Transmisibles I – Universidad de El Salvador.
Doctorado en Medicina 2024.
TIRAJE 18
BACTERIOLOGIA MÉDICA
“Genética bacteriana”
OBJETIVOS.
1. Explique las definiciones de los
conceptos de uso más frecuente en
genética bacteriana
2. Describa las diferentes estructuras que
contienen información genética en el
interior de una célula bacteriana y su
respectiva función
3. Describa las características generales
del genoma bacteriano
4. Explique las mutaciones en el genoma
bacteriano y sus posibles resultados
5. Explique los mecanismos utilizados con
mayor frecuencia por las bacterias para
el intercambio genético, tanto a nivel
intracelular como extracelular
6. Explique la base genética de la
resistencia bacteriana a los antibióticos
7. Explique en qué consisten las islas de
patogenicidad y su función
8. Explique los elementos básicos de la
regulación de la expresión de algunos
factores de virulencia bacteriano
Fundamentos
…
✓ Gen: es un segmento de ADN, está contenido
en los cromosomas en el caso de bacterias.
✓ Cromosomas: son estructuras celulares.
✓ Genoma: son todos los genes de una célula.
✓ Locus: posición de un gen en un cromosoma.
✓ Haploide: genoma de una serie simple de
cromosomas, la mayoría de las bacterias son
haploides.
✓ Replicón: moléculas o estructuras que
contienen información genética necesaria
para la replicación celular, las bacterias
pueden tener uno o varios replicones.
✓ Episoma: un tipo especial de plásmido
integrado en el cromosoma de su célula
huésped.
✓ Profago: son estructuras de ADN viral que
incorpora el genoma del virus al genoma de la
célula hospedera.
o Cuando el virus este integrado al
cromosoma de la célula eucariota se le
llamara: provirus
La información genética de la bacteria se encuentra a nivel del cromosoma. A diferencia
de las células eucariotas, donde los cromosomas están contenidos dentro de una
membrana llamada núcleo, en las bacterias, el cromosoma no está encerrado por una
membrana, sino que está ubicado en el nucleoide, que está ubicado en el citoplasma.
El cromosoma es generalmente una molécula circular de ADN que contiene la mayoría
de los genes de la bacteria
⟶ Tamaño del cromosoma. La longitud del cromosoma bacteriano se mide por
pares de base (pb) ó pares de kilobases (kpb) y el tamaño puede variar por
especie.
o Puede haber especies con cromosomas muy pequeños como en el caso de
Mycoplasma genitalium 0.58 x 106 pb con 475 genes potenciales
o Puede haber tamaños promedios como en el caso de Escherichia coli con
4,639 x 106 pb con 4,288 genes potenciales.
⟶ Realiza un superenrollamiento. Para poder encontrarse a nivel del interior de la
bacteria pues existe una propiedad que presentan el genoma bacteriano que es
el superenrollamiento.
o El ADN circular empieza a formar asas enrolladas a través de ciertas
proteínas que lo mantienen compactado.
⟶ No poseen núcleos, poseen nucleoide. Las bacterias no tienen núcleo verdadero,
pero si ubican su cromosoma en un lugar específico en el citoplasma y ese lugar
donde se condensa ese cromosoma se llama NUCLEOIDE
o No presentan histonas, el superenrollamiento es ayudado por otro tipo de
proteínas que no son como en el cromosoma eucariota
⟶ Forma secuencias codificadores. Generalmente el
DNA se encuentra como secuencias codificadoras, que
son segmentos de transcritos de RNA mensajero, que
están listas para ser transcriptas y luego traducidas.
⟶ La mayoría de las bacterias tiene UN genoma
circular de doble cadena. Generalmente las cadenas
están unidas por enlaces covalentes porque no se
puede permitir que el ADN se desenrolle y sea
degradado se ADN, ya que se encuentra suspendido en
el citoplasma.
