UNIVERSIDAD ADVENTISTA DE BOLIVIA
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA
INFORME DE LABORATORIO
“ DETERMINACIÓN DE AMILASA, CON LOS CONTROLES DE HUMATROL P Y
HUMATROL N”
ESTUDIANTES:
Sebastian Espinoza
Jhoel Misael Misael Quispe Laura
Alejandra Esther Zacari Pajsi
Liz Wendy Lovera Rojas
SEMESTRE:
Sexto
ASIGNATURA:
Bioquímica Clínica II
DOCENTE:
Dra Shirley Lazcano
VINTO-COCHABAMBA-BOLIVIA
2024
DETERMINACIÓN DE AMILASA, CON LOS CONTROLES DE HUMATROL P Y
HUMATROL N
1. OBJETIVOS
● Determinar la actividad de amilasa utilizando los controles de calidad
Humatrol P y Humatrol N, con el fin de evaluar posibles condiciones
patológicas relacionadas con alteraciones enzimáticas pancreáticas y adquirir
habilidades prácticas en técnicas analíticas.
2. DEFINICIONES
La prueba de la amilasa es un análisis de laboratorio que mide la cantidad de la
enzima amilasa presente en la sangre o la orina. La amilasa es una enzima que
cataliza la hidrólisis de los enlaces químicos que conforman el almidón y el
glucógeno, descomponiéndolos en hidratos de carbono más sencillos para permitir
su absorción digestiva (1).
La amilasa es producida principalmente por el páncreas (aproximadamente 40% de
la amilasa total) y las glándulas salivales (aproximadamente 60%)
La prueba de la amilasa se utiliza para detectar y diagnosticar problemas
relacionados con el páncreas y las glándulas salivales. Es especialmente útil en el
diagnóstico de (2).
● Pancreatitis aguda: Un nivel elevado de amilasa en sangre puede indicar
inflamación, obstrucción o lesión del páncreas. Los niveles de amilasa suelen
aumentar 2-12 horas después del inicio de los síntomas y alcanzan su pico
máximo entre 12-48 horas.
● Otras afecciones pancreáticas: Como pancreatitis crónica, pseudoquiste,
rotura de un conducto pancreático, absceso pancreático, y cáncer de
páncreas (1, 2, 3).
● Afecciones de las glándulas salivales: Como parotiditis (paperas) (3)
3. FUNDAMENTO
El sustrato, almidón tamponado, se incuba con la muestra, produciéndose la
hidrólisis enzimática. Esta se detiene por el agregado de reactivo de iodo, que al
mismo tiempo produce color con el remanente de almidón no hidrolizado. La
disminución de color respecto de un sustrato color (sin muestra) es la medida de la
actividad enzimática, que se expresa en Unidades Amilolíticas (Smith & Roe)
/decilitro (UA/dl), comparables con las Unidades Sacarogénicas (Somogyi)/decilitro.
La α-amilasa hidroliza el sustrato definido 2-cloro-p-nitrofenil-α-D-maltotriósido
(CNP-G3) para liberar 2-cloro-p-nitrofenol (CNP), formándose 2-cloro-nitrofenil-α-D-
maltósido (CNP-G2), maltotriosa (G3) y glucosa. El CNP absorbe a 405 nm y la
velocidad de aparición del color es directamente proporcional a la actividad
enzimática. (3)
4. DESARROLLO EXPERIMENTAL
4.1 Materiales, reactivos, equipos y muestra
MATERIALES
Tubos de Gradilla Micropipeta Tips
ensayo
Tubo cónico
REACTIVOS
Control Patológico Solución Reactivo FA
Control Normal
EQUIPOS
Stat fax Vortex
MUESTRA
Suero
4.1.1 Cantidad
Cantidad requerida de 100 μl
4.1.2 Requisitos
4.2 Procedimiento experimental
En 2 tubos marcados C (Control) y D (Desconocido) colocar: C D Reactivo A 1 ml 1
ml Dejar unos minutos en baño de agua a 37o C y agregar: Muestra - 20 ul Incubar
a 37o C.
A los 7 minutos y medio exactos, agregar: Reactivo B 1 ml 1 ml Mezclar por
agitación suave. Retirar los tubos del baño y agregar: Agua destilada 8 ml 8 ml
Mezclar por inversión. Leer en fotocolorímetro con filtro rojo o en espectrofotómetro
alrededor de 640 nm, llevando a cero el aparato con agua destilada.(4)
4.2.1 Estabilidad de la mezcla de reacción final
La mezcla no está diseñada para almacenarse, ya que la reacción enzimática
comienza inmediatamente después de agregar la muestra y debe medirse dentro de
esos 2 minutos.
4.2.3 Linealidad
La reacción es lineal hasta una actividad de amilasa de 2000 U/l.
4.2.4 Valores de referencia
Los valores de referencia varían según la temperatura de reacción:
● 25 °C: Hasta 84 U/l
● 30 °C: Hasta 100 U/l.
● 37 °C: Hasta 125 U/l
4.2.5 Almacenamiento y estabilidad del reactivo y suero
● Amilasa
El reactivo A debe almacenarse refrigerado entre 2-10 °C, es estable hasta la fecha
de vencimiento indicada.
● Control Humatrol P y Control Humatrol N
Si se almacena sin abrir en un congelador (2-8°C)
5. Resultados:
Se realizó en Stat fax 4500
Se usa el auxiliar #92 para la amilasa
Rango Rango Valor obtenido
Unidad Media inferior superior
Control U/L
Normal
Control U/L 173
Patológico
Interpretación de resultado-.
6. CONCLUSIÓN
●
7. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICAS
1. Cardona DG. ¿Qué es la amilasa? [Internet]. Blog Salud MAPFRE. 2021
[citado el 17 de octubre de 2024]. Disponible en:
[Link]
pancreatitis
2. prueba de la AMILASA [internet] [Link]. [citado el 17 de
octubre de 2024]. Disponible en:
[Link]
enfermedades/amilasa-en-sangre
3. Amilasa (en la sangre) [Internet]. [Link]. [citado el 17 de octubre de
2024]. Disponible en:
[Link]
