Unidad 10
Citologías, biopsias y autopsias
Gestión de muestras biológicas
INDICE
1. Citologías
1.1. Citología exfoliativa
1.2. Citología líquida
1.3. Impronta
1.4. Citología por punción-aspiración con aguja fina (PAAF)
A. Procedimiento para la toma de muestras citológicas con PAAF
2. Biopsias
2.1. Biopsia con aguja gruesa
2.2. Biopsia por punción tipo trucut
3. Las guías por imagen
3.1. Ecografía
3.2. Tomografía computarizada (TC)
3.3. Resonancia magnética nuclear (RMN)
3.4. Mamografía
4. Autopsias
4.1. Autopsias clínicas
4.2. Ecopsias
Las citologías
La citología es el diagnóstico morfológico basado en los caracteres microscópicos de células y
componentes extracelulares desprendidos de los órganos espontáneamente u obtenidos por otros
procedimientos
El objetivo básico de la citología es diferenciar entre:
Población celular normal
Respuesta citológica inflamatoria
Población celular neoplásica
La citología estudia las alteraciones morfológicas
de las células desprendidas libremente de los
epitelios de revestimiento o extraídas de distintas
zonas del cuerpo humano
Tipos de citología
Las citologías pueden ser de diversos tipos:
Exfoliativa Por aspiración con
aguja fina (PAAF)
De líquidos
Por impronta
cepillado
Tipos de citología
Exfoliativa
Se basa en recoger material desprendido espontáneamente o de forma inducida de las superficies de
los órganos para practicarle un estudio citológico
Exfoliación por raspado. Se raspa la Exfoliación por cepillado. Se cepilla
superficie para obtener células. la superficie para obtener células.
Cojo varias capas celulares Cojo fluido y una capa celular
Tipos de citología
Citología vaginal o de papanicolau
La citología vaginal se
basa en la obtención
por raspado de células
del cuello uterino y del
exterior de este para su
estudio citológico
Tipos de citología
Citología vaginal o de papanicolau
El objetivo es identificar los cambios celulares que se producen en las fases iniciales del cáncer, y de
esta forma poder iniciar el tratamiento de forma precoz. Cuando se detecta en un estadio temprano el
cáncer invasor de cuello uterino, la supervivencia a cinco años es del 92%
La mujer no debe realizarse un aseo vaginal previo a la toma de muestras
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https://www.youtube.com/watch?v=ZSJIWWkFvlU
Tipos de citología
Citología vaginal o de papanicolau. Toma de muestra
Verificar los datos de solicitud y rellenar el formulario de registro
Preparar el equipo/material necesario y explicar a la paciente cómo debe
proceder (posición ginecológica)
1. Colocar la luz para visualizar el campo de toma
2. Inspeccionar la zona perineal (secreciones, sangrado, cicatrices o irritación)
3. Sostener el espéculo con los dedos índice y medio de la mano
4. Separar los labios con los dedos índice y pulgar de la mano contraria e
introducir el espéculo sin lubricantes (ocasionalmente impregnado de agua
destilada o solución salina)
La introducción del espéculo se realiza a través del canal vaginal en forma
oblicua (angulación de 45˚ con relación al suelo de la vagina)
Tipos de citología
Citología vaginal o de papanicolau. Toma de muestra
5. Una vez en la mitad del canal vaginal, se gira 45˚
volviéndolo a la posición inicial y se introduce hasta
localizar el cuello del útero
6. Una vez visualizado el cuello se ajusta el tornillo
para liberar las manos
7. Se inspeccionan:
Las características del cuello: forma, tamaño,
color, erosiones, pólipos, desgarros
La mucosa vaginal: color, irritaciones y secreciones
Tipos de citología
Citología vaginal o de papanicolau. Toma de muestra
8. Se realiza una triple toma:
Primera: obtención de la muestra vaginal con el extremo de
una curvatura de la espátula de Ayre
Extensión en la 1ª porción del portaobjetos, la más próxima a la zona
de identificación, y en sentido perpendicular al portaobjetos
Segunda: obtención de la muestra de exocérvix con el extremo
de doble curvatura de la espátula de Ayre (movimiento de
rotación)
Extensión en la porción central del portaobjetos, paralela a la
anterior
Tercera: obtención de la muestra endocervical, con el
escobillón, rotándolo en el interior del canal endocervical
Extensión por rotación en la porción distal del portaobjetos, paralela
a la anterior
Tipos de citología
Citología vaginal o de papanicolau. Toma de muestra
9. Una vez tomadas las muestras y sin dejar
