UD: Métodos y Técnicas en Micología y Virología
Enterovirus (semana 10)
3NLA52
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
Agenda
1. Generalidades:
1. Virosis
2. Enterovirus
3. Picornavirus
4. Características en la infección
humana, cuadro clínico.
5. Factores predisponentes,
prevención.
6. Diagnostico de laboratorio.
VIROSIS
Comité Internacional de Taxonomía de los virus
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
DENGUE
o Agente: Flavivirus (arbovirus)
o Familia: Flaviviridae
o Transmisión: A. aegypti
o P. Incubación: 4 – 7 días
o Genoma: ARN mc
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DENGUE
o Síntomas:
o Dengue clásico: Fiebre 3 a 5 días,
dolor muscular y articular, cefalea,
erupciones en miembros inferiores
y tórax, nauseas, vómitos.
o Dengue hemorrágico: Sangrado de
mucosas y encías, diarrea con
sangre, fiebre alta, elevada tasa de
letalidad.
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FIEBRE AMARILLA
o Agente: Flavivirus (arbovirus)
o Familia: Flaviviridae
o Transmisión: A. aegypti
o P. Incubación: 4 – 7 días
o Genoma: ARN mc
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
FIEBRE AMARILLA
o Síntomas:
o Forma leve: Fiebre elevada,
escalofríos, cefalea, nauseas,
vómitos, dura 1 a 3 días luego cura.
o Forma grave: Tras un inicio igual al
anterior, baja la fiebre para luego
reaparecer, ictericia, insuficiencia
hepatorrenal, encías hemorrágicas,
bradicardia, hemorragias
intestinales y en orina.
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HEPATITIS
o Agente: Virus hepatotropicos
o Familia: Hepadnaviridae
o Transmisión: oral, utensilios, agua y
alimentos contaminados con heces,
sexual, madres a bebés.
o P. Incubación: según
o Genoma: ADN
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HEPATITIS
o Síntomas:
o Fiebre, ictericia, fatiga, dolor
abdominal, perdida de apetito,
nauseas, diarrea.
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HERPES
o Agente: Herpesvirus simple
tipos 1 y 2
o Familia: Herpesviridae
o Transmisión:
Directa (tipo 1)
Sexual (tipo 2)
o P. Incubación: 7 a 10 d.
o Genoma: ADN
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HERPES
o Síntomas:
o Ulceras en la boca, labios, encías,
ano y genitales.
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GRIPE
o Agente: influenzavirus
o Familia: Orthomyxoviridae
o Transmisión: aerógena
o P. Incubación: 12 a 72 horas.
o Genoma: ARN
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GRIPE
o Síntomas:
o F i eb re, cef al ea, es ca l o f rí o s ,
mialgias, somnolencia, malestar
general.
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MONONUCLEOSIS
o Agente: Virus Epstein Barr (VEB)
o Familia: Herpesviridae
o Transmisión: saliva (besos,
compartir el vaso, etc.).
o P. Incubación: 4 a 6 semanas.
o Genoma: ADN
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MONONUCLEOSIS
o Síntomas:
o Fiebre, cefalea, faringitis, fatiga,
inflamación, de ganglios linfáticos,
escalofríos, erupciones cutáneas,
esplenomegalia, hepatomegalia.
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PAROTIDITIS
o Agente: Mixovirus
o Familia: Paramixoviridae
o Transmisión: aerógena
o P. Incubación: 2 a 3 semanas.
o Genoma: ARN
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PAROTIDITIS
o Síntomas:
o Fiebre, cefalea, malestar general,
dolor mandibular, inflamación y
edema facial por crecimiento de las
glándulas parótidas.
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POLIOMIELITIS
o Agente: Poliovirus
o Familia: Picornaviridae
o Transmisión: aerógena- oral
o P. Incubación: 5 a 35 días.
o Genoma: ARN
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POLIOMIELITIS
o Síntomas:
o Fiebre, cefalea, fatiga, vómitos,
estreñimiento, babeo, rigidez de
nuca, dolor en las extremidades.