El ARNm se
traduce para
formar
proteínas
Existen excepciones de bacterias con cromosomas
lineales en bacterias Grampositivas y Gramnegativas
Grampositivas Gramnegativas
✓ Streptomyces spp ✓ Agrobacterium
✓ Borrelia burgdorferi tumefaciens
moléculas
2 moléculas de ADN circular
✓ Brucella melitensis
✓ Burkholderia pseudomallei
✓ Vibrio cholerae
Múltiples cromosomas Existen bacterias con mas
de uno o dos cromosomas
✓ Rhodobacter sp.
⟶ Islas de patogenicidad. Están inmersas entre los genes domésticos o
constitutivos del genoma bacteriano, que son aquellos que se encargan de
producir enzimas para el metabolismo y la sobrevivencia de la bacteria. En esos
genes domésticos encontramos un grupo de genes que le da propiedades de
patogenicidad a las bacterias y se le llama islas de patogenicidad. Estas islas
poseen ciertas características importante:
o Presentan un porcentaje diferente de G-C
o Tienen una estrecha relación con los genes que producen ARNt, porque
tienen oportunidad de ser heredadas o transmitidas
o Esta rodeadas por repeticiones directas (DR) que contienen diversos genes
de patogenicidad que les dan características especiales como: resistencia
a los antibióticos, producción de toxinas, producción de colicinas, etc
La información genética bacteriana se encuentra almacenada en el cromosoma y en
los plásmidos. Son estructuras extracromosomales usualmente circulares, pero pueden
ser lineales y generalmente presentan la información genética necesaria para poder
replicarse independiente al cromosoma. Los plásmidos muchas veces no necesitan
integrarse al cromosoma, pero existen plásmidos autotransferibles.
Algunos genes de los plásmidos pueden saltar de una posición hacia el cromosoma y
producir a la bacteria cierta características especiales. El plásmido siendo un replicón
contiene todos los segmentos necesarios para poder reproducirse y además unirse a
los ribosomas y producir proteínas. Además, posee sitios importantes como:
✓ La región de replicación (Sitio donde comienza la replicación)
✓ Tienen genes de resistencia bacteriana
Los plásmidos son estructuras extracromosomales que más frecuentemente se
transfieren por el mecanismo de conjugación.
Diferentes tipos de plásmidos
Clasificación de los plásmidos por el tipo de genes que portan
Plásmido F o factor de fertilidad Al ser transferido a otra bacteria se
convierten en bacterias receptoras y si se
incorpora al cromosoma de la bacteria
receptora se comporta como bacteria de
alta frecuencia de recombinación
(bacterias de conjugación)
Plásmidos de resistencia bacteriana Contienen genes que proporcionan
resistencia contra antibióticos o venenos
Plásmidos de colicina o plásmidos Col Contienen genes que codifican para
bacteriocinas, proteínas que pueden
matar a otras bacterias
Plásmidos de virulencia Contienen genes que transforman
bacterias en patógenos con
características de virulencia
Factores de virulencia codificados por
plásmidos
Hay otro tipo de elementos genéticos que podemos encontrar en las bacterias, pero
estos se encuentran directamente integrados en el cromosoma bacteriano, nos
referimos a los elementos móviles o transposones.
Efectos que acarrea la inserción
de un transposón:
✓ La mutación
✓ Rearreglo de ADN
✓ Bloqueo de transcripción
✓ Bloqueo de traducción
Esas moléculas de DNA lo que hacen es que se integran en el cromosoma bacteriano
en un lugar específico y de este mismo salta a otro locus dejando una copia de esos
genes. También estos genes pueden saltar al plásmido y proporcionarle características
específicas a ese plásmido y del plásmido puede regresar al cromosoma y se les llama
también genes saltarines porque tiene capacidad de movilización en las diferentes
estructuras genéticas de las bacterias.
Están formados por enzimas que facilitan el movimiento, como la transposasa que
facilita el salto o movimiento de esos genes a diferentes posiciones, la resolvasa corta
el sitio blanco donde se unirá el transposón y algunos de ellos están formados además
de esos genes que producen esas enzimas por genes que dan la virulencia.
