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Tipos de Microscopía en Biología Celular

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Universidad de Sonora

Campus Navojoa
Biología Celular
Dr. Edgar F. Morán Palacio

Tema 2. Introducción al Estudio de las Células


Tarea 1. Las células bajo el microscopio: Tipos de microscopía

1. Define qué es un microscopio y su importancia en la ciencia.

Un microscopio es un instrumento óptico que amplifica la imagen de objetos


pequeños, permitiendo observar estructuras invisibles al ojo humano. Es crucial en la
ciencia para estudiar células, tejidos y moléculas, lo que ha llevado a
descubrimientos fundamentales en biología, medicina y nanotecnología.

2. Tipos de Microscopía:

▪ Microscopía Óptica:
La microscopía óptica utiliza luz visible para iluminar y lentes ópticos para
ampliar las imágenes de las muestras biológicas. Es una herramienta básica para
observar células vivas y estructuras generales, como el núcleo, la membrana
plasmática y organelos grandes, con una resolución máxima de 0.2 micrómetros
(μm), limitada por la difracción de la luz.
⎯ Explica el principio de funcionamiento.
El principio de funcionamiento de la microscopía óptica se basa en la
utilización de luz visible que atraviesa o se refleja en una muestra, la cual
es ampliada mediante un sistema de lentes de vidrio. La luz se enfoca
primero en la muestra usando un condensador, y la imagen ampliada se
proyecta hacia el lente ocular para ser observada. La resolución máxima
alcanzada es de 0.2 μm, determinada por la longitud de onda de la luz
utilizada.
1. Una fuente de luz ilumina la muestra.
2. La luz pasa a través de lentes objetivas, que generan una primera
ampliación de la imagen.
3. La imagen ampliada es proyectada hacia el lente ocular, que
proporciona una segunda ampliación para que el ojo humano pueda
observarla.
⎯ Describe sus componentes principales.
- Fuente de iluminación: Lámpara de halógeno o LED.
- Condensador: Enfoca la luz en la muestra.
- Lente objetiva: Amplifica la imagen inicial.
- Lente ocular: Permite observar la imagen.
- Platina: Soporta la muestra y permite movimientos precisos.
⎯ Menciona al menos dos aplicaciones.
Observación de células vivas teñidas con colorantes no tóxicos.
Estudio de tejidos mediante tinciones como hematoxilina-eosina.
Identificación de estructuras básicas como núcleos, membranas
plasmáticas y organelos grandes.
Uso de microscopía de contraste de fases para observar células sin
necesidad de tinción.

▪ Microscopía Electrónica:
La microscopía electrónica es una técnica que utiliza un haz de electrones en
lugar de luz visible para iluminar la muestra y formar imágenes. Este método
permite una resolución mucho mayor que la microscopía óptica, alcanzando
hasta 0.2 nanómetros (nm), debido a la longitud de onda extremadamente corta
de los electrones.
⎯ Diferencia entre microscopía electrónica de transmisión (TEM) y
microscopía electrónica de barrido (SEM).
Ambas técnicas son complementarias mas sin embargo una de ellas se
usa para estudiar el o detalles internos (TEM),mientras (SEM) se enfoca en
las superficies.
⎯ Explica cómo funcionan y sus diferencias.
• Un haz de electrones acelerado atraviesa una muestra ultrafina (50-100
nm de espesor).
• Los electrones que atraviesan áreas menos densas alcanzan el
detector, mientras que las regiones más densas dispersan los electrones,
creando contrastes.
• Esto genera una imagen bidimensional de alta resolución que revela
la estructura interna de las células.
• Un haz de electrones se dirige a la superficie de la muestra y genera
electrones secundarios cuando impacta con ella.
• Los electrones secundarios son capturados por un detector, que crea
una imagen tridimensional detallada de la topografía de la superficie.
⎯ Proporciona ejemplos de su uso en la investigación.
TEM
Estudio de organelos celulares:
• Identificación de la ultraestructura de las mitocondrias, como la
organización de las crestas mitocondriales.
• Observación de los ribosomas adheridos al retículo endoplásmico
rugoso.
Virología:
• Visualización y análisis de la morfología de virus como el VIH, SARS-
CoV-2 o bacteriófagos.
Caracterización de biomateriales:
• Estudio de nanopartículas utilizadas en medicina, como sistemas de
liberación de fármacos.
SEM
Análisis de tejidos y células:
• Estudio de la topografía de superficies celulares, como
microvellosidades del intestino o estomas en hojas de plantas.
Investigación en materiales biomédicos:
• Evaluación de implantes médicos (e.g., prótesis óseas) para analizar
su superficie y detectar irregularidades o defectos.
Ecología y paleontología:
• Análisis de fósiles microscópicos y estructuras superficiales de
insectos.

▪ Microscopía de Fluorescencia:
La microscopía de fluorescencia utiliza moléculas fluorescentes (fluorocromos)
que emiten luz al ser excitadas por una fuente de energía, generalmente rayos
ultravioleta o láser. Esta técnica permite visualizar estructuras celulares
específicas etiquetadas con fluorocromos, como proteínas o ácidos nucleicos.
Es particularmente útil para el estudio de procesos dinámicos en células vivas.
⎯ Describe cómo se genera la imagen.
la luz de excitación (de longitud de onda más corta) interactúa con los
fluoróforos en la muestra. Los fluoróforos absorben esta energía y emiten
luz de longitud de onda más larga, que es separada por filtros ópticos y
enfocada en un detector o directamente en el ocular para su observación.
Esto permite resaltar estructuras específicas dentro de las células o
tejidos.
⎯ Menciona sus aplicaciones en biología celular y medicina.
En Biología Celular:
• Localización de proteínas específicas:
La microscopía de fluorescencia permite etiquetar proteínas con
anticuerpos fluorescentes para localizar su posición dentro de la célula.
Esto es útil para estudiar la distribución de proteínas en organelos como
el núcleo, el aparato de Golgi o las mitocondrias.

• Visualización de procesos dinámicos en células vivas:


Herramientas como la proteína fluorescente verde (GFP) permiten seguir
en tiempo real eventos como la división celular, el tráfico de vesículas o la
polimerización de microtúbulos.

• Estudios de interacción molecular:


Técnicas como FRET (transferencia de energía por resonancia de
fluorescencia) permiten estudiar interacciones entre moléculas como
proteínas o ácidos nucleicos.
En Medicina:
• Diagnóstico de enfermedades:
La microscopía de fluorescencia se utiliza para identificar células
infectadas o anómalas. Por ejemplo, en inmunohistoquímica, se emplean
anticuerpos fluorescentes para detectar marcadores tumorales o agentes
infecciosos en biopsias.
• Visualización de patógenos:
Se utiliza para observar bacterias, virus o parásitos marcados con
fluorocromos específicos, facilitando su identificación y estudio.
• Investigación en terapia génica:
El uso de fluorocromos permite seguir la expresión de genes terapéuticos
en células vivas y analizar la eficacia de las terapias génicas.
▪ Microscopía de Fuerza Atómica (AFM):
La AFM es descrita como una técnica que utiliza una aguja diminuta que se
mueve sobre la superficie de una muestra para detectar las fuerzas
intermoleculares. Permite estudiar la topografía y propiedades mecánicas de
biomoléculas y nanomateriales.
⎯ Explica el principio de funcionamiento.
1. Sonda o aguja:
Una punta extremadamente fina (de 1-10 nm de diámetro) se encuentra
montada en un brazo flexible llamado cantilever.
2. Interacción con la muestra:
La sonda se acerca a la superficie de la muestra, interactuando con ella
mediante fuerzas atómicas (fuerzas de Van der Waals, electrostáticas,
etc.).
3. Movimiento de la sonda:
La sonda se desplaza por la superficie, y el cantilever detecta los cambios
en estas fuerzas al inclinarse o moverse.
4. Registro de datos:
Un láser enfocado en el cantilever detecta sus movimientos, registrando
las variaciones para generar una imagen topográfica tridimensional de la
superficie con resolución atómica.
⎯ Describe sus aplicaciones en la nanotecnología.
Estudio de nanomateriales:
• Caracterización de nanotubos de carbono y grafeno para medir su
estructura, rugosidad y propiedades mecánicas.
Estudio de nanomateriales:
• Caracterización de nanotubos de carbono y grafeno para medir su
estructura, rugosidad y propiedades mecánicas.
Fabricación de dispositivos nanoelectrónicos:
• Inspección de superficies en semiconductores y materiales
electrónicos avanzados.
Biología molecular y celular:
• Visualización de ADN, proteínas y complejos macromoleculares a
escala nanométrica.
3. Comparación:

▪ Realiza una tabla comparativa de los tipos de microscopía anteriormente


mencionados, incluyendo:

⎯ Fuente de iluminación.
⎯ Resolución.
⎯ Aplicaciones principales.
⎯ Ventajas y desventajas.
TIPOS DE FUENTE DE RESOLUCION APLICACIONES VENTAJAS DESVENTAJAS
MICROSCOPIA ILUMINACION PRINCIPALES
Óptica Luz visible 0.2 μm Análisis de tejidos y Simple.economica, y Limitada
células vivas apta para tejidos resolución,no
vivos muestra
organelos
Electrónica Electrones 0.2 nm Ultra celular Alta Muestras fijas y
(TEM Y SEM) (mitocondrias,ribosomas) resolución,imágenes no vivas,costos
detalladas elevados
Fluorescencia Luz visible 10-20 nm Localización de proteínas Estudio de procesos Equipamiento
mas (superres.) especificas dinamicos costoso,requiere
fluoroforos marcadores
Fuerza Interacciones A nivel Carecterizacion de Imágenes Requiere
atómica (AFM) mecánicas atomico (- suerficies y biomoleculas tridimensionales de muestras
(fuerzas 0.01nm) alta precisión solidas
atomicas) Preparación
compleja

Haz una pequeña reflexión sobre la importancia de la microscopía en el avance de la ciencia


y la tecnología.

La microscopía ha sido uno de los pilares más importantes para entender la vida a nivel
celular y molecular. Piensa en esto: antes de que existieran los microscopios, no sabíamos
que nuestro cuerpo estaba compuesto por células ni cómo funcionaban. Gracias a la
microscopía, pasamos de observar tejidos al ojo desnudo a entender los procesos más
pequeños que ocurren dentro de una célula, como el movimiento de las proteínas o el
comportamiento de los virus.

En el avance científico, la microscopía no solo nos ha permitido “ver lo invisible”, sino


también crear herramientas para intervenir en ello. Por ejemplo, en medicina, ahora podemos
diagnosticar enfermedades como el cáncer desde sus primeras etapas, y en nanotecnología,
diseñar materiales y medicamentos a escala molecular. Sin la microscopía, literalmente
estaríamos “ciegos” en muchas áreas de la ciencia.

Más allá de lo técnico, la microscopía también nos hace cuestionar lo que creemos saber.
Cada vez que una nueva técnica mejora la resolución o amplía lo que podemos observar, se
abren más preguntas que respuestas. Y aquí está el verdadero impacto: no solo nos ayuda a
ver el mundo, sino a replantearnos cómo funciona. En pocas palabras, la microscopía no es
solo una herramienta, es una ventana al universo microscópico que impulsa el conocimiento
y la innovación tecnológica.
Nota: Tus Referencias deben incluir al menos 5 fuentes confiables que hayas consultado
para realizar la tarea. Pueden ser artículos o libros.

Libros:

El mundo de la celula Becker (6ta edición).- Cap 1 y 18

Biología molecular de alberts (5ta edición).- Cap 9

Bioquímica harper.- Cap 3

Biologia molecular de la celula .- Cap 9,

Bioquímica harper.- Cap 3

Bioquímica de mathews.- Cap 2

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