UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
ESCUELA DE MEDICINA
CÁTEDRA: BIOLOGÍA II
DR. RAMON VILLACRES PASTOR
-
La teoría de la evolución de Charles Darwin señala que todos los seres vivos
provenimos de un mismo precursor común.
La propuesta fortalecida con evidencias
científicas, como la lectura del conjunto de genes
(Genoma), que nos define a los humanos así
como a una gran diversidad de organismos,
incluidos virus, bacterias, hongos, plantas y
animales.
Queda establecido, que todos los seres
vivos compartimos material genético,
incluidos muchos genes, que afirma que
Dentro de nuestro genoma se encuentran
el genoma de la raza humana es similar genes de origen bacteriano, incluso orgánulos
aproximadamente 60 % al chimpancé, como las mitocondrias, parecen haber sido
40 % al de la mosca, 30 % al de algunas alguna vez microorganismos de vida
plantas y 20 % al de la levadura. independiente.
Recombinación genética
Los genes no tienen una posición fija en el ADN, ya
sea en el cromosoma EUCARIOTICO, o en la molécula
circular de los PROCARIOTAS, pueden trasladarse en él,
lo que da lugar a la recombinación genética.
2 tipos de procesos de recombinación alteran los
genes:
1.- Recombinación recíproca:
Mecanismo principal que genera recombinación
genética, se produce en eucariotas durante la meiosis,
y consiste en el intercambio de todo o de una de sus
partes entre dos cromosomas homólogos.
2. Transferencia Genética
2.- Transferencia de genes:
Puede llevarse a cabo, con genes
involucrados, como parte de segmentos
circulares pequeños extracromosómicos de
ADN llamados Plásmidos, U OTROS
ELEMENTOS GENETICOS MOVILES.
Los plásmidos pueden entrar y salir del
genoma principal en los organismos
procariotas.
Otra vía de transferencia de genes, es dentro
de trasnposones, que pueden saltar al azar
en el genoma, tanto en procariotas o
eucariotas.
Existen dos tipos de Transferencia genética:
Transferencia Vertical: ocurre
cuando un organismo recibe
material genético de sus
ancestros, por ej: de sus padres
o de un ancestro de la que ha
evolucionado.
Transferencia Horizontal:
se refiere a cualquier proceso
mediante el cual se transfiere
material genético de un
organismo donador a un
receptor no descendiente.
Es muy común en bacterias.
La transferencia genética horizontal (TGH) es el movimiento de material genético entre organismos
unicelulares y/o pluricelulares.
La transferencia genética horizontal es la razón principal de que se propague en las bacterias la
resistencia a los antibióticos
TRANSMISIÓN
VERTICAL HORIZONTAL
PROGENITOR AL TRANSDUCCION TRANSPOSICIÓN CONJUGACIÓN
HIJO. TRANSFORMACIÓN
La transferencia de genes
Muchos genes son capaces de moverse, de “saltar” de cromosoma en
cromosoma, de un organismo a otro e incluso de una especie a otra .
Existen varios procesos por los cuales un fragmento de ADN foráneo, portador
de información, puede ingresar en una célula:
La conjugación o transferencia directa de DNA de una bacteria a otra por
contacto célula con célula.
La transformación es un proceso de transferencia de genes, donde la célula
capta fragmentos de ADN desnudo, a partir del medio circundante lo
incorpora y lo expresa.
La transducción es un proceso mediante el cual el ADN es transferido desde
una bacteria a otra mediante la acción de un virus.
La infección viral por medio de la incorporación del ácido nucleico de un
genoma viral en células procariontes o eucariontes
La transposición de genes de cromosomas de una misma célula entre éstos
CONJUGACION
Para que 2 bacterias puedan conjugar, tiene que
existir contacto físico entre la bacteria donadora
de ADN y la receptora.
La capacidad de donar la proporciona el poseer
un plásmido conjugativo que también se PUEDE
denominar: factor de fertilidad o plásmido sexual.
El plásmido conjugativo se rompe Haga por un
cliclugar
para
fijo, llamado, origen de transferenciaagregar
u oriT, texto
y una
de sus cadenas pasa a través del puente
citoplásmico creado.
En ambos citoplasmas se van sintetizando las
cadenas complementarias de forma que al final
del proceso, ambas bacterias poseen un
plásmido conjugativo completo.
El factor F puede encontrarse en 3 estados:
1. Autónomo, en las células F+;
2. Integrado ( episoma), en las células Hfr
3. Autónomo, pero con un trozo de
cromosoma, en las cepas F
En estos tres estados realiza el mismo tipo de
funciones esenciales.