pasar más de 5 -10 s. , se fijan con un citospray o
sumergiéndolas en alcohol de 96˚ durante 10 min
Se envían al laboratorio para su tinción
y observación al microscopio
Papanicolaou (policromática):
Tinción nuclear (hematoxilina)
Contraste citoplasmático (eosina alcohol y orange G)
Se suele aclarar con un sustituto de xilol (transparencia celular)
Se añade medio de montaje y un cubreobjetos
Citología en base líquida
Tipos de citología a partir de una muestra
obtenida por exfoliación
Citología de líquidos por raspado y cepillado
Se basa en separar, mediante centrifugación, las
células presentes en líquidos orgánicos para
realizar un estudio citológico
Punción, en el caso de líquidos naturales (LCR,
pleural, peritoneal, pericárdico, sinovial, etc.) o
de líquidos de origen patológico que se han
acumulado en alguna zona del organismo
Lavado y aspiración. Es una técnica habitual
para obtener células de la mucosa bronquial
Recogida directa. En el caso de la orina, se puede
realizar una citología a partir de una muestra
recogida por micción espontánea
Tipos de citología
Citología de líquidos
Tipos de citología
Citología de líquidos
Tipos de citología
Citología de líquidos
El LP obtenido mediante toracocentesis
Se reparte en tubos estériles de 5 mL que
contenían heparina para su análisis bioquímico
(glucosa, proteínas, LDH, colesterol, amilasa,
ADA) y citológico (cámara de Thoma o Neubauer)
Las muestras de LP que se remitieron al
laboratorio de anatomía patológica se
centrifugaron durante 10 minutos a 3.000
revoluciones por minuto, tiñéndose el botón
celular con la técnica de Papanicolau y
extendiéndose en dos laminillas para su examen
microscópico.
Tipos de citología
Impronta
Se basa en poner en contacto directo un tejido con un portaobjetos para obtener una muestra para el
estudio citológico
Se procede a cortar con bisturí una pequeña porción de un órgano, tejido o tumor
Se seca bien una de las superficies con papel absorbente para eliminar sangre y líquidos tisulares
Esta técnica se aplica durante una
intervención quirúrgica y generalmente
se observa al microscopio en el propio
quirófano
Tipos de citología
Impronta
Por contacto: Se realizan varios toques de la muestra contra un
portaobjetos para dejar impregnada parte de las células del
fragmento cortado. No se debe restregar ni presionar en
exceso la muestra contra el portaobjetos para no distorsionar
la morfología celular durante la impresión
Por aplastamiento: Se coge una pequeña porción del material a
estudio entre dos portaobjetos y se aplica una pequeña presión
para realizar la extensión. Permite obtener dos portaobjetos
con muestra de estudio. Este tipo de impronta es usado en
biopsias cerebrales, debido al escaso número de células de las
muestras, o para fragmentos de tejido pequeño y blando
Por raspado de superficie: El médico realiza cortes de la pieza
quirúrgica y sobre ellos, con un bisturí, se hace un raspado de
la superficie, que se extenderá sobre un portaobjetos
Tipos de citología
Impronta
Se fija la muestra y se tiñe para observar al microscopio y emitir un
resultado in situ. La tinción de las muestras se suele hacer mediante:
Hematoxilina-eosina (H-E), útil en la mayoría de los casos.
Permite la comparación de las características de la impronta con
los cortes por congelación y las muestras definitivas
Tinción de Papanicolaou, adecuada para evaluar características
nucleares, pero consume más tiempo que la H-E
Tinción de Diff-Quick� Se realiza en menos de un minuto. Se
recomienda para lesiones linfoides, hematopoyéticas, con fondo
hemorrágico en sospecha de procesos infecciosos y en lesiones
testiculares y de las glándulas salivales
Tipos de citología
Aspiración con aguja fina (PAAF)
Es una técnica para obtener muestras para citología de masas sólidas o quísticas mediante un
procedimiento de punción y aspiración que puede se o no guiado por técnicas de imagen
Lesiones superficiales palpables. Diagnóstico diferencial entre
La muestra se puede obtener lesión benigna y cáncer en casos
con una aguja fina corriente de quistes y nódulos superficiales
Lesiones profundas no palpables pero Se realiza en pacientes hospitalizados, utilizando
visualizables por técnicas de imagen agujas finas largas de diseños especiales
La toma de muestras se debe realizar bajo
control de imágenes ecográficas, TC, RMN...
