Experimento de Griffith
¿En qué consistió el experimento?
investigando una enfermedad infecciosa mortal la neumonía, estudió las diferencias entre una cepa de la bacteria
Streptococcus peumoniae que producía la enfermedad y otra que no la causaba. La cepa que causaba la enfermedad estaba
rodeada de una cápsula (también se la conoce como cepa S, del ingles smooth, o sea lisa, que es el aspecto de la colonia en
las placas de Petri). La otra cepa (la R, de rugosa, que es el aspecto de la colonia en la placa de Petri) no tiene cápsula y no
causa neumonía.
Griffith inyectó las diferentes cepas de la bacteria en ratones, la cepa S
mataba a los ratones mientras que la cepa R no lo hacía, luego comprobó
que la cepa S, muerta por calentamiento, no causaba neumonía cuando se
la inyectaba. Sin embargo cuando combinaba la cepa S muerta por
calentamiento, con la cepa R viva, es decir con componentes individuales
que no mata a los ratones e inyectaba la mezcla a los ratones, los ratones
contraían la neumonía y morían; en la sangre de estos ratones muertos
Griffith encontró neumococos vivos de la cepa S. Es decir que en las
bacterias S muertas había “algo” capaz de transformar a las bacterias R, en
patógenas y este cambio era permanente-heredable. Este "algo" fue
aislado; luego se encontró que era DNA Las bacterias que se aislaban de los ratones muertos poseían cápsula y, cuando se
las inyectaba, mataban otros ratones. Frederick Griffith fue capaz de inducir la transformación de una cepa no patogénica
Streptococcus pneumoniae en patogénica. Griffith postuló la existencia de un factor de transformación como responsable de
este fenómeno.
Experimento de Avery, Macleod y McCarthy
Comenzaron con grandes cultivos de células S muertas por calor, y mediante una larga serie de pasos bioquímicos (que se
determinaron por cuidadosa experimentación), purificaron progresivamente el principio transformante al lavar, separar o
destruir enzimáticamente los otros componentes celulares. Con este método, fueron capaces de obtener pequeñas cantidades
de principio transformante altamente purificado, el cual podían luego analizar con otras pruebas para determinar su identidad.
El principio transformante tenían la idea mas compleja que se debería de acercar al ADN:
• La sustancia purificada dio un resultado negativo en las pruebas químicas conocidas para detectar proteínas, pero un
resultado fuertemente positivo en un examen químico conocido para detectar ADN.
• La composición elemental del principio transformante purificado era muy semejante a la del ADN en su proporción de
nitrógeno y fósforo.
• Enzimas que degradan proteínas y ARN tenían poco efecto sobre el principio transformante, pero las enzimas capaces
de degradar ADN eliminaban la actividad transformante.
Todos estos resultados apuntaban hacia el ADN como el probable principio transformante. Sin embargo, Avery fue cauteloso
en la interpretación de sus resultados. Se dio cuenta de que era posible que alguna sustancia contaminante presente en
pequeñas cantidades, y no el ADN, fuera el principio transformante real.
Experimento de Hershey y Case
En este caso el estudio fue dado en otro enfoque estudiaron bacteriófagos, virus que atacan bacterias. Los fagos que
utilizaban eran simples partículas compuestas de proteína y ADN, con sus estructuras externas hechas de proteínas y el núcleo
interno compuesto por ADN.
Los fagos se unían a la superficie de una célula bacteriana
hospedera e inyectaban alguna sustancia (ya sea ADN o
proteínas) en el hospedero. Esta sustancia daba "instrucciones"
que causaban que la bacteria hospedera comenzara a producir
montones y montones de fagos, es decir, este era el material
genético del fago. Antes del experimento, Hershey pensaba que
el material genético resultaría ser proteína Hershey y Chase
prepararon dos lotes diferentes de fagos. En cada lote, el fago se
produjo en presencia de un elemento radioactivo específico que
se incorporó a las macromoléculas (ADN y proteínas) que
componían el fago.
• Una muestra se produjo en presencia de, un isótopo radiactivo de azufre. El azufre se encuentra en muchas proteínas
y está ausente en el ADN, por lo que este tratamiento solo marcaba radiactivamente las proteínas del fago.
• La otra muestra se produjo en presencia de un isótopo radiactivo de fósforo. El fósforo se encuentra en el ADN y pero
no en las proteínas, por lo que este tratamiento solo marcaba radiactivamente el ADN del fago (y no sus proteínas).
Cuando Hershey y Chase midieron la radioactividad del sedimento y del sobrenadante en ambos de sus experimentos,
encontraron que una gran cantidad de fosforo aparecía en el sedimento, mientras que casi todo el azufre aparecía en el
sobrenadante. Con base en esto y otros experimentos similares, Hershey y Chase concluyeron que el ADN, y no la proteína, se
inyectaba en las células del hospedero y constituía el material genético de los fagos.
