PRÁCTICA 5. Reacción de aglutinación en placa.
Proteína C reactiva
INTRODUCCIÓN
La proteína C reactiva es una proteína producida en el hígado que forma un precipitado con el
polisacárido somático C del neumococo, de ahí su nombre de proteína C reactiva. Es una
lectina que hace parte del amiloide P y del PTX3 de un grupo conocidos como pentraxinas.
Normalmente, se encuentra en el plasma en una concentración de microgramos, pero su
concentración se incrementa rápidamente, hasta mil veces su valor normal, ante invasiones
bacterianas. Se liga a los polisacáridos de las bacterias y activa el complemento como manera
de cumplir su importante acción bactericida.
Tiene algunas funciones de los Acs, pero sin especificidad antigénica. Se une a la fosfatilcolina
presente en la membrana de muchos microorganismos y los hace susceptibles a la acción del
complemento y la fagocitosis.
Se han observado en diversas afecciones y, aunque no sea específica de ninguna enfermedad
en particular, la demostración de la PCR en la sangre refleja de una manera sensible, la
presencia de una inflamación sea o no de origen infeccioso. Las variaciones en la cantidad de
la PCR son útiles para el pronóstico y para comprobar la eficacia del tratamiento. La presencia
de PCR en diversos estadios morbosos puede variar según el estado de la enfermedad, el
tratamiento y el estado físico del paciente.
FUNDAMENTO
Es una prueba en placa rápida, sensible y específica para determinación y cuantificación de la
proteína C reactiva en suero sanguíneo humano. La presencia de proteína C reactiva indica la
presencia de un proceso inflamatorio o necrótico. Además de ser útil como ayuda en el
diagnóstico clínico, puede ser usada para conocer la eficacia de un tratamiento o terapia.
HIPÓTESIS
Se espera que al realizar la prueba de aglutinación en placa con suero del paciente, la
presencia de Proteína C Reactiva (PCR) en concentraciones elevadas cause la aglutinación de
partículas recubiertas con anticuerpos específicos contra la PCR. Esta aglutinación será
visible, indicando la presencia de un proceso inflamatorio o necrótico, y su intensidad se
correlacionará con los niveles de PCR en el suero, lo que permitirá una evaluación rápida y
cualitativa del estado inflamatorio del paciente.
ACTIVIDADES PREVIAS
Lectura de la práctica. Elaboración de cronograma y diagrama del procedimiento.
Entrega de vale de material (de martes a jueves previos a la práctica).
Investigación previa de lo que realizarás en la práctica.
MATERIALES
● Materiales de ● Recursos para ● Equipo ● Reactivos ● Protección y
laboratorio traer anotaciones
✔ Pizeta ✔ Torundas ✔ Microcentrífug ✔ Agua ✔ Bitácora
(algodón a destilada
c/alcohol)
✔ Gradilla ✔ Algodón seco ✔ Alcohol ✔ Instrumento
de
evaluación
✔ Placa de ✔ Torniquete ✔ Agua de ✔ Cronograma
vidrio con grifo de
excavaciones actividades
✔ Micropipetas ✔ Jeringas ✔ Kit PCR ✔ Hojas de
práctica
✔ Puntas para ✔ Tubos tapón ✔ Bata de
micropipeta rojo laboratorio
✔ Jerga ✔ Zapato
cerrado
✔ Palillos de ✔ Uniforme
madera
✔ Jerga ✔ Cofia
✔ Klinex ✔ Cubrebocas
✔ Guantes
(látex, vinilo,
nitrilo)
PROCEDIMIENTO
Prueba cualitativa
Para esta prueba selecciona a un individuo que tenga las características de algún
padecimiento asociado con PCR.
1. Extraer 3 mL de sangre venosa. Dejar en reposo 5 minutos.
2. Centrifugar a 2,000 rpm por 5 minutos.
3. Decantar el suero.
4. Colocar una gota de suero (50 uL) en una de las excavaciones de la placa.
5. Añade una gota de látex-antiproteína C reactiva
6. Mezclar con un palillo nuevo la reacción durante 5 minutos, detente si aglutina antes.
7. Rotar la placa con movimiento circular por 3 minutos y observar si ocurre
aglutinación macroscópica.
8. Redacta tus resultados e interprétalos.
9. Realiza la limpieza de tu área, materiales y ordena. Los bancos en la orilla, mesa limpia
y seca, piso sin basura, material lavado y estilando en su mesa. Desechos RPBI en su
lugar. Desechos comunes en bote de basura normal.
MANEJO DE DESECHOS
Desecha objetos punzocortantes (agujas sin tapón, lancetas) en contenedor rígido rojo.
Desecha material de vidrio (portaobjetos, cubreobjetos) en la caja de cartón.
Desecha material con sangre o con excedente (tubos con sangre, jeringas con sangre,
algodones saturados de sangre) en bolsa roja.
Desecha los materiales no nocivos y no de riesgo en bote para basura normal.
