CENTRO DE SALUD INTEGRAL COLCAPIRHUA POE-03
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS
SEROLOGIA
PROTEINA C REACTIVA (PCR) Página 1 de 7
1. OBJETIVO:
Determinar en forma cualitativa la proteína C reactiva en suero mediante la
prueba rápida de aglutinación en látex.
2. CAMPO DE APLICACIÓN:
Área de química sanguínea.
3. RESPONSABLE:
Bioquímicos (as) en cargo laboratorio clínico.
4. DEFINICIONES:
P.C.R.:
La proteína C Reactiva es una glicoproteína que recibe ese nombre debido a
su propiedad de precipitar, al refaccionar con el polisacárido C del neumococo.
La concentración PCR en el suero es en condiciones normales, muy baja
menor o igual a 5mg/l aumenta muy rápidamente cuando se inicia una reacción
inflamatoria, permanece elevado a lo largo de la misma y disminuye
velozmente cuando esta cesa. La concentración alcanza por la PCR es
directamente proporcional a la intensidad del fenómeno inflamatorio
subyacente.
5. DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO:
5.1. Fundamento:
La prueba PCR se basa en la reacción inmunológica entre la proteína C
reactiva de la muestra del paciente o suero control y el correspondiente
anticuerpo anti- PCR humano, que recubre las partículas de látex. Una
reacción positiva es indicada por una marca y visible aglutinación de las de
látex. Una reacción positiva es indicada por una macada y visible aglutinación
de las partículas de látex en el área de la lámina.
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NOMBRE: PERSONAL DE NOMBRE: NOMBRE:
LABORATORIO C.S.M.C
CARGO: BIOMICOS I,II,III CARGO: CARGO:
FECHA: Enero 2016 FECHA: FECHA:
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La prueba PCR se basa en la reacción inmunológica entre la Proteína C
reactiva del paciente o suero control y el correspondiente anticuerpo anti- PCR
humano
Una reacción Positiva es indicada por una marca y visible aglutinación de las
partículas de látex.
5.2. Muestra:
La muestra a usarse es cuero libre de contaminación, hemolisis y fuertemente
lipemicos: obtenido por la punción venosa o capilar de la tradicional.
5.3. Equipos:
Rotor automático entre 100-120 r.p.m. centrifuga y reloj.
5.4. Reactivos: Human.
El reactivo CRP-Humatex Látex PCR en suspensión mezclada con partículas
de poliestireno (inerte). Recubierta con anticuerpos mono específicos anti
humano PCR.
Suero control Positivo y control Negativo, y buffer glicina NaCI, listos para usar.
5.5. Materiales:
Micropipetas, tips, laminas con áreas de fondo oscuro o placa de vidrio de de
fondo negro y aplicadores.
5.6. Procedimiento:
Human
Determinación Cualitativa
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Atemperar reactivos y muestras y homogeneizar el reactivo suavidad.
En una placa de vidrio de fondo negro poner:
Colocar en la lámina:
Muestra 40ul
Reactivo PCR (látex) 1 gota
Mezclar con un aplicador desechable, procurando extender la mezcla en
forma circular por toda la superficie interior del círculo.
Agitar la tarjeta a 100r.p.m. durante 2 minutos. Mezclar la placa de atrás
hacia delante por 2 minutos o colocar en rotor a 100rpm
Pasado este tiempo observar la presencia de aglutinación, bajo luz
artificial.
La aglutinación indica un contenido de PCR de más de 6 mg/l en la
muestra sin diluir.
En este caso se debe realizar la prueba semi-cuantitativa, para saber el
título de la muestra
5.7. Determinación Semi-cuantitativa:
Realizar las respectivas diluciones de la muestra de acuerdo al siguiente
esquema:
Dilución Procedimiento Concentración (mg/l)
½ 20ul sol. Fisiológica + 20ul suero 12
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¼ 60ul sol. Fisiológica + 20ul suero 24
1/8 70ul sol. Fisiológica + 10ul suero 48
1/16 150ul sol. Fisiológica + 10ul 96
suero
1/32 310ul sol. Fisiológica + 10ul 192
suero
1/64 630ul sol. Fisiológica + 10ul 384
suero
A partir de la disolución ¼ realizar la disolución en tubo y tomar solo 40ul de la
respectiva dilución.