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RESFRIO
o Agente: Rinovirus
o Familia: Picornaviridae
o Transmisión: aerógena
o P. Incubación: 48 a 72 horas.
o Genoma: ARN
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RESFRIO
o Síntomas:
o Picazón nasal, estornudos,
obstrucción nasal, mucosidad
transparente, cambios en el olfato y
gusto, ardor de garganta, raras
veces fiebre moderada y malestar
general.
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RUBEOLA
o Agente: Rubivirus
o Familia: Togaviridae
o Transmisión: aerógena- oral
o P. Incubación: 12 a 23 días.
o Genoma: ARN
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RUBEOLA
o Síntomas:
o Fiebre, aparición de manchas
rosadas que inician en la cabeza y
descienden al resto del cuerpo,
aumento del tamaño de los
ganglios, especialmente en el cuello
y detrás de las orejas.
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SARAMPIÓN
o Agente: Morbilivirus
o Familia: Paramixoviridae
o Transmisión: aerógena, por tos,
estornudos.
o P. Incubación: 7 a 14 días.
o Genoma: ARN
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SARAMPIÓN
o Síntomas:
o Fiebre, rinitis, tos, erupción rojiza
en cara luego en todo el cuerpo,
pequeños puntos blancos (puntos
de Koplik) en las encías y el interior
de las mejillas.
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VARICELA
o Agente: Herpesvirus
o Familia: Herpesviridae
o Transmisión: aerógena, P.
Incubación: 14 a 16 días.
o Genoma: ADN
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VARICELA
o Síntomas:
o Fiebre, prurito, erupciones en la
piel con ampollas y costras en todo
el cuerpo.
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SIDA
o Agente: Retrovirus
o Familia: Lentiviridae
o Transmisión: sexual,
transparentaría, sanguínea.
o P. Incubación: 8 a 12 semanas.
o Genoma: ARN
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SIDA
o Síntomas:
o Fiebre, cefalea, dolor muscular y
articular, erupción, dolor de
garganta, ulceras dolorosas en la
boca, inflamación de ganglios
linfáticos, sobre todo en el cuello,
diarrea, perdida de peso.
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Enterovirus
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Enterovirus
o Los enterovirus son un
grupo de agentes virales
que habitan en el
intestino y que son los
responsables de
importantes y frecuentes
enfermedades humanas con
manifestaciones clínicas
muy variadas.
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Enterovirus
o Los enterovirus son
virus ARN pertenecientes
a l a f a m i l i a
Picornaviridae (“pico”
pequeño; ”rna” por tipo
de ácido ribonucleico)
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Características de los picornavirus
o Son virus desnudos de
simetría icosahédrica de
aproximadamente 30 nm de
diámetro.
o La cápside viral está
compuesta por 60
subunidades proteicas
que envuelven al genoma
viral, constituido por
una cadena única lineal
de ARN que codifica para
una gran poliproteína.
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Características de los picornavirus
o Son resistentes al éter,
cloroformo y alcohol, pero
son inactivados por las
radiaciones ionizantes,
formaldehido y fenol.
o Estos datos son de gran
importancia médica en el
momento de elegir un
antiséptico, desinfectante o
medio de esterilización
frente a la presencia de
estos agentes.
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rotavirus, astrovirus,,
Clasificación de los picornavirus
o La familia Picornaviridae està integrada por
4 grupos:
Animales
1- Aphthovirus.
2- Cardiovirus. - Poliovirus: tipos 1 - 3
- Coxsackievirus A1-A24
3- Rinovirus. - A23 hoy Echovirus 9
Humanos /animales
4- Enterovirus (humanos) - Coxsackievirus tipos B1-B6
- Echovirus (Enteric
Cytopathogenic Human Orphan)
- Echovirus 10 hoy reovirus
- Echovirus 28 hoy rinovirus
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Epidemiología
o El hacinamiento y la pobre
higiene aumenta la
transmisión fecal oral. La
transmisión a través del
agua puede presentarse como
una extensión de la vía
fecal oral en la cual el
vector es el agua en lugar
de las manos o los fómites.