AUTOEVALUACIÓN:
1. Enfermedades en las que se puede tener la presencia de PCR en sangre:
● Infecciones bacterianas (como neumonía, sepsis, meningitis).
● Enfermedades inflamatorias (como artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico).
● Infarto de miocardio.
● Cáncer (especialmente durante procesos metastásicos).
● Traumatismos o quemaduras severas.
● Enfermedades autoinmunes (como vasculitis).
2. Enfermedades con las que se le puede asociar de forma irregular:
● Enfermedades cardiovasculares (como aterosclerosis).
● Enfermedades neurodegenerativas (como Alzheimer o Parkinson).
● Obesidad.
● Diabetes tipo 2.
3. Función de la PCR para estimular al complemento y la fagocitosis:
La Proteína C Reactiva (PCR) se une a polisacáridos en las membranas de microorganismos
como bacterias. Al unirse a estos, activa la vía clásica del complemento, promoviendo la
fagocitosis y la destrucción bacteriana. La PCR facilita la opsonización de patógenos, haciendo
que sean más fácilmente reconocidos y eliminados por células inmunitarias, como los
fagocitos.
4. Las pentraxinas y su papel en la respuesta inmunitaria:
Las pentraxinas son una familia de proteínas plasmáticas, entre ellas la Proteína C Reactiva
(PCR) y la PTX3. Cumplen un papel fundamental en la respuesta inmune innata, actuando
como receptores de reconocimiento de patrones. Las pentraxinas ayudan a reconocer y unirse
a patógenos, facilitando su eliminación a través de la activación del complemento y la
promoción de la fagocitosis. También modulan la inflamación y la reparación tisular en
procesos patológicos.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
Plasma en este espacio tus resultados, observaciones, discusiones. Debes describir en qué
porcentaje dan compatibilidad cada prueba y por ende si es o no factible hacer la transfusión.
Utiliza diagramas, gráficos, tablas, no solo texto. Utiliza de referencia los libros de apoyo para
discutir. Signo negativo indica que no hay aglutinación; signo positivo indica aglutinación
CONCLUSIONES
En esta práctica, aprendí que la Proteína C Reactiva (PCR) es un marcador clave de
inflamación, y su detección mediante aglutinación en placa es una herramienta rápida y
efectiva para identificar procesos inflamatorios. Los resultados obtenidos se alinearon con las
expectativas, ya que observamos aglutinación en sueros con niveles elevados de PCR, lo que
confirma la presencia de un proceso inflamatorio o infeccioso.
Además, comprendí cómo la PCR activa la vía clásica del complemento y facilita la fagocitosis,
jugando un papel crucial en la respuesta inmune. También entendí la función de las
pentraxinas, como la PCR y la PTX3, en la inmunidad innata, al reconocer patógenos y
promover su eliminación.
REFERENCIAS
Pavón, L., Garcés, M. E., & Jiménez, M. C. ( 24 de mayo de 2016). Inmunología molecular,
celular
y traslacional.
ANEXOS
Cronograma:
Actividad Descripción Responsable
Introducción teórica y Explicación sobre la Proteína C Reactiva Ocegueda
objetivos de la (PCR), su función en la inflamación y su Camacho
práctica detección mediante aglutinación. Estrella Gpe
Distribución de Entrega de los materiales necesarios: reactivos Cantabrana
materiales de PCR, partículas de látex, sueros, portaobjetos, Sánchez Jose Gael
etc.
Preparación del Limpieza de la mesa y preparación del área para el Zamaro
área de trabajo procedimiento: disposición de materiales y Sánchez
reactivos. Ingrid
Realización de las Procedimiento: mezclar el suero con las Lopez
pruebas de partículas de látex, observar y registrar la Hernández
aglutinación presencia o ausencia de aglutinación. Perla
Realización de controles negativos y positivos (sueros Ocegueda
Control de con niveles conocidos de PCR) para asegurar la Camacho Estrella
calidad precisión de los resultados. Gpe
Observación y Observación de aglutinación y análisis de los Cantabrana
análisis de resultados obtenidos. Interpretación de los Sánchez Jose Gael
resultados signos positivos y negativos.
Discusión de Discusión sobre los resultados obtenidos: ¿se Zamaro
resultados y observó aglutinación? ¿Qué indican los resultados Sánchez
conclusiones en términos de inflamación? Ingrid
Revisión de conceptos Aclaración de dudas sobre la PCR, su función Lopez
y aclaración de dudas en la respuesta inmunitaria y su aplicación Hernández
clínica. Perla
Limpieza y Recogida de materiales, limpieza del área de Ocegueda
cierre de la trabajo y almacenamiento adecuado de muestras Camacho Estrella
práctica y reactivos. Gpe
Cierre y Resumen de lo aprendido, retroalimentación Cantabrana
retroalimentación sobre el desarrollo de la práctica y sugerencias Sánchez Jose Gael
para futuras sesiones.
Diagrama:
