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PRÁCTICA N° 7
DETERMINACIÓN DE GLICÓSIDOS CARDIOTÓNICOS
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I. GENERALIDADES
Los glicósidos son principios orgánicos complejos provenientes de las plantas que por hidrólisis ácida,
alcalina o enzimática producen uno o más azúcares y otro compuesto no azucarado de diferente
composición química denominado aglicón. Tienen relativamente pocas propiedades comunes, algunos
son solubles en agua caliente; otros en alcohol, acetona, acetato de etilo, metanol; por lo general son
insolubles en éter sulfúrico y de petróleo. La digitonina es soluble en cloroformo.
La valoración de glicósidos se puede hacer por los métodos: por pesada directa de los glicósidos
aislados, por colorimetría, por determinación del azúcar producido por hidrólisis ácida o enzimática,
por determinación del aglicón del glicósido (valoración por yodometría de la hidroquinona).
Los glicósidos cardiotónicos, se caracterizan por tener un aglicón esteroide y un resto zucarado,
formado por tres azúcares llamados digitoxosas. Las reacciones químicas buscan identificar el aglicón
esteroide, formando acetatos con el grupo hidroxilo que une al aglicón, con el resto azucarado, al
núcleo lactónico y a las digitoxosas mediante pruebas específicas.
Los glicósidos cardiotónicos, cardiactivos o heterósidos cardiacos se caracterizan por su acción
específica sobre el músculo cardiaco pues aumenta el tono, la excitabilidad y la contractibilidad. La
genina tiene estructura esteriodal pudiendo ser cardenólido o bufenólido según el anillo lactónico del
carbono 17 se de 5 ó 6 lados respectivamente.
El principal glicósido cardiotónico es la digitoxina que se obtiene de las drogas Digitalis purpurea y
Digitalis lanata. Otros glicósidos son gitoxina, gitalina y digoxina. Todas ellas se utilizan en casos de
insuficiencia cardiaca o arritmias.
II. OBJETIVOS
El estudiante, haciendo uso de materiales, equipos y reactivos de laboratorio, realizará
correctamente la extracción e identificación de glicósidos cardiotónicos en muestras vegetales.
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III. MATERIALES Y REACTIVOS
Proporcionados por el laboratorio:
- Pipeta de 10 ml - Beaker de 250 ml
- Embudo de vidrio - Tubos de ensayo 13x100
- Digitonina - Papel de filtro
- Tubo de ensayo 16x150 mm - Acetato de Plomo 5%
- Cloroformo - Pipetas (1mL y 2mL)
- Anhídrido acético - H2SO4 q.p
- Balanza - Reactivo de Kedde
- Pizeta con agua destilada - Gradilla
- Cocina eléctrica
Proporcionados por el estudiante:
- Hojas de Neríum oleander “laurel rosa”
- Tableta de digoxina
IV. PROCEDIMIENTO
1. Identificación de glicósidos cardiotónicos en una muestra vegetal
a. Extracción
A unos 2g de polvo de hojas, agregarle 10 mL de alcohol de 70° y calentar suavemente,
dejándolo en contacto por 3minutos, filtrar
A 5mL del filtrado adicionarle 10mL de agua; precipitar con 5 gotas de acetato de plomo
5%, agitar y filtrar.
El líquido filtrado se agita con cloroformo, decantar, separar y evaporar el solvente con
las precauciones debidas.
b. Identificación
Ensayo de Kedde: Una alícuota de un extracto etanólico se mezcla con 1mL del reactivo
y se deja reposar durante 5 a 10 minutos. Un ensayo positivo es en el que se desarrolla
una coloración violácea, persistente durante 1-2 horas.
Reacción de Lieberman-Bouchard: A una alícuota del extracto etanólico evaporar a
sequedad y redisolverlo en cloroformo, añadirle anhídrido acético y por las paredes
dejar caer ácido sulfúrico concentrado. Observar la formación de un anillo o coloración.
2. Identificación de glicósidos cardiotónicos (triterpenos y/o estereoides) en una muestra
problema
En un tubo de ensayo se vierte 2 ml de muestra problema (extracto etéreo) + 0.5 ml de
cloroformo + 0.5 ml de anhídrido acético y por las paredes V a VIg de ácido sulfúrico y no se
agita.
Da como resultado la formación del anillo violáceo demostrando así la presencia de
triterpenos o esteroides.
3. Valoración colorimétrica de digoxina
Solución tipo de digoxina: Disolver 5 mg de digoxina (USP) desecada (105 °C x 1 h) y pesada
con exactitud en alcohol para obtener exactamente 25 mL. Conservar en refrigeración.
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Solución de Trinitrifenol (ácido pícrico): Disolver 1,8 g de ácido pícrico en 50 mL de alcohol,
añadir 5 mL de hidróxido de sodio al 10% y agua destilada para obtener 100 mL.
Gráfica tipo digoxina: Transferir porciones de 2, 3, 4 y 5 mL de la solución tipo de digoxina
que representan 0,4; 0,5; 0,8 y 1 mg de digoxina a fiolas de 25 mL, añadir 15 mL de solución
de ácido pícrico (del preparado) a cada matraz aforado y diluir a 25 mL con alcohol. Mezclar
perfectamente y dejar reposar durante 30 minutos. Luego determinar la absorbancia
(espectrofotómetro) de cada solución a 525 nm y luego dibujar una gráfica. Prepare un blanco
compuesto de 15 mL de solución de ácido pícrico y cantidad suficiente de alcohol para 25 mL,
para llevar el aparato a cero.
Solución problema: Disolver 5 mg de dogoxina comercial a valorar desecada y pesada con
exactitud, en alcohol para obtener 25 mL. Transferir 4 mL de esta solución a una fiola de 25
mL. Añadir 15 mL de ácido pícrico (del preparado). Diluir exactamente a 25 mL con alcohol,
mezclar y dejar reposar durante 30 minutos. Determinar la absorbancia de esta solución.
V. CÁLCULOS Y RESULTADOS
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VI. DISCUSIÓN
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VII. CONCLUSIONES
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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ESQUEMA DEL PROCEDIMIENTO DE LA PRÁCTICA
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