Laboratorio
Curso de Biología General I
PRÁCTICA NO. 1
MICROSCOPÍA I: GENERALIDADES
1. INTRODUCCIÓN
El trabajo en cualquier laboratorio conlleva una serie de prácticas y normas que
garanticen resultados confiables y minimicen los accidentes o problemas que puedan
surgir debido al desconocimiento del uso o características de los equipos o materiales
empleados, o también debido a la negligencia de los individuos involucrados. Por tal
motivo es necesario informar a los estudiantes del curso de Biología General sobre las
normas de seguridad y las acciones que deben ejecutarse en caso de alguna emergencia.
También es importante que los estudiantes se familiaricen con el equipo, reactivos y otros
materiales, y que practiquen el uso adecuado de todos los instrumentos que se empleen.
Esta primera práctica presenta instrucciones generales para los estudiantes que
harán uso del laboratorio en este curso. Sin embargo, muchas de ellas son estándares para
cualquier laboratorio, por lo que todas las carreras de la Facultad de Ciencias Químicas y
Farmacia deben conocer estas normas mínimas. Asimismo, conocerán la estructura del
laboratorio y tendrán una inducción a las prácticas de microscopía, dentro de lo que
aprenderán a hacer el uso apropiado del equipo óptico (microscopio y estereoscopio).
Existen casos en los cuales la observación de los objetos a simple vista no nos
permite examinar algunos detalles que nos interesan. Los instrumentos de óptica se han
creado para facilitarnos y mejorar la observación de estos detalles. Estereoscopios, lupas y
microscopios son aparatos con los cuales se observan objetos que no podemos percibir o
distinguir a simple vista. La microscopía inicia en 1590 y sufre cambios favorables durante
el siglo XVII (Campbell y Reece, 2007). En 1665 Robert Hooke emplea lentes simples y
describe por primera vez una célula. El trabajo de Hooke inspiró al holandés Anton van
Leeuwenhoek, quien utilizó lentes que él mismo fabricó y con ellos pudo observar, con
cierto detalle, los microorganismos (Solomon et al., 2018).
Los microscopios que usted utilizará en el laboratorio de Biología General son
microscopios ópticos. Este tipo de microscopio le permitirá observar estructuras celulares
que tengan un diámetro superior a 0.2 micrómetros (μm) o 200 nanómetros (nm)
(Solomon et al., 2018). Los microscopios ópticos son muy útiles para observar a detalle los
diferentes tipos de células que conforman los tejidos, como las que integran estomas y las
células sanguíneas.
Los microscopios estereoscópicos, o estereoscopios, (como les llamaremos en el
resto del manual), permiten hacer estudios de objetos y especímenes demasiado
pequeños para ser estudiados a simple vista, pero demasiado grandes para ser colocados
5
Laboratorio
Curso de Biología General I
sobre la platina de los microscopios de gran aumento. Los estereoscopios también son
conocidos como microscopios de disección, pues en muchas ocasiones son usados durante
la disección de especímenes o muestras, durante la cual se separan aquellas partes que
serán examinadas mediante otros tipos de microscopía.
El uso correcto de los instrumentos ópticos es una técnica básica que debe adquirir
todo estudiante de ciencias biológicas. Como toda técnica compleja, necesita continua
ejercitación para lograr niveles operativos aceptables. La observación a través del
microscopio debe ir acompañada por la esquematización y descripción de los objetos
observados, con el fin de integrar un material de estudio basado en la experiencia
personal. Para poder observar un objeto o una muestra a través de un microscopio, debe
tratarse con técnicas diferentes, algunas más especializadas que otras, dependiendo de la
muestra. Estas técnicas aseguran la integridad de las muestras y la seguridad de observar
lo que se desea.
2. OBJETIVOS
- Identificar las partes del microscopio y del estereoscopio mediante su
manipulación.
- Enfocar correctamente diversos objetos y estructuras biológicas a través del
microscopio y del estereoscopio.
3. MATERIAL Y EQUIPO
● Estereoscopio.
● Microscopio.
● Agua destilada en goteros.
● Aceite de inmersión.
● Agujas de disección.
● Cajas de Petri
● Espátulas
● Vidrios de reloj.
● Porta y cubreobjetos.
● Papel limpia-lentes.
● Pinzas.
● Papel periódico.
● Pequeñas flores.
● Pequeños invertebrados.
● Tierra o arena.
6
Laboratorio
Curso de Biología General I
4. PROCEDIMIENTO
4.2.1 Uso del Microscopio
4.2.1.1 Obtención y revisión del microscopio
1. Saque el microscopio con cuidado, sin arrastrarlo, y transpórtelo a la mesa de trabajo,
tomándolo del brazo con su mano dominante (derecha si es diestro; izquierda si es
zurdo), sosteniendo la base con la otra mano, y manteniendo el aparato pegado a su
cuerpo.
2. Colóquelo suavemente sobre su mesa de trabajo en ángulo recto con relación al largo
de la misma y alejado del borde, sin arrastrarlo.
3. Retire la funda, dóblela y guárdela bajo la mesa de trabajo.
4. Verifique el estado del microscopio y regístrelo en la hoja de control correspondiente.
Si nota alguna anomalía, notifíquelo a su instructor(a), para que quede constancia de
que el microscopio ya estaba así. De lo contrario, la responsabilidad de dicha anomalía
recaerá en su grupo de trabajo.
5. Asegúrese de que el microscopio esté apagado antes de conectar el cable de
electricidad. COLOQUE EL EXCESO DE CABLE SOBRE LA MESA, pues si lo deja colgando
corre el riesgo de tirar de él.
4.2.1.2 Montaje húmedo y uso del microscopio
1. En el centro de un portaobjetos, coloque lo que su instructor le indique.
2. Agregue una gota de agua destilada.
3. Coloque el cubreobjetos en un ángulo de 45° respecto al portaobjetos y bájelo
lentamente, como se muestra en la Figura 1.
Figura 1. Pasos para elaborar un montaje húmedo
7
Laboratorio
Curso de Biología General I
4. Asegúrese de que el objetivo que esté en posición vertical sea el de menor aumento
(4x).
5. Asegúrese de que la platina esté lo más abajo posible, alejada del objetivo.
6. Manipule el sujetador de portaobjetos (pinza) para poder colocar y ajustar el
portaobjetos con la muestra, soltando la pinza lentamente.
7. Retire la tapa protectora de la bombilla (para que no tope con el condensador) y baje
el condensador hasta su nivel más bajo.
8. Encienda el microscopio.
9. Si usa anteojos, quíteselos. Separe o aproxime los oculares de acuerdo con la distancia
de sus ojos, hasta ver una sola imagen. Conserve los dos ojos abiertos todo el tiempo.
10.Con el tornillo macrométrico, suba la platina hasta su posición más alta. Utilice los
tornillos de desplazamiento de la platina para que la muestra quede centrada.
11.Siempre con el tornillo macrométrico, baje la platina lentamente hasta que la muestra
quede bien enfocada.
12.Asegúrese de que los oculares estén en su posición más baja (más aumento). Si tiene
diferencia de agudeza visual entre los dos ojos, cierre el ojo que ve mejor (el que
necesita menor graduación) y use el TORNILLO MICROMÉTRICO para enfocar
perfectamente la imagen. Luego cierre el ojo que ve menos (el de mayor graduación) y
SIN TOCAR NINGÚN TORNILLO, gire el AJUSTE DEL OCULAR por el cual está
observando, para alejarlo hasta que vea perfectamente.
13.Compare cómo se ve la letra a través del microscopio y a simple vista. ¿Qué puede
usted notar al respecto? Mueva la platina hacia la derecha. ¿En qué dirección se
desplaza la imagen?.
14.Rote el revólver para observar con el objetivo de 10x. A PARTIR DE AHORA, SÓLO
PODRÁ MANIPULAR EL TORNILLO MICROMÉTRICO para enfocar. Cada vez que pase a
un objetivo de mayor aumento, deberá:
● Subir un poco el condensador (éste debe estar totalmente abajo cuando se use
el objetivo de 4x, y CASI totalmente arriba cuando se use el de inmersión).
● Aumentar un poco la intensidad de la luz, puede abrir un poco más el
diafragma.
8
Laboratorio
Curso de Biología General I
15.Observe con el objetivo de 40x, tomando en cuenta las observaciones del inciso
anterior.
16.Cada vez que vaya a retirar el portaobjetos, debe tener estas precauciones:
a. Girar el revólver para ir pasando al objetivo de menor aumento, hasta llegar
al de 4x.
b. Bajar la platina, para evitar dañar al objetivo al retirar el portaobjetos.
17.Con la ayuda de una pinza o de agujas de disección, coloque los diferentes objetos o lo
que su instructor le indique y prepare un montaje húmedo con ellos.
18.Con la ayuda de su instructor, realice una preparación y obsérvela con el objetivo de
inmersión.
19.Observe con el microscopio, esquematice y describa en su hoja de esquemas y
descripciones.
20.Cuando termine de utilizar el microscopio, límpielo y asegúrese que cumpla con todos
los criterios señalados en las hojas de revisión de microscopios.
Notas:
● Si puede ver sus pestañas al enfocar, acérquese más a los oculares.
● Si ve una línea negra que atraviesa el ocular, no se preocupe: es el puntero del
ocular; sirve para señalar algún detalle específico de la muestra.
4.2.2 Uso del Estereoscopio
4.2.2.1 Obtención y revisión del estereoscopio
1. Saque el estereoscopio con cuidado, sin arrastrarlo, posteriormente trasladarlo a la
mesa de trabajo, tomándolo del brazo con su mano dominante (derecha si es
diestro; izquierda si es zurdo), sosteniendo la base con la otra mano, y
manteniendo el aparato pegado a su cuerpo.
2. Colóquelo suavemente sobre su mesa de trabajo en ángulo recto con relación al
largo de la misma y alejado del borde, sin arrastrarlo.
3. Retire la funda, dóblela y guárdela bajo la mesa de trabajo.
4. Verifique el estado del estereoscopio y regístrelo en la hoja de control
correspondiente. Si nota alguna anomalía, notifíquelo a su instructor(a), para que
9
Laboratorio
Curso de Biología General I
quede constancia de que el estereoscopio ya estaba así. De lo contrario, la
responsabilidad de dicha anomalía recaerá en su grupo de trabajo.
5. Asegúrese de que el estereoscopio esté apagado antes de conectar el cable de
electricidad. COLOQUE EL EXCESO DE CABLE SOBRE LA MESA, pues si lo deja
colgando corre el riesgo de tirar de él.
6. Asegúrese de que el objetivo seleccionado sea el de 2x.
4.2.2.2 Uso del estereoscopio
1. Coloque un pequeño invertebrado, arena, una flor pequeña o lo que su instructor
le indique, sobre un vidrio de reloj, y éste sobre la platina.
2. Encienda la luz más adecuada (transmitida o incidente) para ver la muestra, o
ambas.
3. Si usa anteojos, quíteselos. Separe o aproxime los oculares de acuerdo con la
distancia de sus ojos, hasta ver una sola imagen. Conserve los dos ojos abiertos
todo el tiempo.
4. Utilizando el tornillo de enfoque, logre una imagen clara.
5. Si tiene diferencia de agudeza visual entre los dos ojos, deberá hacer lo siguiente.
Como el ocular izquierdo está fijo, cierre el ojo derecho y observando con el
izquierdo, suba o baje el cabezal hasta enfocar bien. Luego, cierre el ojo izquierdo y
SIN TOCAR EL TORNILLO DEL CABEZAL, gire el AJUSTE DEL OCULAR derecho hasta
ver lo mejor posible.
6. Elija el objetivo siguiente (4x) y enfoque.
7. Esquematice lo observado, señale sus partes y describa lo observado.
8. En un vidrio de reloj, coloque otros objetos y obsérvelos por el estereoscopio.
Esquematice y describa.
9. Cuando termine de utilizar el estereoscopio, límpielo y asegúrese que cumpla con
todos los criterios señalados en las hojas de revisión de estereoscopios.
4.2.3 Consideraciones finales
1. Lave y seque la cristalería.
10
Laboratorio
Curso de Biología General I
2. Asegúrese de que guardó adecuadamente el equipo óptico.
3. Limpie sus estaciones de trabajo.
5. Referencias bibliográficas
Campbell, N.A. & Reece, J.B. (2007). Biología. Médica Panamericana.
Duarte, M. G., & del Carmen Botureira, M. (s.f.). Guía práctica para el estudio analítico de
preparados histológicos.
Rojas Triviño, A. (2011). Conceptos y práctica de microbiología general. Facultad de
Ciencias Agropecuarias.
Solomon, E. P., Berg, L. R., & Martin, D. W. (2018). Biology (11th ed.). Cengage.
6. PRELABORATORIO
Para este prelaboratorio deberá realizar, en el tiempo designado por su auxiliar de cátedra,
la guía de estudio que a continuación se le presenta y luego un diagrama de flujo de esta
práctica de laboratorio.
Ambas actividades deberán ser realizadas y culminadas durante el período de tiempo
establecido. Debe realizarlas a mano y en el cuaderno que usted designe exclusivamente
para el laboratorio de Biología General I.
A. Guía de estudio
En su cuaderno de laboratorio responda las siguientes preguntas, las cuales deberá copiar
para llevar un orden. Recuerde que deberá citar y escribir sus referencias bibliográficas
utilizando las normas APA VII (20 puntos cada una).
1. Resuma en dos párrafos la historia del microscopio.
2. Investigue la diferencia de uso entre el microscopio óptico común y el estereoscopio
(o microscopio de disección). Explique los cuidados y precauciones que se deben
tomar en cuenta en el empleo de un microscopio y un estereoscopio.
3. Los estereoscopios poseen una platina con un lado negro y uno blanco. ¿Para qué
sirve cada uno?
11
Laboratorio
Curso de Biología General I
4. Realice un cuadro comparativo que indique los aumentos de los objetivos seco
débil, seco fuerte y de inmersión.
5. Explique brevemente las consideraciones y precauciones que debe tomar a la hora
de utilizar un objetivo de inmersión.
B. Diagrama de flujo
En su cuaderno de laboratorio de Biología General Ielabore un diagrama de flujo en el que
explique el procedimiento de esta práctica de laboratorio. Siga un orden lógico. Puede
guiarse con la Figura 2.
Figura 2. Símbolos para ser usados en el diagrama de flujo
del procedimiento
(imagen tomada de https://concepto.de/diagrama-de-flujo/)
12