Una vez realizando el mismo proceder de la misma forma como en la
determinación cualitativa expresar los resultados de acuerdo al título de la
dilución correspondiente en mg/l.
5.8. Interpretación de resultados:
En caso positivo aparece una aglutinación visible macroscópicamente.
Leer el título en la última dilución que presenta una aglutinación visible.
Multiplicar el título por el factor de conversión 6 y reportar el resultado en mg/l
Procesar simultáneamente control positivo y negativo.
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5.9 Linealidad:
En muestras cuya concentración es muy inferior o prácticamente está ausente
la proteína PCR, no es detectable por el Kit, a diferencia de concentraciones
superiores o iguales a 6mg/l que es detectable por el sistema, hasta las
diluciones respectivas en cuya concentración se encuentra presente la
proteína. Por ejemplo 1/ 8, 1/ 16, etc.
5.10. Interferencias:
Sueros contaminados y fuertemente lipemicos.
Un tiempo mayor al de reacción puede dar resultados falsos positivos.
Sueros hemolizados.
5.11. Calculo de resultados:
La concentración aproximada de PCR en la muestra del paciente es calculada
como sigue: Leer el título en la última dilución, que presente una aglutinación
visible.
Multiplicar el titulo por el factor 6. Y reportar el resultado en mg/l
PCR=Titulo de la Ultima Dilucion∗Factor ( 6 )
Ejemplo: Titulo 1/16=concentración de PCR
16X6 = 96 mg/L.
5.12. Valores de referencia:
Negativo
Positivos mayores a 6 mg/l.
5.13. Interpretación clínica:
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Fiebre reumática, artritis reumatoide, infarto de miocardio, cáncer (activo
diseminado) infecciones bacterianas y virales y en el post operatorio (no
complicado), disminuye después del cuarto día.
La reacción de PCR es un indicador sensible para los procesos inflamatorios y
es positiva en los siguientes casos:
Fiebre reumática
Artritis reumatoidea
Infarto de Miocardio
Cáncer (activo diseminado)
Infecciones bacterianas y virales
En el post operatorio (no complicado), disminuye después del 4to. día
La elevación de la proteína C reactiva refleja, casi siempre, la presencia de un
proceso inflamatorio (no necesariamente reumático), aunque no da ninguna
información sobre sus causas es muy inespecífica.
La cuantía de la elevación de la PCR es útil desde el punto de vista del
pronóstico, pues nos indica la intensidad del proceso patológico que la origina e
incluso, la respuesta del paciente al tratamiento.
5.14. Precauciones:
Material sucio o mal lavado que pueda precipitar el reactivo de latex.
5.15. Control de calidad:
Se realiza control de calidad interno con controles comerciales, se debe
realizar diariamente en los diferentes turnos y correr juntamente con las
muestras. El control de calidad externo de acuerdo a la programación.
5.16. Recomendaciones:
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Se recomienda dispensar el reactivo en forma vertical y muy separada de la
nuestra para evitar contaminaciones del mismo reactivo con las muestras y
para asegurar el completo dispensado del reactivo.
Material sucio o mal lavado que pueda precipitar al reactivo de látex.
6. FORMULARIOS Y REGISTROS: Se informa el resultado en mg/l, se debe
registrar en el cuaderno de químicas del respectivo turno, luego al cuaderno de
resultados generales de emergencias y particulares, de ahí serán transcritos al
sistema para su posterior entrega de resultados al paciente.
[Link] BIBLIOGRAFICAS :
Manuel – Human Alemania.
Gilberto, Angel, Mauricio Ángel. Interpretación Clínica del Laboratorio
Internacional LTDA. 2006 .Editorial Medica 7º Edición. Bogotá Colombia.
Balcells, Alfonso. La Clínica y el Laboratorio. Editorial Masson S.A. 2001.
18º Edición Barcelona España. Pagana, Pagana. Guía de pruebas
diagnósticas y de laboratorio. Editorial Elsevier España 2008. 8º Edición
Barcelona España.
Gilberto, Ángel. Diccionario del Laboratorio Clínico. Editorial Médica
Panamericana. 2007.
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