Tipos de citología
Aspiración con aguja fina (PAAF). Indicaciones diagnósticas
Establecer el diagnóstico de patologías: procesos inflamatorios agudos, inflamación crónica
granulomatosa...
Determinar si un proceso es tumoral o no tumoral, y en caso de serlo, saber si un tumor es
benigno o maligno
Identificar recidivas tumorales y metástasis
Establecer el estadio de una neoplasia
Tipos de citología
Aspiración con aguja fina (PAAF). Obtención de muestras
Una citología por punción-aspiración está constituida por cuatro fases:
1. Localización mediante palpación cuidadosa o
técnicas de imagen
2. Punción con técnica correcta. Normalmente
se efectúan tres punciones de cada
tumoración, en diferentes zonas y a distintas
profundidades→ cantidad suficiente
representativa
3. Preparación de los frotis. Las tres punciones
nos aseguran un mínimo de cuatro extensiones
4. Estudio al microscopio
Tipos de citología
Aspiración con aguja fina (PAAF). Estudios a realizar con la muestra
Morfología celular, dependiendo del órgano punzado se teñirá con:
Papanicolaou (PAP)
May-Grünwald-Giemsa (MGG)
Hematoxilina-eosina (HE)
Citoquímica (composición química de las células y sus procesos
biológicos moleculares mediante análisis químicos y fisicoquímico)
Tinciones PAS, Azul de Prusia, Fontana o Rojo Congo
Inmunocitoquímica (permite localizar moléculas en los tejidos
mediante el empleo de Ac)
Se utilizan marcadores de proliferación celular
Se basa en el reconocimiento del Ag por un Ac que
previamente se ha conjugado con un fluorocromo, una
enzima o un coloide de un metal pesado
https://www.youtube.com/watch?v=gEdZvuDrWo4
Tipos de citología
Aspiración con aguja fina (PAAF). Estudios a realizar con la muestra
Citometría de flujo (uso de luz láser para recuento y clasificación
de células según características morfológicas o presencia de
biomarcadores)
Muy útil en síndromes linfoproliferativos (buena
caracterización de las subpoblaciones linfocitarias)
Microscopía electrónica
Citogenética (estudio de estructura, función y comportamiento de
los cromosomas
Tipos de Biopsias
Una biopsia es un procedimiento en el cual se remueve tejido de un órgano vivo para realizar un
examen microscópico y así establecer un diagnóstico, un pronóstico o un seguimiento
Según requieran o no de una técnica
complementaria
Biopsias dirigidas: necesario uso de
método complementario
Biopsias endoscópicas: endoscopio
Biopsias estereotáxicas: imagen
tridimensionales, con un sistema
de coordenadas
Biopsia no dirigida: sin apoyo de
ningún sistema de imagen
Tipos de Biopsias
Según el método de extracción
Biopsia incisional: Se corta o se extirpa
quirúrgicamente sólo un trozo de tejido, masa o
tumor
Tumores de tejidos blandos (cerebro, hígado,
pulmón o el riñón)
Órganos que no se pueden extirpar
Lesiones muy grandes o difusas
No recomendada en las que al manipularlas se
rompen o se diseminan
Biopsia excisional: Extirpación completa de un
órgano o un tumor, que suele incluir tejido normal
adyacente (margen de seguridad)
Muy utilizada para lesiones pequeñas
Se realiza normalmente en el quirófano bajo
anestesia, general o local
Tipos de Biopsias
Según la forma de acceso a la lesión
Biopsia abierta: El cirujano hace una incisión en el área
afectada y extrae el tejido (anestesia local o general):
Biopsia transoperatoria o intraoperatoria: se
realiza por congelación, se secciona y se tiñe.
Carácter urgente del resultado
Biopsia postoperatoria: la muestra se lleva al
laboratorio para su estudio. Permite conocer el
éxito de una cirugía
Biopsia cerrada: Solamente se practica una pequeña
incisión para introducir el instrumento con que se
tomará la muestra
Tipos de Biopsias
Biopsia punch: biopsia de piel obtenida con instrumentos
cilíndrico hueco llamado punch, de diámetro variable
(algunos mm) que permite el estudio de todas las capas de la
piel e hipodermis
Biopsia shave: biopsia de piel en la que la muestra se obtiene
mediante corte paralelo a la superficie cutánea (afeitado)
Tipos de Biopsias
Biopsia con aguja gruesa (BAG), tru-cut, core
La biopsia con aguja gruesa (BAG) consiste en la
obtención de una muestra de tejido con agujas
especiales de calibre grueso
≈ PAAF, pero hay que hacer incisión previa
Pistola automática para obtención de la muestra
Toma de varias muestras, generalmente cuatro
Observación muestra de tejido al microscopio
En lesiones:
Palpables (menos recomendada)
No palpables: sistema de imagen
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Tipos de Biopsias
Biopsia con aguja gruesa (BAG), tru-cut, core
La biopsia por punción tipo tru-cut consiste en la
obtención de pequeños cilindros de tejido para su estudio
Esta es una técnica que puede usarse para determinar si
un tumor es maligno o no en:
Piel
Órganos internos (riñón, hígado, próstata, etc.)
mediante guía ecográfica
La biopsia core es una técnica de biopsia (normalmente
mamaria) que permite obtener pequeñas muestras del
“centro” o “núcleo” de una lesión, guiándose con
ecografía para localizar la zona
Tipos de Biopsias
Biopsia con aguja gruesa (BAG), tru-cut, core
Las agujas para punción son huecas y de calibre grueso, y
tienen una cánula interior y un dispositivo para accionarlas
El interior de la aguja se llena de tejido
Se acciona la cánula interior, desciende, cortando y
encerrando el tejido que había dentro de la aguja →
atrapa en el interior un pequeño cilindro de tejido, que
se obtiene tras recuperar la aguja
Se toman entre tres y cinco muestras de diferentes zonas de
la lesión para que la muestra sea representativa, pero
insertando la aguja siempre por el mismo orificio
Tipos de Biopsias
Biopsia con aguja gruesa (BAG), tru-cut, core
https://www.youtube.com/watch?v=4jBEUBmQQkQ
Tipos de Biopsias
Congelación
La congelación de los tejidos es una manera rápida de endurecerlos
sin necesidad de inclusión
Ventajas:
La preservación molecular es máxima
Las muestras congeladas pueden cortarse en secciones finas, del
orden de 5-15 µm, y más gruesas del orden de cientos de µm
La obtención de buenas secciones no depende del tipo de tejido
(excepto tejidos mineralizados como el hueso o aquellos
excesivamente cornificados)
Es posiblemente la manera más rápida de obtener secciones
Tipos de Biopsias
Congelación
Guías por imágenes en Biopsias
Las técnicas de imagen son útiles como:
Herramienta para el diagnóstico
Sistema para localizar la lesión y para
hacer llegar hasta ella el sistema de
toma de muestras que se vaya a usar
Las más utilizadas son:
Ecografía
Tomografía axial computarizada (TAC)
Resonancia magnético nuclear (RMN)
Mamografía
Guías por imágenes en Biopsias
Ecografía
Técnica de diagnóstico por imagen que utiliza
ultrasonidos (ondas acústicas que al chocar contra un
objeto, rebotan y producen un eco)
La medida del eco permite determinar la distancia a la
que se encuentra el objeto, su forma, tamaño y
consistencia
Se utiliza un ecógrafo (equipo que genera ultrasonidos,
interpreta su eco, y lo convierte en imágenes)
El ecógrafo tiene una pantalla en la que se visualizan
las imágenes, y un pequeño transductor (sonda)
Requiere la aplicación de un gel (mejora la transmisión
de los ultrasonidos entre el transductor y la piel)
Guías por imágenes en Biopsias
Ecografía
Las imágenes se capturan en tiempo real (pueden
mostrar estructura y movimiento de los órganos
observados, incluso la sangre (ecografía Doppler)
A diferencia de las radiografías, la ecografía no utiliza
radiación
Aplicaciones:
Detectar cambios en el aspecto y función de los
órganos, tejidos, y vasos
Detectar masas anormales
Guiar procedimientos como biopsias por aspiración
Obtener imagen de los senos y guiar la biopsia del
cáncer de mama
Guías por imágenes en Biopsias
Tomografía computarizada
Técnica de diagnóstico por imagen que utiliza
rayos X, con un sistema informático que procesa
las imágenes y permite ver secciones o cortes
del organismo o, incluso, imágenes 3D de
órganos o estructuras orgánicas
El equipo se encuentra en una habitación
cerrada con un cristal tras el cual el personal lo
maneja y da las instrucciones al paciente
El paciente debe permanecer tumbado e inmóvil
sobre una camilla que forma parte del equipo
Guías por imágenes en Biopsias
Tomografía computarizada
La camilla se introduce en la máquina y ésta va
tomando imágenes secuencialmente que el
ordenador procesa para generar la imagen
Se diferencia de los rayos X por brindar mayor
detalle e incluso generar imágenes en 3D, en
especial en el caso de tejidos blandos y vasos
sanguíneos
A veces se necesita administrar un contraste
(compuesto de yodo que resalta en las
imágenes y facilita la interpretación de la
prueba) por v.i. (a veces por vía oral)
Guías por imágenes en Biopsias