Algunos poseen
genes que dan
Transposasa: virulencia
facilita el salto
Resolvasa: corta el sitio
de unión al que se
unirá el transposón
⟶ Los transposones están flanqueados. Poseen secuencias repetitivas en los
extremos, para poderlos determinar
⟶ En un replicón el transposón va a unirse al sitio blanco y se producirá un corte en
esa secuencia nucleotídica donde se unirá en ese corte el transposón.
o La complementariedad de bases de ese transposón con el replicón es
bastante baja, generalmente los transposones se unen aleatoriamente a
los sitios, pero tratan de buscar los sitios que estén relacionados con la
producción de ARN de transferencia para que les sea más fácil poderse
ubicar en los diferentes locus.
o Luego se llenan los espacios con las repeticiones directas.
⟶ Los corridos de las bases y deleción de las bases es lo que forma las mutaciones.
En las bacterias pueden producirse estas mutaciones naturales por medio de
esos mecanismos de: deleción o la posición de los nucleótidos de otros lugares.
Tipos de transposones
⟶ Transposón simple: estos sólo están formados por los genes que van a producir
el salto de un lugar a otro y por las secuencias repetidas que están flanqueando
a esos genes.
o Son de muy pequeño tamaño.
o De 1 a 2 pb
⟶ Transposones complejos: además de
tener estructuras de salto y flanqueadoras,
contienen genes que dan características
específicas fisiológicas que dan resistencia
a los antibióticos.
o Flanqueados por secuencias de
inserción cortas.
o Genes con resistencia a antibióticos.
Bacteriófagos
Los bacteriófagos son virus que parasitan una bacteria. Estos virus adquieren material
genético de la bacteria que parasitan, este material generalmente está cubierto de una
capa proteica (una cápside) que cubre al material genético de enzimas que lo
degraden.
⟶ Poseen una cola de tipo de inyección: la cola
inyecta el material genético que presenta la
cápside proteica hacia la célula huésped.
⟶ Existen muchas bacterias que son parasitados
por bacteriófagos. En la ingeniería genética se
utiliza mucho el bacteriófago para poder de
desarrollar bacterias con nuevas características.
o Los bacteriófagos moderados evitan la lisis
de la célula que está parasitando y en
ingeniería genética si se evita esa lisis de
esas células se obtienen más células
modificadas.
Tipos de bacteriófagos según su modo de
propagación
⟶ Bacteriófago lítico. Se reproducen en gran cantidad dentro de una célula
huésped y luego de reproducir y producir esa gran cantidad de material genético
y virus, destruyen la célula.
o Ejemplo T pares T2 y T4
⟶ Bacteriófago moderado, antiguamente eran denominados ciclolisogénicos,
pero tienen la peculiaridad de parasitar a la célula huésped y luego se integran
en el genoma de la célula huésped, donde se replicará ahí y se mantendrá por
mucho tiempo.
o Cuando exista el factor adecuado (como un estrés) esta célula va a lisar,
de lo contrario permanecerá en deprofago. Ejemplo LAMBDA de E. coli.
o Este es el bacteriófago más utilizado en ingeniería genética porque no
destruye rápidamente a la célula y puede permanecer integrado en el
genoma de esa célula por mucho tiempo.
⟶ Bacteriófago filamentoso. El material genético de estos está formado por
filamentos que se incorporan a proteínas de la célula huésped
o Ejemplo el fago M13 de E. coli.
Factores de virulencia codificados por fagos
Está relacionado con los mecanismos de transferencia de material genético entre
bacterias de la misma especia o diferentes.
El genotipo de la bacteria
se modifica con:
✓ La mutación
✓ Transferencia del
material genético
Mecanismos de transferencia
Existen tres mecanismos
de transferencia genética
que son:
1. Conjugación o
apareo
2. Transformación o
ingesta de ADN
soluble
3. Transducción o
infección por virus Intercambio de genes en
la célula procariota
Se necesita una célula donadora que se destruya naturalmente para que libere material
genético de ella, mientras el material genético de esta bacteria destruida queda libre,
existen algunas bacterias que naturalmente tienen capacidad de ser transformadas al
captar la molécula de DNA soluble, no todas lo hacen, pero las que si lo hacen se llaman
bacterias competentes. Este es uno de los mecanismos de intercambio genético
menos frecuentes dentro de las bacterias.
