

3. Determinar 3.1 Preparar y 3.1 Estación 3.1. Columna

niveles de ordenar los Bladimir hidrobiológi de cadmio,
nitritos, nitratos y reactivos en el Olivar y ca ´´Aníbal sulfanilamida y
fosfatos en espacio de José Vélez´´ N-1-
cultivos de trabajo, Rivas. naftilendiamina,
Chaetoceros distribuyéndolos cloruro de
Gracillis e de forma que 3.2 amonio, EDTA,
Isochrysis cada Mariangel vanado-
Galbana, bajo 3 determinación de Guerra y molíbdico,
tipos de nutrientes se Josmarys espetrofotómetr
concentración encuentre en una Rincones. o.
(baja, media y estación distinta.
alta), según los 3.3 Todos 3.2. Beakers,
métodos: fósforo 3.2 Disponer los los pipetas,
COVENIN 1130 materiales integrante erlenmeyers,
y necesarios en los s. muestra de
espectrofotometrí espacios y cultivo, muestra
a. calibrar el del blanco.
espectrofotómetro

33
 . 3.3. Se
emplean todos
3.3. Llevar a cabo los materiales y
pruebas de reactivos
nitritos, nitratos y descritos en 3.1
fosfatos, y 3.2.
empleando
muestras de los
cultivos bajo los
tres tipos de
concentración.
4. Cuantificar Estación
proteínas y hidrobiológi
lípidos totales en ca ´´Aníbal
cultivos de Vélez´´
Chaetoceros
Gracillis e
Isochrysis
Galbana, bajo 3
tipos de
concentración
(baja, media y
alta).

34