Resonancia magnética nuclear (RMN)
Técnica de diagnóstico por imagen que utiliza imanes y
ondas de radio para generar imágenes de dos o tres
dimensiones
Proporciona una visión más clara del interior del cuerpo
No aplica radiaciones ionizantes (más seguro y de
aplicación menos compleja)
También se puede usar un medio de contraste
Permite obtener imágenes casi desde cualquier ángulo
(en TAC los planos son limitados)
Produce imágenes más detalladas de los órganos
Las diferencias entre los tejidos normales y anormales
se suelen ver con más claridad que en el TAC
Guías por imágenes en Biopsias
Mamografía
Radiografía especial de las mamas con un
aparato de rayos X específico (mamógrafo)
Muy útil para la detección precoz de carcinoma
de mama y tumores inferiores a 5 mm Ø
Justificada a partir de los 40 años y
recomendada en pacientes más jóvenes con
antecedentes personales o familiares de cáncer
de mama
Autopsias
La autopsia o necropsia significa investigar por uno mismo el origen del fallecimiento mediante la
manipulación instrumental del cadáver y sus órganos
Las causas que justifican este examen, según establece la Ley 29/1980,
pueden ser:
Que un estudio clínico completo no haya bastado para caracterizar
suficientemente la enfermedad que ha causado la muerte
Que un estudio clínico haya bastado para caracterizar la
enfermedad suficientemente, pero exista un interés científico
definido en conocer aspectos de la morfología o de la extensión del
proceso
Que un estudio clínico incompleto haga suponer la existencia de
lesiones no demostradas que pudieran tener un interés social,
familiar o científico
Autopsias
Todos los hospitales pueden contar con una sala
de autopsias para las personas fallecidas en el
hospital, con la autorización de sus familiares
Si antes de iniciar o durante el examen, existe
sospecha fundada de causa de muerte distinta a
la natural, se debe suspender la autopsia y
ponerlo en conocimiento del juzgado de guardia
Las realizan médicos anatomopatólogos
asistidos por técnicos de laboratorio de AP
Autopsias
Ecopsia
La ecopsia es una técnica post mortem que obtiene muestras del cadáver por punción de los órganos
o aspiración de los líquidos guiadas por un estudio ultrasonográfico en el que se basa el diagnóstico
El protocolo de trabajo está muy estandarizado para no
dejar ningún órgano sin estudiar
La ecopsia se comienza por el cerebro. Estas muestras
se obtienen a través de una pequeña ventana abierta
en el cráneo o a través del foramen magnum
El siguiente paso es analizar los derrames, el abdomen,
el tórax, los órganos superficiales y, finalmente, los
tejidos blandos
Autopsias
Ecopsia. Muestras clasificadas en 3 grupos
Muestras sólidas: Corresponden a fragmentos de tejidos que
son fijados, incluidos, cortados y teñidos para ser observados
al microscopio y poder obtener las conclusiones pertinentes.
Las agujas que se usan para obtener este tipo de muestras
son agujas gruesas para biopsias (BAG) o de trucut. Los
tejidos más fáciles de obtener son los compactos (páncreas,
bazo, riñón, cerebro...) y los más complicados, los órganos
huecos (pulmón, tubo digestivo, vejiga, vasos sanguíneos...)
Muestras líquidas: Se procesan para su estudio citológico.
Son muestras procedentes de cavidades anatómicas, quistes
y órganos huecos. Se ha comprobado que la calidad de estas
muestras es semejante a una citología exfoliativa. Para la
obtención de la muestra, se visualiza el líquido en la pantalla
del ecógrafo y con una aguja fina tipo PAAF se aspira el
contenido
Autopsias
Ecopsia. Muestras clasificadas en 3 grupos
Muestras para cultivos microbiológicos: Para obtener estas muestras se ha de esterilizar
previamente la superficie de la piel, en la que se va a realizar la punción con alcohol de 95° y, tras
su evaporación, se aplica povidona yodada. Se recogen muestras de unos 2 cm de longitud en una
zona de 6-8 cm de diámetro utilizando una aguja de punción