ETAPAS DE LA CONJUGACION
TRANSFORMACION
Búsqueda de vacuna contra la neumonía
bacteriana.
Descubrió que una cepa no-virulenta (sin
cápside) Streptococcus neumoniae podía
ser transformada en virulenta (con cápsula)
al exponerla a cepas virulentas que habían
sido matadas con calor.
TRANSFORMACION
El término transformación es también usado, de manera más general, para
describir mecanismos de transferencia de ADN o ARN en biología
molecular.
Por ejemplo: la producción de transgénicos como maíz
transgénico requiere la inserción de nueva información genética en
el genoma del maíz, usando el mecanismo apropiado de transferencia de
ADN; al proceso se le llama comúnmente transformación.
Introducción de genes Bacillus Thuringiesis
Transformación
Es la alteración genética de una bacteria resultante
de la absorción directa, incorporación y expresión
del material genético exógeno
En determinadas condiciones fragmentos de ADN
exógeno, pueden entrar en el interior de las
bacterias.
El ADN exógeno, puede intercambiar segmentos
con el ADN del cromosoma principal bacteriano
La transformación de plásmidos
TRANSFORMACION implica
la captación de ADN en Transformación química, las células son
células bacterianas, de capaces de captar ADN exógeno,
mediante el tratamiento con cationes
levadura/vegetales, divalentes como el cloruro de calcio, que
hacen que la pared celular bacteriana sea
TRANSFECCION término más permeable al ADN.
generalmente reservado Choque térmico
para células de mamíferos. se utiliza para formar temporalmente poros
en la membrana celular, lo que permite la
Típicamente, LOS métodos transferencia del ADN exógeno a la célula.
para la transformación de
Electroporación:
una construcción de ADN, se usa un pulso eléctrico corto para hacer que la
en una célula huésped, célula bacteriana sea temporalmente
permeable.El bombardeo de partículas: se utiliza
SON: para la transformación de células vegetales.
Transfecciòn
Consiste en la introducción de
material genético externo en
células eucariotas, mediante
plásmidos, vectores víricos u
otras herramientas para la
transferencia.
Su significado original es
“infección por transformación”,
es decir introducción de ADN y
ARN, desde un virus procariòtico
o bacteriófago en las células,
resultando en una infección.
Transducción
Transducción genética es un proceso mediante el
cual el ADN es transferido, desde una bacteria a
otra, mediante la acción de un virus
Se utiliza para designar al proceso mediante el
cual ADN exógeno es introducido en una célula
mediante un vector viral.
TRANSDUCCION
En la transducción podemos distinguir dos etapas
diferenciadas:
1. Formación de la partícula fágica transductora: un trozo de
material genético de la célula donadora se introduce en el interior
de la cabeza de la cápside de un bacteriofago.
2. La partícula transductora inyecta de forma habitual el ADN
que posee, a la célula receptora., donde este ADN, puede
eventualmente recombinarse y expresar su información.
Sistemas de replicación
Los viriones, no realizan ninguna actividad fisiológica, por
lo que no requieren sintetizar proteínas, ni utilizan
energía, son estructuras inertes.
El ácido nucleico viral, se replica a expensas de la
maquinaria y la energía de la célula infectada.
Existen dos sistemas de replicación de virus, el ciclo lítico
y el ciclo lisogénico
TIPOS DE TRANSDUCCIÓN
Transducción FAGOS ATEMPERADOS O
FAGOS VIRULENTOS
MODERADOS
Especializada
Generalizada
Ciclo
Ciclo litico
lisogenico
Es capaz de transferir cualquier parte La partícula transductora transporta
del genoma sólo porciones específicas del
bacteriano. genoma bacteriano
¿ QUE ES UN
BACTERIOFAGO?
En la mayoría de los casos la transferencia de genes es
entre miembros de una misma especie bacteriana.
Si un fago específico, tuviera mayor espectro de
huéspedes, entonces ocurre transferencia entre especies.
Fago de tipo virulento:
Se expresa el programa genético
vegetativo (lítico) de su genomio,
destinado a producir muchas copias de
ese ADN fágico, y muchas cápsidas
proteicas.
En el interior de cada cápsida, se
introduce,“se empaqueta”, una copia del
genomio del fago.
Las nuevas partículas (viriones), una vez
completadas y ensambladas, lisan a la
bacteria, quedando libres en el medio y
preparadas para infectar nuevas células
de la especie bacteriana hospedadora.