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Cuadros clínicos
o Los EV se distinguen por su
estabilidad a pH ácido su
sitio de infección primaria,
específicamente las placas
de Peyer en el intestino.
o Luego ocurre una viremia
menor que siembra numerosos
órganos incluyendo sistema
nervioso central (SNC),
hígado, pulmones y corazón.
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Poliomielitis:
Es una infección aguda
que afecta de forma
grave al SNC, con
destrucción de las
neuronas motoras de la
médula espinal, dando
lugar a una parálisis
flácida.
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Coxsackie A:
Pueden producir meningitis
aséptica, herpangina, mialgia
epidémica (pleurodinia o
enfermedad de Bornholm),
síndrome mano-pie-boca,
miocarditis, pericarditis,
neumonía, exantema cutáneo y
resfriado común. Se han
relacionado también con
malformaciones congénitas y
algunas formas de diabetes.
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Coxsackie B:
Juegan papel importante en la
etiología de la diabetes mellitus
dependiente de insulina (DM-1),
particularmente el virus Coxsackie
B4, pero queda por determinar si
inician los procesos que dan lugar
a la diabetes o bien precipitan la
enfermedad en aquellos pacientes
con la función endocrina ya
dañada.
También se ha relacionado a los
virus Coxsackie B4, B5 y del grupo
A con la pancreatitis en los
adultos.
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Patogénia:
El virus penetra en el organismo
por vía oral o nasofaríngea, con
un periodo de incubación que
oscila entre 2 y 30-40 días.
Se multiplica localmente en el
tejido linfoide de la faringe y
las placas de Peyer y después se
disemina por vía sanguínea a otros
tejidos diana, como la piel,
miocardio, meninges, páncreas,
etc., en donde se replica.
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Patogénia:
Los síntomas pueden ser el
resultado directo de la
destrucción de células diana en
los tejidos (como ocurre en la
poliomielitis), o puede deberse a
la respuesta inmune frente al
virus (como ocurre en el modelo
murino de miocarditis por virus
Coxackie tipo B).
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Laboratorio
Aislamiento vírico e identificación:
o La técnica de referencia para el diagnóstico especifico de
las infecciones por enterovirus es el cultivo en líneas
celulares susceptibles.
o Ante una sospecha de infección enteroviral se deben
remitir muestras de heces (o torunda rectal), o bien un
exudado faríngeo.
o En el caso de la meningitis aséptica debe remitirse LCR,
aunque en la fase aguda de la infección se puede detectar
el virus también en plasma.
o Asimismo, se puede aislar de fluidos vesiculares, orina,
exudado conjuntival y secreciones nasales.
Cultivo de virus
[Link]
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Aislamiento vírico e identificación:
o Se recomienda el envío conjunto de muestras de LCR,
exudado faríngeo y heces, ya que aumenta el porcentaje de
aislamiento.
o La excreción es con frecuencia intermitente; por tanto,
debe recogerse más de una muestra en un intervalo de 24-48
horas.
o Dicha excreción comienza a los pocos días de la infección
y puede mantenerse semanas o incluso meses, excepto en el
caso de los Echovirus, donde rara vez excede de un mes.
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Aislamiento vírico e identificación:
o Los cultivos celulares más sensibles son las líneas WI-38
(pulmón embrionario humano), HEK (riñón embrionario
humano) y RD (rabdomiosarcoma humano).
o Tras la incubación a 37oC, la presencia del virus se
manifiesta por la aparición de un efecto citopático típico
y rápido (24-48 h), caracterizado por la picnosis nuclear,
redondeamiento citoplasmático, aparición de células
refractarias, degeneración celular y despegamiento del
frasco de cultivo.
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Detección de anticuerpos específicos:
o Las técnicas serológicas deben considerarse como un arma
diagnóstica adicional. La detección de anticuerpos
específicos de tipo sólo deberían realizarse:
o a) si se dispone del aislamiento de un enterovirus y es
necesaria la confirmación del serotipo infectante,
o b) cuando en un cuadro clínico puedan estar implicados
varios enterovirus de un mismo grupo (v. g., pleurodinia
por Coxsackievirus del grupo B),
o c) ante un brote epidémico causado por un serotipo
determinado, y
o d) en estudios seroepidemiológicos.