Existen de eso dos mecanismos de transformación:
✓ Transformación competente natural
✓ Transformación inducida en el laboratorio (que se relaciona con la resistencia
bacteriana)
Bacterias
competentes
Se necesita la presencia de bacteriófagos porque estos transportarán desde la célula
donadora hasta la célula receptora el material genético.
En este tipo de mecanismo lo que interviene más son los plásmidos, sobre todo los
transferibles en los cuales esa transmisión de material genético está relacionada con
unos genes denominados genes TRA, que son transportados por plásmidos
autotransmisibles.
✓ Los genes TRA facilitan la transmisión del material genético del plásmido o del
cromosoma.
o En este mecanismo de transferencia genético las bacterias deben de estar
muy cerca de una de la otra
o Una de ellas necesita tener un pilus sexual, este no es como el que tiene
las bacterias en el exterior, se le llama así para transferir el material genético
o Solo se va a transferir una cadena de las dos que hay y de las células
receptoras se producirá la recombinación de la otra cadena que ha
adquirido.
En algunas bacterias existe un plásmido integrado en el cromosoma que le proporciona
a la bacteria la capacidad de transferir, desde el cromosoma, una hebra de su material
genético a la célula receptora, a esta célula que tiene incorporado el material genético
en su cromosoma se le denomina células de alta capacidad de recombinación
genética. Leer jawetz
Células de alta
capacidad de
recombinación
genética.
Las propiedades que le dan a la bacteria la capacidad de producir la resistencia a los
antibióticos están basadas en la transferencia de material genético de una bacteria a
otra.
Existen dos tipos de resistencia
a los antibióticos:
✓ Natural
✓ Adquirida
⟶ Es una de carácter constante, de cepas en
una misma especie bacteriana.
o Es un mecanismo permanente que se
produce en esas especies.
o Es constitutivo para algunas bacterias
como lo es en el caso de Klebsiella
pneumoniae, quien tiene la propiedad
de producir betalactamasa volviéndola
resistente a la familia de las penicilinas,
específicamente a la ampicilina y
amoxicilina dada por un mecanismo de
transferencia por conjugación.
⟶ Está determinado genéticamente por eso es natural.
o Sin correlación con la dosis del antibiótico.
⟶ Es una característica propia de una bacteria
que es naturalmente resistente.
o Está siendo modificada por fenómenos
como mutación o adquisición por
mecanismos de genes materiales
plásmidos, transposones o integrones.
⟶ Depende de la dosis del antibiótico el anterior
no porque es natural.
o Ejemplo mutaciones a nivel de las
porinas, que son las que permiten al
antibiótico integrarse o penetrar en la
pared de la bacteria.
A través de mutaciones existen diferentes mecanismos de resistencia en las bacterias:
✓ Mutación del receptor del antibiótico de la pared de la bacteria.
✓ Modificación del antibiótico por una enzima
✓ Impermeabilidad de la pared de la bacteria
✓ Expulsión del antibiótico por bomba
Modificar la
proteína o el
receptor
Estos mecanismos son por mutaciones o genes que han sido transferidos
Un individuo mutante es un organismo
que acarrea a un cambio en su material
genético y que ese cambio será
traducido en la mayoría de los casos en
un cambio fenotípico
En el caso de bacterias ese cambio no es siempre expresado fenotípicamente porque
estas son haploides, es más frecuente que esa mutación no se manifieste de forma tan
evidente en las bacterias. Además, las mutaciones están siendo reparadas o superadas
por ciertas enzimas que tienen las bacterias para corregir esos errores.
✓ Cuando quieren reparar pequeños errores se utiliza enzimas
✓ Cuando quieren reparar grandes errores se utiliza el sistema SOS.