Fago de tipo moderado
El ADN del fago establece una
relación benigna con su hospedador,
integrándose en el genoma bacteriano,
denominandose profago, y permanece en esta
situación, como una porción más del genomio
de la bacteria, replicándose como parte de éste.
El profago mantiene reprimidas todas sus
funciones líticas, expresando solamente una
proteína represora de aquellas funciones.
La célula bacteriana portadora de un
profago se denomina lisogénica.
Este tipo de relación benigna es estable, pero de
forma espontánea “despierta” y se activan sus
funciones vegetativas, este fenómeno recibe el
DIFERENCIAS TRANSDUCCIÓN GENERALIZADA Y ESPECIALIZADA
CICLO LITICO y
fases de
infeccion
Fase de eclipse/Replicacion: Fase de
Fase de adhesión: El virus se Fase de ensamblaje: se Fase de lisis o
no se observan copias del ruptura: Los
une a la célula penetración o produce la
virus en la célula, pero se está
hospedadora de forma inyección: el unión de los viriones salen de la
produciendo la síntesis de
estable. La unión es ácido nucleico capsómeros célula, mediante
ARN, necesario para generar
específica ya que el virus viral entra en la para formar la la rotura
las copias de proteínas de la
reconoce complejos célula mediante cápsida y el enzimática de la
cápside, se produce la
moleculares de tipo una perforación,
continua formación de ácidos empaquetamie pared bacteriana,
proteico, lipoproteico o que el virus realiza nto del ácido los nuevos virus
nucleicos virales y enzimas
glucoproteico, presentes en en la pared nucleico viral viriones), infectan
destructoras del ADN
las membranas celulares. bacteriana. en ella. nuevas células.
bacteriano.
Las 2 primeras fases de Este cambio induce a El profago se En este estado el
este ciclo son iguales a las la liberación del mantendrá latente profago puede
descritas en el ciclo litico. profago, hasta producirse un mantenerse
transformándose en cambio en el medio durante un
En la fase de eclipse(3era)
un virus activo,que ambiente celular tiempo
el ácido nucleico viral en
continúa el ciclo de que provoque un indeterminado,
forma de ADN bicatenario
infección hasta cambio celular, por pudiendo incluso,
recombina con el ADN
producir la muerte ejemplo, por reproducirse la
bacteriano,
celular y la liberación variaciones bruscas célula,
introduciéndose en éste
de nuevos virus. de temperatura, o generando
como un gen más.
desecación, o nuevas células
Esta forma viral se disminución en la hijas lisogénicas
denomina profago, o concentración de
oxígeno.
virus atenuado, mientras
que la célula infectada se
denomina célula
CICLO LISOGENICO y fases de
lisogénica. infeccion
Los virus procariontes:
transferencia de ADN
entre hospedadores
Los bacteriófagos también son
capaces de transferir ADN de una
célula hospedadora a otra por
medio de la trasducción.
Durante un ciclo lítico, en el que los
virus explotan los recursos de la
célula hospedadora, el ADN se
fragmenta, de modo, que algunos
virus cuando abandonan la célula,
llevan fragmentos de ADN del
hospedador.
Los virus de
eucariontes:
provirus y retrovirus
Algunos virus de eucariontes
también se integran en el ADN de
la célula hospedadora.
Integrados se denominan provirus.
Estos virus pueden ser de ADN,
análogos a los bacteriófagos
atenuados, o retrovirus de ARN.
La infección viral
El virus es una partícula inerte cuando
está fuera de una célula, por lo tanto no
se considera un microorganismo vivo.
En los virus con genoma de ADN, el ADN
viral se replica y también se transcribe a
ARN mensajero.
El ARN mensajero codifica enzimas
virales, proteínas de la cubierta viral y en
algunos casos proteínas reguladoras que
controlan la expresión del genoma de la
célula operadora.
TRANSDUCCIÓN GENERAL
TRANSDUCCIÓN ESPECIALIZADA
La infección viral
Distintos tipos de virus presentan diferentes estrategias de
infección.
1. Algunos se desensamblan y dejan la cubierta proteica fuera
de la membrana plasmática de la célula e inyectan el ácido
nucleico en el citoplasma.
2. Otros entran intactos en la célula y la cápside se
desensambla una vez adentro, por otros mecanismos, y libera
el ácido nucleico.
Ya dentro de la célula hospedadora, el ácido nucleico viral
dirige la producción de nuevos virus usando materias primas
de las células y también su maquinaria metabólica.
los virus son parásitos obligados: NO PUEDEN MULTIPLICARSE
NATURALMENTE FUERA DE LA CELULA HOSPEDADORA.
Vectores virales
Un vector viral es un virus modificado que hace de
vehículo para introducir material genético exógeno en el
núcleo de una célula.
En terapia génica, el uso de virus como vectores requiere
la eliminación de los genes que dotan al virus de su
capacidad infecciosa y patógena, dejando únicamente
aquellos que participan en la inserción del material
genético, y su sustitución por el gen terapéutico de interés.
Los diferentes tipos de vectores, difieren en las células que
infectan, su eficencia, su acción, si es temporal o
permanente, su estructura y lugar de inserción.
TRANSPOSICION: DEFINICIÓN
Un transposón es una
secuencia de ADN que
La transposición es un
puede moverse de
mecanismo especial de
manera autosuficiente a
recombinación
diferentes partes del
genoma de una célula
Este fenómeno se conoce desde
El transposón modifica el ADN:
hace tiempo, lo observó
ya sea arrastrando un gen
Bárbara McClintok mientras
codificador de un cromosoma a
estudiaba genéticamente la
otro, rompiéndolo por la mitad
variegación del maíz. Postuló
o haciendo que desaparezca del
que eran necesarios unos
todo.
"genes que saltaban".
Características que distinguen la
transposición de la recombinación
La transposición puede reestructurar
drásticamente la organización del
cromosoma hospedador. No requiere homología de DNA
Además, puede alterar la expresión entre la secuencia dadora y la
de un gen, bien sea, inactivándolo, o aceptora.
bien, sobreexpresándolo.
Se produce una duplicación de
Necesita la intervención de la transposasa la secuencia aceptora (entre 3
y, en algunos casos, la resolvasa. y 12 pb) antes y detrás del
transposón
La transposición puede llevarse a
cabo de dos maneras
Vía RNA, un fragmento de RNA previamente copiado a
DNA por la transcriptasa reversa, pasa a otro DNA.
Los retrovirus se transponen por un intermediario de RNA.
Vía DNA, un fragmento de DNA pasa a otro DNA (es el tipo
de transposición que vamos a tratar).
TRANSPOSICIÓN CONSERVATIVA
El transposón sale de la sede donadora que queda vacía y se
incorpora en una nueva sede (sede receptora). No aumenta el
número de copias del transposón en el interior de la célula.
PROCESO:
➢ Se expresa la transposasa
➢ Realiza dos cortes de doble cadena a la misma
altura en el genoma donante, dejando aislado el
transposón.
➢ Se localiza una secuencia diana en el genoma
aceptor
➢ Realiza un corte cohesivo.
➢ Se une los extremos a los del transposón aislado
➢ La ADN Polimerasa de la célula rellena las zonas
de cadena sencilla dejadas en la secuencia señal
tras el corte cohesivo.
➢ La secuencia señal queda duplicada.
➢ Queda un hueco en el genoma donante, que puede
ser letal si no se repara. Realmente, en este caso
se habla más de recombinación.
R. Conservativa
2. Transposición no conservativa: La transposasa realiza un corte cohesivo no solo en la secuencia
diana, sino también en el genoma donante, dejando un corte a cada lado del transposón.
Luego integra todo el genoma donante con el aceptor, mediante un mecanismo llamado “estructura
entrecruzada”.
la estructura entrecruzada es resuelta por una 2da enzima, la resolvasa, que dará lugar a una de las
siguientes transposiciones:
2A. Transposición no replicativa: el genoma donante se libera, queda un hueco en el genoma donante,
que puede ser letal si no se repara.
2B. Transposición replicativa: se produce una replicación del genoma aceptor, lo que duplica el
transposón, y produce un genoma mixto llamado “cointegrado”.
• luego la resolvasa rompe el cointegrado mediante una recombinación recíproca, que une los extremos
del ADN aceptor original, y libera el genoma donante de nuevo con su transposón.
TRANSPOSICIÓN REPLICATIVA
El transposón permanece en la sede donadora y mediante un mecanismo combinado de replicación y
recombinación se incorpora en la sede aceptora.
Aumenta el número de copias del transposón en el interior de la célula
Es decir, se produce una replicación del genoma aceptor, lo que duplica el transposón, y produce un genoma
mixto llamado “cointegrado”.
La enzima transposasa se comporta como una enzima de restricción, posibilita los cortes de cadena
simple en cada extremo del elemento transponible y en los extremos de la secuencia donde se va a
insertar el elemento.
La enzima resolvasa rompe el cointegrado mediante una recombinación recíproca,
que une los extremos del ADN aceptor original, y libera el genoma donante de
nuevo con su transposón.
Es codificada en unos casos por el elemento transponible y en otros por un gen
celular.