[Link]
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Seroneutralización:
o La técnica recomendada, y considerada de referencia, es la
seroneutralización. Se necesitan muestras pareadas, la
primera tomada tan precozmente como sea posible durante en
el curso de la infección, y la segunda 3-4 semanas
después. Los sueros de la fase aguda y convaleciente se
estudiaran simultáneamente, utilizando varias diluciones
del suero frente a una cantidad constante de virus.
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Fijación del complemento (FC):
o Inicialmente se realiza la FC con un antígeno común de
enterovirus; si el resultado es positivo, se debe repetir
la técnica utilizando antígeno de los distintos grupos.
Los anticuerpos FC aparecen durante el curso de la
infección, pero pueden desaparecer o caer a niveles bajos
en pocos meses; si se obtienen las muestras en momentos
apropiados, es posible aumentar la utilidad diagnostica de
la FC. Pueden aparecer reacciones cruzadas entre los
distintos enterovirus, que hacen a ésta técnica poco
especifica de serotipo.
o [Link]
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Hemaglutinación:
o Relativamente fácil de realizar, los pacientes que son
infectados con un enterovirus hemaglutinante desarrollan
anticuerpos homotípicos que pueden persistir años, aunque
también pueden producirse anticuerpos heterotípicos que
hacen que la prueba pierda especificidad.
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Inmunofluorescencia indirecta:
o Es posible detectar y titular anticuerpos usando una
técnica de inmunofluorescencia. Se trata de métodos
sencillos que están teniendo cada vez un uso mayor en los
laboratorios diagnósticos, ya que permite la detección
separada de los anticuerpos IgG e IgM. Si sólo se dispone
de una muestra, la detección de anticuerpos específicos de
la clase IgM puede ser útil para identificar infecciones
recientes.
o [Link]
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Hemaglutinación pasiva:
o Es un método que permite detectar elevaciones en el título
de anticuerpos frente a los enterovirus. Existe
reactividad cruzada y los serotipos no pueden
distinguirse, aunque la prueba puede servir de cribado
para diagnosticar una infección por enterovirus.
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
PCR:
o La detección de genoma mediante PCR, aporta rapidez,
aumento de sensibilidad y posibilidad de detección de
todos los enterovirus, por lo que, aunque está actualmente
en evaluación, resulta muy recomendable en los
laboratorios de Virología. Así, Andréoletti et al. (1998),
detectan un 22% de muestras de LCR positivas, frente a un
2,3% por cultivo. Recomiendan realizar la PCR en LCR y
suero para aumentar la sensibilidad diagnóstica.
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
ENTEROVIRUS NO POLIO
o Muy frecuentes en niños
y en recién nacidos con
una gran variabilidad de
cuadros clínicos. La
forma más frecuente de
presentación es la
enfermedad febril
inespecífica, que en los
niños hace pensar
generalmente en una
sepsis bacteriana.
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
ENTEROVIRUS NO POLIO
o Otras de las manifestaciones clínicas
más frecuentes son:
o Tracto respiratorio: resfrío común,
faringitis, herpangina, estomatitis,
neumonía y pleurodinia.
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
ENTEROVIRUS NO POLIO
o Tracto gastrointestinal:
vómitos y diarrea, dolor
abdominal y hepatitis.
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
ENTEROVIRUS NO POLIO
o Ojo:
conjuntivitis aguda hemorrágica.
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
ENTEROVIRUS NO POLIO
o Corazón:
miocardio- pericarditis
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
ENTEROVIRUS NO POLIO
o Piel:
exantema
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ENTEROVIRUS NO POLIO
o Neurológicas:
meningitis aséptica, encefalitis y
parálisis.
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
Gracias…
Blgo. Miguel Angel Purizaca Navarro