Hablemos sobre 2 tipos de
mutación que hay:
✓ Mutación espontanea
✓ Mutación inducida
⟶ Ocurren en un ambiente natural hostil, en un gen determinado para una especie
bacteriana
o Es un fenómeno natural
o Causada por mecanismos de sustitución de bases, deleciones, inserciones
y reordenamiento.
⟶ Ocurre algo frecuente en las bacterias
o Su frecuencia es de 10-6 a 10-8
⟶ Sustitución de bases. Surgen como consecuencia de la colocación inapropiada
de pares de bases entre bases complementarias durante la replicación. Puede
haber mutaciones en la secuencia de aminoácidos como a nivel de las proteínas
o Cuando ocurre nivel de aminoácidos. (Se cambia un a.a por otro en el
producto proteico) Suelen presentarse sin efecto fenotípico discriminable,
porque las bacterias son de tipo haploide el cambio no se nota tanto como
nosotros que somos diploides. También puede darse una reparación, si son
mutaciones pequeñas se reparan con enzimas de reparación,
reconociendo la cadena complementaria estableciendo una metilación a
nivel de la adenina en la cadena base templete.
o Cuando ocurren mutaciones interruptoras de proteínas. Hay un cambio
de a.a. resulta en la producción de un codón stop o señal de terminación,
la proteína antes de que se complete su síntesis, los productos en estas
mutaciones suelen ser inactivos. La proteína puede producirse, pero no
estará activa por lo cual, en esta mutación más grande, actúa otro
mecanismo para poder reparar ese daño, el cual será de reparación SOS.
Lo repara el Lo reparan
sistema SOS las enzimas
⟶ Los reordenamientos. Son consecuencia de deleciones que eliminan grandes o
incluso conjuntos de genes.
o Se da en las bacterias que tienen la capacidad de transportar a los
transposones.
o Tales deleciones implican recombinación entre secuencias repetidas
directas (IS) o inserciones cortas.
o Casi nunca se revierten, porque se forma la cadena.
⟶ Mutaciones que causan duplicación de aminoácidos. Estas son inestables y se
revierten con facilidad.
o Producen cambios fenotípicos si son varios los a.a que cambian.
⟶ Son provocadas por agentes mutagénicos (radiaciones, radiaciones naturales
UV) producen cambios en material genético.
⟶ Mutaciones por agentes físicos o químicos o biológicos
⟶ La expresión génica dependerá de la capacidad del promotor. Es un segmento
de ADN que se une a la RNA polimerasa.
o Se encuentran por los genes domésticos o estructurales (son los que
desarrollan enzimas para que las bacterias pueden sobrevivir al
metabolismo de los sustratos) cerca de estos genes estructurales se
encuentran los promotores. El inductor es sustrato que activa a los genes
estructurales.
⟶ La capacidad también depende de las proteínas reguladoras tienen un control
adicional.
⟶ En la regulación también participan el operón. Es grupo de genes estructurales
cuya expresión está regulada por los mismos elementos de control (promotor y
operador) y genes reguladores
o Un operón inducible y muy importante en las bacterias es el operón lactosa,
se activa en presencia de una gran cantidad de lactosa y cuando se activa,
el promotor se unirá a la RNA polimerasa para que se inicie el proceso de
transcripción y activará los genes estructurales
Los principales elementos de un operón son:
✓ Genes reguladores (proteína reguladora)
✓ Elementos de control (promotor y operador)
✓ Genes estructurales
✓ Inductor (pero este solo activa los genes
estructurales)
Los genes estructurales Una vez que se activa el operón, la bacteria va a
están formados por: poder metabolizar la lactosa, degradándola en las
✓ El gen Z moléculas esenciales, ósea en los diferentes
carbohidratos, para asimilarla hasta que la lactosa
✓ El gen Y
se termine y el inductor desaparezca, entonces se
✓ El gen A regula el operón regulando los genes estructurales.
⟶ Regulación a nivel del operador. Para que se active el operador se necesita la
presencia de un represor, que es una proteína reguladora que se une al operador
y luego se evita la transducción y por lo tanto no se forma ningún ARNm ni ninguna
proteína.
Fin – Tiraje 18.
Transmisibles 2024
